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UNIME
UNIÃO METROPOLITANA DE EDUCAÇÃO E CULTURA
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CURSO DE ODONTOLOGIA
LAURO DE FREITAS
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• Através dos exames dos locais de crime, da
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Tipos de Identificação Humana
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3. Técnicas de perfil de DNA
Ambas utilizam caracteres:Ambas utilizam caracteres:
• Características Orofaciais
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Histórico
• Em 1905 - Beston diferenciou a genética como uma
ciência de estudo, anteriormente já existia trabalhos com
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• Em 1909 – Johansen descreveu a diferença entre genótipo e
fenótipo
• Em 1985 - Wilson e Thein descobriram a importância da
“impressão digital” do DNA
• Brasil:
– Na década de 90 começou a ser utilizado o DNA pela justiça
brasileira.
DNA
• São ácidos nucléicos envolvidas na
transmissão de caracteres hereditários,
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• É uma molécula formada por duas cadeias na
forma de uma dupla hélice, constituídas por
um açúcar (desoxirribose), um grupo fosfato e
uma base nitrogenada (timina, adenina,
citosina ou guanina); sendo essencial na
replicação do DNA durante a divisão celular,
cada hélice serve de molde para um outra.
Métodos para exame do DNA
• Detecção do RFLPs
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SLPs – Determina se o individo é homozigoto ou
heterozigoto.
MLPs – Detecta vários segmentos repetidos.
Fornecendo um padrão que vária entre 20 a 30
bandas
Técnicas de análise de DNA
PCR - Reacção de Polimerização em Cadeia
• É uma metodologia que se baseia na amplificação de
uma quantidade reduzida de DNA de uma única
célula.
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genético, detecção de doenças hereditárias,
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• O objetivo é produzir uma quantidade apreciável de
um segmento específico de DNA a partir de uma
quantidade mínima.
• O DNA molde sofre uma
amplificação controlada por
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milhões de cópias do
fragmento de DNA de
interesse.
• O molde pode ser qualquer
forma de DNA de cadeia
dupla, como o DNA
genómico: pode usar-se uma
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cabelo, uma célula do
epitélio
Técnicas de análise de DNA
PCR - Reacção de Polimerização em Cadeia
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• É um método de separação electroforético baseado em
diferenças no comportamento de desnaturação de
fragmentos de DNA de cadeia dupla.
• É uma poderosa técnica de análise genética que pode ser
usada para detectar diretamente modificações de uma
única base e polimorfismos em DNA genómico, DNA
clonal e DNA amplificado por PCR fagmentos de DNA de
cadeia dupla.
Técnicas de análise de DNA
RFLP - Restriction Fragment Length Polymorfism
• É uma técnica em que os organismos podem ser
diferenciados pela análise de padrões derivados da clivagem
do seu DNA.
• Após restrição enzimática os fragmentos de DNA genómico
são sujeitos a electroforese em gel e posteriormente
transferidos para um suporte sólido de nitrocelulose através
do arrastamento por capilaridade. Após hibridização com
sondas radioactivas este processo possibilita a identificação,
entre milhares de fragmentos de restrição obtidos, de
sequências bem determinadas.
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• É uma metodologia que se baseia na existência de uma
sequência repetitiva específica activa em diferentes indivíduos
de uma população ou nos dois homólogos diferentes do
cromossoma num indivíduo diplóide.
• Uma repetição em série (“tandem repeat”) é uma sequência
curta do DNA que é repetido na forma de “head-to-tail” num
locus cromossómico específico. As repetições em série são
evidenciadas ao longo de todo o genoma humano; sendo que
algumas sequências são encontradas em somente um local –
um único locus – e o número de unidades repetidas varia entre
indivíduos. Tais loci são denominados VNTRs. Um VNTR nos
seres humanos é uma sequência de 17 pb do DNA repetida
entre 70 e 450 vezes no genoma. O número total de pares de
bases neste locus pode variar de 1190 a 7650.
Técnicas de análise de DNA
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Dna[1]

  • 1. Identificação HumanaIdentificação Humana através do DNAatravés do DNA UNIME UNIÃO METROPOLITANA DE EDUCAÇÃO E CULTURA FACULDADE DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E DA SAÚDE CURSO DE ODONTOLOGIA LAURO DE FREITAS 2009.2
  • 2. COMPONENTES Bruna PaulaBruna Paula Giovanni CaponiGiovanni Caponi Janir QueirogaJanir Queiroga Kriscia CarinneKriscia Carinne Nadia TonussiNadia Tonussi Nathanna LuisaNathanna Luisa Roseli TavaresRoseli Tavares LAURO DE FREITAS 2009.2
  • 3. Fundamentos jurídicos • Art. 158 do CPP. Quando a infração deixar vestígios, será indispensável o exame de corpo de delito, direto ou indireto, não podendo supri-lo a confissão do acusado • Através dos exames dos locais de crime, da pesquisa, da análise, da interpretação e correlação dos vestígios possibilitar, como testemunhas mudas, a reconstituição de atos que ali se desenrolaram
  • 4. Conceituação de Corpo de Delito • É objeto ou pessoa sobre a qual incidiu ação ou omissão criminosa • É, assim, a prova material da existência do crime Fundamentos jurídicos
  • 5. Coleta de Materiais RESOLUÇÃO SSP 194/99 • Trata da COLETA, CONSERVAÇÃO e ENVIO de materiais biológicos para realização de Exames de DNA –Vestígios encontrados em locais de crime –Amostras biológicas oriundas dos IMLs •necropsia •vivos
  • 6. Amostras Biológicas • Vestígios encontrados no local de crime • Vestígios colhidos no IML –Amostras-referência: (de identidade conhecida) •suspeito(s) •vítima(s) •parentes consangüíneos
  • 7. Tipos de Vestígios Biológicos • Sangue • Osso • Sêmen • SalivaSaliva • Pelos • Urina • DenteDente • Tecidos Orgânicos
  • 8. Tipos de Identificação Humana 1. Identificação dentaria comparativa 2. Reconstituição do perfil dentário 3. Técnicas de perfil de DNA Ambas utilizam caracteres:Ambas utilizam caracteres: • Características Orofaciais • Maxilares • Bucais
  • 9. Histórico • Em 1905 - Beston diferenciou a genética como uma ciência de estudo, anteriormente já existia trabalhos com DNA, mas ainda não existia a definição da genética. • Em 1909 – Johansen descreveu a diferença entre genótipo e fenótipo • Em 1985 - Wilson e Thein descobriram a importância da “impressão digital” do DNA • Brasil: – Na década de 90 começou a ser utilizado o DNA pela justiça brasileira.
  • 10. DNA • São ácidos nucléicos envolvidas na transmissão de caracteres hereditários, encontrados em todas as células. • É uma molécula formada por duas cadeias na forma de uma dupla hélice, constituídas por um açúcar (desoxirribose), um grupo fosfato e uma base nitrogenada (timina, adenina, citosina ou guanina); sendo essencial na replicação do DNA durante a divisão celular, cada hélice serve de molde para um outra.
  • 11. Métodos para exame do DNA • Detecção do RFLPs – Sondas Multiloculares(MLPs) – Sondas de locus (SLPs) - “Impressão digital” do DNA SLPs – Determina se o individo é homozigoto ou heterozigoto. MLPs – Detecta vários segmentos repetidos. Fornecendo um padrão que vária entre 20 a 30 bandas
  • 12. Técnicas de análise de DNA PCR - Reacção de Polimerização em Cadeia • É uma metodologia que se baseia na amplificação de uma quantidade reduzida de DNA de uma única célula. • É usada no diagnóstico médico, mapeamento genético, detecção de doenças hereditárias, clonagem de genes, testes de paternidade, identificação de “impressões digitais” genéticas. • O objetivo é produzir uma quantidade apreciável de um segmento específico de DNA a partir de uma quantidade mínima.
  • 13. • O DNA molde sofre uma amplificação controlada por enzimas, obtendo-se milhões de cópias do fragmento de DNA de interesse. • O molde pode ser qualquer forma de DNA de cadeia dupla, como o DNA genómico: pode usar-se uma gota de sangue, um fio de cabelo, uma célula do epitélio Técnicas de análise de DNA PCR - Reacção de Polimerização em Cadeia
  • 14. DGGE - Electroforese em Gel de Gradiente Desnaturante • É um método de separação electroforético baseado em diferenças no comportamento de desnaturação de fragmentos de DNA de cadeia dupla. • É uma poderosa técnica de análise genética que pode ser usada para detectar diretamente modificações de uma única base e polimorfismos em DNA genómico, DNA clonal e DNA amplificado por PCR fagmentos de DNA de cadeia dupla. Técnicas de análise de DNA
  • 15. RFLP - Restriction Fragment Length Polymorfism • É uma técnica em que os organismos podem ser diferenciados pela análise de padrões derivados da clivagem do seu DNA. • Após restrição enzimática os fragmentos de DNA genómico são sujeitos a electroforese em gel e posteriormente transferidos para um suporte sólido de nitrocelulose através do arrastamento por capilaridade. Após hibridização com sondas radioactivas este processo possibilita a identificação, entre milhares de fragmentos de restrição obtidos, de sequências bem determinadas. Técnicas de análise de DNA
  • 16. VNTR - Variable Number of Tandem Repeats • É uma metodologia que se baseia na existência de uma sequência repetitiva específica activa em diferentes indivíduos de uma população ou nos dois homólogos diferentes do cromossoma num indivíduo diplóide. • Uma repetição em série (“tandem repeat”) é uma sequência curta do DNA que é repetido na forma de “head-to-tail” num locus cromossómico específico. As repetições em série são evidenciadas ao longo de todo o genoma humano; sendo que algumas sequências são encontradas em somente um local – um único locus – e o número de unidades repetidas varia entre indivíduos. Tais loci são denominados VNTRs. Um VNTR nos seres humanos é uma sequência de 17 pb do DNA repetida entre 70 e 450 vezes no genoma. O número total de pares de bases neste locus pode variar de 1190 a 7650. Técnicas de análise de DNA
  • 17. Conclusão A tecnologia de análise de DNA possibilitou o identificação humana. Muitas vezes, não requer somente o uso de uma técnica, mas sim a conjugação de várias, visto existir complementaridade entre elas.