Identificación Bacteriana MICROBIOLOGIA

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Identificación Bacteriana MICROBIOLOGIA

  1. 1. Comenzar bien no es poco, pero tampoco mucho (Sócrates)
  2. 2. <ul><li>M ÉRIDA SILES CARLOS GABRIEL </li></ul><ul><li>UMSS ODONTOLOGIA </li></ul>Presentación: Docente: Dra. S ILES R OCIÓ I NES
  3. 3. M ICROBIOLOGÍA El mundo oculto de los microbios
  4. 4. Condiciones para el crecimiento microbiano Nutrientes agua fuente de energía fuentes de C, N, otros elementos micronutrientes, factores de crecimiento Condiciones de cultivo temperatura pH luz aireación actividad de agua potencial redox Crecimiento Medios de cultivo
  5. 5. DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL LABORATORIO
  6. 7. IDENTIFICACIÓN BATERIANA Cochabamba-Bolivia
  7. 8. Diagnóstico Clínico Investigaciones No microbiológicas Tomar correctamente Rotular y embalar adecuadamente Almacenar y transportar correctamente No teñidos o teñidos con Gram u otra tinción Serología Tecnologías de DNA Por difusión en discos o MIC Característica de colonia, morfología, hemólisis, pigmento, etc.
  8. 10. Cochabamba-Bolivia C ARACTERISTICAS M ORFOLÓGICAS
  9. 11. Características Morfológicas <ul><li>Se logra por diferentes métodos, siendo los mas comunes: examen en fresco y las tinciones. </li></ul><ul><li>EXAMEN EN FRESCO: </li></ul><ul><li>GOTA PENDIENTE </li></ul>
  10. 12. <ul><li>TINCIONES </li></ul><ul><li>TINCION GRAM: </li></ul>
  11. 13. Tinción GRAM: Bacterias GRAM positivas <ul><li>Cocos gram positivos: </li></ul><ul><li>Bacilos Gram positivos: </li></ul>
  12. 14. Tinción GRAM: Bacterias GRAM negativas <ul><li>Cocos GRAM-negativos: </li></ul><ul><li>Bacilos GRAM-negativos: </li></ul>
  13. 15. Cochabamba-Bolivia C aracTERISTICAS De C ultivo
  14. 16. CARACTERISTICAS DE CULTIVO Medio de Cultivo Líquido Formación de una película en la superficie, sedimento y olor
  15. 17. <ul><li>Streptococcus mutans . Tinción de Gram. Cultivo en caldo de tioglicolato. Su morfología es parecida al Bacillus y forma cadenas cuando se cultiva en caldo, puede causar endocaditits sub aguda bacteriana y caries dental.   </li></ul>
  16. 18. <ul><li>C ultivo de placa bacteriana subgingival en el que se aprecia la gran </li></ul><ul><li>diversidad microbiana de esta microflora. </li></ul>
  17. 19. <ul><li>Periodontitis. Se aprecia inflamación de la encía y presencia de bolsas periodontales </li></ul>
  18. 21. Medios de Cultivo Sólido El AGAR es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
  19. 23. Streptococcus mutans. Tinción de gram.  El cultivo en placa de agar sangre produce una morfologia cocoide sin formar cadenas. Este microorganismo puede causar endocarditis  bacteriana subaguda y caries dental .
  20. 24. Cultivos en placas de  bicarbonato y  agar sangre de Bacillus anthracis . Colonias lisas en bicarbonato (izquierdo) y colonias rugosas en el agar sangre (derecho).
  21. 25.                         En un estudio bacteriológico in-vitro se demostró que con una sola aplicación de campos magnéticos naturales a través de la mano del Doctor Wilhelm &quot;Willy&quot; Frinta durante 10 minutos y a una distancia de 1 1/2 pulgada sobre un recipiente de petri con agar sangre, hubo una inibición de crecimiento de gérmenes, (estreptococo, estafilococos) <ul><li>CONTROL ESTUDIO   </li></ul>
  22. 26. Cochabamba-Bolivia A CTIVIDAD B IOQUÍMICA
  23. 27. ACTIVIDAD BIOQUIMICA BACTERIAS PROTEOLÍTICAS Constituyen un grupo heterogéneo de bacterias fuertemente proteolíticas que forman proteinasas extracelulares , así llamadas porque se difunden fuera de las células. Todas las bacterias poseen proteinasas intracelulares , pero sólo unas cuantas las tienen en forma que puedan ser difundidas extracelularmente. Las Bacterias proteolíticas pueden dividirse en aerobias o facultativas , que pueden ser esporógenas o no y anaerobias productoras de esporas.
  24. 28. <ul><li>Caracteristicas fermentativas sobre azucares </li></ul><ul><li>TEMPERATURA : Tiene una gran influencia en la fermentación del mosto, en la fermentación alcohólico no hay actividad de levaduras por debajo de 3ºC, siendo esta muy esta muy lenta hasta los 6 ó 7 ºC. Los cambios bruscos de temperatura actúan de forma muy negativa en la fermentación, a tal extremo que puede llegar a paralizarla. En general, para todo tipo de actividad microbiana, las temperaturas más favorables son alrededor de 30 ºC, sin embargo, para evitar competencia de cepas bacterianas no deseables, la temperatura más adecuadas para la fermentación alcohólica y maloláctica es la que ronda entre 12-18 ºC. </li></ul>
  25. 29. <ul><li>Fermentación de azucares por diferentes bacterias </li></ul>
  26. 30. <ul><li>SINTESIS DE UREASA </li></ul><ul><li>El HP sintetiza la enzima ureasa que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ácido. El amonio puede producir directamente daño celular, también se ha reportado que aumenta la retrodifusión de los iones H+, e inactiva el complemento (1-4). </li></ul>
  27. 31. <ul><li>El Helicobacter pylori sintetiza la enzima ureasa, que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ambiente ácido. El amonio puede producir directamente daño celular </li></ul>
  28. 32. <ul><li>METODO DE VACIADO EN PLACA </li></ul><ul><li>FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO </li></ul><ul><li>Factores externos </li></ul><ul><li>Condiciones ambientales o culturales: pH, T°, Aw, O2, CO2 Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1, 12:1 </li></ul><ul><li>Factores internos </li></ul><ul><li>Capacidad metabólica </li></ul>
  29. 33. <ul><li>QUIMIOSTATO </li></ul><ul><li>Es el dispositivo más comúnmente usado para cultivo continuo. Su diseño y manejo permite el control de la densidad de la población nutrientes en el medio. Si la tasa de dilución se incrementa y la concentración de nutrientes es constante, la densidad de la población es constante y la tasa de crecimiento. Cuando el sistema está en equilibrio, el número de células (densidad de la población) y el estado nutricional permanecen constantes, a esto se le conoce como “estado estable” o “estado sostenido”. </li></ul>
  30. 34. P ropiedad M etabólica
  31. 35. C ARACTERES s eROLÓGICOS
  32. 37. A cción P atógena
  33. 38. ACCION PATOGENA ACCION PATOGENA
  34. 39. VIA INTRADERMICA VIAS DE INOCULACION
  35. 40. VIA SUBCUTANEA
  36. 41. VIA INTRAMUSCULAR
  37. 42. VIA ENDOVENOSA
  38. 43. VIA INTRAPERITONEAL
  39. 44. VIA INTRANASAL
  40. 45. VIA BUCAL
  41. 46. Cochabamba-Bolivia t IPIFICACIÓN FÁGICA
  42. 47. MEDIOS DE CULTIVO Cochabamba-Bolivia
  43. 48. Medios de cultivo -Los medios de cultivo son mezclas de substancias nutritivas que se combinan para favorecer el crecimiento, aislamiento e identificación de microorganismos. -material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo .
  44. 49. Cultivo <ul><li>Infecciones por bacterias viables </li></ul><ul><li>Infecciones polimicrobianas </li></ul><ul><li>Microorganismos anaerobios </li></ul>Periodontitis periimplantitis Pulpitis Abscesos periapicales osteomielitis
  45. 50. Cultivo Transporte de muestras Identificación Recuento Rápido Condiciones de anaerobiosis Antibiograma Crecimiento lento
  46. 51. Cochabamba-Bolivia c onscistencia
  47. 52. -Un medio de cultivo es una preparación artificial liquida, sólida o semisólida, compuesta por nutrientes y utilizada para hacer crecer microorganismos.
  48. 53. Clasificacion de los medios de cultivo <ul><li>Por su consistencia: </li></ul><ul><li>1-liquidos: son soluciones preparadas a base de sustancias que satisfagan los requisitos nutritivos de los microorganismos,contienen nutrientes que son capaces de mantenes un pH adecuado. </li></ul><ul><li>-se clasifican : </li></ul><ul><li>*sintéticos: tienen ingredientes de una </li></ul>
  49. 54. <ul><li>composición perfectamente definida (sales, azucares, aminoácidos, etc.) </li></ul><ul><li>*no sintéticos:compuestos de origen natural (peptonas, extractos de carne, de levadura </li></ul><ul><li>-medios de cultivo mas empleados: </li></ul><ul><li>a)caldo tioglicolato de sodio : medio de cultvo de bacterias anaerobicas ,que contiene sustancias reductoras del potencial de óxido reducción y está contenido en un tubo o frasco hermético </li></ul>
  50. 55. Cultivo de caldo de tioglicolato
  51. 56. Cultivo in-vitro de Staphylococcus aureus
  52. 57. b)Caldo nutritivo
  53. 58. 2.- medios de cultivo solidos <ul><li>Son medios de cultivo liquidos adicionados de una sustancia gelificante :el agar agar que gelifica por debajo de 45 .C o gelosa. </li></ul><ul><li>Los medios de cultivo nos permite observar colonias separadas ,donde cada colonia es el resultado de la multiplicacion de cada bacteria. </li></ul>
  54. 59. Cultivo de agar
  55. 60. Cultivos de agar
  56. 61. Agar de tiosulfato,citrato,sales de bilis y sacarosa(vibrio).TCBS
  57. 62. AGAR DE TCBS VIBRIO
  58. 63. Agar marino y soya tripticasa (TSA)
  59. 64. Colonias en agar TCBS
  60. 66. Colonias de agar marino
  61. 67. Purificación de Vibrios
  62. 68. Vibrios en TSA
  63. 69. Colonias aerobicas
  64. 70. Colonias termofilas en cultivo
  65. 71. Colonias macroscopicas de hongos
  66. 72. Colonias de bacterias en cultivo
  67. 73. Crecimiento bacteriano en agar de schaedler
  68. 74. Agar
  69. 75. Cochabamba-Bolivia O rigen
  70. 76. Medio Sintéticos Medio Naturales
  71. 77. Cochabamba-Bolivia C omposición
  72. 78. M EDIOS DE CULTIVOS COMUNES
  73. 79. Fermentadores de lactosa en agar Hektoen
  74. 80. Crecimiento de un no fermentador de la lactosa en agar Mac Conkey
  75. 81. Crecimiento de bacterias Gram. negativas que no son capaces de fermentar la lactosa en agar de eosina
  76. 82. M EDIOS DE CULTIVOS ENRIQUECIDOS
  77. 83. Medios de cultivo enriquecidos: Agar Chocolate
  78. 84. Agar chocolate
  79. 85. Agar sangre
  80. 86. Agar chocolate y sangre
  81. 87. Liquido ascitico
  82. 88. Cochabamba-Bolivia m EDIOS DE enriquecimiento
  83. 89. <ul><li>C.- Medios de enriquecimiento . Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos (particularmente heterótrofos exigentes). Ejemplo: adicción de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas. D.- Medios selectivos . Son aquellos que favorecen por su diseño el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para autotrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram (+); utilizando maltosa como única fuente de carbono sólo crecerán los que usen maltosa. </li></ul>
  84. 91. Cochabamba-Bolivia m EDIOS sELECTIVOS
  85. 93. Cochabamba-Bolivia m EDIOS eSPECIALES
  86. 95. Cochabamba-Bolivia m EDIOS DIFERENCIALES
  87. 96. Cochabamba-Bolivia m EDIOS DE TRANSPORTE
  88. 107. Cochabamba-Bolivia m EDIOS DE TRANSPORTE
  89. 108. MEDIOS DE TRANSPORTE
  90. 109. INCUBACIÓN EN ANAEROBIOSIS
  91. 112. Cochabamba-Bolivia m EDIOS DE CONSERVACIÓN
  92. 113. Medios de conservación Los principales métodos de conservación que se aplican a los cultivos microbianos abarcan la refrigeración, liofilización, aceite mineral, gel de sílice, suelo estéril, agua destilada estéril.
  93. 114. Medios de conservacion
  94. 115. Métodos tradicionales de conservación:
  95. 116. Mantienen la viabilidad, propiedades morfológicas, fisiológicas
  96. 117. GRACIAS
  97. 118. Fin

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