G. componentes de la sangre

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G. componentes de la sangre

  1. 1. Obtención de componentes Dra María Elena Alfonso
  2. 2. Fraccionamiento de la Sangre ST Hemoderivados Ig FVIII Albúmina Industria Plaquetas CR Plasma Eritrocitos Hemocomponentes
  3. 3. Concentrado de Hematíes Plasma Normal Sedimento Globular Concentrado Plaquetario Crioprecipitado
  4. 4. Los componentes sanguíneos pueden obtenerse mediante dos formas <ul><li>Por procesamiento de sangre obtenida por donación de sangre convencional. </li></ul><ul><li>Por tecnología de aféresis </li></ul>
  5. 7. Principios de la obtención de componentes <ul><li>Las células sanguíneas se sedimentan de forma diferente en dependencia de su tamaño y de la diferencia de densidad entre éstas y el fluido que las rodea </li></ul>
  6. 8. Principios de la obtención de componentes <ul><li>Células Densidad (g/L) </li></ul><ul><li>Eritrocitos 1.100 </li></ul><ul><li>Neutrófilos 1.082 </li></ul><ul><li>Linfocitos 1.070 </li></ul><ul><li>Monocitos 1.062 </li></ul><ul><li>Plaquetas 1.058 </li></ul><ul><li>Plasma 1.026 g/ml </li></ul><ul><li>. </li></ul>
  7. 9. Principios de la obtención de componentes <ul><li>Volumen medio (en 10-15 litros): </li></ul><ul><li>Monocitos (740) </li></ul><ul><li>Neutrófilos (270) </li></ul><ul><li>Linfocitos (230) </li></ul><ul><li>Eritrocitos (87) </li></ul><ul><li>Plaquetas </li></ul>
  8. 10. <ul><li>La velocidad y el tiempo de centrifugación determinará la composición del componente deseado, por tanto se deben establecer para cada centrifugación las condiciones óptimas para una buena separación. </li></ul>
  9. 11. <ul><li>Después de la centrifugación inicial: se retira cuidadosamente de la centrífuga el sistema de bolsas. </li></ul><ul><li>La bolsa principal se coloca a un sistema de extracción de plasma y las capas se transfieren, una por una, a bolsas satélites dentro del sistema cerrado. </li></ul>
  10. 12. Bolsas para extracción sanguínea Resina de PVC (Cloruro de Polivinilo) + Plastificantes + Estabilizantes + Lubricantes
  11. 13. Solución Anticoagulante Bolsa de Extracción Bolsa para Plaquetas Bolsa de Transferencia Bolsa de Transferencia Bolsas Cuádruples
  12. 16. Concentrado de eritrocitos sencillos  Concentrados de glóbulos rojos o hematíes) . <ul><li>Se obtienen a partir de la separación del plasma de la unidad de sangre total mediante centrifugación o sedimentación espontánea. </li></ul><ul><li>La unidad contiene todos los eritrocitos de la unidad de sangre original, gran cantidad de leucocitos y de plaquetas, dependiendo del método de centrifugación utilizado. </li></ul>
  13. 17. Concentrado de eritrocitos sencillos  Concentrados de glóbulos rojos o hematíes) . <ul><li>Cada unidad de hematíes debe tener un volumen de 280  50 ml, una fracción del volumen eritrocitario (FVE) de 0.65 a 0.75 y una hemolisis menor del 0.8%. </li></ul><ul><li>Conservación: 2-4 0 C durante 35 dias. </li></ul>
  14. 18. Concentrado de Hematíes
  15. 19. Transferencia de Plasma Corte y Sellado
  16. 20. Concentrados de eritrocitos en solución aditiva <ul><li>Es una suspensión de eritrocitos en la que se ha añadido una solución nutriente adecuada para lograr una mejor conservación. </li></ul><ul><li>Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias. </li></ul>
  17. 21. Concentrados de eritrocitos en solución aditiva , sin capa leucocitaria <ul><li>Es la suspensión de hematíes obtenida de la sangre total mediante centrifugación y separación del plasma y de la capa leucocitaria y subsiguiente adición de una solución nutriente adecuada. </li></ul><ul><li>Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias. </li></ul>
  18. 22. Concentrados de eritrocitos lavados <ul><li>Es la suspensión de eritrocitos a la cual se le ha retirado la mayor parte del plasma, los leucocitos y las plaquetas y se ha lavado en una solución de NaCl isotónica. </li></ul><ul><li>Deben emplearse antes de las 6 horas del proceso de lavado. </li></ul>
  19. 23. Concentrados de eritrocitos pobres en leucocitos <ul><li>Se obtiene eliminando la mayoría </li></ul><ul><li>de los leucocitos de un concentrado de eritrocitos por eliminación del buffycoat o empleando filtros para leucocitos. </li></ul><ul><li>Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias. </li></ul>
  20. 24. Concentrados de eritrocitos congelados <ul><li>Componente derivado de la sangre total en la que los hematíes son congelados preferiblemente en un plazo máximo de 7 días desde su extracción, usando una solución de sustancia crioprotectora (glicerol), y conservados a -196ºC en nitrógeno líquido </li></ul>
  21. 25. Concentrados de eritrocitos congelados <ul><li>Variantes de este método permiten conservar los concentrados a –80 0 C. Antes de su utilización los hematíes se descongelan, se lavan y se suspenden en solución salina isotónica. </li></ul>
  22. 26. Concentrados de eritrocitos congelados <ul><li>La ventaja principal de los glóbulos rojos congelados es que se pueden mantener por períodos de tiempo indefinidos, que permitan la acumulación de sangre procedente de grupos raros. Así los pacientes con uno o más aloanticuerpos, es posible que encuentren en el banco de sangre congelada las cantidades suficientes que necesitan. </li></ul>
  23. 27. Concentrados de eritrocitos congelados <ul><li>Los eritrocitos congelados (y lavados) se encuentran virtualmente libres de plasma, leucocitos y plaquetas. La congelación es el método apropiado de conservación para los glóbulos autólogos </li></ul>
  24. 28. Concentrado de plaquetas <ul><li>Es un componente derivado de la sangre total fresca que contiene la mayor parte del contenido plaquetario original, de forma terapéuticamente efectiva. </li></ul><ul><li>El contenido de plaquetas por unidad variará dependiendo del método de preparación de 0,4 a 0,8 x10 11 en 50 a 60 ml de plasma. </li></ul>
  25. 29. Concentrado de plaquetas <ul><li>De forma similar el contenido de leucocitos variará de 0.05 a 1x 10 9 por cada unidad equivalente, a menos que se tomen las medidas oportunas para reducir estas cifras. </li></ul><ul><li>Los leucocitos residuales antes de la depleción en el caso de las plaquetas preparadas a partir de plasma rico en plaquetas debe ser menor de 0.2x10 9 por cada unidad simple, en el caso de las preparadas a partir de la capa leucoplaquetaria la cifra de leucocitos debe ser menor de 0.05x10 9 por unidad simple equivalente. </li></ul>
  26. 30. Preparación de concentrados de plaquetas a partir de plasma rico en plaquetas (PRP) <ul><li>Se centrifuga una unidad de sangre total de manera que un número óptimo de plaquetas permanezca en el plasma y que el número de leucocitos y glóbulos rojos se reduzca a un nivel definido. </li></ul><ul><li>Las plaquetas del PRP se sedimentan mediante una centrifugación enérgica </li></ul>
  27. 31. Preparación de concentrados de plaquetas a partir de plasma rico en plaquetas (PRP) <ul><li>El plasma sobrenadante se retira dejando de 50 a 70 ml del mismo con las plaquetas </li></ul><ul><li>Finalmente las plaquetas se desagregan y se resuspenden. </li></ul>
  28. 33. Concentrado de Hematíes Plasma Rico en Plaquetas
  29. 34. Centrifugación Rápida
  30. 35. Concentrado de Hematíes Sedimento Globular Concentrado Plaquetario
  31. 36. Transferencia de Plasma Corte y Sellado
  32. 37. Preparación de plaquetas a partir de buffy coat. <ul><li>Se centrifuga una unidad de sangre total de manera que las plaquetas, en primer lugar se sedimenten (en la capa leucocitaria) junto con los leucocitos. </li></ul>
  33. 38. Preparación de plaquetas a partir de buffy coat. <ul><li>La capa leucocoplaquetaria se separa y se suspende con el plasma sobrenadante. Tras una mezcla cuidadosa, se centrifuga la bolsa con la capa leucoplaquetaria, de forma que las plaquetas permanezcan en el sobrenadante pero los glóbulos rojos y los leucocitos se sedimenten al fondo de la bolsa. </li></ul><ul><li>Las plaquetas pobres en leucocitos se pueden separar empleando un desplasmatizador mediante filtrado se recomienda un prealmacenamiento </li></ul><ul><li>( preferiblemente un plazo de 6 horas tras su recuperación). </li></ul>
  34. 39. Preparación de plaquetas a partir de buffy coat por medios automatizados <ul><li>Equipos que emplean un sensor capaz de diferenciar los eritrocitos, el plasma y el buffycoat. </li></ul><ul><li>Despues de la centrifugación inicial, empleando un sistema de tres bolsas, la bolsa con la sangre centrifugada se introduce en la cámara del equipo y despues del funcionamiento del mismo se obtendrá plasma en la bolsa superior, buffycoat en la bolsa primaria y eritrocitos en la bolsa inferior. </li></ul><ul><li>El empleo de estos sistemas denominados “top and bottom” conllevan a una economía de recursos humanos al automatizar la obtención de componentes </li></ul>
  35. 40. Preparación de plaquetas a partir de buffy coat por medios automatizados <ul><li>La bolsa con buffycoat obtenida se pulea de forma estéril con una bolsa de plasma y otras 3 de buffycoat isogrupo </li></ul><ul><li>La mezcla se centrifuga para obtener en el fondo los eritrocitos y leucocitos y en el sobrenadante un concentrado de plaquetas que contiene el equivalente a 4 unidades simples de plaquetas. </li></ul><ul><li>. </li></ul>
  36. 41. Preparación de plaquetas a partir de buffy coat por medios automatizados <ul><li>Algunos grupos realizan pooles de 6 buffycoats. Los concentrados de plaquetas obtenidos por este sistema tienen una baja contaminación con leucocitos y un menor daño y activación plaquetarios. </li></ul>
  37. 42. Plaquetas obtenidas por aféresis <ul><li>Es un preparado plaquetario obtenido utilizando un equipo automatizado de separación celular. </li></ul><ul><li>Dependiendo del método utilizado el contenido de plaquetas por proceso variará de 2 a 8. 10 11 . </li></ul><ul><li>Este método permite recolectar plaquetas de donantes seleccionados, para reducir el riesgo de aloinmunización HLA y para el tratamiento efectivo de pacientes ya aloinmunizados. </li></ul>
  38. 43. Plaquetas obtenidas por aféresis <ul><li>Mediante la reducción del número de exposiciones a un solo donante, el riesgo de transmisión viral puede ser reducido. </li></ul><ul><li>Una unidad estándar de plaquetas por aféresis debe ser el equivalente a las plaquetas obtenidas en 5 unidades de sangre total. </li></ul><ul><li>Las unidades de plaquetas deben almacenarse por un período de hasta 5 días tras la donación, a 22 0 C durante 5 dias, en agitación. </li></ul>
  39. 44. PLASMA FRESCO CONGELADO <ul><li>Plasma obtenido a partir de centrifugación de una unidad de sangre total o por aféresis, congelado de forma rápida antes de las 6 horas de extraído y conservado a una temperatura igual o inferior a los –30 0 C para mantener de forma funcional los factores lábiles de la coagulación. </li></ul>
  40. 45. PLASMA FRESCO CONGELADO <ul><li>Este componente contiene niveles normales de factores de coagulación estables, albúmina e inmunoglobulinas. Contiene un mínimo del Factor VIII original y por lo menos, cantidades similares de los otros factores de coagulación lábiles e inhibidores que se dan naturalmente. </li></ul><ul><li>Las células residuales deben ser: glóbulos rojos menor que 6.0x109/l, leucocitos menor que 0.1x109/l, las plaquetas menor que 50x109/L. El contenido de Factor VIII debe ser mayor de 0.7 UI/ml. </li></ul>
  41. 46. Concentrado de Hematíes
  42. 47. Transferencia de Plasma Corte y Sellado
  43. 48. PLASMA FRESCO CONGELADO <ul><li>El plasma para transfusión debe ser ABO compatible y debe utilizarse inmediatamente despues de la descongelación en el caso que se emplee como fuente de factores lábiles de la coagulación. </li></ul><ul><li>Se conserva a –30º C o temperaturas inferiores durante un año. </li></ul>
  44. 49. CRIOPRECIPITADO <ul><li>Componente que contiene la fracción crioglobulínica del plasma, obtenida de una donación única y reciente mediante centrifugación intensa y concentrado a un volumen final de 10 a 20 ml, libre de células. </li></ul><ul><li>Contiene una fracción importante de Factor VIII, Factor Von Willebrand, fibrinógeno, Factor XIII y fibronectina presentes en plasma recién extraído y separado. </li></ul>
  45. 50. CRIOPRECIPITADO <ul><li>Se deja que la bolsa de plasma congelado se descongele a una temperatura de 2 a 6ºC mediante la técnica de sifón o mediante la descongelación lenta. </li></ul><ul><li>Despues se centrifuga y desplasmatiza, dejando en la bolsa el crioprecipitado con 10-20 ml del plasma del sobrenadante </li></ul>
  46. 51. Congelación Rápida Descongelación lenta Centrifugación -70º C
  47. 52. Plasma Normal Concentrado de Hematíes Sedimento Globular Concentrado Plaquetario Crioprecipitado
  48. 53. Transferencia de Plasma Corte y Sellado
  49. 54. Concentrado de Hematíes Plasma Normal Sedimento Globular Concentrado Plaquetario Crioprecipitado
  50. 55. CRIOPRECIPITADO <ul><li>El Factor VIII puede ser administrado como crioprecipitado, como Factor VIII concentrado, o como Factor VIII recombinante. </li></ul><ul><li>Su actividad se mantiene adecuada entre –30 0 C y -40 ºC durante 1 año o en productos liofilizados. </li></ul>
  51. 56. CRIOPRECIPITADO <ul><li>La bolsa de crioprecipitado se descongela en un medio adecuadamente controlado a 37ºC inmediatamente después de su retirada del lugar de almacenamiento e inmediatamente </li></ul>
  52. 57. CRIOPRECIPITADO <ul><li>Antes de ser utilizado, la disolución del precipitado debe facilitarse mediante una cuidadosa manipulación durante el proceso de descongelación. </li></ul><ul><li>Preparados de pequeñas mezclas: se agrupan de forma estéril varias bolsas de crioprecipitado para su uso. </li></ul>
  53. 58. Concentrado de granulocitos <ul><li>Es un componente compuesto principalmente por granulocitos suspendidos en plasma, obtenidos mediante aféresis de un único donante. </li></ul>
  54. 59. Concentrado de granulocitos <ul><li>Su principal función es la fagocitosis de las bacterias. </li></ul><ul><li>Se obtienen por leucoféresis mediante máquinas separadoras de células de flujo intermitentes o continuo. </li></ul>
  55. 60. Concentrado de granulocitos <ul><li>El rendimiento se puede mejorar mediante la adición de un agente sedimentador de glóbulos rojos como el almidón de hidroxietil dextrano (HES), de bajo peso molecular o gelatina líquida modificada. </li></ul>
  56. 61. Concentrado de granulocitos <ul><li>El volumen debe ser menor de 500 ml y cada unidad debe tener más de 10x10 9 granulocitos. </li></ul>
  57. 62. Concentrado de granulocitos <ul><li>Al haber una contaminación significativa de glóbulos rojos, se recomienda realizar pruebas de compatibilidad para su empleo terapeutico. </li></ul><ul><li>Se conservan de 2-4 0 C durante 48 horas </li></ul>
  58. 63. Obtención de Hemoderivados POOL DE PLASMA Hemoderivados Ig FVIII Albúmina Industria
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