M od ulo 2011 modificado
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M od ulo 2011 modificado Presentation Transcript

  • 1. UNIVERSIDAD CATOLICA DE MANIZALES FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA AREA: HEMATOLOGIA MODULO DE CELULAS SANGUINEAS UNIDADES: I, II, III, IV PRIMER PERIODO ACADEMICO 2011 DOCENTE:Esp. CLARA GIRALDO ARIAS 1
  • 2. I. PRESENTACION DEL MODULO DE HEMATOLOGIA CELULAS Este módulo de Hematología, nos permite tener un acercamiento a la Hematología Clínica ya que es la rama de la medicina interna que se apoya más intensamente en las pruebas complementarias de laboratorio. Dicho de otro modo, una buena fundamentación científica sobre la Hematología Teórica le va a permitir una buena correlación clínica y destrezas en la realización de las técnicas de laboratorio, siendo una de la esencia de un adecuado ejercicio de la Hematología Clínica. C. ROZMAN La Hematología es una especialidad que requiere para su adecuado ejercicio de una gran cantidad de métodos de laboratorio a los que el hematólogo recurre para confirmar una hipótesis diagnóstica, elaborada con los medios clínicos clásicos de la anamnesis y la exploración física. De ahí que las técnicas analíticas suelen construir un eslabón importantísimo en el proceso diagnóstico de las enfermedades Hematológicas y por esta razón sean de interés no solo para los profesionales del laboratorio, sino para los hematólogos clínicos e incluso para el médico general. De ahí la gran utilidad de que haga las revisiones bibliográfica propuesta por el docente de hematología en las diferentes unidades del módulo. En este sentido las Unidades promueven en el estudiante el control sobre los propios esfuerzos cognitivos tales como: 1. Las experiencias realizadas en el laboratorio le permiten una confrontación del conocimiento. 2. Pone a prueba y modifica las técnicas de aprendizaje. 3. Identifica y selecciona las fuentes de información relevantes al tema tratado. 4. Integra los conocimientos adquiridos de semestres anteriores con los nuevos conocimientos 5. El estudiante y el tutor se encuentran como personas capaces de autorrealizarse. "( Documento proyecto de asignatura de Hematología, 2008)Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación de personas con un factor humano, con gran apertura,comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres, participativas y democráticas con un nuevo sentido deinvestigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo de las Unidades se plantean estrategias para eldesarrollo de aprendizajes significativos tales como talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales yprocesos individuales, casos problemas, casos clínicos, mapas mentales, VAC (vocabulario asociativo científico).El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollardurante el semestre. 2
  • 3. II. OBJETO DEL MODULO:Desarrollar competencias para interpretar la hematopoyesisIII. ENFOQUE METODOLOGICO DEL MODULOEste modulo posee un abordaje teórico y práctico. Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación depersonas con un factor humano, con gran apertura, comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres,participativas y democráticas con un nuevo sentido de investigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo delas Unidades se plantean estrategias para el desarrollo de aprendizajes significativos tales como mapas mentales, protocolos,talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales y procesos individuales, casos problemas, casosclínicos, VAC (vocabulario asociativo científico).El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollardurante el semestre.IV. COMPETENCIAS ESTABLECIDAS UNA VEZ TERMINADO EL MODULO:El desarrollo de estas, permiten formar profesionales con destrezas y habilidades prácticas en hematología con apropiación deconceptos fundamentales de la hematopoyesis normal y anormal, que le permiten diseñar, ejecutar, evaluar e interpretar losprocesos cualitativos y cuantitativos del tejido hematopoyético. 3
  • 4. MAPA CONCEPTUAL DE HEMATOLOGIAUNIDAD UNO 4
  • 5. GENERALIDADES1. HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEAS2. CELULA Y LA FUNCION3. CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGRE ♦Definición ♦Función de la sangre ♦Propiedades físicas de la sangre4. SISTEMA HEMATOPOYETICOA continuación encontrará en cada una de las unidades del modulo, unos Fundamentos y enfoques teóricos yprácticos, desde la perspectiva profesional, disciplinar, investigativa y pedagógica y, en coherencia con las normasque regulan el ejercicio de la profesión que le permitirán guiar las temáticas incluidas en el modulo.1- HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEASEn este documento el estudiante va a encontrar una breve historia de la hematología ya que esta es una especialidad de largay rica historia científica, también podrá recordar y reconocer los esfuerzos de quienes contribuyeron con su genio y dedicacióna lograr los grandes avances que conformaron la hematología que conocemos actualmente, ya que esta es no solamente degran utilidad, sino extremadamente valioso para afrontar los retos del futuro. Bienvenidos a la hematología.El termino de célula madre se utilizo por primera vez en hematología en 1896, cuando Pappenheim propuso la existencia deuna célula precursora capaz de dar origen a las estirpes celulares de la sangre, las células madres se pueden clasificar entotipotenciales, pluripotenciales, multipotenciales y según el tejido de origen en células madres embrionarias o adultas .La primera evidencia de la existencia de células madre hematopoyéticas en el ser humano surgió en 1945, cuando se observoque individuos que habían sido expuestos a dosis letales de radiaciones podían ser rescatados mediante un transplante demédula ósea de un donador sano, permitiéndole regenerar el tejido sanguíneo.En el decenio de 1930 se descubre la anemia microcítica hipocrómica producida por deficiencia de hierro , cuando se observómúltiples agujeros diminutos en el cráneo de los esqueletos de la prehistoria , fue allí cuando el ser humano paso de cazador a 5
  • 6. agricultor y su dieta se baso en el maíz , siendo muy notable la deficiencia de hierro . En 1931 Kaznelson descubre el signo dela coiloniquia en la “Mano de Lydney”, escultura en bronce de un antebrazo y mano de la cultura celta, que muestraclaramente las uñas en forma de cuchara, típicas de la anemia por deficiencia de hierro (ADH). Esta deficiencia siempre hasido más frecuente en los estratos pobres de la sociedad.Van Leeuwenhoek alrededor del año 1700 fue el que hizo descripciones microscópicas de los eritrocitos. Años antes, WilliamHarvey había postulado su teoría de la circulación sanguínea sin el beneficio del microscopio. Un momento decisivo llegó comoconsecuencia del trabajo destacado por Paul Erlich, quien, cuando era estudiante desarrolló los métodos de tinción celular conanilinas, lo que permitió el estudio de la morfología de la sangre periférica y con ella el nacimiento de la hematología comociencia. Aunque antes de Erlich ya se podían contar los eritrocitos, la medición confiable de la Hemoglobina fue posible hastael siglo XX, lo que explica el retraso de la definición de ADH. Es necesario también considerar que los recuentos de eritrocitospermanecen casi normales en la ADH, lo cual dificultó su reconocimiento; además, se suponía que no había deficiencia de lassustancias abundantes en la naturaleza, como el hierro, cuya presencia en la sangre la estableció Magendie en el año de 1747cuando calentó sangre hasta obtener cenizas y demostró que los residuos eran atraídos por un imán o magneto, por lo quededujo la presencia de hierro en la sangre.En 1902, en Basilea, Bunge escribió que el consumo habitual de los alimentos deficientes en hierro podían conducir a anemia;él mismo demostró que la leche humana posee hierro en escasa cantidad, y afirmó que, aunque la deficiencia dietética de estemineral era casi inimaginable, ningún alimento por sí mismo contenía suficiente hierro como para ser eficaz en el tratamientode su deficiencia.En 1932 Hutchinson afirmó que el hierro no se obtiene fácilmente de la dieta y concluyó que….” el hierro contenido en lahemoglobina y sus derivados es muy mal absorbido”. Sin embargo, creía, como Bunge, que este mineral en el entorno erasuficiente y que la complementación era innecesaria. Este concepto cambiaría como resultado del extenso y brillante trabajode investigación de la anemia en niños que desarrolló Helen Mackay en Viena después de la segunda Guerra Mundial.Entidades clínicas de interés histórico en la deficiencia del hierro: el mal de amor y la enfermedad de las vírgenesEstos cuadros, descritos inicialmente en 1554 por Johann Large, también denominados” clorosis” o “enfermedad verde “,fueron muy populares entre los médicos de los siglos desde XVII y hasta principios de XX. Se refieren a un cuadro de anemiahipocrómica en mujeres adolescentes relacionado con alteraciones gastrointestinales y trastornos menstruales. La coloraciónverde descrita por muchos médicos a lo largo de estos períodos dificultó explicar la clorosis con una simple ADH. Tal vez unaexplicación razonable es la que expuso Crosby en 1955, quien razonó que estos casos se debían a una combinación dedesnutrición proteínica y deficiencia de hierro. Ya antes, Andril había comentado sobre la presencia de eritrocitos muypequeños en la clorosis, la cuál continuó vinculándose con el desarrollo de la sexualidad en los jóvenes adolescentes y laposible relación de un trastorno temporal de la eritropoyesis con el desarrollo de los órganos de la reproducción. En esta épocase utilizaba como tratamiento para la deficiencia de hierro un jarabe preparado con virutas de hierro en vino endulzado y 6
  • 7. hervido, así como beber agua de la región de Spa, en Bélgica, en donde las principales enfermedades tratadas eran la clorosisy la anemia. Ya que estas aguas eran ricas en bicarbonato de hierro. En 1832, Blaud inicio el uso de píldoras que contenían1.4 g de sulfato ferroso, en tanto que Osier pensaba que el hierro era más eficaz si se combinaba con el arsénico. Hacia elsiglo XIX desapareció la clorosis sin una razón aparente y se especulo que esto se debió a una mejoría en la dieta, a lascircunstancias socioeconómicas y una reducción de la tasa de infección.En 1931, dos publicaciones de Davies y Witts aclararon de manera definitiva el papel que juega el hierro en la ADH del adulto.Además Davies, en su articulo señaló que el hierro se extendía a los epitelios y la piel, pues los cambios en las uñas, lengua yesófago de los pacientes con aclorhidria, y anemia mostraban mejoría después de recibir tratamientos de hierro.En el mismo año. 1931, Witts concluyó que la anemia se debía a la incapacidad para formar hemoglobina (Hb) como resultadode la cantidad reducida de hierro en la sangre; señaló que muchas de las mujeres que padecían la anemia ingerían hierro encantidades insuficientes a partir de sus alimentos. En 1924 Hurst demostró la ausencia de ácido en el jugo gástrico de lospacientes con AP.Quizás el primer caso de anemia perniciosa (AP), una anemia megaloblástica debida a la atrofia de la mucosa del cuerpo delestómago por factores auto inmunitarios, lo descubrió Osier en Canadá, cuyo paciente padecía hipoestesia de los dedos,manos y antebrazos; sus glóbulos rojos eran muy grandes y su estomago se encontró atrófico durante la necropsia.Un avance significativo en el estudio de las anemias ocurrió en el año 1880 cuando Paul Ehrlich, realizo en un paciente con uncaso de anemia perniciosa (AP) una tinción de anilina en un (FSP) que secaba con calor; y de esta manera, fue capaz dehacer la distinción morfológica entre los normoblastos en el FSP después de la anemia aguda por hemorragia y las enormescélulas que denominó “megaloblastos” en los AP.Fue hasta 1921 que Zadek observó los megaloblastos in vivo; dos años después, en 1923, Naegeli descubrió por primera vezlos neutrófilos hipersegmentados en la AP. Casi un decenio después, en 1932, Temka y Braun descubrieron losmetamielocitos gigantes en la médula ósea (MO) de pacientes con AP.Más de dos decenios transcurrieron después de los trabajos de Minot para aislar un compuesto rojo y cristalino que en 1948 sedenomino “cobalamina”. Estos esfuerzos los encabezó Dorothy Hodgkin, quien por ello recibiría el Premio Nobel de Químicaen 1964.En el año de 1924 y 1934 se produjo una serie de descubrimientos relacionados con las anemias carenciales. Los tres másimportantes fueron el hallazgo de una cura para la AP por Minot, la descripción del factor intrínseco (FI) y factor extrínseco (FE)por Castle y el descubrimiento por Lucy Wills de una sustancia en la levadura capaz de corregir la anemia megaloblástica delembarazo, caracterizada después como folato.El ácido fólico se aisló de la espinaca en 1941. En 1943 se trabajo en los laboratorios en el descubrimiento de los folatos. Eltermino “folato” se usa para designar los compuestos que poseen la misma actividad de vitamina, e incluye a los folatosnaturales y al ácido fólico sintético. 7
  • 8. Una supervivencia disminuida del eritrocito en la circulación es el dato esencial de la existencia de una anemia hemolítica (AH).Es necesario distinguir si se trata de un problema adquirido o heredado. En 1945 Robin Coombs introdujo en la práctica clínicala prueba de la antiglobulina humana (AGH), que sirvió para lograr la aceptación de la existencia de las formas adquiridas de laAH al proporcionar un método objetivo para distinguirlas de la hereditaria.Claudio Galeno, médico del emperador Marco Aurelio, descubrió el primer caso de hemólisis, en un esclavo cazador deserpientes que fue mordido por una de estas. Este era el cuadro de una hemólisis intravascular aguda. Luego JohannisActuarius en Constantinopla al final del siglo XIII descubrió una AH, en donde la orina era oscura después de la exposición deun clima gélido, lo que se atribuyo a una enfermedad renal. Esta anemia posteriormente fue la hemoglobinuria paroxística alfrío.Otra descripción de AH fue la realizada por Vanlair y Masius, en 1871 en una mujer con un cuadro repetitivo de ictericia, doloren el cuadrante superior derecho y esplenomegalia .Esta descripción que se hizo en sangre correspondía a la presencia deesferocitos, a la que se le llamaron “microcitos “dados su diámetro de solo 3 y 4 µm.El francés investigador Chauffard, contribuyo en el diagnóstico de la AH con el descubrimiento de la fragilidad osmóticaaumentada de los eritrocitos y la descripción de los reticulocitos.LEUCOCITOSAunque la palabra “cáncer” fue utilizada por Galeno, no hay evidencias de que en esa poca se conocieran la neoplasiahematológica. De hecho, las primeras observaciones de los eritrocitos las hizo Van Leeuwenhoeken 1674, en tanto que losglóbulos blancos los descubrió el anatomista francés Joseph Lieutaud en 1749, a los que llamó ”globuli albicantes”, un cuartode siglo antes que el prestigioso anatomista ingles William Hewson describiera el linfocito, en 1774. Hacia el mismo año de1749 Senac describió” los glóbulos blancos de pus “. De esta manera, el pus y la inflamación eran los conceptos imperantes enla hematología hasta la primera parte del siglo XIX.Un cambio de rumbo en la hematología surge a partir de 1845, cuando John Bennett, en Edimburgo, realizo la necropsia deJohn Menteith, un paciente de 28 años con un tumor esplénico que falleció con lo que luego Bennett publicó como “Un caso dehipertrofia del bazo e hígado en el que la muerte tuvo lugar por supuración de la sangre “. Concluyó que toda la sangre estabaafectada y que el paciente había sufrido una transformación dentro de su sistema sanguíneo, y no una inflamación. En suinforme, dibujó por primera vez las células malignas de un individuo con leucemia. Probablemente este sujeto sufría de unaleucemia granulocítica crónica (LGC).Rudolph Virchow, en Berlín, publico el segundo caso de leucemia, el de una mujer de 50 años con una enfermedad crónica ycrecimiento del bazo, que murió cuatro meses después. Durante la necropsia, Virchow encontró en todos los vasos 8
  • 9. sanguíneos, lo que describió como una sustancia semejante al pus, con células de características morfológicas quecorresponden a una leucemia linfocítica crónica (LLC). El informe de Virchow apareció en noviembre de 1854.En el año de 1940 se había intentado buscar un marcador genético que identificara la LGC, sin éxito. Trascurrieron 20 años debúsqueda para que 1960 Nowelly Hungerford en Filadelfia cultivara la sangre de un pequeño grupo de pacientes con LGC.Sorprendentemente, encontraron un pequeño cromosoma acrocéntrico, que denominaron cromosoma Filadelfia (Ph1 ), siendoen este momento un marcador específicamente ligado a esta neoplasia .Más de un decenio después, 1973, la Dra. Janet Rowley comprobó que no se trataba de una eliminación , sino de unatraslocación hacia el cromosoma 9, t(9;22). Ahora se sabe que este protooncogén ABL, que se localiza por lo general en elcromosoma 9 , esta traslocado hacia el cromosoma 22 en pacientes con LGC, creando el producto híbrido del Gen de fusiónBCR-ABL, este es ocasionada por una cinasa de tirosina citoplasmática, la cual es inhibida por el imatinib, recientementedescubierto para el tratamiento de estos pacientes con LGC.En 1903, el Dr. F. P. Weber describió el caso de un varón de 50 años con mieloma múltiple (MM) y proteinuria de Bence Jonesde 15 g/día.El término “célula plasmática “ lo usó inicialmente Waldeyer en 1875, fueron descritas por Ramón y Cajal, el patólogo en 1890,pensando que estas células hacían parte del tejido conjuntivo.En 1990 Wright publicó el caso de un paciente con MM, la necropsia reveló células ovales grandes con núcleo excéntrico,algunas binucleadas, a las que identifico “células plasmáticas “.En las últimas décadas del siglo XX se ha desarrollado la hibridación in situ; mediante ella se puede detectar en las célulassecuencias de ADN o ARN determinadas, lo que permite una perfecta compenetración entre la estructura y composiciónquímica y organización molecular. Se ha desarrollado también la tecnología de micromatrices o microchips de ADN queincrementa el conocimiento sobre el control de los genes y las variaciones fisiológicas o patológicas en las células procariotasy eucariotas. Frente a estos avances en la investigación, un suceso inesperado puso de manifiesto las limitaciones de laCiencia actual. En 1981, el Centro de control y prevención de enfermedades (Atlanta), alertaba de una nueva pandemia, elsíndrome de inmunodeficiencia adquirida. El SIDA ha sustituido a la peste negra como mayor azote histórico de la civilizaciónoccidental y su expansión constante ha coincidido con la emergencia de microorganismos resistentes a fármacos, lo que hasupuesto una cura de humildad frente a una sensación casi de inmortalidad y en la que todas las patologías se curaban ya oen el futuro inmediato.Con respecto a la célula cancerosa, se conocía que cuando escapan a los controles internos, las células se multiplican deforma exponencial y son capaces de abandonar su localización original e implantarse en otros tejidos. A mitad de los añossetenta, se descubre que una proteína del virus del sarcoma de Rous es codificada por un gen responsable de latransformación neoplásica, un oncogén. Poco después, se confirma que los géneros determinan una quinasa de tirosina y seinfiere la existencia de genes supresores de tumores, el primero de los cuales fue el p53. Por último se identificaron genes quecodificaban proteínas cuya secuencia aminoacídica era coincidente con factores de crecimiento. Se ha podido así cubrir toda la 9
  • 10. trayectoria del cáncer mediante una mutación en un gen determinante del desarrollo se activaba un protooncogén, un gensupresor de tumores o un gen reparador de la molécula de ADN.Es evidente que la biología celular se ha beneficiado, principalmente en las últimas décadas, de técnicas desarrolladas yperfeccionadas por otras disciplinas afines, fundamentalmente la Bioquímica y la Biología Molecular, como la cromatografía, laelectroforesis en gel, el marcado isotópico, el análisis por difracción de rayos X, el fraccionamiento celular, la ultracentrifugación, y la citometría de flujo, que han contribuido notablemente al estudio de la composición molecular y delmetabolismo celular, permitiendo relacionar la estructura de la célula con su arquitectura molecular y enfocar ambas de cara asus funciones biológicas. El conjunto de todas estas técnicas ha posibilitado que el estudio de la célula saltase de suconcepción clásica -que se restringía a estudiar los constituyentes celulares y a la descripción morfológica de las tiposcelulares y tejidos- a una concepción mucho más moderna. Según lo que he escrito en la Guía del alumno estos últimos añosconsidero que la biología celular es el centro de una educación biológica y bioquímica moderna. La biología celular es, portanto, una ciencia en evolución creciente y que, consideramos, aún está en una fase inicial de expansión. La relación con otrasciencias, y las técnicas mixtas que así se han constituido, han dado como resultado que sus límites conceptuales cada vez seencuentren más lejanos y más difusos. Es entonces que Los leucocitos sirven como la línea primaria de defensa en el sistemavascular. Dos categorías, granulocitos y células linfáticas, circulan a través del flujo sanguíneo en un esfuerzo por identificar ycombatir patógenos ajenos tales como bacterias, virus, etc.Añadiendo a esta complejidad se encuentran las numerosas sales que son requeridas en la sangre. Estas sales sonprincipalmente iones básicos, tales como el sodio, potasio, fosfato, y el magnesio que ayudan a mantener un firme valor de pHpara la sangre. Estos iones de bicarbonato eliminan el dióxido de carbono de los tejidos y ayudan a mantener un pHligeramente alcalino de 7.4. Durante daños traumáticos o cirugías, una gran cantidad de atención es dada a la disminuciónsignificante del pH de la sangre o la pérdida de esta alcalinidad puede causar respiración rápida y violenta, con muerteprobable para ocurrir en un pH de 7.0 o más bajo. Contrariamente, si se permite que el pH de la sangre se eleve más allá de7.6, esto también puede resultar fatal.Todas estas técnicas se aplicaron a muestras de médula ósea en los años 20 cuando se realizaron las primeras punciones demédula ósea. Así nació la citoquímica, un conjunto de técnicas que permitían el diagnóstico y clasificación de las leucemiasagudas de una forma rápida, así como la aplicación de un tratamiento específico para cada tipo de leucemia sin necesidad degrandes alardes técnicos. Pero siguiendo el desarrollo escalonado de las técnicas diagnósticas llegamos al inmunofenotipo.Estas técnicas llegaron con el conocimiento de los anticuerpos monoclonales hace ya más de dos décadas. Estas proteínasson capaces de unirse específicamente con antígenos proteicos que se encuentran en la membrana de las célulassanguíneas, las cuales permiten la distinción de cada tipo celular incluso dentro de cada línea celular. Estas técnicas lo quehan conseguido es identificar y tipificar aún más la población leucémica. Permiten, por otro lado, llegar a detectar más allá delmicroscopio óptico la célula leucémica. 10
  • 11. Actualmente el proceso diagnóstico de estas enfermedades no es distinto al seguido en otras enfermedades no oncológicas.Es muy importante la realización de una historia clínica detallada atendiendo a historia familiar de enfermedades oncológicas,exposición a tóxicos medulares, y atención a signos y síntomas propios de anemia, neutropenia y trombocitopenia. En elexamen físico hay que valorar grado de palidez, evidencia de sangrado, signos de focalidad infecciosa. Es muy importante laexploración de linfadenopatías en territorios no usuales en niños (supraclaviculares y auriculares posteriores); tambiénpresencia o no de masas y megalias abdominales. Tras la sospecha clínica hay que realizar estudio hematimétrico dondeexistirán alteraciones en un 90% de los casos, principalmente: leucocitosis o leucopenia con neutropenia, anemia normocítica ynormocrómica con reticulocitos disminuidos, y trombopenia <100.000/mcl en tres cuartas partes de los pacientes. Ante estoshallazgos se deberá hacer diagnóstico diferencial con los siguientes cuadros: enfermedades no malignas: anemia aplásica, mononucleosis infecciosa, artritis reumatoide juvenil, púrpura trombopénica idiopática, infecciones (tos-ferina, etc.). enfermedades malignas: otro tipo de leucemias, linfomas, infiltración medular por tumores sólidos.El examen de frotis de sangre periférica y posteriormente el examen de médula ósea por aspirado/biopsia nos dará eldiagnóstico definitivo. Una vez diagnosticada habrá que tipificar la leucemia. Para esto, disponemos hoy en día de todas lastécnicas diagnósticas específicas descritas al principio de esta ponencia, las cuales nos permiten un diagnóstico del subtipo deleucemia. Pero han aparecido ciertos problemas derivados del gran desarrollo experimentado por estas técnicas de formaaislada y desigual; principalmente, la clasificación de los subtipos de Leucemia. Esto se ha visto en determinados casos, en losque han existido discrepancias entre los distintos métodos diagnósticos que han dificultado la asignación a un subtipo. Debidoa esto, la clasificación de las leucemias ha sufrido cambios constantes en un intento de estandarizarla. Pero, al mismo tiempo,la mayor tipificación de las Leucemias ha dado lugar a un mejor seguimiento de la enfermedad favoreciendo una valoraciónadecuada de la respuesta al tratamiento y el estudio de la enfermedad mínima residual. También esto ha conllevado unaaproximación pronóstico al poder correlacionar determinados subtipos con un mejor o peor pronóstico desde el inicio de laenfermedad.Con respecto al tratamiento los científicos y médicos que idearon el tratamiento para la leucemia infantil promovieron unmétodo racional para destruir las células cancerosas utilizando los conocimientos de las células acumulados a partir de unaserie de descubrimientos procedentes de investigaciones básicas que se llevaron a cabo a principios del siglo XX. Dichosestudios mostraron que los mecanismos de la célula se basan en un gran conjunto de reacciones químicas que se repitencontinuamente de la misma forma que los pasos que forman una cadena de producción.La lucha contra el cáncer se ha convertido más en una guerra de desgaste que en una serie de victorias instantáneas yespectaculares, y la investigación que se ha llevado a cabo sobre la leucemia infantil durante los últimos 40 años no es unaexcepción. Pero, en nuestros días, la mayoría de los niños que sufren esta enfermedad pueden llegar a curarse gracias a los 11
  • 12. fármacos antimetabolitos. La lógica que respalda a estos fármacos procede de una amplia gama de investigaciones mediantelas que se han conseguido definir los procesos químicos de la célula. Dichas investigaciones fueron llevadas a cabo porcientíficos que no podían ser conscientes de que sus descubrimientos iban a salvar las vidas de hasta treinta mil niños enEstados Unidos.La hematología moderna se inicio en la década de los 20 donde, el laboratorio juega un papel importante en el diagnóstico delos trastornos hematológicos ya que permite la cuantificación de los elementos formes de la sangre, con la sistematización yautomatización como la citometría de flujo, la impedancia, aumentando la exactitud en el informe y disminuyendo los riesgosbiológicos con sus diseños de bioseguridad. Además de los estudios genéticos, la citó química entre otros, que permiten llegara un diagnóstico acertado.Las nuevas tecnologías han modificado y transformado toda la hematología, desde las anemias, las patologías de lahemostasia, las leucemias y los Linfomas. En los últimos 50 años se ha convertido en una ciencia amplia que intentacomprender la fisiología normal y patológica del sistema hematopoyético ayudado por otras disciplinas como la bioquímica labiología celular y molecular, la inmunología, el fisicoquímico, la genética y la medicina nuclear.Los conceptos básicos, siguen vigentes sin embargo el conocimiento de las enfermedades hemáticas dependen de unconocimiento profundo de los procesos normales, para poder profundizar en la enfermedad y es con los avances de latecnología que ha permitido implementar un mejor diagnóstico.2-CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGREObservar video.http://www.youtube.com/watch?v=v9mzIC5BMRkhttp://www.youtube.com/watch?v=GoqehY8J20Q&NR=1http://www.youtube.com/watch?v=dVidtTJ4WjsINTRODUCCIONLa sangre se compone de un líquido denominado plasma y elementos celulares, entre los que se encuentran los eritrocitos,leucocitos y plaquetas. Un adulto normal tiene alrededor de 5 litros de este líquido vital, el cual representa de 7% a 8% delpeso corporal total. El plasma constituye casi el 55% del volumen sanguíneo , mientras que el 45% esta compuesto deeritrocitos y 1% se forma de leucocitos y trombocitos con frecuencia las variaciones en estos elementos sanguíneos son elprimer signo de enfermedad que se presenta en tejidos corporales . Los cambios en el tejido enfermo logran detectarse de 12
  • 13. manera frecuente mediante los análisis de laboratorio que identifican las alteraciones sobre la base de valores normales en losdiversos constituyentes de la sangre.El componente más importante es el agua, ya que contiene iones disueltos, proteínas, carbohidratos, grasas, hormonas,vitaminas y enzimas.Los principales iones necesarios para la función celular normal incluyen calcio, sodio, potasio, cloro, magnesio e hidrógeno. Laproteína principal que constituye al plasma es la albúmina, siendo el componente principal para conservar la presión osmótica;la albúmina actúa como molécula transportadora llevando compuestos como la bilirrubina y Hem; otras proteínas sanguíneastransportan vitaminas, minerales y lípidos. Las inmunoglobulinas y el complemento son proteínas especializadas que participanen la respuesta inmunitaria. Las proteínas de la coagulación, encargadas de mantener una hemostasia normal circulan en lasangre como enzimas inactivas hasta que se les requiere para el proceso de coagulación, Un desequilibrio en los elementosdisueltos en el plasma puede ser la causa de alguna enfermedad en otro tejido corporal. El plasma también interviene comomedio de transporte para los nutrientes celulares y metabolitos; por ejemplo, las hormonas elaboradas en un tejido sontrasportadas por la sangre hacia el tejido blando en otras partes del cuerpo; la bilirrubina (principal residuo catabólico de lahemoglobina) es transportada por la albúmina desde el bazo hasta el hígado para su excreción; el nitrógeno ureico sanguíneoes conducido al riñón para ser filtrado y excretado.El aumento en la concentración de estos catabolitos normales, puede indicar metabolismo celular aumentado o defecto delórgano de excreción. (Mackenzie).Todas las células de la sangre se originan en la célula Madre que se localiza en los órganos hematopoyéticos y que puedemadurar a glóbulos rojos , glóbulos blancos y plaquetas, una vez que completan la maduración pasan a la circulación generaldonde son eliminados después de un tiempo por el sistema mononuclear fagocítico (SMF) manteniendo la renovaciónconstante de la sangre .FUNCION DE LA SANGRE mantener las condiciones necesarias para la vida , llevando nutrientes, recogiendo desechos,manteniendo la temperatura adecuada.3. LA CELULA Y SU FUNCIONPara el estudio de la hematología es esencial una comprensión básica de la morfología celular , ya que muchos trastornoshematológicos se acompañan de anormalidades o cambios en la morfología de componentes celulares o subcelulares , asícomo modificaciones en sus concentraciones.Una célula es una estructura compleja con una membrana unida a un gel acuoso de proteínas carbohidratos, grasas,materiales inorgánicos y ácidos nucleicos. El núcleo , limitado por una membrana nuclear , contiene ácidos nucleicos quedirigen y controlan el desarrollo , función y división de la célula .El citoplasma rodea al núcleo y es protegido por una 13
  • 14. membrana celular . El citoplasma contiene organelos diferenciados entre ellos : mitocondrias , lisosoma, retículoendoplasmático, aparato de Golgi, ribosomas, gránulos, microtúbulos y microfilamentos .Los organelos son compartimientos unidos a la membrana con funciones celulares específicas; las diferentes clases deorganelos y su concentración es básica para la función celular.Observar video en http://www.youtube.com/watch?v=6fbwQGioDuI4.SISTEMA HEMAYOPOYETICOEs el conjunto de órganos y tejidos encargados de distribuir y formar a las diferentes células sanguíneas , incluye lossiguientes órganos: Médula ósea, Hígado, Bazo, Timo; Ganglio Linfático, sistema Mononuclear Fagocítico.MEDULA OSEAhttp://www.youtube.com/watch?v=UVUBK1aL6dEEs el principal órgano hematopoyético , recibe el nombre de médula ósea roja que es la encargada de la funciónhematopoyética y la medula ósea amarilla que es la parte grasa. Dentro de la Medula ósea se diferencian dos compartimentosuno de células madres y otros de células de diferenciación y maduración.En el compartimiento de célula madre esta la célula pluripotencial o STEM CELL estas maduran y se transforman en cualquiertipo de célula ya sea linfoide o mieloide , en el laboratorio se han demostrado que en cultivos específicos de la Medula ósea lascélulas crecen formando colonias , por eso se les denomina células formadoras de colonias (CFC) y su característica de poderformar cualquier tipo de la serie celular (linfoide o mieloide) por todo esto se deduce que las células madres también se puedendenominar (CFC_LM).En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de la Historiade las células sanguíneas, la importancia de la célula y su función, y las características normales de la sangre, y elsistema Hematopoyético. COMPETENCIAS LOGROS1. Capacidad de interpretar la evolución de I. Relaciono los conceptos de la historia en el pasado presente y futuro de losla historia de las células sanguíneas hematíes, leucocitos y plaquetas.2 Demostrar capacidad para Argumentar II. Relaciono los valores de referencia para la concentración de célulascon claridad las características normales sanguíneas . 14
  • 15. de la sangre3. Demostrar eficiencia en la comprensión I. Describo la membrana celular teniendo en cuenta su estructura y función .básica de la morfología celular II. Interpreto la estructura y función de cada uno de las organelas citoplasmáticas que existen en una célula. III. Reconozco las diferencias entre los términos de heterocromatina y eucromatina. IV. Relaciono las estructuras nucleares con las actividades celulares que se vinculan con el núcleo. V. Describo los procesos de la mitosis y meiosis celular VI. Defino el proceso de apoptosis.4. Capacidad de recocer las técnicas más I. Conozco el fundamento de la reacción en cadena de la polimerasausadas en biología molecular que tienen II. Defino la utilidad de la técnica de Southerin Biotutilidad en las diferentes diagnósticos de III. Defino las técnicas de microensayoslos trastornos hematológicos IV. Relaciono la aplicación de estas pruebas con algunas patologías de la hematología5. Demuestra capacidad para adquirir y I. Argumento con claridad la localización de la hematopoyesis durante eltransferir el conocimiento sobre el desarrollo fetal,desarrollo de la hematopoyesis II. Reconozco las diferentes hemoglobinas de la vida embrionaria6. Reconocer la importancia de los I. Reconozco los diferentes conceptos sobre el sistema mononuclear fagocítico,órganos y tejidos involucrados en el bazo, ganglio linfático, timo, hígado y médula ósea.sistema hematopoyético que intervienenen la proliferación, maduración ydestrucción de las células sanguíneasEJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:1-Realice una consulta amplia bibliográfica en los documentos de apoyo recibidos e indague el pasado, presente y futuro delas células sanguíneas.Documento del modulo sobre la Historia de las células sanguíneas2. Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) en los documentos de apoyo y videos recibidos para desarrollarlos talleres que se relacionan a continuación: 15
  • 16. Taller de la sangreCuál es el porcentaje de volumen de las células sanguíneas y volumen plasmático?Cuál es la coloración de la sangre?Cuántos litros de sangre tiene un adulto?Cuál es el componente plasmático más abundante?Cuál es la función de la sangre?Cuál es la diferencia entre plasma y suero?Taller de células humana¿Cuál es la función de la membrana celular, citoplasma, lisosomas, ribosomas, retículo endoplasmático, aparato de Golgi,lisosomas, mitocondrias, núcleo, microtúbulos y los microfilamentos.?EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL:1. En 3 grupos elaborar cada grupo un mapa mental del pasado, presente y futuro . Para la socialización del taller seorganizaran 3 grupos cada uno de los cuales deberá escoger un relator durante la clase de teoría .2. Con la revisión de los videos y las respuestas de los talleres , el estudiante hará un debate en el aula de clase. Estopermitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de losestudiantes.Bibliografía complementariaJAIME PERES José Carlos, ALMAGER David Gómez, Hematología. La sangre y sus enfermedades, 2 edición, 2010.RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidadMARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006Base de datos HinariBase de datos ProquestUNIDAD I - PRACTICA1-GLOSARIO2-RECONOCIMIENTO A UN LABORATORIO DE HEMATOLOGIA3-CONTROL DE CALIDAD, BIOSEGURIDAD, MANEJO DE DESECHOS EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA 16
  • 17. 1.El estudiante encontrará un glosario de términos mas utilizado en la hematología, que lo transfiere al contexto de lahematopoyesis normal y anormal. Glosario Ver anexo 12. Reconocimiento de un laboratorio de hematología, mediante a una visita que se realizara al laboratorio de ASSBASALUD dela ciudad de Manizales fecha seleccionada por el grupo de docentes .3.El estudiante deberá hacer la observación de videos sobre Bioseguridad, control de calidad ymanejo de desechos en el laboratorio de hematologíaObservar videos de Bioseguridad:http://www.youtube.com/watch?v=fcSPWbqArjchttp://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=related Técnica del lavado de manos.urlhttp://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=relatedTécnica de puesta de guanteswww.youtube.com/watch?v=2Nx9SIYofzo&feature=relatedVideo de bioseguridadwww.youtube.com/watch?v=9HejcS0B9fM&feature=relatedVideo de toma de muestrahttp://www.youtube.com/watch?v=ysao3R8dhJk Pipetas.urlhttp://www.youtube.com/watch?v=r5-zocCqRrc&feature=relatedhttp://www.youtube.com/watch?v=pISxlv2GAfA MANEJO DE RESIDUOS HOSPITALARIOS.url /www.youtube.com/ watch?v=oKf3j6hddVw&feature=related Video de bioseguridad 17
  • 18. Manejo de desechos , en un laboratorio de hematología .Control de Calidad: http://www.youtube.com/watch?v=fbvwQHhDMDQ 18
  • 19. GLOSARIOAcido fólico Ferritina LeucocitosisAdenopatía Fiebre LeucopeniaAnemia Granulopoyesis Médula óseaAnisocitosis Alopesia MelenasAnorexia Haptoglobina MetástasisApoptosis Hematocrito MicrocitoAnemia Ferropénica Hematuria MacrocitoAnemia Megaloblástica Hemoglobina NeuropatíaAntígeno Hemograma OliguriaAnticuerpo Hierro PalidezBilirrubina Hipoxia PancitopeniaBradicardia Hiperesplenismo ParestesiaCitocinas Hem PetequiasEdemas Ictericia PoiquilocitosisEpistaxis Indices eritrocitarios PúrpuraEquimosis VCM ReticulocitoEritropoyesis HCM RofeocitosisEritropoyetina CHCM SideremiaEritrosedimentación RDW SangreEsplenomegalia Inflamación TaquicardiaEsplenectomía Leucemia TrombocitosisEstroma Leucopoyesis TumorEtiología Leucocito Trombocitopenia 19
  • 20. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación del glosario,recomendaciones para control de calidad, bioseguridad, manejo de desechos en el laboratorio de hematología COMPETENCIAS LOGROS1. Capacidad de definir los términos I. Relaciono la terminología utilizada en hematología mediante el desarrollo derelacionados con hematología mediante un un glosarioglosario, que le permita articularconocimiento, habilidades y actitudes encontextos específicos.2. Mediante una visita a un laboratorio I. Reconozco la distribución y equipos de un laboratorio de hematología,clínico deberá recocer la importancia del mediante una visita.bacteriólogo en un laboratorio y latecnología utilizada para los análisis dehematología.3. Demostrar conocimiento en la aplicación I. Interpreto y aplico el control de calidad y la bioseguridad.del control de calidad , bioseguridad y II. Demuestro eficiencia aplicando las normas de bioseguridad, control dedesecho de residuos calidad y buen manejo de los desechos en el laboratorio de hematología teniendo en cuenta la OMS.EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:Desarrollar en forma individual los términos del glosario, hacer la observación de videos de bioseguridad, control de calidad ydesechos de residuos.La función esencial de un laboratorio de hematología es obtener datos confiables y reproducibles para la evaluación del estadode salud del paciente y para los estudios epidemiológicos.De acuerdo a la visita que usted realizó, de respuesta a las siguientes preguntas: 1. Qué requisitos son indispensables para el funcionamiento de un laboratorio clínico? 2. Qué áreas tiene el laboratorio que usted visitó? 3. Enumere las normas generales que deben cumplir los laboratorios para su funcionamiento? 4. El personal que labora en el laboratorio utiliza ropa adecuada? 5. Cómo esta clasificado el laboratorio que usted visitó? 6. En el área de hematología que equipos observo? 7. Como se debe eliminar la jeringa, el algodón, el material contaminado ? 20
  • 21. EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL:Mediante un debate en el aula se hará la socialización del glosario y el taller de las funciones del laboratorio de hematología ylos equipos que hacen parte del laboratorio, se hará preguntas sobre la bioseguridad , control de calidad y la eliminación dedesechos.El docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes.Bibliografía requerida (Documentos docentes)SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000Bibliografía complementariaRODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003MARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidadBase de datos HinariBase de datos Proquest 21
  • 22. 22
  • 23. UNIDAD II TEORIAHEMATOPOYESIS1.) ORIGEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS2.) SITIOS DE LA HEMATOPOYESIS Y FUNCION DE LA MEDULA OSEA a.) Elementos celulares de la médula ósea b.) Eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis, megacariopoyesis c.) Otras células sanguíneas de la médula ósea3.) FACTORES DE CRECIMIENTO HEMATOPOYETICO – INTERLEUQUINAS -4.) EXAMEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS EN MADURACION a.) Características celulares generales b.) Características nucleares c.) Características citoplasmáticasTEORIA HEMATOPOYETICAABORDAJE TEORICO El proceso de la formación de las células de la sangre se llama hematopoyesis. El conjunto de células y estructuras implicadasen la fabricación de las células sanguíneas se llama tejido hematopoyético. La hematopoyesis es un proceso complejo influidopor factores propios del individuo de tipo genético o hereditario, factores ambientales (nutrición, vitaminas, etc.) yenfermedades diversas que afectan a la producción de sangre de forma directa o indirecta.Los factores de crecimiento hematopoyéticos son necesarios para la supervivencia, proliferación y maduración de las célulasprogenitoras en medios de cultivo en el laboratorio. Estos factores se producen en el ambiente de la médula ósea o en otroslugares del organismo. Se trata de glicoproteínas con estructura conocida hoy en día y que se están produciendo de formaindustrial con fines terapéuticos. 23
  • 24. Durante la primera etapa de la vida en el embrión y feto, la hematopoyesis se produce de forma diferente. El hígado y enmenor proporción el bazo, ganglios linfáticos y timo son los órganos productores entre el 2º y 7º mes. A partir del 7ª mes devida intrauterina será la medula ósea el órgano hematopoyético principal hasta el nacimiento y después lo será durante toda lavida en situación normal .INTERLEUCINASSe denominan interleucinas o interleuquinas a un conjunto de proteínas que son sintetizadas y expresadas por losleucocitos (de ahí -leukin), más específicamente por los Linfocitos TCD4 y por los y que tienen como función laintercomunicación (de servir como mensajeros) entre las distintas subpoblaciones leucocitarias, participando en la respuestadel sistema inmunitario. Han sido descritas distintas alteraciones de ellas en enfermedades raras, en enfermedades autoinmunes o en inmunodeficiencias.Estructura : Son proteínas solubles de bajo peso molecular que ejecutan múltiples funciones vinculadas al crecimiento celular,inmunidad, diferenciación tisular, inflamación, etc. Además de las células del sistema inmune, estas citocinas son producidaspor diferentes tipos celulares durante la activación de la inmunidad innata y adquirida. Son el principal medio de comunicaciónintracelular ante una invasión microbiana. Las citocinas sirven para iniciar la respuesta infamatoria, y para definir la magnitud ynaturaleza de la respuesta inmunitaria específica. Se conocen en la actualidad no menos de 33 interleucinas (1), las cualesdifieren entre si tanto desde el punto de vista químico como del biológico. Mientras algunas de ellas [IL-4, IL-10, IL-11]presentan esencialmente efectos favorables, otras [IL-1, IL-6, IL-8], paralelamente a su función defensiva, pueden también serdeletéreas para el organismo (2).ClasesUna lista de interleucinas: IL-1: producida por macrófagos, y células epiteliales induce reacción de fase aguda y la activación y reconocimiento por parte de linfocitos T y macrófagos del lugar donde se desarrolla la respuesta inmune. IL-2: producida por linfocitos Th1 , estimula el crecimiento y la diferenciación de la respuesta de los linfocitos T. IL-3: producida por linfocitos Th2, estimula las células madre de la médula ósea. IL-4: relacionada con la proliferación de linfocitos B, mastocitos y linfocitos T. Tiene un importante papel en las reacciones alérgicas. IL-5: producida por linfocitos T y Mastocitos, estimula el crecimiento y proliferación de eosinófilos. IL-6: segregada por macrófagos, participa en reacciones de fase aguda, también estimula el crecimiento y diferenciación de tanto linfocitos T como linfocitos B. 24
  • 25.  IL-7:intensifica la actividad alocitolítica de las células NK activadas por las linfocinas , se considera un promotor de la Timopoyesis y de la recuperación inmune IL-8: producida por monocitos, macrófagos, queratinocitos, fibroblastos y células endoteliales, su función es atraer a neutrófilos y linfocitos vírgenes, así como movilizar, activar y provocar la degranulación de neutrófilos. También estimula la angiogénesis. IL-9 factor célula linfoide potente, estimula el crecimiento de algunos linfocitos T y mastocitos.En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de laHematopoyesis COMPETENCIAS LOGROS1. Capacidad de relacionar los I. Explico el origen de las células sanguíneasconceptos de la Hematopoyesis, en II. Reconozco los sitios y función de la médula óseael proceso de producción, III. Describo el desarrollo de las células sanguíneas desde la etapa de célula madrediferenciación y desarrollo de las hasta la forma blástica de una célula ( eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis,células sanguíneas megacariopoyesis,) IV. Interpreto la función de los factores de crecimiento hematopoyético y enumero 3 factores. V. Relaciono el orden de maduración de las células sanguíneas como eritrocitos, células plasmáticas, y los 5 tipos de leucocitos ( eosinófilo , basófilo, neutrófilos, monocitos, linfocitos) VI. Analizo las características celulares generales de una célula que son importantes para la identificación celular.2. Capacidad de caracterizar el I. Identifico el papel de las citocinas o interleucinas en la diferenciación de la célulapapel de las citocinas en la troncaldiferenciación de la célula troncal.EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:El estudiante deberá realzar una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) y con en el documento de apoyo sugeridopor el docente, responderá en forma individual el siguiente taller. 25
  • 26. 1. Dónde se origina la hematopoyesis?2. Cuál es el principal sitio de la Hematopoyesis del adulto?3. Explique cuales son las proteínas reguladoras de la hematopoyesis4. Qué es tejido Hematopoyético?5. Qué es el sistema fagocítico-mononuclear?6. Dónde se encuentra el bazo ,el timo , hígado y cuál es su función?7. Qué compone el sistema linfático?8. Qué es la Medula ósea y que la conforma?9 .Defina eritropoyesis?10.Defina la granulopoyesis?11.Defina linfopoyesis?12.Defina megacariopoyesis?13 .Defina Las citocinas, el origen y el sitio de acción de estas.14. Que características comparten las interleucinasEJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL1.) Mediante un debate en el aula se socializara el taller de la Hematopoyesis .2.) Cada uno de los estudiantes deberá tener un mapa mental de hematopoyesis de acuerdo con la teoría desde ladiferenciación de células troncales no diferenciadas a células sanguíneas maduras, teniendo en cuenta el sitio de acción de losfactores estimulantes de colonias y las interleucinas.Cada estudiante deberá identificar la hematopoyesis intramedular y extramedular .Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento.Bibliografía requeridaMARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México 2006 . capitulo 4 Pág.65-73.Bibliografía complementaria 26
  • 27. NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. Segundaedición 2008. Capitulo. Pág. 13-18SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000. Páginas 13,14, 15, 16, 17,18, 19, 20,22.RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005 Pág..78.79.80.JAIME , PEREZ José David, ALMAGER GOMEZ David, HEMATOLOGIA ,la sangre y sus enfermedades , 2010, capitulo 1Célula madre Hematopoyética y Hematopoyesis.CARR. RODAK Altas de HEMATOLOGIA CLINICA.3 edición, 2010.BIBIANA Martínez : CD sobre la hematopoyesis.Motores de búsqueda: Base de datos Hinari Base de datos Proquest.UNIDAD II PRACTICA1-PRINCIPIOS PARA LA RECOLECCION DE LA SANGRE2-CLASES DE ANTICOAGULANTES3-PRUEBAS DE LABORATORIO : BASICAS Y ESPECIALES1-RECOLECCION DE LA MUESTRA EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA PARA CUADRO HEMATICOABORDAJE TEORICOUna muestra sanguínea recolectada en forma apropiada es esencial para la calidad en el desempeño del laboratorio. Elcumplimiento estricto de las reglas para la recolección de la muestra es crucial para la exactitud de cualquier prueba. Loserrores previos al análisis como la identificación, ya sea del paciente o de la muestra, son fuentes potenciales importantes deerror. (Turgeon, 2006).Para los estudios hematológicos, la sangre anticoagulada es la muestra que se usa mas a menudo. Cuando se mezcla sangreentera fresca con sustancias que previenen la coagulación, (anticoagulantes), la sangre puede separarse en plasma, un líquidode color pajizo y los elementos celulares (eritrocitos, leucocitos y plaquetas o trombocitos). La sangre entera que se permitecoagular en forma normal produce el suero, un liquidó de color pajizo. (Turgeon, 2006). 27
  • 28. Se espera que la persona que realiza la flebotomía, brinde una satisfacción inmejorable. Es importante que comprenda yconozca las expectativas del paciente, que maneje la prudencia con este y que sea diplomático ante las quejas del mismo.Si un paciente no esta satisfecho, hay que ofrecerle una disculpa sincera y escucharlo para conocer los detalles del problema.Es preciso asegurarse de comprender y confirmar el problema, actuar en consecuencia con la queja, mantener las promesasque se hagan y seguir el problema hasta la resolución del mismoOBSERVAR UN VIDEO DE TOMA DE MUESTRA YouTube - Extraccion de sangre y hematocrito.url2.) ANTICOAGULANTESEn Hematología debe saber elegir el anticoagulante idóneo y mantener siempre una adecuada proporción entre éste y elvolumen de sangre extraída .En hematología el anticoagulante idóneo debe cumplir los siguientes requisitos: 1. No alterar el volumen del eritrocito 2. No producir hemólisis 3. Evitar la agregación de las plaquetas 4. No alterar la morfología eritrocitariaLos anticoagulantes utilizados en el hemograma son las sales sódicas o potásicas del acido etilendiaminotetraacético ( EDTA) ,se pueden utilizar en forma líquida o sólida .3. PRUEBAS DE LABORATORIOA continuación encontrara una serie de pruebas más frecuentes en el laboratorio para la correlación clínica de los pacientescon trastornos hematológicos-PRUEBAS DE LABORATORIO EL HEMOGRAMA (determinación de hemoglobina, hematocrito, recuentos de leucocitos, recuento diferencial deHay pruebas de laboratorio en hematología que son células blancas o fórmula leucocitaria)utilizadas como de rutina para evaluar la salud del paciente, Determinación de reticulocitosestas pruebas se denominan básicas .Entre estas están: Velocidad de sedimentación globular o eritrosedimentación Recuento de plaquetas 28
  • 29. HEMOGRAMA AUTOMATIZADO : hematíes, hemoglobina Productos de degradación del fibrinógeno (PDF)( Hb), hematocrito (Hto), Volumen corpuscular medio Indice de saturación de transferrina(VCM),concentración de hemoglobina corpuscular media Inmunoglobulinas (IgA, IgD, IgE, IgG, IgM )(CHCM), Amplitud de la distribución del tamaño de Lactato deshidrogenasa (LDH) sueroeritrocitos (ADE) Plomo (suero)Reticulocitos Proteínas totales (suero)Leucocitos Proteínas fraccionadas (albúmina, globulinas)Fórmula leucocitaria: neutrófilos, linfocitos, monocitos, Hepcidinaeosinófilos, basófilos.Recuento de plaquetas OTRAS PRUEBAS ESPECIALES COMO: Valor absoluto de leucocitos. Homocisteína Acido metilmalónicoESTUDIOS BIOQUIMICOS Eritropoyetina (radioinmunoanálisis)Acido fólico (suero) Fosfatasa alcalina granulocíticaAcido úrico (suero) Cromosoma FiladelfiaBeta2 microglobulina (suero) Protoporfirina eritrocitaria libreBilirrubina total, directa, indirecto (suero) Receptor sérico de la transferrinaCalcio (ionizado) Fragilidad osmóticaCobalamina o vitamina B12, (suero) Test de HamComplemento (suero) Electroforesis de ProteínasCreatinina (suero) Test de la sacarosaFerritina Test de falciformiaFibrinógeno (plasma ) Electroforesis de hemoglobinaHierroHierro, capacidad de fijación 29
  • 30. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía ,para la recolección de la sangre,identificación de los principales anticoagulantes y las pruebas básicas y específicas utilizadas en las ayudas diagnósticas delas alteraciones hematológicas COMPETENCIAS LOGROS1. Capacidad de realizar una buena I. Reconozco el protocolo para una buena toma de muestra venosa y capilarrecolección de la muestra para las II. Ejecuto una buena toma de muestra con un compañero teniendo en cuenta lapruebas de células sanguíneas. punción capilar y venosa2. Capacidad de identificar los I. Identifico los diferentes anticoagulantes utilizados en hematologíadiferentes anticoagulantes utilizados enel laboratorio de hematología II. Preparo material con anticoagulante para hemogramas III. Conozco las diferentes ventajas del EDTA –K3.3. Demuestra capacidad de asociar las I. Desarrollo e interpreto las diferentes pruebas básicas y especificas, más usadaspruebas básicas y especificas mas en el laboratorio para las ayudas diagnósticas de las diferentes patologías enusadas en el laboratorio , para las hematologíaayudas diagnósticas de las diferentespatologías en hematologíaEJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:1.) Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) ,observe el video de toma de muestra y plasme elconocimiento adquirido en el desarrollo del siguiente taller : a.) Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total. b.) ¿Por qué la sangre se coagula? c.) ¿Como actúa el anticoagulante frente a la sangre? d.) Describa la importancia de la utilización de cada uno de los anticoagulantes que usted investigo e.) Qué importancia tiene la relación anticoagulante sangre para la realización de un cuadro hemático. f.) El EDTA es el anticoagulante de elección en células sanguíneas. De una explicación a esta afirmación. g.) Sí una muestra presenta un coagulo pequeño. Qué implicaciones trae los resultado 30
  • 31. 2.) Por grupos seleccionados en el aula de clase , identifique y fundamente las pruebas básicas y específicas mas usadas enel laboratorio para las diferentes patologías en hematología .3.) Cada estudiante deberá realizar un protocolo para la toma de muestra de acuerdo a la lectura del documento del manual detoma de muestra venosa y capilar .EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPALEn el aula de clase se socializara el taller y la fundamentación encontrada por los diferentes grupos sobre las pruebas básicasy específicas .Después de socializar el protocolo elaborado del documento, se realizara una flebotomía con un compañero elegidopreviamente en la práctica, dicha actividad requiere de un estricto cumplimiento de las normas de bioseguridad , descarte dedesechos y los cuidados observadas en el video .El estudiante tendrá que explicar al docente y sus compañeros cuales son los requerimientos necesarios en el laboratoriocuando tiene en sus manos una orden para la toma de muestra en un examen de hemograma.Bibliografía requeridaManual de toma de muestras Becton, Dickinson BDBibliografía complementaria  MARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México 2006.capitulo 2 paginas 21-42.  RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005  DACIE Y LEWIS. Hematología practica. 10 a edición.  JOAN LUIS VIVES. AGUILAR. Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología , 3 edición 2005.Motores de búsqueda: Base de datos Hinari Base de datos Proquest.  REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología.  Internet: www.Scielo.org.  www.genereviews.org 31
  • 32. UNIDAD IIIUNIDAD III TEORIAERITROPOYESIS 32
  • 33. 1—CICLO DE VIDA Y FISIOLOGIA NORMALES DEL ERITROCITO a.) Eritropoyesis b.) Eritropoyetina c.) Trastornos de la eritropoyetina d.) Aumento de eritrocitos2- DESARROLLO Y MADURACION DE LOS ERITROCITOS a.) Características generales b.) Etapas del desarrollo c.) Maduración defectuosa d.) Reticulocitos3- CARACTERISTICAS Y PROPIEDADES DE LA HEMOGLOBINA a.) Composición química y configuración de La Hemoglobina b.) El papel del 2,3-difosfoglicerato c.) Disociación y alteraciones en la disociación del oxigeno d.) Transporte del dióxido de carbono e.) Síntesis de la Hemoglobina f.) Tipos, formas variantes y herencia de Hemoglobinas normal4.) CARACTERISTICAS DE MEMBRANA Y ACTIVIDADES METABOLICAS DE LOS ERITROCITOS a.) Características de membrana b.) Característica citoplasmáticas c.) Actividades Metabólicasd.) Catabolismo de los eritrocitos5 ) MEDICION DE LOS ERITROCITOS a.) Volumen corpuscular medio b.) Hemoglobina corpuscular medio c.) Concentración media de hemoglobina corpuscular 33
  • 34. 6.) MORFOLOGIA E INCLUSIONES DE LOS ERITROCITOS a.) Eritrocitos normales y anormales b.) Alteraciones en tamaño y forma c.) Alteraciones en el color d.) Inclusiones eritrocitaria7.) CLASIFICACION Y EVALUACION DE LAS ANEMIAS EN EL LABORATORIO a.) Causas de anemias b.) Signos y síntomas clínicos de la anemia c.) Clasificación de las anemias d.) Valoración de laboratorio de las anemias teniendo en cuenta las bases químicas, fisiológicas, genéticas y biología molecular.8. ANEMIAS POR PERDIDA DE SANGRE AGUDAS Y CRONICA a.) Anemia por perdida aguda de sangre : Etiología, datos de laboratorio. b.) Anemia por perdida crónica de sangre : Etiología9.ANEMIA APLASICA Y RELACIONADAS a.) Anemia aplásica ; Etiología, fisiopatología, características clínicas, datos de laboratorio b.) Anemia de Fanconi: Signos y síntomas , datos de laboratorio c.) Trastornos relacionados como aplasia eritrocitaria pura , Anemia diseritropoyética congénita : Fisiología y datos de laboratorio10.) ANEMIAS HIPOCROMICAS Y TRASTORNOS EN EL METABOLISMO DEL HIERRO a.) Anemia por perdida de hierro : Etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, datos de laboratorio. b.) Anemia por trastornos inflamatorios o crónicos : Etiología, Fisiopatología, datos de laboratorio. c.) Anemia Sideroblástica: Etiología, fisiología, datos de laboratorio d.) Hemocromatosis Hereditaria: clasificación y etiología , datos de laboratorio.11.) ANEMIA MEGALOBLASTICA a. Anemia Megaloblástica: Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntoma datos por el laboratorio. 34
  • 35. b.) Anemias no megaloblásticas12.) ANEMIAS HEMOLITICAS a.) Anemia hemolítica hereditaria: Etiología, fisiopatología, pruebas diagnósticas. b.) Hemoglobinuria paroxística nocturna: Etiología, epidemiología, fisiología,, signos y síntomas, datos de laboratorio. c. Anemia hemolítica adquirida: Etiología . d.) Anemia hemolítica por mecanismos inmunitarios. e.) Anemia hemolítica por agentes físicos13 HEMOGLOBINOPATIAS a.) Enfermedad de células falciformes : Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntomas clínicos, datos por el laboratorio . b.) Talasemia (Beta ) Etiología, fisiología, datos de laboratorio,GLOBULO ROJOAbordaje teóricoEl eritrocito maduro es un disco bicóncavo con una palidez central que ocupa el tercio medio de la célula. Cerca del 33 % delvolumen de la célula madre consiste en la proteína respiratoria hemoglobina, que realiza la función de transporte de oxigeno ydióxido de carbono. Con un promedio de vida de 120 días, esta célula blanda y flexible se mueve con facilidad por los capilarestitulares y la circulación esplénica. Con forme la célula envejece, las enzimas citoplasmáticas se catabolizan, lo que aumenta larigidez de la membrana, y conduce a la destrucción mediante la fagocitosis por los macrófagos.HEMOGLOBINAAbordaje teóricoLa hemoglobina es una heteroproteína de la sangre, de peso molecular 68.000, de color rojo característico, que transporta eloxígeno desde los órganos respiratorios hasta los tejidos, en mamíferos y otros animales. La forman cuatro cadenaspolipeptídicas (globina) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo átomo de hierro es capaz de unirse de formareversible al oxígeno. La hemoglobina se encuentra en el interior de los glóbulos rojos.La hemoglobina es la proteína transportadora de oxigeno. Representa en promedio el 32% de la masa total del eritrocito.La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno como para 35
  • 36. bicarbonato por parte del eritrocito. Tanto la concentración de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directael número de eritrocitos.Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de hemoglobina es superior alhematocrito y al recuento de eritrocitos. Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromesanémicos) están definidas por la concentración de la hemoglobina.La determinación de la hemoglobina por métodos electrónicos, se obtiene por el método de la cianometahemoglobina quedetermina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la carboxihemoglobina, mediante un pequeñohemoglobinómetro incorporado al equipo.El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para la Estandarización de Hematología(ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más recomendado.Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares satisfactorios y la capacidad decuantificar todas las formas de Hb de importancia clínica. Es el método de elección para efectuar estudios científicos sobreanemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pública. (González, 2005)METABOLISMO DEL HIERROEl contenido en hierro del organismo y su distribución se resume en la siguiente tabla: DISTRIBUCION DEL HIERRO EN EL ORGANISMO PROTEINA LOCALIZACION CONTENIDO EN HIERRO (mg) Hemoglobina Hematíes 3.000 Mioglobina Músculo 400 Citocromo y proteínas con hierro y azufre Todos los tejidos 50 Transferrina Plasma y liquido extravascular 5 Ferritina y Hemosiderina Hígado, Bazo, Médula Osea 100- 1000La mayor parte del hierro se encuentra en la proteína transportadora del oxigeno en los hematíes : La Hemoglobina . Elrecambio metabólico del hierro esta dominado por la síntesis y degradación de la hemoglobina. El grupo Hemo se sintetiza enlos hematíes nucleados en la médula ósea a través de una ruta que finaliza con la incorporación del hierro en la protoporfirina 36
  • 37. IX mediante la ferroquelasa. La ruptura del grupo hemo se produce en las células fagocíticas , principalmente en el bazo,hígado y la médula ósea. El hierro se libera del grupo hemo por la hemoxigenasa y se reutiliza en su mayor parte parasintetizar el hemo. Cada día se usan alrededor de 30 mg de hierro para fabricar nueva hemoglobina y la mayor parte de estase obtiene de la lisis de los hematíes viejos .La cantidad de hierro perdida por el organismo es de 1 mg/ día en los hombres , en las mujeres la menstruación y el partoincrementan la perdida de hierro en 2 mg/día. Es posible que la absorción de hierro no aumente lo suficiente para compensaresta perdida debido a esto aparece la anemia ferropénica.La proteína fijadora del hierro , la transferrina , es responsable del transporte extracelular , la mayoría de las células obtienen elhierro a partir de la transferrina . El hierro se une a los receptores de la transferrina en la superficie celular y luego se produceun intercambio con la liberación del hierro en las células y la devolución de la apotransferrina (proteína sin hierro) al plasmapara ser reciclado.METABOLISMO DE LA VIT B 12 Y ACIDO FOLICO.La investigación del estado del folato y de la vitamina B12 en los individuos no está restringida a la investigación de los quepresentan las características de anemia megaloblástica , ya que en el déficit de Vitamina B12 se pueden producir cambiosneuropáticos y neurosiquiátricos en ausencia de macrocitos y anemia .Se ha postulado que valores elevados de Homocisteínaplasmática y de Acido metilmalónico ( AMM) séricos podrían ser indicadores sensibles del déficit , incluso subclínico , defolatos y cobalamina.Una deficiencia de Vitamina B12 y de folatos ocasionan alteraciones en la Hematopoyesis ya que originan una anomalía en lasíntesis de DNA y como consecuencia anemias con alteraciones megaloblásticas ( eritrocitos grandes y asincronismomadurativo).Es importante que se conozca como se ingieren y absorben la vitamina B12 y el ácido fólico, pues es la clave para eldiagnóstico etiológico. Dentro del déficit de la vitamina B12 se incluye la anemia perniciosa. El diagnóstico requiere de unhemograma (hemoglobina baja y VCM alto), examen de medula ósea (cambios megaloblásticos) y de determinacionesbioquímicas (Vit. B12 y Acido fólico). 37
  • 38. MORFOLOGIA CELULAR EN FROTIS DE SANGRE PERFERICAObservación de la Línea Eritroide DOCUMENTO APORTADO POR LA DOCENTEANEMIASLos tejidos del organismo requieren oxígeno continuamente, nutrientes y electrolitos para su función normal, en estados deanemias el aporte de O2 a los tejidos es inadecuado debido a la disminución en la capacidad transportadora de este gas por lamasa eritrocitaria circulante.La anemia no es una enfermedad sino un signo o síntoma que como la fiebre, el dolor, la cefalea y la fiebre está relacionadacon muchas enfermedades y como en todos estos casos, el médico antes de tratar el síntoma, debe identificar la causa eintervenirla. Frente a un paciente con anemia el médico debe tener como principal objetivo establecer el diagnóstico, incluido eltipo de anemia y su causa. (Campuzano, 2007).Cuando la anemia se instaura en un periodo de días o semanas, el volumen total de sangre es normal o aumentado, aexpensas del plasma y los cambios que se producen en el gasto cardíaco y en el flujo sanguíneo, facilitan la compensación dela pérdida global de la capacidad de transporte de O2. Los cambios de la posición de la Curva de disociación de O2-Hemoglobina explican en parte la respuesta compensatoria frente a la anemia.DOCUMENTO SOBRE ANEMIAS DEL DR. GERMAN CAMPUZANO ,DADO POR EL DOCENTEEn la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la Eritropoyesis einterpretar las alteraciones morfológicas y las inclusiones de los eritrocitos. COMPETENCIAS LOGROS1. Capacidad de Interpretar el ciclo I. Reconozco los diferentes procesos para la producción de eritrocitosde vida y fisiología normales del II. Explico las condiciones normales que estimulan la producción deeritrocito Eritropoyetina. III. Establezco la diferencia entre los términos policitemia secundaria y policitemia relativa 38
  • 39. 2. Demostrar comprensión en el I. Describo las principales características morfológicas de cada etapa dedesarrollo y maduración del eritrocito Maduración del eritrocito. II. Explico los sucesos que ocurren durante la maduración de los reticulocitos III. Defino el concepto de reticulocitos de estrés.3. Capacidad de expresar las I .Describo la configuración química de la Hemoglobina normal del adultocaracterísticas y propiedades de la II. Relaciono el papel fisiológico del 2,3-difosfoglicerato en la oxigenación deHemoglobina La molécula de hemoglobina. III. Describo el efecto Bohr IV. Describo brevemente la síntesis del Hem V. Reconozco la síntesis y el mecanismo de transporte e inserción del hierro en la producción de hemoglobina.4. Capacidad de Describir las I. Explico las diferentes vías metabólicas en el eritrocitocaracterísticas de membrana y II. Conozco las principales características de la membrana del eritrocitoactividades metabólicas de los III Conozco las principales características citoplasmáticaseritrocitos IV. Describo e interpreto el catabolismo de los eritrocitos extravascular e Intravascular. 5. Para evaluar los trastornos de I. Conozco los procedimientos que valoran las cantidades de eritrocitos o los eritrocitos debe hacer hemoglobina. mediciones cuantitativas y evaluar el frotis de sangre periférica como II. Interpreto los valores normales para los eritrocitos ,hemoglobina, información básica. Hematocrito de acuerdo a los diferentes grupos de edad. III. Conozco e interpreto los índices eritrocitarios como: volumen corpuscular medio (VCM),Hemoglobina corpuscular media (HCM), concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC) IV. Aplico las formulas apropiadas y calculo el VCM, HCM y CMHC cuando me aportan los valores de eritrocitos. 6. El estudiante debe reconocer I. Relaciono las alteraciones observadas en el tamaño del eritrocito . las diferentes alteraciones en el II. Relaciono las alteraciones de la forma del eritrocito. tamaño, forma, color e inclusiones III. Interpreto las variaciones del color del eritrocito. de los eritrocitos. IV. Identifico las inclusiones observadas en el eritrocito. V. Reconozco las inclusiones parasitarias en los eritrocito 39
  • 40. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante darárespuesta al siguiente taller :1.Qué Función cumple el eritrocito?2.Cuales son los componentes de la membrana del eritrocito, cual es su función y qué importancia tienen. Qué implicacionestrae su ausencia.3.Qué entiende por Eritropoyesis.4.Como explica el concepto de Eritropoyesis ineficaz?5.Qué importancia tiene el recuento de reticulocitos? Sustente la respuesta.6. Que sustancias alimenticias son necesarias para la maduración nuclear y citoplasmática, las cuales evitan las llamadasanemias carenciales.7.Defina Hemólisis.8.Que funciones ejerce la EPO.(eritropoyetina) y donde se origina.9.Elabore un mapa conceptual de la hemólisis intravascular y extravascular,10.Mediante un esquema realizo una presentación de la estructura de la hemoglobina.11.Que importancia tiene el efecto Bohr y Aldane en el transporte de oxigeno.12.Esquematice la curva de disociación de hemoglobina.13.Qué importancia tiene el 2,3 DPG en el transporte de oxigeno?TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPALMediante un debate en el aula se socializa el taller y los mapas conceptuales de la hemólisis intravascular y extravascular, estopermitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de losestudiantes. 40
  • 41. Bibliografía requerida.TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. Edición 2006.Capitulo 5,6,7,8,9,10,11,12,13. , Paginas79- 191.BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIANARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. 2da. edición2008 cap. 3 Pág. 26-47RUIZ, Arguelles. G, J. Fundamentos de Hematología. Tercera edición 2001.RODAK, Bernadette F. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Segunda edición 2005. Capitulo 7, Paginas 83-97MCKENZIE, Shirlin. Hematología clínica. Segunda edición 2000. Capitulo 3, paginas 39-64MOTORES DE BUSQUEDA Hinari. Proquest. REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología. Internet: www.Scielo.org. www.genereviews.orgEn la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la clasificación yevaluación de las anemias en el laboratorio. COMPETENCIAS LOGROS1. Argumentar con claridad las causas de la I. Conozco las alteraciones fisiológicas de las diferentes anemiasanemia. II. Explico los factores que contribuyen con la anemia2. Capacidad de Reconocer los diferentes signos I. Interpreto las causas , signos y síntomas de la anemia.y síntomas de las diferentes anemias . II. Describo las molestias más frecuentes en pacientes anémicos.3. Demostrar coherencia en la interpretación de la I. Relaciono las alteraciones morfológicas observadas en el frotisclasificación de las anemias teniendo en cuenta la de sangre periférica .morfología, fisiología y la posible etiología. II. Reconozco las pruebas de laboratorio que se utilizan como ayudas en el diagnóstico de las anemias . 41
  • 42. III. Identifico otras pruebas específicas para las ayudas Diagnósticas de las anemias.4.Reconocer las diferencias en las anemias por I. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida agudapérdida de sangre aguda y crónica. de sangre. II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología en la pérdida aguda de sangre. III. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida crónica de sangre. II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología en la perdida crónica de sangre5. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, fisiopatología ,las características clínicas y losanemia aplásica y el grupo que se relaciona con datos de laboratorio que se puedan relacionar con este grupo deellas . anemias .6. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, losanemia hipocrómica y los trastornos en el datos por el laboratorio.metabolismo del hierro. II. Establezco la diferencia entre la anemia ferropénica y las anemias por trastornos inflamatorios o crónicos. III. Interpreto el metabolismo del Hierro7. Capacidad de expresar el concepto de las I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, losanemias megaloblásticas, datos por el laboratorio. II. Establezco la diferencia entre la anemia megaloblástica y no megaloblástica. III. Interpreto el metabolismo de la vitamina B12 y los folatos8. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, losanemia hemolítica . datos por el laboratorio. II. Establezco la diferencia entre la anemia hemolíticas hereditarias Y anemias hemolíticas adquiridas.9. Capacidad de interpretar las Pruebas de I. Reconozco algunas de las pruebas de biología molecular para elBiología Molecular mas utilizadas para el diagnóstico de algunas anemias.diagnóstico de algunas anemias. 42
  • 43. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante darárespuesta al siguiente vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicas encontradas en los eritrocitosAnexo 1TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPALMediante un debate en el aula se socializa el vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicasencontradas en los eritrocitos, esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiacióndel conocimiento de los estudiantes.UNIDAD III PRACTICA1- PRINCIPIOS Y METODOS DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA, TINCION DE WRIGHT. Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.2- DETERMINACION DE HEMOGLOBINA , HEMATOCRITO Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.3. DETERMINACION DE RETICULOCITOS Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 4. DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 5. RECUENTO DE LEUCOCITOS . Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.3-HEMOGRAMA MANUAL.4- HEMOGRAMA AUTOMATIZADO5- OBSERVACION DE LA MORFOLOGIA NORMAL Y ANORMAL DEL ERITROCITO Con los parámetros de la OMS.6- OBSERVACION DE LAS INCLUSIONES ERITROCITARIA Con los parámetros de la OMS.7- PRUEBAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO CLINICO PARA EL DIAGNOSTICO DE ANEMIAS . 43
  • 44. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender los principios ymétodos del extendido de sangre periférica y la coloración de Wright, también le permitirán tener claridad sobre elhemograma manual y automatizado , recuento de reticulocitos VSG, recuento de leucocitos. COMPETENCIAS LOGROS1. Aplicar los conocimientos para realizar un I. Comprendo el método para un frotis de sangre periférica y una coloración conbuen frotis de sangre periférica buen control de calidad.2. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento de la determinación de los procedimientos del cuadrocorrelacionar los procedimientos del hemático manual ( Eritrograma)Eritrograma (Frotis de sangre periférica,coloración de Wright, determinación de II. Identifico equipos, materiales, reactivos y procedimientos que se utilizan parahemoglobina y hematocrito, citología realizar el cuadro hemático manual en el laboratorio clínico.eritrocitaria, manual.) III. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos del cuadro hemático manual ( Eritrograma) IV. interpreto y correlaciono las alteraciones de un hemograma en las anemias más comunes que se evidencien en el laboratorio. V. Reporto las alteraciones morfológicas en el frotis de sangre periférica de las patologías más comunes encontradas en el laboratorio. VI. interpreto el control de calidad aplicado en los procedimientos del hemograma manual .3. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento para la determinación de la VSG. y la correlacionocorrelacionar los procedimientos de con la clínica .Velocidad de sedimentación globular y su II Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos de laimportancia clínica . VSG.4. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento para el conteo de reticulocitos y su importanciacorrelacionar los procedimientos para el clínica .recuento de reticulocitos , y su importancia II. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos declínica . los reticulocitos.5. Demuestro capacidad de analizar e I. Conozco el fundamento para el conteo de leucocitosinterpretar el recuento de leucocitos. II. Adquiero habilidades y destrezas en los cálculos y conteo en cámara de leucocitos. 44
  • 45. 6.Capacidad de Interpretar el cuadro I. Interpreto el cuadro hemático automatizado ,incluyendo las alarmas .hemático automatizado. II. Identifico el principio de la impedancia eléctrica y la dispersión de la luz. III. interpreto el control de calidad aplicado en los hemogramasABORDAJE TEORICO DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA Y LA COLORACION DE WRIGHT HEMATOLOGIA RODAKEl estudio de las células sanguíneas por medio de la observación en un microscopio de las preparaciones coloreadas,conocido como ESP, ha sido uno de los exámenes más antiguos e importantes en el laboratorio clínico. La práctica del ESP esde gran utilidad en hematología ya que permite visualizar la morfología celular, estimar el número de células en sangreperiférica y determinar la eventual presencia de elementos atípicos. Los resultados obtenidos con este estudio son un reflejodel funcionamiento de la médula ósea y de los factores que influyen en las diferentes poblaciones celulares.El extendido de sangre periférica permite la evaluación del estado de maduración de las células sanguíneas , lascaracterísticas tinto riales, el contenido de los gránulos, las inclusiones y formas celulares, una adecuada orientación en laevaluación de la respuesta inmune , todo lo cual se correlaciona con la fisiopatología de ciertas enfermedades, permitiendoesto un manejo inicial simplificado de los pacientes. 45
  • 46. TINCION DEL FROTIS DE SANGRE PERIFERICAEl propósito de teñir los frotis sanguíneos es identificar las células y reconocer fácilmente la morfología a través delmicroscopio . La tinción de Wright o Wright- Giemsa es la más utilizada con mayor frecuencia en el frotis de sangre periférica ymédula ósea. Ambas contienen eosina y azul de metileno , por lo tanto , se denominan tinciones policromáticas .Las células se fijan sobre el portaobjetos con el metanol de la tinción . Las reacciones de tinción dependen del Ph; y la tinciónreal de los componentes celulares sucede cuando se agrega una solución amortiguadora (pH 6,4) a la tinción . El azul demetileno libre es básico y tiñe de azul los componentes celulares ácidos como por ejemplo, el RNA. La eosina libre es ácida ytiñe de rojos los componentes básicos , como la hemoglobina o los gránulos eosinófilos . Los neutrófilos posen gránuloscitoplasmáticos que tiñen pH neutro y admiten algunas características de ambas tinciones.Un frotis teñido de manera adecuada tiene las siguientes características : 1. Los eritrocitos deben ser de color rosa a salmón 2. Los núcleos son de color azul oscuro a violeta 3. Los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos son de color lila 4. Los gránulos citoplasmáticas de los basófilos son de color azul oscuro a negro. 5. Los gránulos citoplasmáticas de los eosinófilos son de color rojo a anaranjado. 6. El área entre las células deben estar limpia y libre de precipitado de colorantes. Los mejores resultados de la tinción se obtienen de frotis recientemente preparados en un periodo de 2 a 3 horas de recolectada la muestra. Los frotis se deben dejar secar completamente antes de teñirse .Carr Rodak.FUNDAMENTO DE LA TECNICA DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICAConsiste en la extensión de una gota de sangre sobre un portaobjeto (25 x 75 mm) mediante una lámina con bordeesmerilado.MATERIALES Y REACTIVOSMaterialesSangre venosa con K2- EDTA o sangre capilarAlcohol de 70ºCAlgodónLanceta descartable 46
  • 47. Láminas portaobjetos limpios y desgrasados (25 x 75 mm).METODOLOGIARecolección y almacenamiento de la muestra.Muestra se obtiene de Sangre venosa o capilar con EDTA- K2.Se conserva a temperatura ambiente por un máximo de 2 horas.Es muy importante respetar la proporción sangre-anticoagulante, por esto las medidas deben ser exactas; cualquierdesproporción así sea mínima influirá en los resultados alterándolos.Control de calidadCalidad del extendido utilizando placas con borde fino o esmeriladoDisposición de residuosEl material cortopunzante se descartan en el guardián, el resto del material se coloca en una solución detergente enzimática(Wescoziyme) al 0.6%.El material de toma de muestra debe ser descartado en bolsa roja, destinada para material biológico. El material nocontaminado con sangre se descarta en bolsas verdes.PROCEDIMIENTOPara ello se recomienda seguir el siguiente método:1. Colocar una gota de sangre (5µL) de no más de 3 mm de diámetro sobre la superficie de un portaobjetos a 2 cmaproximadamente de uno de sus extremos2.colocar el borde esmerilado de otro portaobjeto por la parte anterior a la gota de sangre sobre la superficie del primerportaobjeto, formando un ángulo aproximado de 45º, y desplazarlo suavemente hacia atrás hasta que alcance la gota .3.Esperar que por capilaridad toda la sangre se distribuya de manera uniforme. Es aconsejable que la sangre no llegue a loslados del portaobjeto sobre el que se realizará la extensión .4 Deslizar suavemente y a velocidad moderada un portaobjeto sobre el otro en sentido longitudinal, hasta que la gota desangre quede bien extendida sobre la superficie del primer portaobjeto .Así, si es superior a 45º, la extensión obtenida serágruesa y corta (Hematocrito bajo); por el contrario, si es inferior a 45º (Hematocrito alto), será larga y fina . 47
  • 48. 5 Secado de la extensión a temperatura ambiente y en posición horizontal.TINCION DE WRIGHTMATERIALES Y REACTIVOSMateriales Solución amortiguadora tamponadaLamina portaobjeto con el extendido Soporte metálico para colocar las laminas portaobjetosColorante de Wright Cronómetro.Frasco goteroEstandarización de la coloración de WrightCalidad del extendido Color de las PltsCantidad de colorante Definición de membranasTiempo de colorante Definición de granulacionesCantidad de buffer Color de granulacionesTiempo de buffer Ph aspectoColor de los hematíes PrecipitadosColor del núcleo de los LyMETODOLOGIA1.- Hacer un frotis sanguíneo, ni demasiado delgado, ni que llegue al extremo del portaobjetos, dejarlo secar entre 15 y 20minutos .2.- luego se coloca la preparación en un soporte y se cubre con el colorante de Wright dejándolo por espacio de 1 minuto. Sinvotar el reactivo, colocar la solución amortiguadora en partes iguales hasta que se forme el brillo metálico por 3 minutos .3.- lavar con agua corriente,( Ph de 7.2 ) limpiar el revés del portaobjeto y dejarla secar en posición vertical.4.- Observar al microscopio y con pequeño aumento, se revisa la calidad de la coloración.TRABAJO INDIVIDUALCon una amplia revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente elabore este taller : 48
  • 49. 1. ¿Cuáles son los requisitos fundamentales para lograr que un extendido cumpla sus objetivos?2. Causas de error en un extendido de sangre periférica.3. ¿Cuál es el efecto que produce el anticoagulante en las células sanguíneas después de dos horas de extraída la muestrade sangre?4. Describa e interiorice el fundamento y método de la coloración de Wright.5. De acuerdo al fundamento de la coloración de Romanowsky describa el color del núcleo y citoplasma de los linfocitos,monocitos, polimorfonucleares neutrófilos, polimorfonucleares eosinófilos, polimorfonucleares basófilas, eritrocitos yreticulocitos.6. Causas de error de la coloración de Wright7. Cuáles son las alteraciones en la morfología del eritrocito?8.Describa la importancia de observar el frotis con la coloración de Wright desde un objetivo de : 10 X, 40X, 100X.9. Encuentre las causas de las discrepancias observadas en los siguientes problemas A y B de la coloración de Wright:A. Problemas• los eritrocitos aparecen de un color gris• Los leucocitos están demasiados oscuros• Los gránulos de los eosinófilos son de color gris, no anaranjadosB. Problemas• Los eritrocitos están demasiado pálidos o de color rojo• los leucocitos son apenas visiblesTRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL.Socializar y revisar el taller en el aula de clase, con el fin de aclarar dudas presentadas durante las prácticas.DETERMINACION DE HEMOGLOBINA y DETERMINACION DEL VOLUMEN GLOBULAR (HEMATOCRITO)FUNDAMENTACION TEORICA DE LA HEMOGLOBINAMétodo del cianuro de hemoglobina (cianmetahemoglobina) 49
  • 50. La base del método consiste en la dilución de sangre en una solución que contiene cianuro y ferrocianuro potásicos. Lahemoglobina, la Hi (metahemoglobina) y la HbCO (carboxihemoglobina), pero no la SHb (sulfahemoglobina), se convierten enHiCN (cianuro de hemoglobina). La absorbancia de la solución es proporcional a la cantidad de hemoglobina que contenga lasangre1. Hemoglobina + ferrocianuro potásico = metahemoglobina (Hi).2. Hi + cianuro potásico = cianmetahemoglobina (HiCN)MATERIALES Y REACTIVOSMaterialesCubetas estandarizadas de lectura. - Puntas plásticas.- Pipeta automática de 20 μL. - Tapones de plástico- Pipetas de Sahli (graduada hasta 0.02 ml 0 20 µl) - Guantes descartables.- Boquillas - Pipeta serológica de 5 ml.- Tubos de 13 x 100 mm. - Pipetiador automático.- Gradilla para tubos. - Sangre venosa con K2- EDTA o sangre capilar- Marcador de vidrio.EQUIPOSUn espectrofotómetroMezclador mecánico (opcional).Reloj marcadorReactivos:Sangre venosa con K2- EDTA o sangre capilarReactivo de Drabkin :Bicarbonato de Sodio (NaHCO3) 1.0 gCianuro de potasio (KCN) 0.05 gFerrocianuro de potasio (K2Fe2 (CN)6) 0.200 gAgua destilada o c.s.p. 1000 mlProcedimientoMezclar todo y guardar en frasco oscuro protegido de la luz. Es estable 1 mes. 50
  • 51. - Solución estándar de Hemoglobina (15g/dl)METODOLOGIARecolección y almacenamiento de la muestraMuestra se obtiene de Sangre venosa o capilar con EDTA- K2.Se conserva a temperatura ambiente por un máximo de 4 horas.Es muy importante respetar la proporción sangre-anticoagulante, por esto las medidas deben ser exactas; cualquierdesproporción así sea mínima influirá en los resultados alterándolos.PROCEDIMIENTOLa preparación de la cianmetahemoglobina estará sujeta a las indicaciones del fabricante del reactivo.1. Conectar el fotocolorímetro o el espectrofotómetro según las especificaciones de la casa comercial.2. Homogenizar bien la sangre mediante agitación suave con un sistema automático durante un tiempo mínimo de 5 minutos omanualmente por una inversión de 20 veces.3. Pipetear 5 ml de reactivo de Drabkin en un tubo de 13 x100 mm.4. Con la micropipeta de Salhi o automática añadir 20 µl (0,02 ml) de sangre homogenizada al tubo que contiene el reactivo5. Al realizar la operación es necesario que se elimine el exceso de sangre adherida a la pared externa de la pipeta o punta,introducir en el reactivo y tratar que no quede sangre adherida a las paredes de la pipeta o punta.6 Agitar el tubo tapado mediante inversión (4 o 5 veces) con el fin de homogenizar bien la mezcla sangre-reactivo esperarmínimo 5 minutos para que se produzca la hemólisis total y se complete la transformación de toda la hemoglobina encianmetahemoglobina.7. Prender el equipo y esperar que se estabilice por lo menos 10 Min, utilizar cubetas limpias y secas, al terminar limpiarcuidadosamente con solución detergente y abundante agua destilada.8. Leer la absorbancia de la solución a 540mm, mediante un instrumento bien calibrado. Como blanco se emplea aguadestilada o la propia solución de Drabkin.CALCULOPara obtener el cálculo debemos obtener el factor a partir de un estándar conocido. 51
  • 52. F= Concentración del estándar g/l D.O. DEL STANTARHb g/l. = F x DO de la Hb del pacienteResultadosLa lectura en absorbancia del problema debe ser comparada en la curva patrón para encontrar a que concentración dehemoglobina corresponde expresándose en g/dl.PARAMETROS DE VALIDACIONValores normalesRecién nacido hasta 18 gr / dl lNiños de (1-5 años) 11 - 13 gr /dlMujeres en edad fértil 12,5 - 15 gr/ dlMujer embarazada 11 gr / dlHombre adulto 14,5 - 17 gr /dlLos valores de la concentración de hemoglobina varían ampliamente con la edad, sexo, raza y altura sobre el nivel del mar.Las variaciones diurnas y factores ambientales y fisiológicos también se tienen en cuenta en los reportes de hemoglobina.DETERMIANCION DEL HEMATOCRITO MEDIANTE EL MICROMETODO (MICROHEMATOCRITO)FUNDAMENTACION TEORICAEl método del microhematocrito se realiza con la sangre contenida en tubos capilares de 75 mm de longitud y con un diámetrointerno de aproximadamente 1 mm. Pueden ser tubos sin anticoagulantes o revestidos internamente con 1 UL de heparinapara la recogida directa de la sangre capilar. 6. HEMATOCRITOEl Hto. mide la fracción que comprende a los glóbulos rojos (masa globular), respecto al volumen total de la muestra de sangrevenosa o capilar. Su determinación se hace en porcentaje, sirve para determinar si un paciente presenta anemia 52
  • 53. MATERIALES Y METODOS1. Materiales- Tubos capilares heparinizados o no heparinizados.- Plastilina.- Lector de hematocrito2. EquipoMicro centrífuga para hematocritoPROCEDIMIENTO: Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del pulpejo del dedo (mediano o anular) cerca del borde o si es un niño recién nacido, el talón del pie, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante. Debe llenarse aproximadamente 70%-80 % del capilar. Tapar con plastilina un extremo del capilar. Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrifuga de microhematocrito, con el extremo tapado adherido al reborde externo de la plataforma. Centrifugar 5 minutos en 12000 g y medir la proporción de células con respecto a la columna total (es decir Hto.) utilizando un dispositivo de lectura. Para leer en la tabla el hematocrito se debe hacer coincidir el menisco del plasma con el final de la marca de la tabla y el fondo del empacado de eritrocitos que coincida con el inicio de la marca de la tabla. Leer siempre en la dirección de la numeración ascendente cuantos ml de empacados de eritrocitos tiene la muestra (ver tabla)ResultadosSe reporta el volumen de eritrocitos empacados en porcentaje del volumen total. Valores de referencia: Hombre 42%-51% Mujer 38%-42% Niños 33%-38% Recién nacidos Hasta 55% 53
  • 54. TRABAJO INVESTIGATIVO INDIVIDUALRealice revisión bibliográfica mínimo de 4 autores sobre la realización de la hemoglobina, hematocrito .Una vez obtenida la información resuelva las siguientes preguntas:1. Describa e interiorice el fundamento para la determinación de hemoglobina (cianometahemoglobina) y hematocrito.2. ¿Cuáles son las causas de error de la determinación de la concentración de Hemoglobina y hematocrito ?3. Qué métodos existen para realizar el control de calidad de hemoglobina y el hematocrito, descríbalo .4. Establezca las cifras de Hemoglobina y hematocrito en hombres, mujeres, niños y recién nacidos de acuerdo a la altura sobre el nivel del mar.5. ¿Qué otros métodos existen para determinar el Hto y cual es su importancia ? Describa la técnica.6. Por qué es importante la relación anticoagulante sangre en la determinación de hemoglobina y hematocrito.7. ¿Cuáles son los índices eritrocitarios secundarios, defina cada uno de ellos.8. ¿Qué importancia tienen los índices eritrocitarios en el estudio del cuadro hemático?Mediante la obtención de varias muestras de Cuadros Hemáticos elabore: Determinación de Hemoglobinas y Hematocritos.TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPALSocializar y revisar el taller, con el fin de aclarar las dudas a cerca de las técnicas realizadas en el aula de clase y hacerénfasis en el reporte por el laboratorio y la correlación clínicaBIBLIOGRAFIA REQUERIDA:ROBERT S, HILMAN, AUIT, RINDER. HEMATOLOGIA en la practica clínica , McGrawHill. 4 Edición .2006VIVES. J.l. et.al. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. Editorial Masson, Tercera edición, 2006BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA: VIVES, Joan Lluís Corrons. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. Editorial Elsevier. Tercera edición. 2006. FISCHBACH, Frances Talaska .Manual de pruebas diagnosticas. Editorial McGraw-Hill. Interamericana. Edición quinta. 1.996. TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica teoría y procedimientos. Editorial El Manual Moderno. 2006. BERNADETTE, F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Editorial panamericana, segunda edición. 2005 54
  • 55. Motores de búsqueda Hinari. Proquest. REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología. Internet: www.Scielo.org. www.genereviews.orgPARA CONCLUIR LOS ESTUDIANTE RESPONDERAN ESTE CASO PROBLEMA1 Al laboratorio acude una paciente de sexo femenino de 45 años con una posible sospecha de cáncer ,en sureporte de laboratorio se encuentra Hb: 9 g/dl y Hto: 28% .¿ Por qué la Hemoglobina 4 no es igual a la 9?.DETERMINACION DE LA ERITROSEDIMENTACION (VSG)PRINCIPIOSi se deja reposar verticalmente un tubo de sangre con anticoagulante se observa que, después de algún tiempo, loseritrocitos sedimentan en su fondo, formándose dos fases que corresponden al plasma (parte superior) y a las células 55
  • 56. sanguíneas constituidas fundamentalmente por eritrocitos (parte inferior).Este proceso de denomina eritrosedimentación y lavelocidad con que se realiza (VSG) puede variar en diversas patologías.La VSG es la cantidad de milímetros que los eritrocitos sedimentan en 1 hora .MATERIALES Y METODOS1.Material y equipos Sangre venosa tomada con EDTA. o citrato de sodio 3.8% Tubo de Wintrobe Cánula Jeringa Tubos de Westergreen Soporte para sedimentaciónPROCEDIMIENTOla sangre citratada se equilibra a temperatura ambiente, se mezcla por inversión repetidas veces, y se sumerge en un tubo deWestergreen la muestra dejando que la sangre ascienda por capilaridad. El nivel de la sangre se ajusta a cero, no debe haberburbujas de aire en la pipeta .  El tubo es colocado en la gradilla en posición estrictamente vertical a temperatura ambiente (I8-25°C), sin exposición a la luz del sol directa, libre de vibraciones y corrientes de aire, manteniéndolo exactamente 6O min.  Si se utiliza el tubo de Wintrobe se llena con una cánula hasta la marca de 0, teniendo en cuenta de que no hayan burbujas de aire en el tubo.Valores de referencia por el método de WestergreenLos valores de referencia para la VSG son:Edad VSG (mm/hr)Niños 0-1Hombres< 50 años 0 a 15> 50 años 0 a 20Mujeres< 50 años 0 - 20 56
  • 57. > 50 años 0 - 30Las cifras normales por el método de WintrobeNiños 0 - 13 mm en una hora,Hombres 0 - 9 mm en una horamujeres 0 - 20 mm en una horaDETERMINACION DE RETICULOCITOSAbordaje teóricoEl recuento de reticulocitos es un parámetro de gran valor en el estudio de las anemias, ya que permite diferenciar entre losmecanismos central (anemia arregenerativa ) y periférico (anemia regenerativa) .Los reticulocitos, (eritrocitos inmaduros) existen en la sangre del individuo en una proporción de 0,5% a 2%. El tamaño es iguala los demás eritrocitos, pero se caracterizan por contener una pequeña cantidad de ARN, que forma un retículogranulofilamentoso observable al ser teñido, esta cantidad es menor a medida que madura la célula. Es una célula anucleadaque posee un elevado contenido hemoglobínico. El grado de reticulocitos es proporcional a la actividad eritropoyetina.Existen métodos automatizados donde se utilizan colorantes especiales para los ácidos nucleidos o sustancias fluorescentesque colorean los ácidos nucleidos.En la anemia se necesita un índice de actividad eritropoyética más preciso que la cuenta relativa de reticulocitos. Cuando elresultado se expresa en porcentaje , nos indica la relación entre la masa de eritrocitos de la sangre periférica y el número de 57
  • 58. reticulocitos que se encuentran en producción, así un paciente con un recuento de reticulocitos de 0.5% a 2 % dentro de loslimites de referencia nunca es normal para u individuo anémico. En un individuo anémico la cuenta relativa de reticulocitosaparece normal, pero en realidad realiza 30 X109/L menos eritrocitos que un individuo normal con la misma cuenta relativa dereticulocitos; UNA CUENTA DE RETICULOCITOS CORREGIDOS supera este aspecto de dilución y es útil para evaluar la respuesta de lamedula ósea en la anemia, la corrección hace ajustes proporcionales a la intensidad de la anemia; la formula para cuentacorregida de reticulocitos usa el hematocrito del paciente en comparación con el hematocrito real ó normal.Normal el valor corregido aplica la siguiente formula. El valor medio de hematocrito en hombres es de 45% y en mujeres de42%. Reticulocitos observados (%) × Htc del pacienteReticulocitos correegidos (%) = Htc realINDICE DE PRODUCCION RETICULOCITARIA (IPR)Se necesita una corrección adicional cuando en el frotis de sangre periférica se encuentran macrocitos policromáticos. Conuna estimulación creciente de eritropoyetina, la médula ósea libera reticulocitos antes de su periodo de maduración normal quees de 2 a 3 días en la médula ósea. Estos reticulocitos inmaduros aparecen como eritrocitos policromáticos grandes(reticulocitos de cambio de estrés) en el frotis de sangre. Esto significa que el tiempo adicional de maduración en la médulaósea al tiempo de maduración en la sangre periférica toma más del día habitual para que los reticulocitos de la sangreperiférica pierdan su retículo y se vuelvan eritrocitos, mientras más intensa es la anemia, más temprana será la liberación dereticulocitos. En una medula ósea estimulada la concentración de hematocrito se acompañan a la liberación de reticulocitos yprolongación de su maduración en la sangre periférica así: VALOR DEL HEMATOCRITO DEL PACIENTE FACTOR DE CORRECCION EN MADURACION EN DIAS 39 a 44.1% 1.0 34 A 38.1% 1.5 24 A 33.1% 2.0 15 A 23% 2.5 MENOR 15% 3.0 58
  • 59. A partir del porcentaje de reticulocitos corregidos y la corrección del periodo de maduración, se calcula el denominado ÍNDICE DEPRODUCCIÓN RETICULOCITARIA (IPR) que suministra información más fidedigna sobre la capacidad regenerativa de la medula ósea,con la siguiente formula. Recuento corregido de reticulocitos IPR= Tiempo de maduraciónEjemplo:Mujer adulta con Hto de 30 %, Reticulocitos 7.8%, presencia de macrocitos policromáticos en el extendido. 7,8 % × 30 %Reticulocitos correegidos (%) = = 5,57 42 % 5,57% IPR= = 2,78 2,0%Se admite que un IPR mayor de 2 significa un aumento de la regeneración medular (anemia hemolítica) mientras que un IPRmenor de 2 indica escasa regeneración medular.DETERMINACION DE RETICULOCITOSMATERIAL Y REACTIVOSMateriales• Tubo de ensayo de 12 x 25 • Cronómetro• Pipeta Pasteur • Capilar Azul• Portaobjetos de 25 x 75 mm • Microscopio• Baño María • Aceite de inmersión 59
  • 60. ReactivosColorante para reticulocitos.Nuevo azul de metileno.Solución de azul de cresil brillante.PROCEDIMIENTOS• Depositar 2 o 3 gotas de la solución de tinción en un tubo de plástico de 75 X10 mm utilizando una pipeta Pasteur de plástico.• Añadir 2 -4 volúmenes de sangre del paciente con anticoagulante K2- EDTA a la solución de tinción y mezclarlas.• Mantener la mezcla a 37 ºC durante 15 – 20 minutos• Volver a poner en suspensión los eritrocitos agitando suavemente y hacer extensiones en los portaobjetos de la forma habitual.• Cuando se sequen, examinar las extensiones sin fijar ni contrateñirlas.• El volumen exacto de sangre que se debe añadir a la solución colorante para su tinción óptima depende del recuento de eritrocitos.Nota: se debe añadir una proporción mayor de sangre en anemias y una proporción menor de sangre en policitemiasValores normalesRecién nacido (Sangre del Cordón) 3,2-6,0%Niños y adultos Jóvenes (4-19 años) 0,2-2,2% Hombres: 0,5-2,8%Adultos (20-50 años): Mujeres: 0,2-2,5%CALCULOPor medio de una regla de tres se establece el recuento de reticulocitos en %. Se obtiene la media de los dos conteos y serealiza el cálculo así: 1.000 Eritrocitos # de Reticulocitos 100 Eritrocitos X 60
  • 61. Numero de reticulocitos × 100Reticulocitos % = 1000TRABAJO INVESTIGATIVO INDIVIDUALRealice revisión bibliográfica mínimo de 4 autores, propuestos por el docente y lectura del documento entregado. Una vezobtenida la información de eritrosedimentación y recuento de reticulocitos resuelva las siguientes preguntas:1. ¿Qué relación tiene el potencial Z de los eritrocitos y la VSG?2. ¿Cuáles cree usted que sean las causas de error en el procesamiento de una VSG?3. ¿Qué importancia clínica tiene una VSG?4. Cuales son los factores que intervienen en la determinación de la VSG.5. Cuáles son las limitaciones?6. Que procesos patológicos se acompaña de un incremento de la VSG. Sustente cada uno de ellos.Luego de realizado el proceso de reticulocitos resuelva las siguientes preguntas:1. Qué importancia tiene el recuento de reticulocitos.2. Qué nos indica el aumento del recuento de reticulocitos en sangre periférica3. Cuando se debe realizar Corrección de Reticulocitos, que es IPR, cual es el valor del recuento absoluto de reticulocitos.4. Establezca las cifras normales de acuerdo a la edad .5. Causas de error en el recuento de reticulocitos. (Altos y bajos)6. Porqué los reticulocitos se encuentran más aumentados en los recién nacido.Mediante la obtención de varios cuadros Hemáticos elabore un recuento de reticulocitos y la “Determinación de de la velocidadde sedimentación globular mediante micro método, compare con el método de Wintrobe” sobre la realización de la prueba deeritrosedimentación con este método.“Determinación de de la velocidad de sedimentación globular mediante micro método, comparado con el método deWintrobe”Objetivo. Comparar la sedimentación globular medida en capilares sin heparina con la obtenida mediante el tubo de Wintrobe. 61
  • 62. TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPALDespués de socializar y revisar los talleres, elaboren por grupos de práctica un video de VSG y recuento de reticulocitos, sinmusicalización o con música acorde a la temática , incluyendo control de calidad y bioseguridad. En un tiempo limite de 5minutos por l video ya editado . El video debe finalizar con 5 conclusiones relevantes a la temática del video y que sean aplicables a las condiciones actualesdel laboratorio.BIBLIOGRAFIA REQUERIDAVIVES. J.l. et.al. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. Editorial Masón, Tercera edición, 2006Lemus, Valera, et al. Determinación de de la velocidad de sedimentación globular mediante micro método, comparado con elmétodo de Wintrobe.BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA TURGEON, Mary Louis. Hematología clínica teoría y procedimientos. Editorial El Manual Moderno. 2006. BERNADETTE, F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Editorial panamericana, segunda edición. 2005Motores de búsqueda Hinari. Proquest.ConclusionesCASO PROBLEMA1 Al laboratorio acude una paciente de sexo femenino de 45 años con una posible sospechade cáncer ,en su reporte de laboratorio se encuentra Hb: 9 g/dl y Hto: 28% ,el médico leordena un VSG, el reporte es el siguiente :La VSG que corresponde a esta paciente es la de la izquierda .Que lectura haría? 62
  • 63. Cómo relaciona la VSG y el hematocrito?Porque hay diferencia en las 2 VSG2. CASO PROBLEMA :Al laboratorio acude una paciente de 40 años sexo femenino, con un Hto de 20% y un recuento de reticulocitos del 6%, en elFSP se observa la presencia de macrocitos policromáticos.¿Con estos parámetros usted deberá obtener el recuento de reticulocitos corregido y el Indice de Producción Reticulocitaria?Que indican los macrocitos policromáticos?3. CASO PROBLEMA :Un paciente de sexo masculino de 65 años quien acude al laboratorio para un Hemograma y un recuento de Reticulocitos.Valor de Hto: 30%, Recuento de reticulocitos de 1.2 %¿Cuál es el recuento de reticulocitos corregido y IPR .Justifique la respuesta.HEMOGRAMA MANUAL Es el estudio general de los elementos formes de la sangre , eritrocitos, leucocitos y plaquetas.Incluye determinación de Hb, Hto, Recuento de Leucocitos, Diferencial de glóbulos Blancos , Reporte de Valor absoluto deleucocitos y Recuento de plaquetas . FSP de las tres líneas .EN EL HEMOGRAMA AUTOMATIZADOSe tienen en cuenta los índices Eritrocitario, Histograma de glóbulos Rojos , Histograma de Plaquetas , y dispersión ohistograma de glóbulos Rojos.REPORTE DEL FROTIS DE SANGRE DE SANGRE PERIFERICA (FSP).Hay que tener en cuenta : Tamaño, relación núcleo/citoplasma. Contorno nuclear, cromatina, citoplasma, forma, color,inclusiones. Indices eritrocitarios .Documento de Apoyo : Frotis de Sangre Periférica de Aura Rosa Manacero 63
  • 64. PRUEBAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO CLINICO PARA EL DIAGNOSTICO DE ANEMIASPor grupos de trabajo en el laboratorio consulte los significados y correlacione estas pruebas según el estado de anemia delpaciente . Ojo muchas de estos términos usted los desarrolló en la unidad II en la parte Practica :  fragilidad osmótica  Haptoglobina,  auto hemólisis  Hemoglobina fetal,  test de Ham  electroforesis de Hb  test de sacarosa  Fe sérico,  Coombs directo  Ferritina  Coombs indirecto  Transferrina  Ciclaje  Hepcidina  Bilirrubina,  DHL TRABAJO INVESTIGATIVO INDIVIDUALEn un extendido de sangre periférica se evalúan las alteraciones en el tamaño, alteraciones en la forma, alteraciones en elcolor y la presencia de inclusiones eritrocitarias.Defina cada uno de estos conceptos; y para su mejor comprensión e interiorización dibuje cada una de las alteraciones de loseritrocitos, ELABORANDO SU PROPIO ATLAS .De acuerdo a las lecturas previas de respuesta a las siguientes preguntas: 1. A que nos referimos con los conceptos: Anisocitosis, poiquilocitosis, Policromatofilia, Hipocromía, anisocromía. 2. Una herramienta fundamental en el extendido de sangre periférica son los índices eritrocitarios secundarios (MCV, MCH, MCHC, RDW) describa cada índice, y con que alteración morfológica del eritrocito se correlaciona cada uno. Ejemplo el RDW determina la anisocitosis. 3. Qué importancia tienen los índices eritrocitarios secundarios en el extendido de sangre periférica. 4. Cómo se hace el informe correcto de la morfología eritrocitaria? 5. Defina las pruebas utilizadas en el laboratorio clínico para el diagnostico de anemias , enunciadas atrás.Haga una observación al microscopio de varios frotis de sangre normales y anormales para que reconozca las alteraciones delos eritrocitos . 64
  • 65. Obtenga varios muestras para cuadro hemático y así podrá montar varios Hemogramas manuales y automatizados , realizar elFSP y la tinción de Wright y observación de la serie roja, serie blanca, , inclusiones en los glóbulos rojos y en los glóbulosblancos ,también debe tener en cuenta plaquetas cualitativas y cuantitativas .Cada estudiante:1. Realiza el informe correcto de la morfología eritrocitaria.2. Reporta adecuadamente un Frotis de sangre periférica (FSP) para ser entregado terminada la clase.3. De acuerdo a su conocimiento interpreta sus resultados teniendo en cuenta control de calidad.4. Responde a que se debe la pérdida prematura de eritrocitos circulantes5. Cuando el IPR es superior a 2 como lo interpreto6. Que significa la presencia de policromatofilia en el FSP.EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL:Una vez obtenida la información y mediante mesa redonda me dispongo a realizar una discusión grupal para socializar el tallery aclarar las falencias presentada por el estudiante. Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrávisualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes. El docente será el guía o eje articulador para establecer lasclaridades en las temáticas abordadas .BIBLIOGRAFIA REQUERIDA:NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Centro Editorial Universidad Católica de Manizales.Segunda edición 2008 capitulo 4 Pág.. 55-59.BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA VIVES, Joan Lluis Corrons. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. Editorial Elsevier. Tercera edición. 2006. TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica teoría y procedimientos. Editorial El Manual Moderno. 2006. BERNADETTE, F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Editorial panamericana, segunda edición. 2005 MANASCERO. AURA ROSA .Reporte grafico del cuadro hemático. Centro editorial Javeriana. 2002 ROBERT S, HILMAN, AULT, RINDER. HEMATOLOGIA en la practica clínica , McGrawHill. 4 edición .2006Motores de búsqueda Hinari. Proquest. 65
  • 66.  REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología. Internet: www.Scielo.org. www.genereviews.orgUNIDAD IV TEORIALEUCOPOYESISSERIE GRANULOCITICA1 Producción de neutrófilos, eosinófilos, basófilos.2.Sitios de desarrollo y maduración3. Desarrollo , proliferación y distribución de neutrófilos, eosinófilos y basófilos.4. Características normales de maduración de neutrófilos, eosinófilos, basófilosLA SERIE MONOCITICA- MACROFAGOS.1. Producción y desarrollo de monocitos y macrófagos2. Características morfológicasVALORES NORMALES Y PROPIEDADES FUNCIONALES DE LOS GRANULOCITOS Y MONOCITOS1.Valores normales2. Fagocitosis3.Respuesta inflamatoria aguda, sepsis.4. Funciones especializadas de eosinófilos, basófilos, monocitos.5. Métodos de evaluación ( cuenta de leucocitos, evaluación del frotis de sangre diferencial, valores absolutos).TRASTORNOS BENIGNOS DE LOS GRANULOCITOS Y MONOCITOS1. Trastornos cuantitativos2. Trastornos cualitativos3. Trastornos en los monocitos y macrófagosLEUCOCITOS : LINFOCITOS Y CELULAS PLASMATICAS1.Origen y desarrollo de los linfocitos2. Características morfológicas de los linfocitos normales3. Desarrollo y maduración de los plasmocitos 66
  • 67. TRASTORNOS DE LOS LEUCOCITOS CRONICOS Y AGUDOSABORDAJE TEORICO 67
  • 68. La leucopoyesis o desarrollo del leucocito, con excepción de los linfocitos, se produce en el mismo lugar de la eritropoyesis.Estos sitios cambian a lo largo de la vida, comenzando con el saco vitelino del mesénquima, seguido por el bazo y el hígado ypor ultimo la médula óseaLos leucocitos de la sangre humana pueden dividirse en varias categorías sobre la base de sus funciones específicas, sitio deorigen o morfología. En esencia la función de todos los leucocitos es defender al organismo contra agentes extraños. Esto selogra con la cooperación intrincada de entre células.Los leucocitos se dividen en granulocitos y linfocitos en virtud de la diferenciación evidente en el nivel de la célula troncal(Shem cell) primitiva. Los linfocitos se producen en la médula ósea y tejido linfoide. Están bajo el control de estímulosambientales y hormonales muy diferentes de los que controlan a granulocitos y monocitos. Los granulocitos como losneutrófilos, funcionan en primer término como destructores de bacterias piógenas mientras que los monocitos y los macrófagosson menos discriminatorios en sus actividades fagocitarías.Los granulocitos contienen gránulos visibles y se desarrollan solo en la médula ósea. Se subdividen de acuerdo con sumorfología y pueden clasificarse en los que contienen gránulos grandes y se visualizan con facilidad, y los que contienengránulos minúsculos y son apenas visibles. Por convención, las células que contienen gránulos visibles en general, se llamangranulocitos; estos a su vez se dividen de acuerdo con el tipo de reacción (neutrófila, eosinófila, basófila). Detectada en losgránulos cuando se tiñen con una tinción tipo Romanowsky . Los monocitos contienen gránulos minúsculos que, comoresultado de la resolución limitada de la mayoría de los microscopios ópticos, le otorga una apariencia granular al citoplasma.INTRODUCCION AL ESTUDIO BASICO DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDADES RELACIONADAS CON LASALTERACIONES DE LOS LEUCOCITOS BENIGNAS Y MALIGNAS :Sus bases bioquímicas, fisiológicas, genéticas y moleculares .TRASTORNOS DE LOS LEUCOCITOSAbordaje teóricoSe producen alteraciones en el número y las funciones de los leucocitos en una amplia variedad de afecciones hematológicas,infecciosas, inflamatorias, metabólicas y neoplásicas.Como los leucocitos resultan afectados en tantas enfermedades, la evaluación rutinaria de laboratorio de muchos pacientes seinicia con la determinación del conteo leucocitario y el examen de un frotis sanguíneo coloreado con Wright. Con base en elestudio clínico y estos estudios sanguíneos, pueden hacerse o sospecharse fuertemente ciertos diagnósticos, como leucemia, 68
  • 69. agranulocitosis, mononucleosis infecciosa, y el síndrome de Chédiak-Higashi. En los pacientes con enfermedades infecciosase inflamatorias, el conteo leucocitario generalmente sirve como útil guía sobre la gravedad del proceso patológico.Pueden identificarse cinco tipos de leucocitos circulantes por su morfología en los frotis sanguíneos: neutrófilos, linfocitos,monocitos, eosinófilos y basófilos. Se acepta generalmente que estos tipos de leucocitos, junto con los eritrocitos y plaquetas,derivan de una célula madre pluripotente común. Sin embargo, después de este origen común, mecanismos reguladoresindependientes gobiernan la producción, distribución y funcionamiento de cada tipo de leucocito.Por simplicidad, con frecuencia se hacen inferencias acerca de la presencia o gravedad de una enfermedad a partir del conteoleucocitario total y la fórmula leucocitaria diferencial expresada como porcentaje.Los valores de los leucocitos presentan variaciones fisiológicas con la edad, el niño en términos generales, posee máslinfocitos que el adulto normal y alrededor de los 10 años comienza a estabilizarse en los valores normales del adulto. Elanciano presenta un recuento de leucocitos entre 3.1 – 8.5 x 109/L y el recuento diferencial tiene una media de 65 +/- 10% depolimorfos nucleares y linfocitos de 30 +/- 9%. En el embarazo y sobre todo en el último trimestre, la leucocitosis puede llegar a15 x 109/L, con un aumento de polimorfos nucleares y bandas neutrófilos.En estados de enfermedad un tipo de célula blanca en particular puede mostrar un incremento absoluto en la sangre como sepresenta a continuación.En los trastornos malignos de los leucocitos se encuentra las leucemias que son caracterizadas por una enfermedad neoplasiaprogresiva del sistema hematopoyético donde hay una proliferación no regulada de las células progenitoras.La enfermedad se clasifica en dos amplios grupos dependiendo de la agresividad de la enfermedad.Leucemias Agudas que se caracterizan por la acumulación de células inmaduras y tiene un curso progresivo rápido .las leucemias crónicas que se caracterizan por una acumulación de células más diferenciadas y de curso lentamenteprogresivo.En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender los conceptossobre la leucopoyesis, las alteraciones cualitativas y cuantitativas de los leucocitos, algunas alteraciones benigna ymalignas. COMPETENCIAS LOGROS1.Capacidad de Interpretar, identificar y correlacionar La I. Interpreto, identifico y correlaciono La leucopoyesis en susleucopoyesis en sus fases de maduración normal y anormal fases de maduración normal y anormal2. Capacidad de describir las Alteraciones cualitativas y I. Describo las Alteraciones cualitativas y cuantitativas de loscuantitativas de los leucocitos leucocitos3. Capacidad de interpretar la función fagocítica ,las I. Interpreto la función fagocítica , las alteraciones de laalteraciones de la quimiotaxis, comprender las lnteracciones quimiotaxis, comprendo las alteraciones de la ingestiónde la ingestión. e Identifico las alteraciones de la capacidad bactericida. 69
  • 70. 4.Capacidad de Interpretar los dispersogramas de leucocitos I. Interpreto el cuadro hemático automatizado incluyendo elen el cuadro hemático automatizado valor absoluto y el valor relativo.5. Capacidad de analizar, interpretar y correlacionar los I. Reconozco los trastornos benignos y malignos de lostrastornos de los leucocitos benignos y malignos. glóbulos blancos . II. Valoro los signos y síntomas de las enfermedades relacionadas con los leucocitos determino las pruebas de laboratorio que se llevan a cabo para su diagnósticoTRABAJO INDIVIDUALRealice una consulta bibliográfica amplia (mínimo 4 autores), y la lectura del documento entregado por los docentes; una vezrealizada dicha actividad responda las preguntas que a continuación se relacionan:1. Las células encargadas de la producción de anticuerpos son?2. Las células fagocítica son?3. La función de los gránulos en las células es ?4. Cuál es la sustancia que da el color verdoso a la pus es?5. La muramidasa es una enzima que se activa en que tipo de leucemia?6. Cuándo se utiliza el término granulaciones tóxicas?7. Qué son los cuerpos de Döhle?.8. La liberación de los gránulos de los basófilos que puede producir en un paciente.9. Cual es la función de los monocitos.10. Que diferencia hay entre inmunidad celular y humoral11. El promedio de vida y la composición química de los Granulocitos es12. Qué tipo de interleucinas son generadas por los granulocitos13. la cifra normal de leucocitos es ?14. El recuento elevado de leucocitos se denomina.15. El recuento de leucocitos bajos se denomina?16. Como se observa la anomalía de Pelgar-Huet.17. Como se observan los cuerpos de Auer.18. A que nos referimos cuando se habla de desviación a la derecha.19. A que nos referimos cuando hablamos de desviación a la izquierda.20. Que se entiende por neutrófilos pignóticos? 70
  • 71. 21. La Fosfatasa Alcalina leucocitaria es una prueba que nos ayuda al diagnóstico de?22. Qué indica la presencia de vacuolas en los neutrófilos.23. Como se obtiene el valor absoluto de los leucocitos. (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilas )24. Los gránulos de los eosinófilos son.25. En que etapa de maduración de la línea granulocítica aparecen los gránulos primarios o inespecíficos26. Hasta que etapa de maduración del neutrófilo llega la mitosis?TRABAJO GRUPALEn el aula de clase se socializan los talleres. Al azar se sacará algunos estudiantes para responder cada una de las preguntaspropuestas en el taller, esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación delconocimiento y permitirá un parámetro para realizar .Mediante exposiciones propuestas por el docente se conocerán algunas patologías más frecuentes en el laboratorio.Dichas alteraciones de los leucocitos son : Reacción leucemoide, reacción leucoeritroblástica ,leucemia mieloide crónica,leucemia linfocítica crónica, leucemias agudas , malaria , dengue , mononucleosis infecciosa, mieloma múltiple, en dichaexposición tenemos presente la etiología y patogenias, manifestaciones clínicas, epidemiología, Clasificación fisiopatológica ymorfológica, diagnóstico por el laboratorio, diagnóstico diferencial y pruebas especiales.BIBLIOGRAFIA REQUERIDA NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. Segunda edición 2008 capitulo 5 Pág. 60-86 HILMAN, Dane. Et al. Manual de Hematología. México: Ed. Manual moderno. 1998 MCKENZIE, Shirlin. Hematología clínica. Segunda edición 2000. Capitulo 3.BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. Edición 2006.Capitulo 5, Paginas 59-100 RUIZ, Arguelles. G, J. Fundamentos de Hematología. Tercera edición 2001. RODAK, Bernadette F. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Segunda edición 2005. Capitulo 7, Paginas 83-97 ROBERT S, HILMAN, AUIT, RINDER. HEMATOLOGIA en la practica clínica , McGrawHill. 4 edición .2006Motores de búsqueda Hinari. 71
  • 72.  Proquest.UNIDAD IV PRACTICA1.RECUENTO DE LEUCOCITOS EN CAMARA Y EQUIPO AUTOMATIZADO . Muestra, fundamento de la prueba ,materiales y equipos, control de calidad Procedimiento, cálculos, valores normales,interpretación clínica y reporte de resultados.2.FORMULA DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS3.RECUENTO CORREGIDO DE LEUCOCITOS4.DIFERENCIACION Y REPORTE DE LEUCOCITOS EN SANGRE PERIFERICA5.DIFERENCIACION EN MEDULA OSEA DE LA HEMATOPOYESISRECUENTO DE CELULAS SANGUINEAS DIRECTOwww.ub.es/biocel/wbc/imageswww.marienfeld-superior.com Recuento manual de Leucocitos.url /www.youtube.com/watch?v=TmPOmi2NHb0&feature=related 72
  • 73. Contaje de células con cámara de NeubauerABORDAJE TEORICOEl recuento celular sanguíneo es la medida de la concentración de las células que circulan por la sangre: eritrocitos, leucocitos,y plaquetas, y junto a la concentración de hemoglobina , el valor hematocrito y los índices eritrocitarios (volumen corpuscularmedio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM)y concentración corpuscular media de hemoglobina (CCHM) ) constituyeel llamado perfil hematológico básico o hemograma.( Vives,2006)El termino hemograma, fue introducido por V, Schilling en 1931 como forma de expresar el estado global de la sangre , a partirde un conjunto de criterios clínico biológicos. Actualmente gracias a la automatización , constituye una de las pruebas delaboratorio más solicitadas ya que no solo forma parte del estudio inicial de cualquier paciente , sino que muchas veces resultadel todo imprescindible para el diagnóstico de las hemopatías o el seguimiento evolutivo de las enfermedades en general. Deesta forma, y con un costo muy razonable resulta, todo paciente puede recibir una información completa y fiable del estado desus células sanguíneas tantas veces como su estado clínico lo requiera. Lo cual supone una indudable ventaja para el control yseguimiento terapéutico de su enfermedad. (Vives, 2006)Hasta bien entrada la década de los sesenta, el recuento de células sanguíneas se realizaba mediante el empleo de unacámara cuenta glóbulos conocida también como hemocitómetro, y se complementaba con la observación morfológica de laextensión sanguínea, que servía también para realizar el recuento diferencial de los leucocitos (RDL)o formula leucocitaria.Hoy en día aunque el microscopio óptico continuo siendo del todo imprescindible para la apreciación de la morfología celular,no se concibe un recuento realizado mediante un procedimiento que no sea el electrónico, es decir basado en la citometría deflujo que analiza las células en suspensión. (Vives,2006)LEUCOCITOS POR EL METODO AUTOMATIZADO 73
  • 74. EN LOS ESTUDIOS AUTOMATIZADOS SE DEBE REALIZAR SIEMPRE EL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICAMANUALIMPEDANCIAUn haz de luz láser monocromática analiza la estructura interna, granularidad y características superficiales de la célula.DISPERSOGRAMASCUADRO HEMATICO AUTOMATIZADOAbordaje teóricoEl término generación ha sido empleado en hematología para especificar el tipo de tecnología utilizada para la realización delcuadro hemático. De acuerdo al grado de automatización inherente al equipo, el hemograma se clasifica así:Primera Generación: cuadro hemático manual. Segunda Generación: cuadro hemático semiautomatizado. Tercera Generación:cuadro hemático automatizado; presenta gráficos de histogramas de glóbulos rojos, plaquetas y un recuento diferencial deglóbulos blancos en tres partes.Cuarta Generación: Cuadro hemático automatizado, con perforación de tapa; entrega gráficas de histograma para glóbulosrojos y plaquetas y un informe de dispersograma para glóbulos blancos, a los que agrupa en cinco tipos de células.Con los múltiples avances de la instrumentación en Hematología, la automatización cubre actualmente las principales pruebasen el laboratorio de hematología. Puede practicarse un conteo de células sanguíneas competo, incluso la cifra de plaquetas yel diferencial de cinco partes con el uso de instrumentos. En el pasado se ha usado varios principios para el conteo celular y elanálisis diferencial. Los dos principios del conteo de células sanguíneas usados por los instrumentos de la hematología son laimpedancia y la dispersión de la luz.Impedancia eléctrica .Se basa en la detección y medición de los cambios en la resistencia eléctrica producida por unapartícula en un liquido conductivo atravesando una pequeña apertura a medida que las suspensión de células diluidas pasan através de la apertura, el paso de cada célula individual momentáneamente aumenta la resistencia de la trayectoria eléctricaentre dos electrodos sumergidos, ubicados a cada lado de la apertura. Mientras que el número de pulsos indica el recuento departículas, la amplitud del pulso eléctrico producido depende del volumen de la célula. 74
  • 75. Dispersión ópticaSe basa en las dispersiones de la luz obtenida de una sola célula sanguínea que pasa a través de un haz de luz, la célulasanguínea crea una dispersión hacia delante y una lateral, detectadas por fotodetectores, la dispersión hacia delante, es unamedición del tamaño de la célula, y la dispersión lateral es una medición de la complejidad o granularidad de la célula.Después de recibir clase magistral dada por el docente resuelva las siguientes preguntas:• En qué consiste en cuadro hemático automatizado y cuales su importancia?• Qué parámetros evalúa, describa cada una de las siglas y su significado• Qué es un histograma• Qué es un dispersograma• Qué nos indica el ancho y el alto de los histogramas• En el histograma de leucocitos hay tres regiones: explique el porque de estas regiones, donde se inician, e identifique que tipo de células se ubican en cada región.• En el dispersograma de leucocitos hay 5 poblaciones de dispersión : ubique las células que se encuentran en cada región.• Qué nos indican la presencia de las alarmas en los reportes numéricos del histograma de leucocitos• En caso de alarmas cuál es el protocolo a seguir para dar un informe correcto de los resultados Describa cada una de ellas• En el histograma de eritrocitos y plaquetas muestra una sola curva. Dónde inicia explique por qué solo es una curva.• Qué nos indica la desviación de la curva de eritrocitos hacia la derecha o a la izquierda• Por qué se puede presentar una curva bimodal.• Qué nos indican la presencia de las alarmas en los reportes numéricos del histograma de eritrocitos• El recuento de plaquetas y eritrocitos se realiza en la misma cámara. Qué precauciones importantes deben tenerse en cuenta cuando hay presencia de alarmas en estos parámetros• Qué mide un Histograma combinado de dispersión.• Analice los tipos de alarmas que pueden presentarse en los histogramas . Anexo entregado por el docente sobre alarmas 1. Alarmas posibles 2. Hallazgos en el extendido. 3. Discrepancias encontradas. 4.Protocolos a seguir en caso de encontrar alarmas. 75
  • 76. RECUENTO DE LEUCOCITOSFUNDAMENTACION TEORICALos leucocitos o glóbulos blancos son células que están principalmente en la sangre y circulan por ella con la función decombatir las infecciones o cuerpos extraños; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio cuerpo. Es unaparte de las defensas inmunitarias del cuerpo humano. El origen de todas las formas de leucocitos es a partir de célulasmadres de la médula ósea. El estudio de los leucocitos se realiza habitualmente en un estudio de hematimetría y recuentoleucocitario completo.PRINCIPIO CIENTIFICOLa sangre anticoagulada se deposita en un liquido que permirte evidenciar los leucocitos , manteniéndolos visibles , mientrasque los eritrocitos son hemolizados . El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm3 (milímetrocúbico)MATERIALES Y REACTIVOS1 MaterialesSangre tomada con EDTA-K2 o por punción capilarCámara de Neubauer.Pipeta de Glóbulos Blancos y boquillas.2 Equipos Microscopio Contador de Células3 Reactivos Solución de Turk. 76
  • 77. METODOLOGIAControl de calidadEl control de calidad de los leucocitos se puede hacer en el frotis coloreado con Wright con el objetivo de 10 X se cuentan losleucocitos encontrados por campo en más o menos tres campos en la cola del frotis donde los glóbulos rojos están separados.Se hace un promedio y este valor se multiplica por 300 . Se acepta una desviación de más o menos 1.000.Cuando el paciente presenta leucopenia < 0 = a 2.500 Leucocitos / mm3.La muestra de sangre debe aspirarse hasta la marca de 1 para obtener una dilución 1:10, siendo el factor de multiplicación 25.En leucemias ( nº de leucocitos muy alto) se emplea pipeta de rojos hasta la marca de 1 (1:100) o hasta la marca 0.5 ( 1:200).Los factores de multiplicación serán 250 y 500 respectivamente.A mayor número de células contadas menor será el error estadístico. Por esto, la diferencia entre el valor mayor y el menor enlos cuatro cuadrados, no debe exceder de 10 células.PROCEDIMIENTOS1. Mezcle suavemente la sangre por inversión, para lograr homogenizar la muestra.2. Llene la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.53. Limpie las paredes externas de la pipeta para no contaminar el diluyente, Aspire el ácido acético hasta la marca 11 exactamente.Pipeta de glóbulo blancos El volumen de la pipeta para leucocitos esta compuesto de 1 parte en la porción capilar y 10 partes en el bulbo, cuando seaspira la sangre a la marca 0.5 y se diluye a la marca 11, la dilución es de 1/20, cuando se aspira la sangre a 1 y se diluye a lamarca 11 la dilución es de 1/10. El bulbo contiene una perla de vidrio para facilitar la mezcla de la sangre con el líquido de dilución . 77
  • 78. 4. Agite la pipeta horizontalmente durante 3 minutos para hemolizar las células ó llévela al agitador de pipetas durante 3 minutos.5. Llene la cámara de Neubauer (especialmente limpia) Se descartan 3 ó 4 gotas de la pipeta (disolvente sin células), manteniendo esta en ángulo de 35 grados, la punta debe tocar la ranura en el borde del cubreobjetos, haciendo que el líquido penetre por debajo por capilaridad, el líquido debe entrar en forma ordenada controlado por la presión del dedo índice sobre el extremo abierto de la pipeta. Debe tenerse en cuenta que el líquido no se derrame por los lados de la cámara, se deja reposar la cámara unos minutos evitando que se seque (evitar el movimiento brusco de la cámara y de la lámina de cuarzo).La cámara cuentaglóbulosConsiste en dos cámaras separadas por una fosa transversal. La área rayada consiste en nueve cuadrados grandes, cada unode 1 x 1 x 0.1, con un volumen de 0.1 mm 3 y bordeado por una línea triple, la línea central de las 3 es la línea de término delcuadrado. Cada uno de los cuadrados de las esquinas esta subdividido en 16 cuadrados más pequeños, destinado para elrecuento de leucocitos, que miden 0.25 x O.25 x 0.1 mm con un volumen de 0.00625mm3, así:Si 16 cuadrados pequeños tienen un volumen de 0.1 mm3, entonces 1 solo cuadrado pequeño tiene un volumen de 0.00625 3mmEl cuadrado central de los 9 cuadrados grandes está dividido en 25 cuadros más pequeños, destinado para el recuento deeritrocitos y plaquetas, midiendo cada uno 0.2 x 0.2 x 0.1 mm con un volumen de 0.004 mm3, así:Si 25 cuadrados pequeños tienen un volumen de 0.1 mm3, entonces 1 solo cuadrado pequeño tiene un volumen de 0.004 mm3 78
  • 79. El cubreobjetos usado sobre la cámara está fabricado con precisión, de acuerdo a los requerimientos del U.S. Bureau ofStandards, el cubreobjeto debe de estar exento de defectos visibles y ser ópticamente plano (cuarzo) por ambos lados dentrode más o menos 0.002 mm.CONTEO Y CALCULOColoque la cámara en el microscopio y espere 1 minuto.Use el objetivo de bajo poder 10 x para observar la distribución de las células en la cámara y ajuste la intensidad de la luz.Cuente todos los leucocitos contenidos en los cuatro cuadrantes grandes de las esquinas. No debe de haber una diferenciamayor entre cuadrante y cuadrante.Para evitar confusiones en el conteo de células se recomienda: Las células se cuentan de izquierda a derecha comenzandopor la parte superior de los cuadrados pequeños, luego de derecha a izquierda para la siguiente fila y así sucesivamenteCalculo No. de celulas contadas × dilucion(20)Leucocitos = No. cuadrados grandes contados (4) × Valor de cada cuadrado (0.1) 79
  • 80. ERITROCITOS NUCLEADOS. (NORMOBLASTOS)Cuando en una sangre periférica encontramos normoblastos, que son células nucleadas, el líquido diluyente (Turk) no destruyeestos núcleos, por lo tanto se debe hacer una corrección para descontar estas células del recuento de leucocitos.La formula de corrección del recuento de leucocitos cuando hay presencia de normoblastos es la siguiente: No. Total de Leucocitos × mm3 × 100No. de Leucocitos real = Normoblastos + 100El número de hematíes nucleados por 100 leucocitos de obtiene del contaje diferencial de leucocitos.PARAMETROS DE VALIDACIONSe pueden considerar como normales las cifras siguientes en el hombre y la mujer adultos: 4.000 a 10.000 glóbulos blancospor mm3 de sangre. Pueden presentarse algunas variaciones según la actividad física. En reposo completo (físico y psíquico),el número de glóbulos blancos rara vez pasa los 7.000/mm3. Después de una actividad física moderada la cifra puede alcanzarhasta los 11.000/m3. Un ejercicio intenso provoca una elevación del número de glóbulos blancos que puede llegar hasta14.000 a 15.000/mm3.Las cifras de leucocitos se elevan significativamente durante el stress emocional, en la taquicardia paroxística, exposición alsol, a los rayos ultravioletas y durante el partoCAUSAS DE ERROR EN LA DETERMINACION Ciertos medicamentos que pueden alterar los resultados del recuento de leucocitos son los siguientes: Indometacina, Drogas antitiroideas. Antiinflamatorios no esteroideos, Anticonvulsivantes. fentoína. Antibióticos yquimioterápicos. Otros factores que pueden alterar los valores de este recuento son el estrés, el ejercicio intenso y la digestión. Pueden aumentar el número de leucocitos: Alopurinol ,Epinefrina ó adrenalina ,Cortisona, Cloroformo , Heparina , quinina etc. 80
  • 81.  Pueden disminuir el número de leucocitos: Antibióticos, anticonvulsivantes ,Antihistamínicos, antitiroideos , arsenicales barbitúricos, diuréticos, quimioterápicos, sulfonamidas.CONCLUSIONLa disminución del número de leucocitos es una leucopenia. El aumento del número de leucocitos es una leucocitosis. Elconocimiento de la fórmula leucocitaria es indispensable para la interpretación de las variaciones patológicas del número deleucocitos en sangre periférica. La fórmula leucocitaria permite calcular el número absoluto de cada categoría de leucocitos yprecisar la variedad que está aumentada o disminuida.Además el frotis de sangre periférica permite en algunos casos patológicos poner en evidencia la presencia de hematíesnucleados. Estos no pueden ser separados de los glóbulos blancos durante el recuento y deben ser sustraídos de la cifra deleucocitos después de la determinación de la fórmula leucocitaria.La leucopenia pude tratarse de una neutropenia o de una linfopenia.La leucocitosis sin paso de células anormales a la sangre periférica puede ser : polinucleosis neutrófilas, polinucleosiseosinófilas y basófilas (aisladas no modifican el número total de leucocitos), monocitosis, linfocitosis.La leucocitosis con paso de células anormales a la sangre periférica precisan establecer la naturaleza de las células parareconocer una leucemia aguda o crónica, mieloide o linfoide, etc.Los cambios en la morfología de las células sanguíneas se producen fácilmente con el almacenamiento de la sangre a cortoplazo. Estos cambios pueden ser por la presencia de anticoagulantes cuando las muestras se guardan más de 3 horas .Las siguientes son las alteraciones en los leucocitos:Los núcleos de los neutrófilos se tiñen de forma más homogénea que en sangre fresca, los lóbulos nucleares puedensepararse y el borde citoplasmático presenta deshilachado o menos definido; pequeñas vacuolas aparecen en el citoplasma .Algunos o muchos monocitos grandes desarrollan cambios notables ; aparecen pequeñas vacuolas en el citoplasma y elnúcleo sufre una lobulación irregular que puede llegar a la desintregación .Los linfocitos sufren cambios similares : en el citoplasma pueden observarse algunas vacuolas , los núcleos se tiñen de formamás homogénea de lo habitual y, en algunos, los núcleos sufren una lobulación dando lugar a núcleos con dos o tres lóbulos(Dacie Lewis)En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender los fundamentos para elrecuento de leucocitos en cámara y en equipos automatizados, entender la fórmula diferencial y corrección de leucocitos,reporte por el laboratorio. 81
  • 82. COMPETENCIAS LOGROS1.Capacidad analizar, Interpretar y I. Reconozco el fundamento de la prueba ,los materiales y equipos, control decorrelacionar el recuento de leucocitos en calidad aplicados en el conteo de leucocitos.el hemocitómetro o (cámara de Neubauer) II. Argumento y desarrollo con claridad el Procedimiento, cálculos, valorespor el método automatizado. normales, interpretación clínica y reporte de resultados de los leucocitos. Incluyendo la corrección de leucocitos cuando lo amerita.2. Capacidad de reconocer las I. Identifico las alteraciones en el núcleo y citoplasma de los glóbulos blancos .alteraciones en el núcleo y citoplasma delos glóbulos blancos .3. Capacidad de analizar, interpretar y I..Realizo el recuento diferencial de leucocitos y aplico la formula para obtener elcorrelacionar el frotis de sangre periférica valor absoluto.con el cuadro hemático automatizado II. Demuestro suficiencia en la correlación clínica , entre los reportes del hemograma y la observación en el frotis de sangre periférica.4. Capacidad de analizar, interpretar y I. Analizo y reporto el frotis de sangre periférica adecuadamente ( leucocitos,correlacionar los trastornos de los eritrocitos, plaquetas ).leucocitos benignos y malignos . II. Argumento con claridad la comprensión sobre los trastornos de los leucocitos benignos y malignos. III. Identifico las pruebas de laboratorio para el diagnóstico como las pruebas citoquímicas, pruebas citogenética, pruebas inmunológicas, PCR en tiempo realTRABAJO INVESTIGATIVO INDIVIDUALCon la revisión bibliográfica mínimo de 4 autores y los documentos entregados por el docente resuelva las siguientespreguntas: 1. El recuento celular es la determinación del número de las células sanguíneas (eritrocitos, plaquetas, leucocitos) por unidad de volumen sanguíneo. Cuáles son sus valores normales? 82
  • 83. 2. El recuento de leucocitos plaquetas y eritrocitos puede ser realizado mediante métodos ópticos con cámara cuenta glóbulos (Cámara de Neubauer) o contadores electrónicos. Esquematice e interprete la cámara para luego ser utilizada en el recuento de leucocitos.3. Para el recuento de leucocitos es necesario la pipeta de glóbulos blancos o de glóbulos rojos; es un instrumento de precisión calibradas cuidadosamente bajo las especificaciones de la US, el error permitido de la pipeta de leucocitos es de más o menos 3,5% y en la pipeta de glóbulos rojos es de más o menos 5%. Describa las características de estás pipetas.4. Para el recuento de glóbulos blancos utilizamos las siguientes medidas en la pipeta de glóbulos blancos. Luego de mezclada la muestra se aspira sangre hasta la marca 0.5 y con liquido de Turk hasta 11. Qué dilución queda? Sustente la respuesta.5. Si utilizamos la pipeta de glóbulos rojos, aspiramos hasta 0.5 con sangre y hasta 101 con líquido de Turk. Qué dilución queda? Sustente la respuesta.6. Con pipeta automática se toman 0.380 microlitros de liquido de Turk 0.02 microlitros de sangre. Qué dilución queda? Sustente la respuesta.7. De acuerdo a lo enumerado con referencia a los errores en el recuento de leucocitos investigue a qué nos referimos con errores inherentes a la muestra, operador, instrumental y errores de campo.8. Cuando en una sangre periférica encontramos normoblastos, que son células nucleadas, el líquido diluyente (Turk) no destruye estos núcleos, por lo tanto se debe hacer una corrección para descontar estas células del recuento de leucocitos. Investigue cuál es el método para obtener un recuento verdadero de leucocitos?9. Si al montar una cámara para realizar un recuento de leucocitos y es imposible contarlos cuál es el procedimiento a seguir en este caso.10. Sí obtenemos un recuento de leucocitos muy bajo. Cuál es el procedimiento a seguir para obtener mejores resultados.11. Cuáles son las causas de error en el montaje del recuento de leucocitos. 83
  • 84. TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL1. En el aula de clase se realizará la socialización de los talleres de recuento celular y alteraciones de los leucocitos . Al azarse sacará algunos estudiantes para responder cada una de las preguntas propuestas en el taller.2. Después de recibir la clase magistral de hemograma , se socializará el taller del hemograma por grupos de 4 estudiantes .Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento .BIBLIOGRAFIA REQUERIDA:VIVES, Joan Lluís Corrons. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. Editorial Elsevier. Tercera edición. 2006.DACY Y LEWIS, hematología Práctica, 2009.ROBERTS, HILMAN, AUIT, RINDER. HEMATOLOGIA en la practica clínica, McGrawHill. 4 edición .2006BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA TURGEON, Mary Louis. Hematología clínica teoría y procedimientos. Editorial El Manual Moderno. 2006. BERNADETTE, F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Editorial panamericana, segunda edición. 2005 Carr Rodak , Atlas de Hematología Clínica 2010.Motores de búsqueda Hinari. Proquest.CONCLUSIONES En un extendido entregado en clase identifique las diferentes células de acuerdo a las características morfológicas. (linfocítica, Monocítica, granulocíticas, plasmocítica y eritroide.) El estudiante observara varios casos clínicos relacionados con alteraciones de los glóbulos blancos , donde podrá hacer su análisis y correlación clínica . 84
  • 85.  De acuerdo a las características morfológicas establezca diferencias entre ellas. Ejemplo: diferencia entre un mieloblasto y un promielocito. Determine el recuento estimativo de leucocitos y correlaciónelo con el recuento realizado en la cámara el cual debe ser un dato aproximado. Partiendo de que ya se adquirió el conocimiento básico para identificar cada uno de las células, realice un diferencial y diga que línea predomina en su extendido, para posteriormente identificar a que alteración corresponde. Interprete los datos arrojados por los dispersogramas ,interprete el aumento y disminución del número de leucocitos Valoro los signos y síntomas de las enfermedades relacionadas con los leucocitos y domino las pruebas de laboratorio que se llevan a cabo para su diagnostico Usted puede AÑADIR A SU ATLAS las siguientes anormalidades encontradas en los leucocitos: Cuerpos de Auer, Anomalía de Pelger-Huet, Cuerpos de Döhle, granulaciones tóxicas, Polisegmentados. 85
  • 86. FORMATO PARA EL REPORTE DEL CUADRO HEMATICO COMPLETOHEMATOLOGIA Solicitud No. RECUENTOS CELULARESHISTORIA CLINICA NO. FECHA DIA MES AÑO EXAMEN RESULTADO NORMALAPELLIDOS Hemoglobina gr/dlNOMBRES EDAD Hematocrito %SERVICIO CAMA No. Leucocitos mm3BLASTOS Frotis de sangre periféricaPROMIELOCITOSMIELOCITOSMETAMIELOCITOSCAYADOSNEUTROFILOS Valor de ReferenciaEOSINOFILOS RETICULOCITOSBASOFILOS V.S.G.MONOCITOS PLAQUETASLINFOCITOSLINF. REACTIVOSGRAN. TOXICOSPOLISEMENTADOSResponsable __________________________________________________________________________Fecha de realización 86
  • 87. FROTIS DE SANGRE PERIFERICA:BLASTOS LINFOCITOSPROMIELOCITOS LINF. REACTIVOSMIELOCITOS MONOCITOSMETAMIELOCITOS BASOFILOSCAYADOS EOSINOFILOSNEUTROFILOSRETICULOCITOSVSGPLAQUETASANALISIS DE LA SERIE BLANCA:ANALISIS DE LA SERIE ROJA:ANALISIS DE LAS PLAQUETAS:RESPONSABLE: 87
  • 88. EVALUACION DE LAS UNIDADES PARA EL TRABAJO POR CREDITOS ACADEMICOSCuando el estudiante como persona integral tiene “La competencia como la esencia de un tipo de conocimiento,ligado a ciertas realizaciones o desempeños , que van más allá de la memorización o la rutina . Y que trata de unconocimiento derivado de un aprendizaje significativo.”Alicia Lara Coral”.Llega a comprender el valioso aporte quele da EL MODULO DE HEMATOLOGIA .Es importante que evalúe las unidades para el trabajo por créditos académicos : “Mi desempeño Excelente en laAsignatura de Hematología “ con el propósito de mejorar la modalidad de trabajo por créditos para que losestudiantes alcancen la autonomía , el acceso a la información y aprenda a aprender. Por esto es tan importanteresaltar las fortalezas y los aspectos a mejorar en el documento de acuerdo a los siguientes criterios:Evaluar cada criterio con una nota de 1 a 5 CRITERIOSLa unidad de Producción de Conocimiento ayudó a la apropiación conceptualLa unidad de Producción de Conocimiento permitió claridad en la temáticas de la asignaturaLa unidad de Producción de Conocimiento ayudó a asumir una actitud en el trabajo extraclaseLa unidad de Producción de Conocimiento motivó a la consulta y lectura .En la unidad de Producción de Conocimiento se observó claridad en los ejercicios planteados .La unidad de Producción de Conocimiento motivó a trabajar temáticas antes de desarrollarlas en clasePromedioObservaciones 88
  • 89. ANEXOS LIBRO ABBOTT: 89
  • 90. 90