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UNIVERSIDAD CATOLICA DE MANIZALES
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
   PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA

       AREA: HEMATOLOGIA

 MODULO DE CELULAS SANGUINEAS
      UNIDADES: I, II, III, IV


 PRIMER PERIODO ACADEMICO 2011




            DOCENTE:

Esp. CLARA GIRALDO ARIAS




                                    1
I. PRESENTACION DEL MODULO DE HEMATOLOGIA CELULAS

   Este módulo de Hematología, nos permite tener un acercamiento a la Hematología Clínica ya que es la rama de la
   medicina interna que se apoya más intensamente en las pruebas complementarias de laboratorio. Dicho de otro modo, una
   buena fundamentación científica sobre la Hematología Teórica le va a permitir una buena correlación clínica y destrezas en
   la realización de las técnicas de laboratorio, siendo una de la esencia de un adecuado ejercicio de la Hematología Clínica.
   C. ROZMAN

   La Hematología es una especialidad que requiere para su adecuado ejercicio de una gran cantidad de métodos de
   laboratorio a los que el hematólogo recurre para confirmar una hipótesis diagnóstica, elaborada con los medios clínicos
   clásicos de la anamnesis y la exploración física. De ahí que las técnicas analíticas suelen construir un eslabón
   importantísimo en el proceso diagnóstico de las enfermedades Hematológicas y por esta razón sean de interés no solo
   para los profesionales del laboratorio, sino para los hematólogos clínicos e incluso para el médico general.

   De ahí la gran utilidad de que haga las revisiones bibliográfica propuesta por el docente de hematología en las diferentes
   unidades del módulo.
    En este sentido las Unidades promueven en el estudiante el control sobre los propios esfuerzos cognitivos tales como:
   1. Las experiencias realizadas en el laboratorio le permiten una confrontación del conocimiento.
   2. Pone a prueba y modifica las técnicas de aprendizaje.
   3. Identifica y selecciona las fuentes de información relevantes al tema tratado.
   4. Integra los conocimientos adquiridos de semestres anteriores con los nuevos conocimientos
   5. El estudiante y el tutor se encuentran como personas capaces de autorrealizarse. "( Documento proyecto de asignatura
       de Hematología, 2008)

Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación de personas con un factor humano, con gran apertura,
comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres, participativas y democráticas con un nuevo sentido de
investigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo de las Unidades se plantean estrategias para el
desarrollo de aprendizajes significativos tales como talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales y
procesos individuales, casos problemas, casos clínicos, mapas mentales, VAC (vocabulario asociativo científico).

El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollar
durante el semestre.




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II. OBJETO DEL MODULO:
Desarrollar competencias para interpretar la hematopoyesis

III. ENFOQUE METODOLOGICO DEL MODULO
Este modulo posee un abordaje teórico y práctico. Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación de
personas con un factor humano, con gran apertura, comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres,
participativas y democráticas con un nuevo sentido de investigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo de
las Unidades se plantean estrategias para el desarrollo de aprendizajes significativos tales como mapas mentales, protocolos,
talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales y procesos individuales, casos problemas, casos
clínicos, VAC (vocabulario asociativo científico).

El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollar
durante el semestre.


IV. COMPETENCIAS ESTABLECIDAS UNA VEZ TERMINADO EL MODULO:
El desarrollo de estas, permiten formar profesionales con destrezas y habilidades prácticas en hematología con apropiación de
conceptos fundamentales de la hematopoyesis normal y anormal, que le permiten diseñar, ejecutar, evaluar e interpretar los
procesos cualitativos y cuantitativos del tejido hematopoyético.




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MAPA CONCEPTUAL DE HEMATOLOGIA
UNIDAD UNO




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GENERALIDADES

1. HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEAS
2. CELULA Y LA FUNCION
3. CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGRE
 ♦Definición
 ♦Función de la sangre
 ♦Propiedades físicas de la sangre

4. SISTEMA HEMATOPOYETICO

A continuación encontrará en cada una de las unidades del modulo, unos Fundamentos y enfoques teóricos y
prácticos, desde la perspectiva profesional, disciplinar, investigativa y pedagógica y, en coherencia con las normas
que regulan el ejercicio de la profesión que le permitirán guiar las temáticas incluidas en el modulo.

1- HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEAS


En este documento el estudiante va a encontrar una breve historia de la hematología ya que esta es una especialidad de larga
y rica historia científica, también podrá recordar y reconocer los esfuerzos de quienes contribuyeron con su genio y dedicación
a lograr los grandes avances que conformaron la hematología que conocemos actualmente, ya que esta es no solamente de
gran utilidad, sino extremadamente valioso para afrontar los retos del futuro. Bienvenidos a la hematología.

El termino de célula madre se utilizo por primera vez en hematología en 1896, cuando Pappenheim propuso la existencia de
una célula precursora capaz de dar origen a las estirpes celulares de la sangre, las células madres se pueden clasificar en
totipotenciales, pluripotenciales, multipotenciales y según el tejido de origen en células madres embrionarias o adultas .
La primera evidencia de la existencia de células madre hematopoyéticas en el ser humano surgió en 1945, cuando se observo
que individuos que habían sido expuestos a dosis letales de radiaciones podían ser rescatados mediante un transplante de
médula ósea de un donador sano, permitiéndole regenerar el tejido sanguíneo.

En el decenio de 1930 se descubre la anemia microcítica hipocrómica producida por deficiencia de hierro , cuando se observó
múltiples agujeros diminutos en el cráneo de los esqueletos de la prehistoria , fue allí cuando el ser humano paso de cazador a




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agricultor y su dieta se baso en el maíz , siendo muy notable la deficiencia de hierro . En 1931 Kaznelson descubre el signo de
la coiloniquia en la “Mano de Lydney”, escultura en bronce de un antebrazo y mano de la cultura celta, que muestra
claramente las uñas en forma de cuchara, típicas de la anemia por deficiencia de hierro (ADH). Esta deficiencia siempre ha
sido más frecuente en los estratos pobres de la sociedad.

Van Leeuwenhoek alrededor del año 1700 fue el que hizo descripciones microscópicas de los eritrocitos. Años antes, William
Harvey había postulado su teoría de la circulación sanguínea sin el beneficio del microscopio. Un momento decisivo llegó como
consecuencia del trabajo destacado por Paul Erlich, quien, cuando era estudiante desarrolló los métodos de tinción celular con
anilinas, lo que permitió el estudio de la morfología de la sangre periférica y con ella el nacimiento de la hematología como
ciencia. Aunque antes de Erlich ya se podían contar los eritrocitos, la medición confiable de la Hemoglobina fue posible hasta
el siglo XX, lo que explica el retraso de la definición de ADH. Es necesario también considerar que los recuentos de eritrocitos
permanecen casi normales en la ADH, lo cual dificultó su reconocimiento; además, se suponía que no había deficiencia de las
sustancias abundantes en la naturaleza, como el hierro, cuya presencia en la sangre la estableció Magendie en el año de 1747
cuando calentó sangre hasta obtener cenizas y demostró que los residuos eran atraídos por un imán o magneto, por lo que
dedujo la presencia de hierro en la sangre.
En 1902, en Basilea, Bunge escribió que el consumo habitual de los alimentos deficientes en hierro podían conducir a anemia;
él mismo demostró que la leche humana posee hierro en escasa cantidad, y afirmó que, aunque la deficiencia dietética de este
mineral era casi inimaginable, ningún alimento por sí mismo contenía suficiente hierro como para ser eficaz en el tratamiento
de su deficiencia.
En 1932 Hutchinson afirmó que el hierro no se obtiene fácilmente de la dieta y concluyó que….” el hierro contenido en la
hemoglobina y sus derivados es muy mal absorbido”. Sin embargo, creía, como Bunge, que este mineral en el entorno era
suficiente y que la complementación era innecesaria. Este concepto cambiaría como resultado del extenso y brillante trabajo
de investigación de la anemia en niños que desarrolló Helen Mackay en Viena después de la segunda Guerra Mundial.

Entidades clínicas de interés histórico en la deficiencia del hierro: el mal de amor y la enfermedad de las vírgenes
Estos cuadros, descritos inicialmente en 1554 por Johann Large, también denominados” clorosis” o “enfermedad verde “,
fueron muy populares entre los médicos de los siglos desde XVII y hasta principios de XX. Se refieren a un cuadro de anemia
hipocrómica en mujeres adolescentes relacionado con alteraciones gastrointestinales y trastornos menstruales. La coloración
verde descrita por muchos médicos a lo largo de estos períodos dificultó explicar la clorosis con una simple ADH. Tal vez una
explicación razonable es la que expuso Crosby en 1955, quien razonó que estos casos se debían a una combinación de
desnutrición proteínica y deficiencia de hierro. Ya antes, Andril había comentado sobre la presencia de eritrocitos muy
pequeños en la clorosis, la cuál continuó vinculándose con el desarrollo de la sexualidad en los jóvenes adolescentes y la
posible relación de un trastorno temporal de la eritropoyesis con el desarrollo de los órganos de la reproducción. En esta época
se utilizaba como tratamiento para la deficiencia de hierro un jarabe preparado con virutas de hierro en vino endulzado y




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hervido, así como beber agua de la región de Spa, en Bélgica, en donde las principales enfermedades tratadas eran la clorosis
y la anemia. Ya que estas aguas eran ricas en bicarbonato de hierro. En 1832, Blaud inicio el uso de píldoras que contenían
1.4 g de sulfato ferroso, en tanto que Osier pensaba que el hierro era más eficaz si se combinaba con el arsénico. Hacia el
siglo XIX desapareció la clorosis sin una razón aparente y se especulo que esto se debió a una mejoría en la dieta, a las
circunstancias socioeconómicas y una reducción de la tasa de infección.
En 1931, dos publicaciones de Davies y Witts aclararon de manera definitiva el papel que juega el hierro en la ADH del adulto.
Además Davies, en su articulo señaló que el hierro se extendía a los epitelios y la piel, pues los cambios en las uñas, lengua y
esófago de los pacientes con aclorhidria, y anemia mostraban mejoría después de recibir tratamientos de hierro.
En el mismo año. 1931, Witts concluyó que la anemia se debía a la incapacidad para formar hemoglobina (Hb) como resultado
de la cantidad reducida de hierro en la sangre; señaló que muchas de las mujeres que padecían la anemia ingerían hierro en
cantidades insuficientes a partir de sus alimentos. En 1924 Hurst demostró la ausencia de ácido en el jugo gástrico de los
pacientes con AP.
Quizás el primer caso de anemia perniciosa (AP), una anemia megaloblástica debida a la atrofia de la mucosa del cuerpo del
estómago por factores auto inmunitarios, lo descubrió Osier en Canadá, cuyo paciente padecía hipoestesia de los dedos,
manos y antebrazos; sus glóbulos rojos eran muy grandes y su estomago se encontró atrófico durante la necropsia.
Un avance significativo en el estudio de las anemias ocurrió en el año 1880 cuando Paul Ehrlich, realizo en un paciente con un
caso de anemia perniciosa (AP) una tinción de anilina en un (FSP) que secaba con calor; y de esta manera, fue capaz de
hacer la distinción morfológica entre los normoblastos en el FSP después de la anemia aguda por hemorragia y las enormes
células que denominó “megaloblastos” en los AP.
Fue hasta 1921 que Zadek observó los megaloblastos in vivo; dos años después, en 1923, Naegeli descubrió por primera vez
los neutrófilos hipersegmentados en la AP. Casi un decenio después, en 1932, Temka y Braun descubrieron los
metamielocitos gigantes en la médula ósea (MO) de pacientes con AP.
Más de dos decenios transcurrieron después de los trabajos de Minot para aislar un compuesto rojo y cristalino que en 1948 se
denomino “cobalamina”. Estos esfuerzos los encabezó Dorothy Hodgkin, quien por ello recibiría el Premio Nobel de Química
en 1964.

En el año de 1924 y 1934 se produjo una serie de descubrimientos relacionados con las anemias carenciales. Los tres más
importantes fueron el hallazgo de una cura para la AP por Minot, la descripción del factor intrínseco (FI) y factor extrínseco (FE)
por Castle y el descubrimiento por Lucy Wills de una sustancia en la levadura capaz de corregir la anemia megaloblástica del
embarazo, caracterizada después como folato.
El ácido fólico se aisló de la espinaca en 1941. En 1943 se trabajo en los laboratorios en el descubrimiento de los folatos. El
termino “folato” se usa para designar los compuestos que poseen la misma actividad de vitamina, e incluye a los folatos
naturales y al ácido fólico sintético.




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Una supervivencia disminuida del eritrocito en la circulación es el dato esencial de la existencia de una anemia hemolítica (AH).
Es necesario distinguir si se trata de un problema adquirido o heredado. En 1945 Robin Coombs introdujo en la práctica clínica
la prueba de la antiglobulina humana (AGH), que sirvió para lograr la aceptación de la existencia de las formas adquiridas de la
AH al proporcionar un método objetivo para distinguirlas de la hereditaria.
Claudio Galeno, médico del emperador Marco Aurelio, descubrió el primer caso de hemólisis, en un esclavo cazador de
serpientes que fue mordido por una de estas. Este era el cuadro de una hemólisis intravascular aguda. Luego Johannis
Actuarius en Constantinopla al final del siglo XIII descubrió una AH, en donde la orina era oscura después de la exposición de
un clima gélido, lo que se atribuyo a una enfermedad renal. Esta anemia posteriormente fue la hemoglobinuria paroxística al
frío.
Otra descripción de AH fue la realizada por Vanlair y Masius, en 1871 en una mujer con un cuadro repetitivo de ictericia, dolor
en el cuadrante superior derecho y esplenomegalia .Esta descripción que se hizo en sangre correspondía a la presencia de
esferocitos, a la que se le llamaron “microcitos “dados su diámetro de solo 3 y 4 µm.
El francés investigador Chauffard, contribuyo en el diagnóstico de la AH con el descubrimiento de la fragilidad osmótica
aumentada de los eritrocitos y la descripción de los reticulocitos.

LEUCOCITOS

Aunque la palabra “cáncer” fue utilizada por Galeno, no hay evidencias de que en esa poca se conocieran la neoplasia
hematológica. De hecho, las primeras observaciones de los eritrocitos las hizo Van Leeuwenhoeken 1674, en tanto que los
glóbulos blancos los descubrió el anatomista francés Joseph Lieutaud en 1749, a los que llamó ”globuli albicantes”, un cuarto
de siglo antes que el prestigioso anatomista ingles William Hewson describiera el linfocito, en 1774. Hacia el mismo año de
1749 Senac describió” los glóbulos blancos de pus “. De esta manera, el pus y la inflamación eran los conceptos imperantes en
la hematología hasta la primera parte del siglo XIX.

Un cambio de rumbo en la hematología surge a partir de 1845, cuando John Bennett, en Edimburgo, realizo la necropsia de
John Menteith, un paciente de 28 años con un tumor esplénico que falleció con lo que luego Bennett publicó como “Un caso de
hipertrofia del bazo e hígado en el que la muerte tuvo lugar por supuración de la sangre “. Concluyó que toda la sangre estaba
afectada y que el paciente había sufrido una transformación dentro de su sistema sanguíneo, y no una inflamación. En su
informe, dibujó por primera vez las células malignas de un individuo con leucemia. Probablemente este sujeto sufría de una
leucemia granulocítica crónica (LGC).

Rudolph Virchow, en Berlín, publico el segundo caso de leucemia, el de una mujer de 50 años con una enfermedad crónica y
crecimiento del bazo, que murió cuatro meses después. Durante la necropsia, Virchow encontró en todos los vasos




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sanguíneos, lo que describió como una sustancia semejante al pus, con células de características morfológicas que
corresponden a una leucemia linfocítica crónica (LLC). El informe de Virchow apareció en noviembre de 1854.
En el año de 1940 se había intentado buscar un marcador genético que identificara la LGC, sin éxito. Trascurrieron 20 años de
búsqueda para que 1960 Nowelly Hungerford en Filadelfia cultivara la sangre de un pequeño grupo de pacientes con LGC.
Sorprendentemente, encontraron un pequeño cromosoma acrocéntrico, que denominaron cromosoma Filadelfia (Ph1 ), siendo
en este momento un marcador específicamente ligado a esta neoplasia .
Más de un decenio después, 1973, la Dra. Janet Rowley comprobó que no se trataba de una eliminación , sino de una
traslocación hacia el cromosoma 9, t(9;22). Ahora se sabe que este protooncogén ABL, que se localiza por lo general en el
cromosoma 9 , esta traslocado hacia el cromosoma 22 en pacientes con LGC, creando el producto híbrido del Gen de fusión
BCR-ABL, este es ocasionada por una cinasa de tirosina citoplasmática, la cual es inhibida por el imatinib, recientemente
descubierto para el tratamiento de estos pacientes con LGC.
En 1903, el Dr. F. P. Weber describió el caso de un varón de 50 años con mieloma múltiple (MM) y proteinuria de Bence Jones
de 15 g/día.
El término “célula plasmática “ lo usó inicialmente Waldeyer en 1875, fueron descritas por Ramón y Cajal, el patólogo en 1890,
pensando que estas células hacían parte del tejido conjuntivo.
En 1990 Wright publicó el caso de un paciente con MM, la necropsia reveló células ovales grandes con núcleo excéntrico,
algunas binucleadas, a las que identifico “células plasmáticas “.

En las últimas décadas del siglo XX se ha desarrollado la hibridación in situ; mediante ella se puede detectar en las células
secuencias de ADN o ARN determinadas, lo que permite una perfecta compenetración entre la estructura y composición
química y organización molecular. Se ha desarrollado también la tecnología de micromatrices o microchips de ADN que
incrementa el conocimiento sobre el control de los genes y las variaciones fisiológicas o patológicas en las células procariotas
y eucariotas. Frente a estos avances en la investigación, un suceso inesperado puso de manifiesto las limitaciones de la
Ciencia actual. En 1981, el Centro de control y prevención de enfermedades (Atlanta), alertaba de una nueva pandemia, el
síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El SIDA ha sustituido a la peste negra como mayor azote histórico de la civilización
occidental y su expansión constante ha coincidido con la emergencia de microorganismos resistentes a fármacos, lo que ha
supuesto una cura de humildad frente a una sensación casi de inmortalidad y en la que todas las patologías se curaban ya o
en el futuro inmediato.
Con respecto a la célula cancerosa, se conocía que cuando escapan a los controles internos, las células se multiplican de
forma exponencial y son capaces de abandonar su localización original e implantarse en otros tejidos. A mitad de los años
setenta, se descubre que una proteína del virus del sarcoma de Rous es codificada por un gen responsable de la
transformación neoplásica, un oncogén. Poco después, se confirma que los géneros determinan una quinasa de tirosina y se
infiere la existencia de genes supresores de tumores, el primero de los cuales fue el p53. Por último se identificaron genes que
codificaban proteínas cuya secuencia aminoacídica era coincidente con factores de crecimiento. Se ha podido así cubrir toda la



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trayectoria del cáncer mediante una mutación en un gen determinante del desarrollo se activaba un protooncogén, un gen
supresor de tumores o un gen reparador de la molécula de ADN.
Es evidente que la biología celular se ha beneficiado, principalmente en las últimas décadas, de técnicas desarrolladas y
perfeccionadas por otras disciplinas afines, fundamentalmente la Bioquímica y la Biología Molecular, como la cromatografía, la
electroforesis en gel, el marcado isotópico, el análisis por difracción de rayos X, el fraccionamiento celular, la ultra
centrifugación, y la citometría de flujo, que han contribuido notablemente al estudio de la composición molecular y del
metabolismo celular, permitiendo relacionar la estructura de la célula con su arquitectura molecular y enfocar ambas de cara a
sus funciones biológicas. El conjunto de todas estas técnicas ha posibilitado que el estudio de la célula saltase de su
concepción clásica -que se restringía a estudiar los constituyentes celulares y a la descripción morfológica de las tipos
celulares y tejidos- a una concepción mucho más moderna. Según lo que he escrito en la Guía del alumno estos últimos años
considero que la biología celular es el centro de una educación biológica y bioquímica moderna. La biología celular es, por
tanto, una ciencia en evolución creciente y que, consideramos, aún está en una fase inicial de expansión. La relación con otras
ciencias, y las técnicas mixtas que así se han constituido, han dado como resultado que sus límites conceptuales cada vez se
encuentren más lejanos y más difusos. Es entonces que Los leucocitos sirven como la línea primaria de defensa en el sistema
vascular. Dos categorías, granulocitos y células linfáticas, circulan a través del flujo sanguíneo en un esfuerzo por identificar y
combatir patógenos ajenos tales como bacterias, virus, etc.
Añadiendo a esta complejidad se encuentran las numerosas sales que son requeridas en la sangre. Estas sales son
principalmente iones básicos, tales como el sodio, potasio, fosfato, y el magnesio que ayudan a mantener un firme valor de pH
para la sangre. Estos iones de bicarbonato eliminan el dióxido de carbono de los tejidos y ayudan a mantener un pH
ligeramente alcalino de 7.4. Durante daños traumáticos o cirugías, una gran cantidad de atención es dada a la disminución
significante del pH de la sangre o la pérdida de esta alcalinidad puede causar respiración rápida y violenta, con muerte
probable para ocurrir en un pH de 7.0 o más bajo. Contrariamente, si se permite que el pH de la sangre se eleve más allá de
7.6, esto también puede resultar fatal.

Todas estas técnicas se aplicaron a muestras de médula ósea en los años 20 cuando se realizaron las primeras punciones de
médula ósea. Así nació la citoquímica, un conjunto de técnicas que permitían el diagnóstico y clasificación de las leucemias
agudas de una forma rápida, así como la aplicación de un tratamiento específico para cada tipo de leucemia sin necesidad de
grandes alardes técnicos. Pero siguiendo el desarrollo escalonado de las técnicas diagnósticas llegamos al inmunofenotipo.
Estas técnicas llegaron con el conocimiento de los anticuerpos monoclonales hace ya más de dos décadas. Estas proteínas
son capaces de unirse específicamente con antígenos proteicos que se encuentran en la membrana de las células
sanguíneas, las cuales permiten la distinción de cada tipo celular incluso dentro de cada línea celular. Estas técnicas lo que
han conseguido es identificar y tipificar aún más la población leucémica. Permiten, por otro lado, llegar a detectar más allá del
microscopio óptico la célula leucémica.




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Actualmente el proceso diagnóstico de estas enfermedades no es distinto al seguido en otras enfermedades no oncológicas.
Es muy importante la realización de una historia clínica detallada atendiendo a historia familiar de enfermedades oncológicas,
exposición a tóxicos medulares, y atención a signos y síntomas propios de anemia, neutropenia y trombocitopenia. En el
examen físico hay que valorar grado de palidez, evidencia de sangrado, signos de focalidad infecciosa. Es muy importante la
exploración de linfadenopatías en territorios no usuales en niños (supraclaviculares y auriculares posteriores); también
presencia o no de masas y megalias abdominales. Tras la sospecha clínica hay que realizar estudio hematimétrico donde
existirán alteraciones en un 90% de los casos, principalmente: leucocitosis o leucopenia con neutropenia, anemia normocítica y
normocrómica con reticulocitos disminuidos, y trombopenia <100.000/mcl en tres cuartas partes de los pacientes. Ante estos
hallazgos se deberá hacer diagnóstico diferencial con los siguientes cuadros:
 enfermedades no malignas: anemia aplásica, mononucleosis infecciosa, artritis reumatoide juvenil, púrpura trombopénica
    idiopática, infecciones (tos-ferina, etc.).
 enfermedades malignas: otro tipo de leucemias, linfomas, infiltración medular por tumores sólidos.

El examen de frotis de sangre periférica y posteriormente el examen de médula ósea por aspirado/biopsia nos dará el
diagnóstico definitivo. Una vez diagnosticada habrá que tipificar la leucemia. Para esto, disponemos hoy en día de todas las
técnicas diagnósticas específicas descritas al principio de esta ponencia, las cuales nos permiten un diagnóstico del subtipo de
leucemia. Pero han aparecido ciertos problemas derivados del gran desarrollo experimentado por estas técnicas de forma
aislada y desigual; principalmente, la clasificación de los subtipos de Leucemia. Esto se ha visto en determinados casos, en los
que han existido discrepancias entre los distintos métodos diagnósticos que han dificultado la asignación a un subtipo. Debido
a esto, la clasificación de las leucemias ha sufrido cambios constantes en un intento de estandarizarla. Pero, al mismo tiempo,
la mayor tipificación de las Leucemias ha dado lugar a un mejor seguimiento de la enfermedad favoreciendo una valoración
adecuada de la respuesta al tratamiento y el estudio de la enfermedad mínima residual. También esto ha conllevado una
aproximación pronóstico al poder correlacionar determinados subtipos con un mejor o peor pronóstico desde el inicio de la
enfermedad.

Con respecto al tratamiento los científicos y médicos que idearon el tratamiento para la leucemia infantil promovieron un
método racional para destruir las células cancerosas utilizando los conocimientos de las células acumulados a partir de una
serie de descubrimientos procedentes de investigaciones básicas que se llevaron a cabo a principios del siglo XX. Dichos
estudios mostraron que los mecanismos de la célula se basan en un gran conjunto de reacciones químicas que se repiten
continuamente de la misma forma que los pasos que forman una cadena de producción.

La lucha contra el cáncer se ha convertido más en una guerra de desgaste que en una serie de victorias instantáneas y
espectaculares, y la investigación que se ha llevado a cabo sobre la leucemia infantil durante los últimos 40 años no es una
excepción. Pero, en nuestros días, la mayoría de los niños que sufren esta enfermedad pueden llegar a curarse gracias a los




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fármacos antimetabolitos. La lógica que respalda a estos fármacos procede de una amplia gama de investigaciones mediante
las que se han conseguido definir los procesos químicos de la célula. Dichas investigaciones fueron llevadas a cabo por
científicos que no podían ser conscientes de que sus descubrimientos iban a salvar las vidas de hasta treinta mil niños en
Estados Unidos.

La hematología moderna se inicio en la década de los 20 donde, el laboratorio juega un papel importante en el diagnóstico de
los trastornos hematológicos ya que permite la cuantificación de los elementos formes de la sangre, con la sistematización y
automatización como la citometría de flujo, la impedancia, aumentando la exactitud en el informe y disminuyendo los riesgos
biológicos con sus diseños de bioseguridad. Además de los estudios genéticos, la citó química entre otros, que permiten llegar
a un diagnóstico acertado.

Las nuevas tecnologías han modificado y transformado toda la hematología, desde las anemias, las patologías de la
hemostasia, las leucemias y los Linfomas. En los últimos 50 años se ha convertido en una ciencia amplia que intenta
comprender la fisiología normal y patológica del sistema hematopoyético ayudado por otras disciplinas como la bioquímica la
biología celular y molecular, la inmunología, el fisicoquímico, la genética y la medicina nuclear.

Los conceptos básicos, siguen vigentes sin embargo el conocimiento de las enfermedades hemáticas dependen de un
conocimiento profundo de los procesos normales, para poder profundizar en la enfermedad y es con los avances de la
tecnología que ha permitido implementar un mejor diagnóstico.

2-CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGRE

Observar video.
http://www.youtube.com/watch?v=v9mzIC5BMRk
http://www.youtube.com/watch?v=GoqehY8J20Q&NR=1
http://www.youtube.com/watch?v=dVidtTJ4Wjs

INTRODUCCION

La sangre se compone de un líquido denominado plasma y elementos celulares, entre los que se encuentran los eritrocitos,
leucocitos y plaquetas. Un adulto normal tiene alrededor de 5 litros de este líquido vital, el cual representa de 7% a 8% del
peso corporal total. El plasma constituye casi el 55% del volumen sanguíneo , mientras que el 45% esta compuesto de
eritrocitos y 1% se forma de leucocitos y trombocitos con frecuencia las variaciones en estos elementos sanguíneos son el
primer signo de enfermedad que se presenta en tejidos corporales . Los cambios en el tejido enfermo logran detectarse de




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manera frecuente mediante los análisis de laboratorio que identifican las alteraciones sobre la base de valores normales en los
diversos constituyentes de la sangre.
El componente más importante es el agua, ya que contiene iones disueltos, proteínas, carbohidratos, grasas, hormonas,
vitaminas y enzimas.
Los principales iones necesarios para la función celular normal incluyen calcio, sodio, potasio, cloro, magnesio e hidrógeno. La
proteína principal que constituye al plasma es la albúmina, siendo el componente principal para conservar la presión osmótica;
la albúmina actúa como molécula transportadora llevando compuestos como la bilirrubina y Hem; otras proteínas sanguíneas
transportan vitaminas, minerales y lípidos. Las inmunoglobulinas y el complemento son proteínas especializadas que participan
en la respuesta inmunitaria. Las proteínas de la coagulación, encargadas de mantener una hemostasia normal circulan en la
sangre como enzimas inactivas hasta que se les requiere para el proceso de coagulación, Un desequilibrio en los elementos
disueltos en el plasma puede ser la causa de alguna enfermedad en otro tejido corporal. El plasma también interviene como
medio de transporte para los nutrientes celulares y metabolitos; por ejemplo, las hormonas elaboradas en un tejido son
trasportadas por la sangre hacia el tejido blando en otras partes del cuerpo; la bilirrubina (principal residuo catabólico de la
hemoglobina) es transportada por la albúmina desde el bazo hasta el hígado para su excreción; el nitrógeno ureico sanguíneo
es conducido al riñón para ser filtrado y excretado.
El aumento en la concentración de estos catabolitos normales, puede indicar metabolismo celular aumentado o defecto del
órgano de excreción. (Mackenzie).
Todas las células de la sangre se originan en la célula Madre que se localiza en los órganos hematopoyéticos y que puede
madurar a glóbulos rojos , glóbulos blancos y plaquetas, una vez que completan la maduración pasan a la circulación general
donde son eliminados después de un tiempo por el sistema mononuclear fagocítico (SMF) manteniendo la renovación
constante de la sangre .

FUNCION DE LA SANGRE mantener las condiciones necesarias para la vida , llevando nutrientes, recogiendo desechos,
manteniendo la temperatura adecuada.


3. LA CELULA Y SU FUNCION

Para el estudio de la hematología es esencial una comprensión básica de la morfología celular , ya que muchos trastornos
hematológicos se acompañan de anormalidades o cambios en la morfología de componentes celulares o subcelulares , así
como modificaciones en sus concentraciones.
Una célula es una estructura compleja con una membrana unida a un gel acuoso de proteínas carbohidratos, grasas,
materiales inorgánicos y ácidos nucleicos. El núcleo , limitado por una membrana nuclear , contiene ácidos nucleicos que
dirigen y controlan el desarrollo , función y división de la célula .El citoplasma rodea al núcleo y es protegido por una




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membrana celular . El citoplasma contiene organelos diferenciados entre ellos : mitocondrias , lisosoma, retículo
endoplasmático, aparato de Golgi, ribosomas, gránulos, microtúbulos y microfilamentos .
Los organelos son compartimientos unidos a la membrana con funciones celulares específicas; las diferentes clases de
organelos y su concentración es básica para la función celular.

Observar video en http://www.youtube.com/watch?v=6fbwQGioDuI

4.SISTEMA HEMAYOPOYETICO

Es el conjunto de órganos y tejidos encargados de distribuir y formar a las diferentes células sanguíneas , incluye los
siguientes órganos: Médula ósea, Hígado, Bazo, Timo; Ganglio Linfático, sistema Mononuclear Fagocítico.

MEDULA OSEA
http://www.youtube.com/watch?v=UVUBK1aL6dE

Es el principal órgano hematopoyético , recibe el nombre de médula ósea roja que es la encargada de la función
hematopoyética y la medula ósea amarilla que es la parte grasa. Dentro de la Medula ósea se diferencian dos compartimentos
uno de células madres y otros de células de diferenciación y maduración.
En el compartimiento de célula madre esta la célula pluripotencial o STEM CELL estas maduran y se transforman en cualquier
tipo de célula ya sea linfoide o mieloide , en el laboratorio se han demostrado que en cultivos específicos de la Medula ósea las
células crecen formando colonias , por eso se les denomina células formadoras de colonias (CFC) y su característica de poder
formar cualquier tipo de la serie celular (linfoide o mieloide) por todo esto se deduce que las células madres también se pueden
denominar (CFC_LM).

En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de la Historia
de las células sanguíneas, la importancia de la célula y su función, y las características normales de la sangre, y el
sistema Hematopoyético.

              COMPETENCIAS                                                         LOGROS
1. Capacidad de interpretar la evolución de   I. Relaciono los conceptos de la historia en el pasado presente y futuro de los
la historia de las células sanguíneas         hematíes, leucocitos y plaquetas.
2 Demostrar capacidad para Argumentar         II. Relaciono los valores de referencia para la concentración de células
con claridad las características normales     sanguíneas .



                                                                                                                              14
de la sangre
3. Demostrar eficiencia en la comprensión I. Describo la membrana celular teniendo en cuenta su estructura y función .
básica de la morfología celular            II. Interpreto la estructura y función de cada uno de las organelas citoplasmáticas
                                           que existen en una célula.
                                           III. Reconozco las diferencias entre los términos de heterocromatina y
                                           eucromatina.
                                           IV. Relaciono las estructuras nucleares con las actividades celulares que se
                                           vinculan con el núcleo.
                                           V. Describo los procesos de la mitosis y meiosis celular
                                           VI. Defino el proceso de apoptosis.
4. Capacidad de recocer las técnicas más I. Conozco el fundamento de la reacción en cadena de la polimerasa
usadas en biología molecular que tienen II. Defino la utilidad de la técnica de Southerin Biot
utilidad en las diferentes diagnósticos de III. Defino las técnicas de microensayos
los trastornos hematológicos               IV. Relaciono la aplicación de estas pruebas con algunas patologías de la
                                           hematología
5. Demuestra capacidad para adquirir y I. Argumento con claridad la localización de la hematopoyesis durante el
transferir el conocimiento sobre el desarrollo fetal,
desarrollo de la hematopoyesis             II. Reconozco las diferentes hemoglobinas de la vida embrionaria
6.     Reconocer la importancia de los I. Reconozco los diferentes conceptos sobre el sistema mononuclear fagocítico,
órganos y tejidos involucrados en el bazo, ganglio linfático, timo, hígado y médula ósea.
sistema hematopoyético que intervienen
en la proliferación, maduración y
destrucción de las células sanguíneas


EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:

1-Realice una consulta amplia bibliográfica en los documentos de apoyo recibidos e indague el pasado, presente y futuro de
las células sanguíneas.
Documento del modulo sobre la Historia de las células sanguíneas

2. Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) en los documentos de apoyo y videos recibidos para desarrollar
los talleres que se relacionan a continuación:




                                                                                                                           15
Taller de la sangre
Cuál es el porcentaje de volumen de las células sanguíneas y volumen plasmático?
Cuál es la coloración de la sangre?
Cuántos litros de sangre tiene un adulto?
Cuál es el componente plasmático más abundante?
Cuál es la función de la sangre?
Cuál es la diferencia entre plasma y suero?

Taller de células humana
¿Cuál es la función de la membrana celular, citoplasma, lisosomas, ribosomas, retículo endoplasmático, aparato de Golgi,
lisosomas, mitocondrias, núcleo, microtúbulos y los microfilamentos.?
EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL:
1. En 3 grupos elaborar cada grupo un mapa mental del pasado, presente y futuro . Para la socialización del taller se
organizaran 3 grupos cada uno de los cuales deberá escoger un relator durante la clase de teoría .
2. Con la revisión de los videos y las respuestas de los talleres , el estudiante hará un debate en el aula de clase. Esto
permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los
estudiantes.

Bibliografía complementaria
JAIME PERES José Carlos, ALMAGER David Gómez, Hematología. La sangre y sus enfermedades, 2 edición, 2010.
RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005
RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003
DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidad
MARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006
Base de datos Hinari
Base de datos Proquest


UNIDAD I - PRACTICA

1-GLOSARIO
2-RECONOCIMIENTO A UN LABORATORIO DE HEMATOLOGIA
3-CONTROL DE CALIDAD, BIOSEGURIDAD, MANEJO DE DESECHOS EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA




                                                                                                                       16
1.El estudiante encontrará un glosario de términos mas utilizado en la hematología, que lo transfiere al contexto de la
hematopoyesis normal y anormal. Glosario Ver anexo 1

2. Reconocimiento de un laboratorio de hematología, mediante a una visita que se realizara al laboratorio de ASSBASALUD de
la ciudad de Manizales fecha seleccionada por el grupo de docentes .

3.El estudiante deberá hacer la observación de videos sobre Bioseguridad, control de calidad y
manejo de desechos en el laboratorio de hematología

Observar videos de Bioseguridad:
http://www.youtube.com/watch?v=fcSPWbqArjc

http://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=related



   Técnica del lavado de manos.url




http://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=related
Técnica de puesta de guantes


www.youtube.com/watch?v=2Nx9SIYofzo&feature=related
Video de bioseguridad

www.youtube.com/watch?v=9HejcS0B9fM&feature=related
Video de toma de muestra
http://www.youtube.com/watch?v=ysao3R8dhJk




 Pipetas.url
http://www.youtube.com/watch?v=r5-zocCqRrc&feature=related

http://www.youtube.com/watch?v=pISxlv2GAfA                            MANEJO DE RESIDUOS HOSPITALARIOS.url
                                                                                                              /www.youtube.com/
                                                                 watch?v=oKf3j6hddVw&feature=related
                                                                 Video de bioseguridad




                                                                                                                              17
Manejo de desechos , en un laboratorio de hematología .
Control de Calidad:   http://www.youtube.com/watch?v=fbvwQHhDMDQ




                                                                                18
GLOSARIO
Acido fólico            Ferritina                Leucocitosis
Adenopatía              Fiebre                   Leucopenia
Anemia                  Granulopoyesis           Médula ósea
Anisocitosis            Alopesia                 Melenas
Anorexia                Haptoglobina             Metástasis
Apoptosis               Hematocrito              Microcito
Anemia Ferropénica      Hematuria                Macrocito
Anemia Megaloblástica   Hemoglobina              Neuropatía
Antígeno                Hemograma                Oliguria
Anticuerpo              Hierro                   Palidez
Bilirrubina             Hipoxia                  Pancitopenia
Bradicardia             Hiperesplenismo          Parestesia
Citocinas               Hem                      Petequias
Edemas                  Ictericia                Poiquilocitosis
Epistaxis               Indices eritrocitarios   Púrpura
Equimosis               VCM                      Reticulocito
Eritropoyesis           HCM                      Rofeocitosis
Eritropoyetina          CHCM                     Sideremia
Eritrosedimentación     RDW                      Sangre
Esplenomegalia          Inflamación              Taquicardia
Esplenectomía           Leucemia                 Trombocitosis
Estroma                 Leucopoyesis             Tumor
Etiología               Leucocito                Trombocitopenia




                                                                   19
En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación del glosario,
recomendaciones para control de calidad, bioseguridad, manejo de desechos en el laboratorio de hematología

              COMPETENCIAS                                                         LOGROS
1. Capacidad de definir los términos          I. Relaciono la terminología utilizada en hematología mediante el desarrollo de
relacionados con hematología mediante un      un glosario
glosario, que le permita articular
conocimiento, habilidades y actitudes en
contextos específicos.
2. Mediante una visita a un laboratorio       I. Reconozco la distribución y equipos de un laboratorio de hematología,
clínico deberá recocer la importancia del     mediante una visita.
bacteriólogo en un laboratorio y la
tecnología utilizada para los análisis de
hematología.
3. Demostrar conocimiento en la aplicación    I. Interpreto y aplico el control de calidad y la bioseguridad.
del control de calidad , bioseguridad y       II. Demuestro eficiencia aplicando las normas de bioseguridad, control de
desecho de residuos                           calidad y buen manejo de los desechos en el laboratorio de hematología
                                              teniendo en cuenta la OMS.

EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:

Desarrollar en forma individual los términos del glosario, hacer la observación de videos de bioseguridad, control de calidad y
desechos de residuos.
La función esencial de un laboratorio de hematología es obtener datos confiables y reproducibles para la evaluación del estado
de salud del paciente y para los estudios epidemiológicos.

De acuerdo a la visita que usted realizó, de respuesta a las siguientes preguntas:
  1. Qué requisitos son indispensables para el funcionamiento de un laboratorio clínico?
  2. Qué áreas tiene el laboratorio que usted visitó?
  3. Enumere las normas generales que deben cumplir los laboratorios para su funcionamiento?
  4. El personal que labora en el laboratorio utiliza ropa adecuada?
  5. Cómo esta clasificado el laboratorio que usted visitó?
  6. En el área de hematología que equipos observo?
  7. Como se debe eliminar la jeringa, el algodón, el material contaminado ?



                                                                                                                                20
EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL:

Mediante un debate en el aula se hará la socialización del glosario y el taller de las funciones del laboratorio de hematología y
los equipos que hacen parte del laboratorio, se hará preguntas sobre la bioseguridad , control de calidad y la eliminación de
desechos.
El docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes.

Bibliografía requerida (Documentos docentes)
SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000

Bibliografía complementaria
RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005
RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003
MARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006
DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidad
Base de datos Hinari
Base de datos Proquest




                                                                                                                              21
22
UNIDAD II TEORIA

HEMATOPOYESIS

1.) ORIGEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS

2.) SITIOS DE LA HEMATOPOYESIS Y FUNCION DE LA MEDULA OSEA

  a.) Elementos celulares de la médula ósea
  b.) Eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis, megacariopoyesis
  c.) Otras células sanguíneas de la médula ósea
3.) FACTORES DE CRECIMIENTO HEMATOPOYETICO – INTERLEUQUINAS -

4.) EXAMEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS EN MADURACION

 a.) Características celulares generales
 b.) Características nucleares
 c.) Características citoplasmáticas


TEORIA HEMATOPOYETICA

ABORDAJE TEORICO

 El proceso de la formación de las células de la sangre se llama hematopoyesis. El conjunto de células y estructuras implicadas
en la fabricación de las células sanguíneas se llama tejido hematopoyético. La hematopoyesis es un proceso complejo influido
por factores propios del individuo de tipo genético o hereditario, factores ambientales (nutrición, vitaminas, etc.) y
enfermedades diversas que afectan a la producción de sangre de forma directa o indirecta.

Los factores de crecimiento hematopoyéticos son necesarios para la supervivencia, proliferación y maduración de las células
progenitoras en medios de cultivo en el laboratorio. Estos factores se producen en el ambiente de la médula ósea o en otros
lugares del organismo. Se trata de glicoproteínas con estructura conocida hoy en día y que se están produciendo de forma
industrial con fines terapéuticos.




                                                                                                                            23
Durante la primera etapa de la vida en el embrión y feto, la hematopoyesis se produce de forma diferente. El hígado y en
menor proporción el bazo, ganglios linfáticos y timo son los órganos productores entre el 2º y 7º mes. A partir del 7ª mes de
vida intrauterina será la medula ósea el órgano hematopoyético principal hasta el nacimiento y después lo será durante toda la
vida en situación normal .


INTERLEUCINAS

Se denominan interleucinas o interleuquinas a un conjunto de proteínas que son sintetizadas y expresadas por los
leucocitos (de ahí -leukin), más específicamente por los Linfocitos TCD4 y por los y que tienen como función la
intercomunicación (de servir como mensajeros) entre las distintas subpoblaciones leucocitarias, participando en la respuesta
del sistema inmunitario. Han sido descritas distintas alteraciones de ellas en enfermedades raras, en enfermedades auto
inmunes o en inmunodeficiencias.

Estructura : Son proteínas solubles de bajo peso molecular que ejecutan múltiples funciones vinculadas al crecimiento celular,
inmunidad, diferenciación tisular, inflamación, etc. Además de las células del sistema inmune, estas citocinas son producidas
por diferentes tipos celulares durante la activación de la inmunidad innata y adquirida. Son el principal medio de comunicación
intracelular ante una invasión microbiana. Las citocinas sirven para iniciar la respuesta infamatoria, y para definir la magnitud y
naturaleza de la respuesta inmunitaria específica. Se conocen en la actualidad no menos de 33 interleucinas (1), las cuales
difieren entre si tanto desde el punto de vista químico como del biológico. Mientras algunas de ellas [IL-4, IL-10, IL-11]
presentan esencialmente efectos favorables, otras [IL-1, IL-6, IL-8], paralelamente a su función defensiva, pueden también ser
deletéreas para el organismo (2).

Clases
Una lista de 'interleucinas:
 IL-1: producida por macrófagos, y células epiteliales induce reacción de fase aguda y la activación y reconocimiento por
   parte de linfocitos T y macrófagos del lugar donde se desarrolla la respuesta inmune.
 IL-2: producida por linfocitos Th1 , estimula el crecimiento y la diferenciación de la respuesta de los linfocitos T.
 IL-3: producida por linfocitos Th2, estimula las células madre de la médula ósea.
 IL-4: relacionada con la proliferación de linfocitos B, mastocitos y linfocitos T. Tiene un importante papel en las reacciones
   alérgicas.
 IL-5: producida por linfocitos T y Mastocitos, estimula el crecimiento y proliferación de eosinófilos.
 IL-6: segregada por macrófagos, participa en reacciones de fase aguda, también estimula el crecimiento y diferenciación de
   tanto linfocitos T como linfocitos B.



                                                                                                                                24
 IL-7:intensifica la actividad alocitolítica de las células NK activadas por las linfocinas , se considera un promotor de la
  Timopoyesis y de la recuperación inmune
 IL-8: producida por monocitos, macrófagos, queratinocitos, fibroblastos y células endoteliales, su función es atraer a
  neutrófilos y linfocitos vírgenes, así como movilizar, activar y provocar la degranulación de neutrófilos. También estimula la
  angiogénesis.
 IL-9 factor célula linfoide potente, estimula el crecimiento de algunos linfocitos T y mastocitos.


En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de la
Hematopoyesis



         COMPETENCIAS                                                         LOGROS

1. Capacidad de relacionar los       I. Explico el origen de las células sanguíneas
conceptos de la Hematopoyesis, en    II. Reconozco los sitios y función de la médula ósea
el    proceso    de    producción,   III. Describo el desarrollo de las células sanguíneas desde la etapa de célula   madre
diferenciación y desarrollo de las   hasta la forma blástica de una célula ( eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis,
células sanguíneas                   megacariopoyesis,)
                                     IV. Interpreto la función de los factores de crecimiento hematopoyético y      enumero
                                     3 factores.
                                     V. Relaciono el orden de maduración de las células sanguíneas como eritrocitos,
                                     células plasmáticas, y los 5 tipos de leucocitos ( eosinófilo , basófilo, neutrófilos,
                                     monocitos, linfocitos)
                                     VI. Analizo las características celulares generales de una célula que son importantes
                                     para la identificación celular.
2. Capacidad de caracterizar el I. Identifico el papel de las citocinas o interleucinas en la diferenciación de la célula
papel de las citocinas en la troncal
diferenciación de la célula troncal.

EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:
El estudiante deberá realzar una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) y con en el documento de apoyo sugerido
por el docente, responderá en forma individual el siguiente taller.




                                                                                                                             25
1. Dónde se origina la hematopoyesis?
2. Cuál es el principal sitio de la Hematopoyesis del adulto?
3. Explique cuales son las proteínas reguladoras de la hematopoyesis
4. Qué es tejido Hematopoyético?
5. Qué es el sistema fagocítico-mononuclear?
6. Dónde se encuentra el bazo ,el timo , hígado y cuál es su función?
7. Qué compone el sistema linfático?
8. Qué es la Medula ósea y que la conforma?
9 .Defina eritropoyesis?
10.Defina la granulopoyesis?
11.Defina linfopoyesis?
12.Defina megacariopoyesis?
13 .Defina Las citocinas, el origen y el sitio de acción de estas.
14. Que características comparten las interleucinas



EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL

1.) Mediante un debate en el aula se socializara el taller de la Hematopoyesis .
2.) Cada uno de los estudiantes deberá tener un mapa mental de hematopoyesis de acuerdo con la teoría desde la
diferenciación de células troncales no diferenciadas a células sanguíneas maduras, teniendo en cuenta el sitio de acción de los
factores estimulantes de colonias y las interleucinas.
Cada estudiante deberá identificar la hematopoyesis intramedular y extramedular .

Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento.


Bibliografía requerida

MARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México 2006 . capitulo 4 Pág.65-73.

Bibliografía complementaria




                                                                                                                            26
NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. Segunda
edición 2008. Capitulo. Pág. 13-18
SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000. Páginas 13,
14, 15, 16, 17,18, 19, 20,22.
RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005 Pág..
78.79.80.
JAIME , PEREZ José David, ALMAGER GOMEZ David, HEMATOLOGIA ,la sangre y sus enfermedades , 2010, capitulo 1
Célula madre Hematopoyética y Hematopoyesis.
CARR. RODAK Altas de HEMATOLOGIA CLINICA.3 edición, 2010.
BIBIANA Martínez : CD sobre la hematopoyesis.

Motores de búsqueda:
 Base de datos Hinari
 Base de datos Proquest.


UNIDAD II PRACTICA

1-PRINCIPIOS PARA LA RECOLECCION DE LA SANGRE
2-CLASES DE ANTICOAGULANTES
3-PRUEBAS DE LABORATORIO : BASICAS Y ESPECIALES

1-RECOLECCION DE LA MUESTRA EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA PARA CUADRO HEMATICO

ABORDAJE TEORICO
Una muestra sanguínea recolectada en forma apropiada es esencial para la calidad en el desempeño del laboratorio. El
cumplimiento estricto de las reglas para la recolección de la muestra es crucial para la exactitud de cualquier prueba. Los
errores previos al análisis como la identificación, ya sea del paciente o de la muestra, son fuentes potenciales importantes de
error. (Turgeon, 2006).
Para los estudios hematológicos, la sangre anticoagulada es la muestra que se usa mas a menudo. Cuando se mezcla sangre
entera fresca con sustancias que previenen la coagulación, (anticoagulantes), la sangre puede separarse en plasma, un líquido
de color pajizo y los elementos celulares (eritrocitos, leucocitos y plaquetas o trombocitos). La sangre entera que se permite
coagular en forma normal produce el suero, un liquidó de color pajizo. (Turgeon, 2006).




                                                                                                                            27
Se espera que la persona que realiza la flebotomía, brinde una satisfacción inmejorable. Es importante que comprenda y
conozca las expectativas del paciente, que maneje la prudencia con este y que sea diplomático ante las quejas del mismo.
Si un paciente no esta satisfecho, hay que ofrecerle una disculpa sincera y escucharlo para conocer los detalles del problema.
Es preciso asegurarse de comprender y confirmar el problema, actuar en consecuencia con la queja, mantener las promesas
que se hagan y seguir el problema hasta la resolución del mismo

OBSERVAR UN VIDEO DE TOMA DE MUESTRA


     YouTube - Extraccion de sangre y hematocrito.url


2.) ANTICOAGULANTES

En Hematología debe saber elegir el anticoagulante idóneo y mantener siempre una adecuada proporción entre éste y el
volumen de sangre extraída .
En hematología el anticoagulante idóneo debe cumplir los siguientes requisitos:
    1. No alterar el volumen del eritrocito
    2. No producir hemólisis
    3. Evitar la agregación de las plaquetas
    4. No alterar la morfología eritrocitaria
Los anticoagulantes utilizados en el hemograma son las sales sódicas o potásicas del acido etilendiaminotetraacético ( EDTA) ,
se pueden utilizar en forma líquida o sólida .

3. PRUEBAS DE LABORATORIO
A continuación encontrara una serie de pruebas más frecuentes en el laboratorio para la correlación clínica de los pacientes
con trastornos hematológicos

-PRUEBAS DE LABORATORIO                                          EL HEMOGRAMA (determinación de hemoglobina,
                                                                 hematocrito, recuentos de leucocitos, recuento diferencial de
Hay pruebas de laboratorio en hematología que son                células blancas o fórmula leucocitaria)
utilizadas como de rutina para evaluar la salud del paciente,    Determinación de reticulocitos
estas pruebas se denominan básicas .Entre estas están:           Velocidad de sedimentación globular o eritrosedimentación
                                                                 Recuento de plaquetas




                                                                                                                           28
HEMOGRAMA AUTOMATIZADO : hematíes, hemoglobina              Productos de degradación del fibrinógeno (PDF)
( Hb), hematocrito (Hto), Volumen corpuscular medio         Indice de saturación de transferrina
(VCM),concentración de hemoglobina corpuscular media        Inmunoglobulinas (IgA, IgD, IgE, IgG, IgM )
(CHCM), Amplitud de la distribución del tamaño de           Lactato deshidrogenasa (LDH) suero
eritrocitos (ADE)                                           Plomo (suero)
Reticulocitos                                               Proteínas totales (suero)
Leucocitos                                                  Proteínas fraccionadas (albúmina, globulinas)
Fórmula leucocitaria: neutrófilos, linfocitos, monocitos,   Hepcidina
eosinófilos, basófilos.
Recuento de plaquetas                                       OTRAS PRUEBAS ESPECIALES COMO:
 Valor absoluto de leucocitos.                              Homocisteína
                                                            Acido metilmalónico
ESTUDIOS BIOQUIMICOS                                        Eritropoyetina (radioinmunoanálisis)
Acido fólico (suero)                                        Fosfatasa alcalina granulocítica
Acido úrico (suero)                                         Cromosoma Filadelfia
Beta2 microglobulina (suero)                                Protoporfirina eritrocitaria libre
Bilirrubina total, directa, indirecto (suero)               Receptor sérico de la transferrina
Calcio (ionizado)                                           Fragilidad osmótica
Cobalamina o vitamina B12, (suero)                          Test de Ham
Complemento (suero)                                         Electroforesis de Proteínas
Creatinina (suero)                                          Test de la sacarosa
Ferritina                                                   Test de falciformia
Fibrinógeno (plasma )                                       Electroforesis de hemoglobina
Hierro
Hierro, capacidad de fijación




                                                                                                             29
En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía ,para la recolección de la sangre,
identificación de los principales anticoagulantes y las pruebas básicas y específicas utilizadas en las ayudas diagnósticas de
las alteraciones hematológicas

            COMPETENCIAS                                                           LOGROS
1. Capacidad de realizar una buena         I. Reconozco el protocolo para una buena toma de muestra venosa y capilar
recolección de la muestra para las         II. Ejecuto una buena toma de muestra con un compañero teniendo en cuenta la
pruebas de células sanguíneas.             punción capilar y venosa
2. Capacidad de identificar los            I. Identifico los diferentes anticoagulantes utilizados en hematología
diferentes anticoagulantes utilizados en
el laboratorio de hematología              II. Preparo material con anticoagulante para hemogramas

                                           III. Conozco las diferentes ventajas del EDTA –K3.
3. Demuestra capacidad de asociar las      I. Desarrollo e interpreto las diferentes pruebas básicas y especificas, más usadas
pruebas básicas y especificas mas          en el laboratorio para las ayudas diagnósticas de las diferentes patologías en
usadas en el laboratorio , para las        hematología
ayudas diagnósticas de las diferentes
patologías en hematología


EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:

1.) Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) ,observe el video de toma de muestra y plasme el
conocimiento adquirido en el desarrollo del siguiente taller :

    a.) Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total.
    b.) ¿Por qué la sangre se coagula?
    c.) ¿Como actúa el anticoagulante frente a la sangre?
    d.) Describa la importancia de la utilización de cada uno de los anticoagulantes que usted investigo
    e.) Qué importancia tiene la relación anticoagulante sangre para la realización de un cuadro hemático.
    f.) El EDTA es el anticoagulante de elección en células sanguíneas. De una explicación a esta afirmación.
    g.) Sí una muestra presenta un coagulo pequeño. Qué implicaciones trae los resultado




                                                                                                                             30
2.) Por grupos seleccionados en el aula de clase , identifique y fundamente las pruebas básicas y específicas mas usadas en
el laboratorio para las diferentes patologías en hematología .

3.) Cada estudiante deberá realizar un protocolo para la toma de muestra de acuerdo a la lectura del documento del manual de
toma de muestra venosa y capilar .

EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL

En el aula de clase se socializara el taller y la fundamentación encontrada por los diferentes grupos sobre las pruebas básicas
y específicas .
Después de socializar el protocolo elaborado del documento, se realizara una flebotomía con un compañero elegido
previamente en la práctica, dicha actividad requiere de un estricto cumplimiento de las normas de bioseguridad , descarte de
desechos y los cuidados observadas en el video .
El estudiante tendrá que explicar al docente y sus compañeros cuales son los requerimientos necesarios en el laboratorio
cuando tiene en sus manos una orden para la toma de muestra en un examen de hemograma.

Bibliografía requerida
Manual de toma de muestras Becton, Dickinson BD
Bibliografía complementaria

              MARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México
               2006.capitulo 2 paginas 21-42.
              RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica
               Panamericana 2005
              DACIE Y LEWIS. Hematología practica. 10 a edición.
              JOAN LUIS VIVES. AGUILAR. Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología , 3 edición 2005.
Motores de búsqueda:
 Base de datos Hinari
 Base de datos Proquest.

      REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología.
      Internet: www.Scielo.org.
      www.genereviews.org




                                                                                                                            31
UNIDAD III

UNIDAD III TEORIA
ERITROPOYESIS




                                 32
1—CICLO DE VIDA Y FISIOLOGIA NORMALES DEL ERITROCITO
 a.) Eritropoyesis
 b.) Eritropoyetina
 c.) Trastornos de la eritropoyetina
 d.) Aumento de eritrocitos

2- DESARROLLO Y MADURACION DE LOS ERITROCITOS
  a.) Características generales
  b.) Etapas del desarrollo
  c.) Maduración defectuosa
  d.) Reticulocitos

3- CARACTERISTICAS Y PROPIEDADES DE LA HEMOGLOBINA
 a.) Composición química y configuración de La Hemoglobina
  b.) El papel del 2,3-difosfoglicerato
  c.) Disociación y alteraciones en la disociación del oxigeno
  d.) Transporte del dióxido de carbono
  e.) Síntesis de la Hemoglobina
  f.) Tipos, formas variantes y herencia de Hemoglobinas normal

4.) CARACTERISTICAS DE MEMBRANA Y ACTIVIDADES METABOLICAS DE LOS ERITROCITOS
 a.) Características de membrana
 b.) Característica citoplasmáticas
 c.) Actividades Metabólicas
d.) Catabolismo de los eritrocitos

5 ) MEDICION DE LOS ERITROCITOS
  a.) Volumen corpuscular medio
  b.) Hemoglobina corpuscular medio
  c.) Concentración media de hemoglobina corpuscular




                                                                               33
6.) MORFOLOGIA E INCLUSIONES DE LOS ERITROCITOS
 a.) Eritrocitos normales y anormales
  b.) Alteraciones en tamaño y forma
  c.) Alteraciones en el color
  d.) Inclusiones eritrocitaria

7.) CLASIFICACION Y EVALUACION DE LAS ANEMIAS EN EL LABORATORIO
 a.) Causas de anemias
  b.) Signos y síntomas clínicos de la anemia
  c.) Clasificación de las anemias
  d.) Valoración de laboratorio de las anemias teniendo en cuenta las bases químicas, fisiológicas,
    genéticas y biología molecular.

8. ANEMIAS POR PERDIDA DE SANGRE AGUDAS Y CRONICA
 a.) Anemia por perdida aguda de sangre : Etiología, datos de laboratorio.
 b.) Anemia por perdida crónica de sangre : Etiología

9.ANEMIA APLASICA Y RELACIONADAS
 a.) Anemia aplásica ; Etiología, fisiopatología, características clínicas, datos de laboratorio
 b.) Anemia de Fanconi: Signos y síntomas , datos de laboratorio
 c.) Trastornos relacionados como aplasia eritrocitaria pura , Anemia diseritropoyética congénita :
   Fisiología y datos de laboratorio

10.) ANEMIAS HIPOCROMICAS Y TRASTORNOS EN EL METABOLISMO DEL HIERRO
 a.) Anemia por perdida de hierro : Etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas,
  datos de laboratorio.
 b.) Anemia por trastornos inflamatorios o crónicos : Etiología, Fisiopatología,
   datos de laboratorio.
 c.) Anemia Sideroblástica: Etiología, fisiología, datos de laboratorio
 d.) Hemocromatosis Hereditaria: clasificación y etiología , datos de laboratorio.

11.) ANEMIA MEGALOBLASTICA
 a. Anemia Megaloblástica: Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntoma
  datos por el laboratorio.




                                                                                                      34
b.) Anemias no megaloblásticas

12.) ANEMIAS HEMOLITICAS
 a.) Anemia hemolítica hereditaria: Etiología, fisiopatología, pruebas diagnósticas.
 b.) Hemoglobinuria paroxística nocturna: Etiología, epidemiología, fisiología,, signos y síntomas,
   datos de laboratorio.
  c. Anemia hemolítica adquirida: Etiología .
  d.) Anemia hemolítica por mecanismos inmunitarios.
  e.) Anemia hemolítica por agentes físicos

13 HEMOGLOBINOPATIAS
 a.) Enfermedad de células falciformes : Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntomas
   clínicos, datos por el laboratorio .
  b.) Talasemia (Beta ) Etiología, fisiología, datos de laboratorio,

GLOBULO ROJO

Abordaje teórico
El eritrocito maduro es un disco bicóncavo con una palidez central que ocupa el tercio medio de la célula. Cerca del 33 % del
volumen de la célula madre consiste en la proteína respiratoria hemoglobina, que realiza la función de transporte de oxigeno y
dióxido de carbono. Con un promedio de vida de 120 días, esta célula blanda y flexible se mueve con facilidad por los capilares
titulares y la circulación esplénica. Con forme la célula envejece, las enzimas citoplasmáticas se catabolizan, lo que aumenta la
rigidez de la membrana, y conduce a la destrucción mediante la fagocitosis por los macrófagos.

HEMOGLOBINA

Abordaje teórico

La hemoglobina es una heteroproteína de la sangre, de peso molecular 68.000, de color rojo característico, que transporta el
oxígeno desde los órganos respiratorios hasta los tejidos, en mamíferos y otros animales. La forman cuatro cadenas
polipeptídicas (globina) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo átomo de hierro es capaz de unirse de forma
reversible al oxígeno. La hemoglobina se encuentra en el interior de los glóbulos rojos.
La hemoglobina es la proteína transportadora de oxigeno. Representa en promedio el 32% de la masa total del eritrocito.
La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno como para




                                                                                                                              35
bicarbonato por parte del eritrocito. Tanto la concentración de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa
el número de eritrocitos.

Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de hemoglobina es superior al
hematocrito y al recuento de eritrocitos. Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes
anémicos) están definidas por la concentración de la hemoglobina.

La determinación de la hemoglobina por métodos electrónicos, se obtiene por el método de la cianometahemoglobina que
determina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la carboxihemoglobina, mediante un pequeño
hemoglobinómetro incorporado al equipo.

El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para la Estandarización de Hematología
(ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más recomendado.

Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares satisfactorios y la capacidad de
cuantificar todas las formas de Hb de importancia clínica. Es el método de elección para efectuar estudios científicos sobre
anemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pública. (González, 2005)

METABOLISMO DEL HIERRO

El contenido en hierro del organismo y su distribución se resume en la siguiente tabla:

                                     DISTRIBUCION DEL HIERRO EN EL ORGANISMO
                   PROTEINA                            LOCALIZACION                         CONTENIDO EN HIERRO (mg)
                  Hemoglobina                              Hematíes                                  3.000
                   Mioglobina                               Músculo                                   400
   Citocromo y proteínas con hierro y azufre           Todos los tejidos                               50
                  Transferrina                   Plasma y liquido extravascular                        5
           Ferritina y Hemosiderina               Hígado, Bazo, Médula Osea                        100- 1000


La mayor parte del hierro se encuentra en la proteína transportadora del oxigeno en los hematíes : La Hemoglobina . El
recambio metabólico del hierro esta dominado por la síntesis y degradación de la hemoglobina. El grupo Hemo se sintetiza en
los hematíes nucleados en la médula ósea a través de una ruta que finaliza con la incorporación del hierro en la protoporfirina



                                                                                                                            36
IX mediante la ferroquelasa. La ruptura del grupo hemo se produce en las células fagocíticas , principalmente en el bazo,
hígado y la médula ósea. El hierro se libera del grupo hemo por la hemoxigenasa y se reutiliza en su mayor parte para
sintetizar el hemo. Cada día se usan alrededor de 30 mg de hierro para fabricar nueva hemoglobina y la mayor parte de esta
se obtiene de la lisis de los hematíes viejos .
La cantidad de hierro perdida por el organismo es de 1 mg/ día en los hombres , en las mujeres la menstruación y el parto
incrementan la perdida de hierro en 2 mg/día. Es posible que la absorción de hierro no aumente lo suficiente para compensar
esta perdida debido a esto aparece la anemia ferropénica.
La proteína fijadora del hierro , la transferrina , es responsable del transporte extracelular , la mayoría de las células obtienen el
hierro a partir de la transferrina . El hierro se une a los receptores de la transferrina en la superficie celular y luego se produce
un intercambio con la liberación del hierro en las células y la devolución de la apotransferrina (proteína sin hierro) al plasma
para ser reciclado.

METABOLISMO DE LA VIT B 12 Y ACIDO FOLICO.

La investigación del estado del folato y de la vitamina B12 en los individuos no está restringida a la investigación de los que
presentan las características de anemia megaloblástica , ya que en el déficit de Vitamina B12 se pueden producir cambios
neuropáticos y neurosiquiátricos en ausencia de macrocitos y anemia .Se ha postulado que valores elevados de Homocisteína
plasmática y de Acido metilmalónico ( AMM) séricos podrían ser indicadores sensibles del déficit , incluso subclínico , de
folatos y cobalamina.

Una deficiencia de Vitamina B12 y de folatos ocasionan alteraciones en la Hematopoyesis ya que originan una anomalía en la
síntesis de DNA y como consecuencia anemias con alteraciones megaloblásticas ( eritrocitos grandes y asincronismo
madurativo).

Es importante que se conozca como se ingieren y absorben la vitamina B12 y el ácido fólico, pues es la clave para el
diagnóstico etiológico. Dentro del déficit de la vitamina B12 se incluye la anemia perniciosa. El diagnóstico requiere de un
hemograma (hemoglobina baja y VCM alto), examen de medula ósea (cambios megaloblásticos) y de determinaciones
bioquímicas (Vit. B12 y Acido fólico).




                                                                                                                                   37
MORFOLOGIA CELULAR EN FROTIS DE SANGRE PERFERICA

Observación de la Línea Eritroide DOCUMENTO APORTADO POR LA DOCENTE


ANEMIAS

Los tejidos del organismo requieren oxígeno continuamente, nutrientes y electrolitos para su función normal, en estados de
anemias el aporte de O2 a los tejidos es inadecuado debido a la disminución en la capacidad transportadora de este gas por la
masa eritrocitaria circulante.
La anemia no es una enfermedad sino un signo o síntoma que como la fiebre, el dolor, la cefalea y la fiebre está relacionada
con muchas enfermedades y como en todos estos casos, el médico antes de tratar el síntoma, debe identificar la causa e
intervenirla. Frente a un paciente con anemia el médico debe tener como principal objetivo establecer el diagnóstico, incluido el
tipo de anemia y su causa. (Campuzano, 2007).
Cuando la anemia se instaura en un periodo de días o semanas, el volumen total de sangre es normal o aumentado, a
expensas del plasma y los cambios que se producen en el gasto cardíaco y en el flujo sanguíneo, facilitan la compensación de
la pérdida global de la capacidad de transporte de O2. Los cambios de la posición de la Curva de disociación de O2-
Hemoglobina explican en parte la respuesta compensatoria frente a la anemia.

DOCUMENTO SOBRE ANEMIAS DEL DR. GERMAN CAMPUZANO ,DADO POR EL DOCENTE

En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la Eritropoyesis e
interpretar las alteraciones morfológicas y las inclusiones de los eritrocitos.


           COMPETENCIAS                                                           LOGROS
1. Capacidad de Interpretar el ciclo     I. Reconozco los diferentes procesos para la producción de eritrocitos
de vida y fisiología normales del        II. Explico las condiciones normales que estimulan la producción de
eritrocito                                  Eritropoyetina.
                                             III. Establezco la diferencia entre los términos policitemia secundaria y
                                             policitemia relativa




                                                                                                                              38
2. Demostrar comprensión en el           I. Describo las principales características morfológicas de cada etapa de
desarrollo y maduración del eritrocito      Maduración del eritrocito.
                                         II. Explico los sucesos que ocurren durante la maduración de los reticulocitos
                                         III. Defino el concepto de reticulocitos de estrés.
3. Capacidad de expresar las             I .Describo la configuración química de la Hemoglobina normal del adulto
características y propiedades de la      II. Relaciono el papel fisiológico del 2,3-difosfoglicerato en la oxigenación de
Hemoglobina                                  La molécula de hemoglobina.
                                         III. Describo el efecto Bohr
                                         IV. Describo brevemente la síntesis del Hem
                                         V. Reconozco la síntesis y el mecanismo de transporte e inserción del hierro
                                             en la producción de hemoglobina.
4. Capacidad de Describir las            I. Explico las diferentes vías metabólicas en el eritrocito
características de membrana y            II. Conozco las principales características de la membrana del eritrocito
actividades metabólicas de los           III Conozco las principales características citoplasmáticas
eritrocitos                              IV. Describo e interpreto el catabolismo de los eritrocitos extravascular e
                                            Intravascular.
   5. Para evaluar los trastornos de     I. Conozco los procedimientos que valoran las cantidades de eritrocitos o
   los     eritrocitos  debe      hacer  hemoglobina.
   mediciones cuantitativas y evaluar
   el frotis de sangre periférica como II. Interpreto los valores normales para los eritrocitos ,hemoglobina,
   información básica.                  Hematocrito de acuerdo a los diferentes grupos de edad.

                                         III. Conozco e interpreto los índices eritrocitarios como: volumen corpuscular medio
                                         (VCM),Hemoglobina corpuscular media (HCM),                   concentración media de
                                         hemoglobina corpuscular (CMHC)
                                         IV. Aplico las formulas apropiadas y calculo el VCM, HCM y CMHC cuando me
                                         aportan los valores de eritrocitos.
   6. El estudiante debe reconocer       I. Relaciono las alteraciones observadas en el tamaño del eritrocito .
   las diferentes alteraciones en el     II. Relaciono las alteraciones de la forma del eritrocito.
   tamaño, forma, color e inclusiones    III. Interpreto las variaciones del color del eritrocito.
   de los eritrocitos.                   IV. Identifico las inclusiones observadas en el eritrocito.
                                         V. Reconozco las inclusiones parasitarias en los eritrocito




                                                                                                                           39
EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:

Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante dará
respuesta al siguiente taller :

1.Qué Función cumple el eritrocito?

2.Cuales son los componentes de la membrana del eritrocito, cual es su función y qué importancia tienen. Qué implicaciones
trae su ausencia.

3.Qué entiende por Eritropoyesis.

4.Como explica el concepto de Eritropoyesis ineficaz?
5.Qué importancia tiene el recuento de reticulocitos? Sustente la respuesta.
6. Que sustancias alimenticias son necesarias para la maduración nuclear y citoplasmática, las cuales evitan las llamadas
anemias carenciales.
7.Defina Hemólisis.
8.Que funciones ejerce la EPO.(eritropoyetina) y donde se origina.
9.Elabore un mapa conceptual de la hemólisis intravascular y extravascular,
10.Mediante un esquema realizo una presentación de la estructura de la hemoglobina.
11.Que importancia tiene el efecto Bohr y Aldane en el transporte de oxigeno.
12.Esquematice la curva de disociación de hemoglobina.
13.Qué importancia tiene el 2,3 DPG en el transporte de oxigeno?


TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL

Mediante un debate en el aula se socializa el taller y los mapas conceptuales de la hemólisis intravascular y extravascular, esto
permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los
estudiantes.




                                                                                                                              40
Bibliografía requerida.
TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. Edición 2006.Capitulo 5,6,7,8,9,10,11,12,13. , Paginas
79- 191.


BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA
NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. 2da. edición
2008 cap. 3 Pág. 26-47
RUIZ, Arguelles. G, J. Fundamentos de Hematología. Tercera edición 2001.
RODAK, Bernadette F. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Segunda edición 2005. Capitulo 7, Paginas 83-97
MCKENZIE, Shirlin. Hematología clínica. Segunda edición 2000. Capitulo 3, paginas 39-64

MOTORES DE BUSQUEDA

    Hinari.
    Proquest.
    REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología.
    Internet: www.Scielo.org.
    www.genereviews.org



En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la clasificación y
evaluación de las anemias en el laboratorio.

                  COMPETENCIAS                                                         LOGROS
1. Argumentar con claridad las causas de la          I. Conozco las alteraciones fisiológicas de las diferentes anemias
anemia.                                              II. Explico los factores que contribuyen con la anemia
2. Capacidad de Reconocer los diferentes signos      I. Interpreto las causas , signos y síntomas de la anemia.
y síntomas de las diferentes anemias .               II. Describo las molestias más frecuentes en pacientes anémicos.
3. Demostrar coherencia en la interpretación de la   I. Relaciono las alteraciones morfológicas observadas en el frotis
clasificación de las anemias teniendo en cuenta la     de sangre periférica .
morfología, fisiología y la posible etiología.       II. Reconozco las pruebas de laboratorio que se utilizan como
                                                       ayudas en el diagnóstico de las anemias .




                                                                                                                          41
III. Identifico otras pruebas específicas para las ayudas
                                                     Diagnósticas de las anemias.
4.Reconocer las diferencias en las anemias por    I. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida aguda
pérdida de sangre aguda y crónica.                  de sangre.
                                                  II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología
                                                    en la pérdida aguda de sangre.
                                                  III. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida crónica
                                                    de sangre.
                                                  II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología
                                                    en la perdida crónica de sangre
5. Capacidad de expresar el concepto de una       I. Conozco la etiología, fisiopatología ,las características clínicas y los
anemia aplásica y el grupo que se relaciona con   datos de laboratorio que se puedan relacionar con este grupo de
ellas .                                           anemias .
6. Capacidad de expresar el concepto de una       I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los
anemia hipocrómica y los trastornos en el         datos por el laboratorio.
metabolismo del hierro.                           II. Establezco la diferencia entre la anemia ferropénica y las anemias por
                                                  trastornos inflamatorios o crónicos.
                                                  III. Interpreto el metabolismo del Hierro
7. Capacidad de expresar el concepto de las       I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los
anemias megaloblásticas,                          datos por el laboratorio.
                                                  II. Establezco la diferencia entre la anemia megaloblástica y no
                                                  megaloblástica.
                                                  III. Interpreto el metabolismo de la vitamina B12 y los folatos
8. Capacidad de expresar el concepto de una       I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los
anemia hemolítica .                               datos por el laboratorio.
                                                  II. Establezco la diferencia entre la anemia hemolíticas hereditarias
                                                    Y anemias hemolíticas adquiridas.

9. Capacidad de interpretar las Pruebas de I. Reconozco algunas de las pruebas de biología molecular para el
Biología Molecular mas utilizadas para el diagnóstico de algunas anemias.
diagnóstico de algunas anemias.




                                                                                                                           42
EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL:
Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante dará
respuesta al siguiente vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicas encontradas en los eritrocitos
Anexo 1

TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL

Mediante un debate en el aula se socializa el vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicas
encontradas en los eritrocitos, esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación
del conocimiento de los estudiantes.


UNIDAD III PRACTICA

1- PRINCIPIOS Y METODOS DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA, TINCION DE
 WRIGHT.
 Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.
2- DETERMINACION DE HEMOGLOBINA , HEMATOCRITO
 Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.
3. DETERMINACION DE RETICULOCITOS
 Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.
 4. DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION
  Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.
 5. RECUENTO DE LEUCOCITOS .
  Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio.
3-HEMOGRAMA MANUAL.
4- HEMOGRAMA AUTOMATIZADO

5- OBSERVACION DE LA MORFOLOGIA NORMAL Y ANORMAL DEL ERITROCITO
 Con los parámetros de la OMS.
6- OBSERVACION DE LAS INCLUSIONES ERITROCITARIA
  Con los parámetros de la OMS.
7- PRUEBAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO CLINICO PARA EL DIAGNOSTICO DE
 ANEMIAS .



                                                                                                                              43
En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender los principios y
métodos del extendido de sangre periférica y la coloración de Wright, también le permitirán tener claridad sobre el
hemograma manual y automatizado , recuento de reticulocitos VSG, recuento de leucocitos.

               COMPETENCIAS                                                       LOGROS
1. Aplicar los conocimientos para realizar un   I. Comprendo el método para un frotis de sangre periférica y una coloración con
buen frotis de sangre periférica                buen control de calidad.
2. Capacidad de Analizar e interpretar y        I. Conozco el fundamento de la determinación de los procedimientos del cuadro
correlacionar     los   procedimientos    del   hemático manual ( Eritrograma)
Eritrograma (Frotis de sangre periférica,
coloración de Wright, determinación de          II. Identifico equipos, materiales, reactivos y procedimientos que se utilizan para
hemoglobina y hematocrito, citología            realizar el cuadro hemático manual en el laboratorio clínico.
eritrocitaria, manual.)
                                                III. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos del
                                                cuadro hemático manual ( Eritrograma)

                                                IV. interpreto y correlaciono las alteraciones de un hemograma en las anemias
                                                más comunes que se evidencien en el laboratorio.

                                                V. Reporto las alteraciones morfológicas en el frotis de sangre periférica de las
                                                patologías más comunes encontradas en el laboratorio.
                                                VI. interpreto el control de calidad aplicado en los procedimientos del
                                                hemograma manual .
3. Capacidad de Analizar e interpretar y        I. Conozco el fundamento para la determinación de la VSG. y la correlaciono
correlacionar     los   procedimientos   de     con la clínica .
Velocidad de sedimentación globular y su        II Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos de la
importancia clínica .                           VSG.
4. Capacidad de Analizar e interpretar y        I. Conozco el fundamento para el conteo de reticulocitos y su importancia
correlacionar los procedimientos para el        clínica .
recuento de reticulocitos , y su importancia    II. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos de
clínica .                                       los reticulocitos.
5. Demuestro capacidad de analizar e            I. Conozco el fundamento para el conteo de leucocitos
interpretar el recuento de leucocitos.          II. Adquiero habilidades y destrezas en los cálculos y conteo en cámara de
                                                leucocitos.



                                                                                                                                 44
6.Capacidad de Interpretar      el   cuadro I. Interpreto el cuadro hemático automatizado ,incluyendo las alarmas .
hemático automatizado.                      II. Identifico el principio de la impedancia eléctrica y la dispersión de la luz.
                                            III. interpreto el control de calidad aplicado en los hemogramas


ABORDAJE TEORICO DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA Y LA COLORACION DE WRIGHT




                                                                                                           HEMATOLOGIA
                                                                                           RODAK


El estudio de las células sanguíneas por medio de la observación en un microscopio de las preparaciones coloreadas,
conocido como ESP, ha sido uno de los exámenes más antiguos e importantes en el laboratorio clínico. La práctica del ESP es
de gran utilidad en hematología ya que permite visualizar la morfología celular, estimar el número de células en sangre
periférica y determinar la eventual presencia de elementos atípicos. Los resultados obtenidos con este estudio son un reflejo
del funcionamiento de la médula ósea y de los factores que influyen en las diferentes poblaciones celulares.

El extendido de sangre periférica permite la evaluación del estado de maduración de las células sanguíneas , las
características tinto riales, el contenido de los gránulos, las inclusiones y formas celulares, una adecuada orientación en la
evaluación de la respuesta inmune , todo lo cual se correlaciona con la fisiopatología de ciertas enfermedades, permitiendo
esto un manejo inicial simplificado de los pacientes.




                                                                                                                                45
TINCION DEL FROTIS DE SANGRE PERIFERICA

El propósito de teñir los frotis sanguíneos es identificar las células y reconocer fácilmente la morfología a través del
microscopio . La tinción de Wright o Wright- Giemsa es la más utilizada con mayor frecuencia en el frotis de sangre periférica y
médula ósea. Ambas contienen eosina y azul de metileno , por lo tanto , se denominan tinciones policromáticas .
Las células se fijan sobre el portaobjetos con el metanol de la tinción . Las reacciones de tinción dependen del Ph; y la tinción
real de los componentes celulares sucede cuando se agrega una solución amortiguadora (pH 6,4) a la tinción . El azul de
metileno libre es básico y tiñe de azul los componentes celulares ácidos como por ejemplo, el RNA. La eosina libre es ácida y
tiñe de rojos los componentes básicos , como la hemoglobina o los gránulos eosinófilos . Los neutrófilos posen gránulos
citoplasmáticos que tiñen pH neutro y admiten algunas características de ambas tinciones.

Un frotis teñido de manera adecuada tiene las siguientes características :
   1. Los eritrocitos deben ser de color rosa a salmón
   2. Los núcleos son de color azul oscuro a violeta
   3. Los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos son de color lila
   4. Los gránulos citoplasmáticas de los basófilos son de color azul oscuro a negro.
   5. Los gránulos citoplasmáticas de los eosinófilos son de color rojo a anaranjado.
   6. El área entre las células deben estar limpia y libre de precipitado de colorantes.

   Los mejores resultados de la tinción se obtienen de frotis recientemente preparados en un periodo de 2 a 3 horas de
   recolectada la muestra. Los frotis se deben dejar secar completamente antes de teñirse .Carr Rodak.

FUNDAMENTO DE LA TECNICA DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA

Consiste en la extensión de una gota de sangre sobre un portaobjeto (25 x 75 mm) mediante una lámina con borde
esmerilado.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales
Sangre venosa con K2- EDTA o sangre capilar
Alcohol de 70ºC
Algodón
Lanceta descartable




                                                                                                                              46
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  • 1. UNIVERSIDAD CATOLICA DE MANIZALES FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA AREA: HEMATOLOGIA MODULO DE CELULAS SANGUINEAS UNIDADES: I, II, III, IV PRIMER PERIODO ACADEMICO 2011 DOCENTE: Esp. CLARA GIRALDO ARIAS 1
  • 2. I. PRESENTACION DEL MODULO DE HEMATOLOGIA CELULAS Este módulo de Hematología, nos permite tener un acercamiento a la Hematología Clínica ya que es la rama de la medicina interna que se apoya más intensamente en las pruebas complementarias de laboratorio. Dicho de otro modo, una buena fundamentación científica sobre la Hematología Teórica le va a permitir una buena correlación clínica y destrezas en la realización de las técnicas de laboratorio, siendo una de la esencia de un adecuado ejercicio de la Hematología Clínica. C. ROZMAN La Hematología es una especialidad que requiere para su adecuado ejercicio de una gran cantidad de métodos de laboratorio a los que el hematólogo recurre para confirmar una hipótesis diagnóstica, elaborada con los medios clínicos clásicos de la anamnesis y la exploración física. De ahí que las técnicas analíticas suelen construir un eslabón importantísimo en el proceso diagnóstico de las enfermedades Hematológicas y por esta razón sean de interés no solo para los profesionales del laboratorio, sino para los hematólogos clínicos e incluso para el médico general. De ahí la gran utilidad de que haga las revisiones bibliográfica propuesta por el docente de hematología en las diferentes unidades del módulo. En este sentido las Unidades promueven en el estudiante el control sobre los propios esfuerzos cognitivos tales como: 1. Las experiencias realizadas en el laboratorio le permiten una confrontación del conocimiento. 2. Pone a prueba y modifica las técnicas de aprendizaje. 3. Identifica y selecciona las fuentes de información relevantes al tema tratado. 4. Integra los conocimientos adquiridos de semestres anteriores con los nuevos conocimientos 5. El estudiante y el tutor se encuentran como personas capaces de autorrealizarse. "( Documento proyecto de asignatura de Hematología, 2008) Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación de personas con un factor humano, con gran apertura, comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres, participativas y democráticas con un nuevo sentido de investigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo de las Unidades se plantean estrategias para el desarrollo de aprendizajes significativos tales como talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales y procesos individuales, casos problemas, casos clínicos, mapas mentales, VAC (vocabulario asociativo científico). El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollar durante el semestre. 2
  • 3. II. OBJETO DEL MODULO: Desarrollar competencias para interpretar la hematopoyesis III. ENFOQUE METODOLOGICO DEL MODULO Este modulo posee un abordaje teórico y práctico. Durante el desarrollo de las unidades se conduce a la formación de personas con un factor humano, con gran apertura, comprensivas, creativas, originales, singulares, investigadoras, libres, participativas y democráticas con un nuevo sentido de investigación y de proyección a la comunidad. A través del desarrollo de las Unidades se plantean estrategias para el desarrollo de aprendizajes significativos tales como mapas mentales, protocolos, talleres, guías de trabajo, confrontación bibliográfica, procesos grupales y procesos individuales, casos problemas, casos clínicos, VAC (vocabulario asociativo científico). El estudiante va ha encontrar un mapa conceptual generalizado donde se han incluido todas las temáticas a desarrollar durante el semestre. IV. COMPETENCIAS ESTABLECIDAS UNA VEZ TERMINADO EL MODULO: El desarrollo de estas, permiten formar profesionales con destrezas y habilidades prácticas en hematología con apropiación de conceptos fundamentales de la hematopoyesis normal y anormal, que le permiten diseñar, ejecutar, evaluar e interpretar los procesos cualitativos y cuantitativos del tejido hematopoyético. 3
  • 4. MAPA CONCEPTUAL DE HEMATOLOGIA UNIDAD UNO 4
  • 5. GENERALIDADES 1. HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEAS 2. CELULA Y LA FUNCION 3. CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGRE ♦Definición ♦Función de la sangre ♦Propiedades físicas de la sangre 4. SISTEMA HEMATOPOYETICO A continuación encontrará en cada una de las unidades del modulo, unos Fundamentos y enfoques teóricos y prácticos, desde la perspectiva profesional, disciplinar, investigativa y pedagógica y, en coherencia con las normas que regulan el ejercicio de la profesión que le permitirán guiar las temáticas incluidas en el modulo. 1- HISTORIA DE LAS CELULAS SANGUINEAS En este documento el estudiante va a encontrar una breve historia de la hematología ya que esta es una especialidad de larga y rica historia científica, también podrá recordar y reconocer los esfuerzos de quienes contribuyeron con su genio y dedicación a lograr los grandes avances que conformaron la hematología que conocemos actualmente, ya que esta es no solamente de gran utilidad, sino extremadamente valioso para afrontar los retos del futuro. Bienvenidos a la hematología. El termino de célula madre se utilizo por primera vez en hematología en 1896, cuando Pappenheim propuso la existencia de una célula precursora capaz de dar origen a las estirpes celulares de la sangre, las células madres se pueden clasificar en totipotenciales, pluripotenciales, multipotenciales y según el tejido de origen en células madres embrionarias o adultas . La primera evidencia de la existencia de células madre hematopoyéticas en el ser humano surgió en 1945, cuando se observo que individuos que habían sido expuestos a dosis letales de radiaciones podían ser rescatados mediante un transplante de médula ósea de un donador sano, permitiéndole regenerar el tejido sanguíneo. En el decenio de 1930 se descubre la anemia microcítica hipocrómica producida por deficiencia de hierro , cuando se observó múltiples agujeros diminutos en el cráneo de los esqueletos de la prehistoria , fue allí cuando el ser humano paso de cazador a 5
  • 6. agricultor y su dieta se baso en el maíz , siendo muy notable la deficiencia de hierro . En 1931 Kaznelson descubre el signo de la coiloniquia en la “Mano de Lydney”, escultura en bronce de un antebrazo y mano de la cultura celta, que muestra claramente las uñas en forma de cuchara, típicas de la anemia por deficiencia de hierro (ADH). Esta deficiencia siempre ha sido más frecuente en los estratos pobres de la sociedad. Van Leeuwenhoek alrededor del año 1700 fue el que hizo descripciones microscópicas de los eritrocitos. Años antes, William Harvey había postulado su teoría de la circulación sanguínea sin el beneficio del microscopio. Un momento decisivo llegó como consecuencia del trabajo destacado por Paul Erlich, quien, cuando era estudiante desarrolló los métodos de tinción celular con anilinas, lo que permitió el estudio de la morfología de la sangre periférica y con ella el nacimiento de la hematología como ciencia. Aunque antes de Erlich ya se podían contar los eritrocitos, la medición confiable de la Hemoglobina fue posible hasta el siglo XX, lo que explica el retraso de la definición de ADH. Es necesario también considerar que los recuentos de eritrocitos permanecen casi normales en la ADH, lo cual dificultó su reconocimiento; además, se suponía que no había deficiencia de las sustancias abundantes en la naturaleza, como el hierro, cuya presencia en la sangre la estableció Magendie en el año de 1747 cuando calentó sangre hasta obtener cenizas y demostró que los residuos eran atraídos por un imán o magneto, por lo que dedujo la presencia de hierro en la sangre. En 1902, en Basilea, Bunge escribió que el consumo habitual de los alimentos deficientes en hierro podían conducir a anemia; él mismo demostró que la leche humana posee hierro en escasa cantidad, y afirmó que, aunque la deficiencia dietética de este mineral era casi inimaginable, ningún alimento por sí mismo contenía suficiente hierro como para ser eficaz en el tratamiento de su deficiencia. En 1932 Hutchinson afirmó que el hierro no se obtiene fácilmente de la dieta y concluyó que….” el hierro contenido en la hemoglobina y sus derivados es muy mal absorbido”. Sin embargo, creía, como Bunge, que este mineral en el entorno era suficiente y que la complementación era innecesaria. Este concepto cambiaría como resultado del extenso y brillante trabajo de investigación de la anemia en niños que desarrolló Helen Mackay en Viena después de la segunda Guerra Mundial. Entidades clínicas de interés histórico en la deficiencia del hierro: el mal de amor y la enfermedad de las vírgenes Estos cuadros, descritos inicialmente en 1554 por Johann Large, también denominados” clorosis” o “enfermedad verde “, fueron muy populares entre los médicos de los siglos desde XVII y hasta principios de XX. Se refieren a un cuadro de anemia hipocrómica en mujeres adolescentes relacionado con alteraciones gastrointestinales y trastornos menstruales. La coloración verde descrita por muchos médicos a lo largo de estos períodos dificultó explicar la clorosis con una simple ADH. Tal vez una explicación razonable es la que expuso Crosby en 1955, quien razonó que estos casos se debían a una combinación de desnutrición proteínica y deficiencia de hierro. Ya antes, Andril había comentado sobre la presencia de eritrocitos muy pequeños en la clorosis, la cuál continuó vinculándose con el desarrollo de la sexualidad en los jóvenes adolescentes y la posible relación de un trastorno temporal de la eritropoyesis con el desarrollo de los órganos de la reproducción. En esta época se utilizaba como tratamiento para la deficiencia de hierro un jarabe preparado con virutas de hierro en vino endulzado y 6
  • 7. hervido, así como beber agua de la región de Spa, en Bélgica, en donde las principales enfermedades tratadas eran la clorosis y la anemia. Ya que estas aguas eran ricas en bicarbonato de hierro. En 1832, Blaud inicio el uso de píldoras que contenían 1.4 g de sulfato ferroso, en tanto que Osier pensaba que el hierro era más eficaz si se combinaba con el arsénico. Hacia el siglo XIX desapareció la clorosis sin una razón aparente y se especulo que esto se debió a una mejoría en la dieta, a las circunstancias socioeconómicas y una reducción de la tasa de infección. En 1931, dos publicaciones de Davies y Witts aclararon de manera definitiva el papel que juega el hierro en la ADH del adulto. Además Davies, en su articulo señaló que el hierro se extendía a los epitelios y la piel, pues los cambios en las uñas, lengua y esófago de los pacientes con aclorhidria, y anemia mostraban mejoría después de recibir tratamientos de hierro. En el mismo año. 1931, Witts concluyó que la anemia se debía a la incapacidad para formar hemoglobina (Hb) como resultado de la cantidad reducida de hierro en la sangre; señaló que muchas de las mujeres que padecían la anemia ingerían hierro en cantidades insuficientes a partir de sus alimentos. En 1924 Hurst demostró la ausencia de ácido en el jugo gástrico de los pacientes con AP. Quizás el primer caso de anemia perniciosa (AP), una anemia megaloblástica debida a la atrofia de la mucosa del cuerpo del estómago por factores auto inmunitarios, lo descubrió Osier en Canadá, cuyo paciente padecía hipoestesia de los dedos, manos y antebrazos; sus glóbulos rojos eran muy grandes y su estomago se encontró atrófico durante la necropsia. Un avance significativo en el estudio de las anemias ocurrió en el año 1880 cuando Paul Ehrlich, realizo en un paciente con un caso de anemia perniciosa (AP) una tinción de anilina en un (FSP) que secaba con calor; y de esta manera, fue capaz de hacer la distinción morfológica entre los normoblastos en el FSP después de la anemia aguda por hemorragia y las enormes células que denominó “megaloblastos” en los AP. Fue hasta 1921 que Zadek observó los megaloblastos in vivo; dos años después, en 1923, Naegeli descubrió por primera vez los neutrófilos hipersegmentados en la AP. Casi un decenio después, en 1932, Temka y Braun descubrieron los metamielocitos gigantes en la médula ósea (MO) de pacientes con AP. Más de dos decenios transcurrieron después de los trabajos de Minot para aislar un compuesto rojo y cristalino que en 1948 se denomino “cobalamina”. Estos esfuerzos los encabezó Dorothy Hodgkin, quien por ello recibiría el Premio Nobel de Química en 1964. En el año de 1924 y 1934 se produjo una serie de descubrimientos relacionados con las anemias carenciales. Los tres más importantes fueron el hallazgo de una cura para la AP por Minot, la descripción del factor intrínseco (FI) y factor extrínseco (FE) por Castle y el descubrimiento por Lucy Wills de una sustancia en la levadura capaz de corregir la anemia megaloblástica del embarazo, caracterizada después como folato. El ácido fólico se aisló de la espinaca en 1941. En 1943 se trabajo en los laboratorios en el descubrimiento de los folatos. El termino “folato” se usa para designar los compuestos que poseen la misma actividad de vitamina, e incluye a los folatos naturales y al ácido fólico sintético. 7
  • 8. Una supervivencia disminuida del eritrocito en la circulación es el dato esencial de la existencia de una anemia hemolítica (AH). Es necesario distinguir si se trata de un problema adquirido o heredado. En 1945 Robin Coombs introdujo en la práctica clínica la prueba de la antiglobulina humana (AGH), que sirvió para lograr la aceptación de la existencia de las formas adquiridas de la AH al proporcionar un método objetivo para distinguirlas de la hereditaria. Claudio Galeno, médico del emperador Marco Aurelio, descubrió el primer caso de hemólisis, en un esclavo cazador de serpientes que fue mordido por una de estas. Este era el cuadro de una hemólisis intravascular aguda. Luego Johannis Actuarius en Constantinopla al final del siglo XIII descubrió una AH, en donde la orina era oscura después de la exposición de un clima gélido, lo que se atribuyo a una enfermedad renal. Esta anemia posteriormente fue la hemoglobinuria paroxística al frío. Otra descripción de AH fue la realizada por Vanlair y Masius, en 1871 en una mujer con un cuadro repetitivo de ictericia, dolor en el cuadrante superior derecho y esplenomegalia .Esta descripción que se hizo en sangre correspondía a la presencia de esferocitos, a la que se le llamaron “microcitos “dados su diámetro de solo 3 y 4 µm. El francés investigador Chauffard, contribuyo en el diagnóstico de la AH con el descubrimiento de la fragilidad osmótica aumentada de los eritrocitos y la descripción de los reticulocitos. LEUCOCITOS Aunque la palabra “cáncer” fue utilizada por Galeno, no hay evidencias de que en esa poca se conocieran la neoplasia hematológica. De hecho, las primeras observaciones de los eritrocitos las hizo Van Leeuwenhoeken 1674, en tanto que los glóbulos blancos los descubrió el anatomista francés Joseph Lieutaud en 1749, a los que llamó ”globuli albicantes”, un cuarto de siglo antes que el prestigioso anatomista ingles William Hewson describiera el linfocito, en 1774. Hacia el mismo año de 1749 Senac describió” los glóbulos blancos de pus “. De esta manera, el pus y la inflamación eran los conceptos imperantes en la hematología hasta la primera parte del siglo XIX. Un cambio de rumbo en la hematología surge a partir de 1845, cuando John Bennett, en Edimburgo, realizo la necropsia de John Menteith, un paciente de 28 años con un tumor esplénico que falleció con lo que luego Bennett publicó como “Un caso de hipertrofia del bazo e hígado en el que la muerte tuvo lugar por supuración de la sangre “. Concluyó que toda la sangre estaba afectada y que el paciente había sufrido una transformación dentro de su sistema sanguíneo, y no una inflamación. En su informe, dibujó por primera vez las células malignas de un individuo con leucemia. Probablemente este sujeto sufría de una leucemia granulocítica crónica (LGC). Rudolph Virchow, en Berlín, publico el segundo caso de leucemia, el de una mujer de 50 años con una enfermedad crónica y crecimiento del bazo, que murió cuatro meses después. Durante la necropsia, Virchow encontró en todos los vasos 8
  • 9. sanguíneos, lo que describió como una sustancia semejante al pus, con células de características morfológicas que corresponden a una leucemia linfocítica crónica (LLC). El informe de Virchow apareció en noviembre de 1854. En el año de 1940 se había intentado buscar un marcador genético que identificara la LGC, sin éxito. Trascurrieron 20 años de búsqueda para que 1960 Nowelly Hungerford en Filadelfia cultivara la sangre de un pequeño grupo de pacientes con LGC. Sorprendentemente, encontraron un pequeño cromosoma acrocéntrico, que denominaron cromosoma Filadelfia (Ph1 ), siendo en este momento un marcador específicamente ligado a esta neoplasia . Más de un decenio después, 1973, la Dra. Janet Rowley comprobó que no se trataba de una eliminación , sino de una traslocación hacia el cromosoma 9, t(9;22). Ahora se sabe que este protooncogén ABL, que se localiza por lo general en el cromosoma 9 , esta traslocado hacia el cromosoma 22 en pacientes con LGC, creando el producto híbrido del Gen de fusión BCR-ABL, este es ocasionada por una cinasa de tirosina citoplasmática, la cual es inhibida por el imatinib, recientemente descubierto para el tratamiento de estos pacientes con LGC. En 1903, el Dr. F. P. Weber describió el caso de un varón de 50 años con mieloma múltiple (MM) y proteinuria de Bence Jones de 15 g/día. El término “célula plasmática “ lo usó inicialmente Waldeyer en 1875, fueron descritas por Ramón y Cajal, el patólogo en 1890, pensando que estas células hacían parte del tejido conjuntivo. En 1990 Wright publicó el caso de un paciente con MM, la necropsia reveló células ovales grandes con núcleo excéntrico, algunas binucleadas, a las que identifico “células plasmáticas “. En las últimas décadas del siglo XX se ha desarrollado la hibridación in situ; mediante ella se puede detectar en las células secuencias de ADN o ARN determinadas, lo que permite una perfecta compenetración entre la estructura y composición química y organización molecular. Se ha desarrollado también la tecnología de micromatrices o microchips de ADN que incrementa el conocimiento sobre el control de los genes y las variaciones fisiológicas o patológicas en las células procariotas y eucariotas. Frente a estos avances en la investigación, un suceso inesperado puso de manifiesto las limitaciones de la Ciencia actual. En 1981, el Centro de control y prevención de enfermedades (Atlanta), alertaba de una nueva pandemia, el síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El SIDA ha sustituido a la peste negra como mayor azote histórico de la civilización occidental y su expansión constante ha coincidido con la emergencia de microorganismos resistentes a fármacos, lo que ha supuesto una cura de humildad frente a una sensación casi de inmortalidad y en la que todas las patologías se curaban ya o en el futuro inmediato. Con respecto a la célula cancerosa, se conocía que cuando escapan a los controles internos, las células se multiplican de forma exponencial y son capaces de abandonar su localización original e implantarse en otros tejidos. A mitad de los años setenta, se descubre que una proteína del virus del sarcoma de Rous es codificada por un gen responsable de la transformación neoplásica, un oncogén. Poco después, se confirma que los géneros determinan una quinasa de tirosina y se infiere la existencia de genes supresores de tumores, el primero de los cuales fue el p53. Por último se identificaron genes que codificaban proteínas cuya secuencia aminoacídica era coincidente con factores de crecimiento. Se ha podido así cubrir toda la 9
  • 10. trayectoria del cáncer mediante una mutación en un gen determinante del desarrollo se activaba un protooncogén, un gen supresor de tumores o un gen reparador de la molécula de ADN. Es evidente que la biología celular se ha beneficiado, principalmente en las últimas décadas, de técnicas desarrolladas y perfeccionadas por otras disciplinas afines, fundamentalmente la Bioquímica y la Biología Molecular, como la cromatografía, la electroforesis en gel, el marcado isotópico, el análisis por difracción de rayos X, el fraccionamiento celular, la ultra centrifugación, y la citometría de flujo, que han contribuido notablemente al estudio de la composición molecular y del metabolismo celular, permitiendo relacionar la estructura de la célula con su arquitectura molecular y enfocar ambas de cara a sus funciones biológicas. El conjunto de todas estas técnicas ha posibilitado que el estudio de la célula saltase de su concepción clásica -que se restringía a estudiar los constituyentes celulares y a la descripción morfológica de las tipos celulares y tejidos- a una concepción mucho más moderna. Según lo que he escrito en la Guía del alumno estos últimos años considero que la biología celular es el centro de una educación biológica y bioquímica moderna. La biología celular es, por tanto, una ciencia en evolución creciente y que, consideramos, aún está en una fase inicial de expansión. La relación con otras ciencias, y las técnicas mixtas que así se han constituido, han dado como resultado que sus límites conceptuales cada vez se encuentren más lejanos y más difusos. Es entonces que Los leucocitos sirven como la línea primaria de defensa en el sistema vascular. Dos categorías, granulocitos y células linfáticas, circulan a través del flujo sanguíneo en un esfuerzo por identificar y combatir patógenos ajenos tales como bacterias, virus, etc. Añadiendo a esta complejidad se encuentran las numerosas sales que son requeridas en la sangre. Estas sales son principalmente iones básicos, tales como el sodio, potasio, fosfato, y el magnesio que ayudan a mantener un firme valor de pH para la sangre. Estos iones de bicarbonato eliminan el dióxido de carbono de los tejidos y ayudan a mantener un pH ligeramente alcalino de 7.4. Durante daños traumáticos o cirugías, una gran cantidad de atención es dada a la disminución significante del pH de la sangre o la pérdida de esta alcalinidad puede causar respiración rápida y violenta, con muerte probable para ocurrir en un pH de 7.0 o más bajo. Contrariamente, si se permite que el pH de la sangre se eleve más allá de 7.6, esto también puede resultar fatal. Todas estas técnicas se aplicaron a muestras de médula ósea en los años 20 cuando se realizaron las primeras punciones de médula ósea. Así nació la citoquímica, un conjunto de técnicas que permitían el diagnóstico y clasificación de las leucemias agudas de una forma rápida, así como la aplicación de un tratamiento específico para cada tipo de leucemia sin necesidad de grandes alardes técnicos. Pero siguiendo el desarrollo escalonado de las técnicas diagnósticas llegamos al inmunofenotipo. Estas técnicas llegaron con el conocimiento de los anticuerpos monoclonales hace ya más de dos décadas. Estas proteínas son capaces de unirse específicamente con antígenos proteicos que se encuentran en la membrana de las células sanguíneas, las cuales permiten la distinción de cada tipo celular incluso dentro de cada línea celular. Estas técnicas lo que han conseguido es identificar y tipificar aún más la población leucémica. Permiten, por otro lado, llegar a detectar más allá del microscopio óptico la célula leucémica. 10
  • 11. Actualmente el proceso diagnóstico de estas enfermedades no es distinto al seguido en otras enfermedades no oncológicas. Es muy importante la realización de una historia clínica detallada atendiendo a historia familiar de enfermedades oncológicas, exposición a tóxicos medulares, y atención a signos y síntomas propios de anemia, neutropenia y trombocitopenia. En el examen físico hay que valorar grado de palidez, evidencia de sangrado, signos de focalidad infecciosa. Es muy importante la exploración de linfadenopatías en territorios no usuales en niños (supraclaviculares y auriculares posteriores); también presencia o no de masas y megalias abdominales. Tras la sospecha clínica hay que realizar estudio hematimétrico donde existirán alteraciones en un 90% de los casos, principalmente: leucocitosis o leucopenia con neutropenia, anemia normocítica y normocrómica con reticulocitos disminuidos, y trombopenia <100.000/mcl en tres cuartas partes de los pacientes. Ante estos hallazgos se deberá hacer diagnóstico diferencial con los siguientes cuadros:  enfermedades no malignas: anemia aplásica, mononucleosis infecciosa, artritis reumatoide juvenil, púrpura trombopénica idiopática, infecciones (tos-ferina, etc.).  enfermedades malignas: otro tipo de leucemias, linfomas, infiltración medular por tumores sólidos. El examen de frotis de sangre periférica y posteriormente el examen de médula ósea por aspirado/biopsia nos dará el diagnóstico definitivo. Una vez diagnosticada habrá que tipificar la leucemia. Para esto, disponemos hoy en día de todas las técnicas diagnósticas específicas descritas al principio de esta ponencia, las cuales nos permiten un diagnóstico del subtipo de leucemia. Pero han aparecido ciertos problemas derivados del gran desarrollo experimentado por estas técnicas de forma aislada y desigual; principalmente, la clasificación de los subtipos de Leucemia. Esto se ha visto en determinados casos, en los que han existido discrepancias entre los distintos métodos diagnósticos que han dificultado la asignación a un subtipo. Debido a esto, la clasificación de las leucemias ha sufrido cambios constantes en un intento de estandarizarla. Pero, al mismo tiempo, la mayor tipificación de las Leucemias ha dado lugar a un mejor seguimiento de la enfermedad favoreciendo una valoración adecuada de la respuesta al tratamiento y el estudio de la enfermedad mínima residual. También esto ha conllevado una aproximación pronóstico al poder correlacionar determinados subtipos con un mejor o peor pronóstico desde el inicio de la enfermedad. Con respecto al tratamiento los científicos y médicos que idearon el tratamiento para la leucemia infantil promovieron un método racional para destruir las células cancerosas utilizando los conocimientos de las células acumulados a partir de una serie de descubrimientos procedentes de investigaciones básicas que se llevaron a cabo a principios del siglo XX. Dichos estudios mostraron que los mecanismos de la célula se basan en un gran conjunto de reacciones químicas que se repiten continuamente de la misma forma que los pasos que forman una cadena de producción. La lucha contra el cáncer se ha convertido más en una guerra de desgaste que en una serie de victorias instantáneas y espectaculares, y la investigación que se ha llevado a cabo sobre la leucemia infantil durante los últimos 40 años no es una excepción. Pero, en nuestros días, la mayoría de los niños que sufren esta enfermedad pueden llegar a curarse gracias a los 11
  • 12. fármacos antimetabolitos. La lógica que respalda a estos fármacos procede de una amplia gama de investigaciones mediante las que se han conseguido definir los procesos químicos de la célula. Dichas investigaciones fueron llevadas a cabo por científicos que no podían ser conscientes de que sus descubrimientos iban a salvar las vidas de hasta treinta mil niños en Estados Unidos. La hematología moderna se inicio en la década de los 20 donde, el laboratorio juega un papel importante en el diagnóstico de los trastornos hematológicos ya que permite la cuantificación de los elementos formes de la sangre, con la sistematización y automatización como la citometría de flujo, la impedancia, aumentando la exactitud en el informe y disminuyendo los riesgos biológicos con sus diseños de bioseguridad. Además de los estudios genéticos, la citó química entre otros, que permiten llegar a un diagnóstico acertado. Las nuevas tecnologías han modificado y transformado toda la hematología, desde las anemias, las patologías de la hemostasia, las leucemias y los Linfomas. En los últimos 50 años se ha convertido en una ciencia amplia que intenta comprender la fisiología normal y patológica del sistema hematopoyético ayudado por otras disciplinas como la bioquímica la biología celular y molecular, la inmunología, el fisicoquímico, la genética y la medicina nuclear. Los conceptos básicos, siguen vigentes sin embargo el conocimiento de las enfermedades hemáticas dependen de un conocimiento profundo de los procesos normales, para poder profundizar en la enfermedad y es con los avances de la tecnología que ha permitido implementar un mejor diagnóstico. 2-CARACTERISTICAS NORMALES DE LA SANGRE Observar video. http://www.youtube.com/watch?v=v9mzIC5BMRk http://www.youtube.com/watch?v=GoqehY8J20Q&NR=1 http://www.youtube.com/watch?v=dVidtTJ4Wjs INTRODUCCION La sangre se compone de un líquido denominado plasma y elementos celulares, entre los que se encuentran los eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Un adulto normal tiene alrededor de 5 litros de este líquido vital, el cual representa de 7% a 8% del peso corporal total. El plasma constituye casi el 55% del volumen sanguíneo , mientras que el 45% esta compuesto de eritrocitos y 1% se forma de leucocitos y trombocitos con frecuencia las variaciones en estos elementos sanguíneos son el primer signo de enfermedad que se presenta en tejidos corporales . Los cambios en el tejido enfermo logran detectarse de 12
  • 13. manera frecuente mediante los análisis de laboratorio que identifican las alteraciones sobre la base de valores normales en los diversos constituyentes de la sangre. El componente más importante es el agua, ya que contiene iones disueltos, proteínas, carbohidratos, grasas, hormonas, vitaminas y enzimas. Los principales iones necesarios para la función celular normal incluyen calcio, sodio, potasio, cloro, magnesio e hidrógeno. La proteína principal que constituye al plasma es la albúmina, siendo el componente principal para conservar la presión osmótica; la albúmina actúa como molécula transportadora llevando compuestos como la bilirrubina y Hem; otras proteínas sanguíneas transportan vitaminas, minerales y lípidos. Las inmunoglobulinas y el complemento son proteínas especializadas que participan en la respuesta inmunitaria. Las proteínas de la coagulación, encargadas de mantener una hemostasia normal circulan en la sangre como enzimas inactivas hasta que se les requiere para el proceso de coagulación, Un desequilibrio en los elementos disueltos en el plasma puede ser la causa de alguna enfermedad en otro tejido corporal. El plasma también interviene como medio de transporte para los nutrientes celulares y metabolitos; por ejemplo, las hormonas elaboradas en un tejido son trasportadas por la sangre hacia el tejido blando en otras partes del cuerpo; la bilirrubina (principal residuo catabólico de la hemoglobina) es transportada por la albúmina desde el bazo hasta el hígado para su excreción; el nitrógeno ureico sanguíneo es conducido al riñón para ser filtrado y excretado. El aumento en la concentración de estos catabolitos normales, puede indicar metabolismo celular aumentado o defecto del órgano de excreción. (Mackenzie). Todas las células de la sangre se originan en la célula Madre que se localiza en los órganos hematopoyéticos y que puede madurar a glóbulos rojos , glóbulos blancos y plaquetas, una vez que completan la maduración pasan a la circulación general donde son eliminados después de un tiempo por el sistema mononuclear fagocítico (SMF) manteniendo la renovación constante de la sangre . FUNCION DE LA SANGRE mantener las condiciones necesarias para la vida , llevando nutrientes, recogiendo desechos, manteniendo la temperatura adecuada. 3. LA CELULA Y SU FUNCION Para el estudio de la hematología es esencial una comprensión básica de la morfología celular , ya que muchos trastornos hematológicos se acompañan de anormalidades o cambios en la morfología de componentes celulares o subcelulares , así como modificaciones en sus concentraciones. Una célula es una estructura compleja con una membrana unida a un gel acuoso de proteínas carbohidratos, grasas, materiales inorgánicos y ácidos nucleicos. El núcleo , limitado por una membrana nuclear , contiene ácidos nucleicos que dirigen y controlan el desarrollo , función y división de la célula .El citoplasma rodea al núcleo y es protegido por una 13
  • 14. membrana celular . El citoplasma contiene organelos diferenciados entre ellos : mitocondrias , lisosoma, retículo endoplasmático, aparato de Golgi, ribosomas, gránulos, microtúbulos y microfilamentos . Los organelos son compartimientos unidos a la membrana con funciones celulares específicas; las diferentes clases de organelos y su concentración es básica para la función celular. Observar video en http://www.youtube.com/watch?v=6fbwQGioDuI 4.SISTEMA HEMAYOPOYETICO Es el conjunto de órganos y tejidos encargados de distribuir y formar a las diferentes células sanguíneas , incluye los siguientes órganos: Médula ósea, Hígado, Bazo, Timo; Ganglio Linfático, sistema Mononuclear Fagocítico. MEDULA OSEA http://www.youtube.com/watch?v=UVUBK1aL6dE Es el principal órgano hematopoyético , recibe el nombre de médula ósea roja que es la encargada de la función hematopoyética y la medula ósea amarilla que es la parte grasa. Dentro de la Medula ósea se diferencian dos compartimentos uno de células madres y otros de células de diferenciación y maduración. En el compartimiento de célula madre esta la célula pluripotencial o STEM CELL estas maduran y se transforman en cualquier tipo de célula ya sea linfoide o mieloide , en el laboratorio se han demostrado que en cultivos específicos de la Medula ósea las células crecen formando colonias , por eso se les denomina células formadoras de colonias (CFC) y su característica de poder formar cualquier tipo de la serie celular (linfoide o mieloide) por todo esto se deduce que las células madres también se pueden denominar (CFC_LM). En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de la Historia de las células sanguíneas, la importancia de la célula y su función, y las características normales de la sangre, y el sistema Hematopoyético. COMPETENCIAS LOGROS 1. Capacidad de interpretar la evolución de I. Relaciono los conceptos de la historia en el pasado presente y futuro de los la historia de las células sanguíneas hematíes, leucocitos y plaquetas. 2 Demostrar capacidad para Argumentar II. Relaciono los valores de referencia para la concentración de células con claridad las características normales sanguíneas . 14
  • 15. de la sangre 3. Demostrar eficiencia en la comprensión I. Describo la membrana celular teniendo en cuenta su estructura y función . básica de la morfología celular II. Interpreto la estructura y función de cada uno de las organelas citoplasmáticas que existen en una célula. III. Reconozco las diferencias entre los términos de heterocromatina y eucromatina. IV. Relaciono las estructuras nucleares con las actividades celulares que se vinculan con el núcleo. V. Describo los procesos de la mitosis y meiosis celular VI. Defino el proceso de apoptosis. 4. Capacidad de recocer las técnicas más I. Conozco el fundamento de la reacción en cadena de la polimerasa usadas en biología molecular que tienen II. Defino la utilidad de la técnica de Southerin Biot utilidad en las diferentes diagnósticos de III. Defino las técnicas de microensayos los trastornos hematológicos IV. Relaciono la aplicación de estas pruebas con algunas patologías de la hematología 5. Demuestra capacidad para adquirir y I. Argumento con claridad la localización de la hematopoyesis durante el transferir el conocimiento sobre el desarrollo fetal, desarrollo de la hematopoyesis II. Reconozco las diferentes hemoglobinas de la vida embrionaria 6. Reconocer la importancia de los I. Reconozco los diferentes conceptos sobre el sistema mononuclear fagocítico, órganos y tejidos involucrados en el bazo, ganglio linfático, timo, hígado y médula ósea. sistema hematopoyético que intervienen en la proliferación, maduración y destrucción de las células sanguíneas EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: 1-Realice una consulta amplia bibliográfica en los documentos de apoyo recibidos e indague el pasado, presente y futuro de las células sanguíneas. Documento del modulo sobre la Historia de las células sanguíneas 2. Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) en los documentos de apoyo y videos recibidos para desarrollar los talleres que se relacionan a continuación: 15
  • 16. Taller de la sangre Cuál es el porcentaje de volumen de las células sanguíneas y volumen plasmático? Cuál es la coloración de la sangre? Cuántos litros de sangre tiene un adulto? Cuál es el componente plasmático más abundante? Cuál es la función de la sangre? Cuál es la diferencia entre plasma y suero? Taller de células humana ¿Cuál es la función de la membrana celular, citoplasma, lisosomas, ribosomas, retículo endoplasmático, aparato de Golgi, lisosomas, mitocondrias, núcleo, microtúbulos y los microfilamentos.? EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL: 1. En 3 grupos elaborar cada grupo un mapa mental del pasado, presente y futuro . Para la socialización del taller se organizaran 3 grupos cada uno de los cuales deberá escoger un relator durante la clase de teoría . 2. Con la revisión de los videos y las respuestas de los talleres , el estudiante hará un debate en el aula de clase. Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes. Bibliografía complementaria JAIME PERES José Carlos, ALMAGER David Gómez, Hematología. La sangre y sus enfermedades, 2 edición, 2010. RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005 RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003 DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidad MARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006 Base de datos Hinari Base de datos Proquest UNIDAD I - PRACTICA 1-GLOSARIO 2-RECONOCIMIENTO A UN LABORATORIO DE HEMATOLOGIA 3-CONTROL DE CALIDAD, BIOSEGURIDAD, MANEJO DE DESECHOS EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA 16
  • 17. 1.El estudiante encontrará un glosario de términos mas utilizado en la hematología, que lo transfiere al contexto de la hematopoyesis normal y anormal. Glosario Ver anexo 1 2. Reconocimiento de un laboratorio de hematología, mediante a una visita que se realizara al laboratorio de ASSBASALUD de la ciudad de Manizales fecha seleccionada por el grupo de docentes . 3.El estudiante deberá hacer la observación de videos sobre Bioseguridad, control de calidad y manejo de desechos en el laboratorio de hematología Observar videos de Bioseguridad: http://www.youtube.com/watch?v=fcSPWbqArjc http://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=related Técnica del lavado de manos.url http://www.youtube.com/watch?v=AZUIJQDyxdc&feature=related Técnica de puesta de guantes www.youtube.com/watch?v=2Nx9SIYofzo&feature=related Video de bioseguridad www.youtube.com/watch?v=9HejcS0B9fM&feature=related Video de toma de muestra http://www.youtube.com/watch?v=ysao3R8dhJk Pipetas.url http://www.youtube.com/watch?v=r5-zocCqRrc&feature=related http://www.youtube.com/watch?v=pISxlv2GAfA MANEJO DE RESIDUOS HOSPITALARIOS.url /www.youtube.com/ watch?v=oKf3j6hddVw&feature=related Video de bioseguridad 17
  • 18. Manejo de desechos , en un laboratorio de hematología . Control de Calidad: http://www.youtube.com/watch?v=fbvwQHhDMDQ 18
  • 19. GLOSARIO Acido fólico Ferritina Leucocitosis Adenopatía Fiebre Leucopenia Anemia Granulopoyesis Médula ósea Anisocitosis Alopesia Melenas Anorexia Haptoglobina Metástasis Apoptosis Hematocrito Microcito Anemia Ferropénica Hematuria Macrocito Anemia Megaloblástica Hemoglobina Neuropatía Antígeno Hemograma Oliguria Anticuerpo Hierro Palidez Bilirrubina Hipoxia Pancitopenia Bradicardia Hiperesplenismo Parestesia Citocinas Hem Petequias Edemas Ictericia Poiquilocitosis Epistaxis Indices eritrocitarios Púrpura Equimosis VCM Reticulocito Eritropoyesis HCM Rofeocitosis Eritropoyetina CHCM Sideremia Eritrosedimentación RDW Sangre Esplenomegalia Inflamación Taquicardia Esplenectomía Leucemia Trombocitosis Estroma Leucopoyesis Tumor Etiología Leucocito Trombocitopenia 19
  • 20. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación del glosario, recomendaciones para control de calidad, bioseguridad, manejo de desechos en el laboratorio de hematología COMPETENCIAS LOGROS 1. Capacidad de definir los términos I. Relaciono la terminología utilizada en hematología mediante el desarrollo de relacionados con hematología mediante un un glosario glosario, que le permita articular conocimiento, habilidades y actitudes en contextos específicos. 2. Mediante una visita a un laboratorio I. Reconozco la distribución y equipos de un laboratorio de hematología, clínico deberá recocer la importancia del mediante una visita. bacteriólogo en un laboratorio y la tecnología utilizada para los análisis de hematología. 3. Demostrar conocimiento en la aplicación I. Interpreto y aplico el control de calidad y la bioseguridad. del control de calidad , bioseguridad y II. Demuestro eficiencia aplicando las normas de bioseguridad, control de desecho de residuos calidad y buen manejo de los desechos en el laboratorio de hematología teniendo en cuenta la OMS. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: Desarrollar en forma individual los términos del glosario, hacer la observación de videos de bioseguridad, control de calidad y desechos de residuos. La función esencial de un laboratorio de hematología es obtener datos confiables y reproducibles para la evaluación del estado de salud del paciente y para los estudios epidemiológicos. De acuerdo a la visita que usted realizó, de respuesta a las siguientes preguntas: 1. Qué requisitos son indispensables para el funcionamiento de un laboratorio clínico? 2. Qué áreas tiene el laboratorio que usted visitó? 3. Enumere las normas generales que deben cumplir los laboratorios para su funcionamiento? 4. El personal que labora en el laboratorio utiliza ropa adecuada? 5. Cómo esta clasificado el laboratorio que usted visitó? 6. En el área de hematología que equipos observo? 7. Como se debe eliminar la jeringa, el algodón, el material contaminado ? 20
  • 21. EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL: Mediante un debate en el aula se hará la socialización del glosario y el taller de las funciones del laboratorio de hematología y los equipos que hacen parte del laboratorio, se hará preguntas sobre la bioseguridad , control de calidad y la eliminación de desechos. El docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes. Bibliografía requerida (Documentos docentes) SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000 Bibliografía complementaria RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005 RUIZ ARGUELLES, Guillermo. Fundamentos de Hematología 3ª Edición. Bogotá. Médica Panamericana. 2003 MARY LOUISE TURGEON , Hematología clínica teoría y procedimientos , 2006 DACIE Y LEWIS, hematología Clínica , 2008, Documento Gestión de la calidad Base de datos Hinari Base de datos Proquest 21
  • 22. 22
  • 23. UNIDAD II TEORIA HEMATOPOYESIS 1.) ORIGEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS 2.) SITIOS DE LA HEMATOPOYESIS Y FUNCION DE LA MEDULA OSEA a.) Elementos celulares de la médula ósea b.) Eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis, megacariopoyesis c.) Otras células sanguíneas de la médula ósea 3.) FACTORES DE CRECIMIENTO HEMATOPOYETICO – INTERLEUQUINAS - 4.) EXAMEN DE LAS CELULAS SANGUINEAS EN MADURACION a.) Características celulares generales b.) Características nucleares c.) Características citoplasmáticas TEORIA HEMATOPOYETICA ABORDAJE TEORICO El proceso de la formación de las células de la sangre se llama hematopoyesis. El conjunto de células y estructuras implicadas en la fabricación de las células sanguíneas se llama tejido hematopoyético. La hematopoyesis es un proceso complejo influido por factores propios del individuo de tipo genético o hereditario, factores ambientales (nutrición, vitaminas, etc.) y enfermedades diversas que afectan a la producción de sangre de forma directa o indirecta. Los factores de crecimiento hematopoyéticos son necesarios para la supervivencia, proliferación y maduración de las células progenitoras en medios de cultivo en el laboratorio. Estos factores se producen en el ambiente de la médula ósea o en otros lugares del organismo. Se trata de glicoproteínas con estructura conocida hoy en día y que se están produciendo de forma industrial con fines terapéuticos. 23
  • 24. Durante la primera etapa de la vida en el embrión y feto, la hematopoyesis se produce de forma diferente. El hígado y en menor proporción el bazo, ganglios linfáticos y timo son los órganos productores entre el 2º y 7º mes. A partir del 7ª mes de vida intrauterina será la medula ósea el órgano hematopoyético principal hasta el nacimiento y después lo será durante toda la vida en situación normal . INTERLEUCINAS Se denominan interleucinas o interleuquinas a un conjunto de proteínas que son sintetizadas y expresadas por los leucocitos (de ahí -leukin), más específicamente por los Linfocitos TCD4 y por los y que tienen como función la intercomunicación (de servir como mensajeros) entre las distintas subpoblaciones leucocitarias, participando en la respuesta del sistema inmunitario. Han sido descritas distintas alteraciones de ellas en enfermedades raras, en enfermedades auto inmunes o en inmunodeficiencias. Estructura : Son proteínas solubles de bajo peso molecular que ejecutan múltiples funciones vinculadas al crecimiento celular, inmunidad, diferenciación tisular, inflamación, etc. Además de las células del sistema inmune, estas citocinas son producidas por diferentes tipos celulares durante la activación de la inmunidad innata y adquirida. Son el principal medio de comunicación intracelular ante una invasión microbiana. Las citocinas sirven para iniciar la respuesta infamatoria, y para definir la magnitud y naturaleza de la respuesta inmunitaria específica. Se conocen en la actualidad no menos de 33 interleucinas (1), las cuales difieren entre si tanto desde el punto de vista químico como del biológico. Mientras algunas de ellas [IL-4, IL-10, IL-11] presentan esencialmente efectos favorables, otras [IL-1, IL-6, IL-8], paralelamente a su función defensiva, pueden también ser deletéreas para el organismo (2). Clases Una lista de 'interleucinas:  IL-1: producida por macrófagos, y células epiteliales induce reacción de fase aguda y la activación y reconocimiento por parte de linfocitos T y macrófagos del lugar donde se desarrolla la respuesta inmune.  IL-2: producida por linfocitos Th1 , estimula el crecimiento y la diferenciación de la respuesta de los linfocitos T.  IL-3: producida por linfocitos Th2, estimula las células madre de la médula ósea.  IL-4: relacionada con la proliferación de linfocitos B, mastocitos y linfocitos T. Tiene un importante papel en las reacciones alérgicas.  IL-5: producida por linfocitos T y Mastocitos, estimula el crecimiento y proliferación de eosinófilos.  IL-6: segregada por macrófagos, participa en reacciones de fase aguda, también estimula el crecimiento y diferenciación de tanto linfocitos T como linfocitos B. 24
  • 25.  IL-7:intensifica la actividad alocitolítica de las células NK activadas por las linfocinas , se considera un promotor de la Timopoyesis y de la recuperación inmune  IL-8: producida por monocitos, macrófagos, queratinocitos, fibroblastos y células endoteliales, su función es atraer a neutrófilos y linfocitos vírgenes, así como movilizar, activar y provocar la degranulación de neutrófilos. También estimula la angiogénesis.  IL-9 factor célula linfoide potente, estimula el crecimiento de algunos linfocitos T y mastocitos. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para la interpretación de la Hematopoyesis COMPETENCIAS LOGROS 1. Capacidad de relacionar los I. Explico el origen de las células sanguíneas conceptos de la Hematopoyesis, en II. Reconozco los sitios y función de la médula ósea el proceso de producción, III. Describo el desarrollo de las células sanguíneas desde la etapa de célula madre diferenciación y desarrollo de las hasta la forma blástica de una célula ( eritropoyesis, granulopoyesis, linfopoyesis, células sanguíneas megacariopoyesis,) IV. Interpreto la función de los factores de crecimiento hematopoyético y enumero 3 factores. V. Relaciono el orden de maduración de las células sanguíneas como eritrocitos, células plasmáticas, y los 5 tipos de leucocitos ( eosinófilo , basófilo, neutrófilos, monocitos, linfocitos) VI. Analizo las características celulares generales de una célula que son importantes para la identificación celular. 2. Capacidad de caracterizar el I. Identifico el papel de las citocinas o interleucinas en la diferenciación de la célula papel de las citocinas en la troncal diferenciación de la célula troncal. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: El estudiante deberá realzar una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) y con en el documento de apoyo sugerido por el docente, responderá en forma individual el siguiente taller. 25
  • 26. 1. Dónde se origina la hematopoyesis? 2. Cuál es el principal sitio de la Hematopoyesis del adulto? 3. Explique cuales son las proteínas reguladoras de la hematopoyesis 4. Qué es tejido Hematopoyético? 5. Qué es el sistema fagocítico-mononuclear? 6. Dónde se encuentra el bazo ,el timo , hígado y cuál es su función? 7. Qué compone el sistema linfático? 8. Qué es la Medula ósea y que la conforma? 9 .Defina eritropoyesis? 10.Defina la granulopoyesis? 11.Defina linfopoyesis? 12.Defina megacariopoyesis? 13 .Defina Las citocinas, el origen y el sitio de acción de estas. 14. Que características comparten las interleucinas EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL 1.) Mediante un debate en el aula se socializara el taller de la Hematopoyesis . 2.) Cada uno de los estudiantes deberá tener un mapa mental de hematopoyesis de acuerdo con la teoría desde la diferenciación de células troncales no diferenciadas a células sanguíneas maduras, teniendo en cuenta el sitio de acción de los factores estimulantes de colonias y las interleucinas. Cada estudiante deberá identificar la hematopoyesis intramedular y extramedular . Esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento. Bibliografía requerida MARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México 2006 . capitulo 4 Pág.65-73. Bibliografía complementaria 26
  • 27. NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. Segunda edición 2008. Capitulo. Pág. 13-18 SHIRLYN B. Mckenzie. Hematología clínica. Editorial el Manual moderno México DF- Santa fe de Bogota.2000. Páginas 13, 14, 15, 16, 17,18, 19, 20,22. RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005 Pág.. 78.79.80. JAIME , PEREZ José David, ALMAGER GOMEZ David, HEMATOLOGIA ,la sangre y sus enfermedades , 2010, capitulo 1 Célula madre Hematopoyética y Hematopoyesis. CARR. RODAK Altas de HEMATOLOGIA CLINICA.3 edición, 2010. BIBIANA Martínez : CD sobre la hematopoyesis. Motores de búsqueda:  Base de datos Hinari  Base de datos Proquest. UNIDAD II PRACTICA 1-PRINCIPIOS PARA LA RECOLECCION DE LA SANGRE 2-CLASES DE ANTICOAGULANTES 3-PRUEBAS DE LABORATORIO : BASICAS Y ESPECIALES 1-RECOLECCION DE LA MUESTRA EN EL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA PARA CUADRO HEMATICO ABORDAJE TEORICO Una muestra sanguínea recolectada en forma apropiada es esencial para la calidad en el desempeño del laboratorio. El cumplimiento estricto de las reglas para la recolección de la muestra es crucial para la exactitud de cualquier prueba. Los errores previos al análisis como la identificación, ya sea del paciente o de la muestra, son fuentes potenciales importantes de error. (Turgeon, 2006). Para los estudios hematológicos, la sangre anticoagulada es la muestra que se usa mas a menudo. Cuando se mezcla sangre entera fresca con sustancias que previenen la coagulación, (anticoagulantes), la sangre puede separarse en plasma, un líquido de color pajizo y los elementos celulares (eritrocitos, leucocitos y plaquetas o trombocitos). La sangre entera que se permite coagular en forma normal produce el suero, un liquidó de color pajizo. (Turgeon, 2006). 27
  • 28. Se espera que la persona que realiza la flebotomía, brinde una satisfacción inmejorable. Es importante que comprenda y conozca las expectativas del paciente, que maneje la prudencia con este y que sea diplomático ante las quejas del mismo. Si un paciente no esta satisfecho, hay que ofrecerle una disculpa sincera y escucharlo para conocer los detalles del problema. Es preciso asegurarse de comprender y confirmar el problema, actuar en consecuencia con la queja, mantener las promesas que se hagan y seguir el problema hasta la resolución del mismo OBSERVAR UN VIDEO DE TOMA DE MUESTRA YouTube - Extraccion de sangre y hematocrito.url 2.) ANTICOAGULANTES En Hematología debe saber elegir el anticoagulante idóneo y mantener siempre una adecuada proporción entre éste y el volumen de sangre extraída . En hematología el anticoagulante idóneo debe cumplir los siguientes requisitos: 1. No alterar el volumen del eritrocito 2. No producir hemólisis 3. Evitar la agregación de las plaquetas 4. No alterar la morfología eritrocitaria Los anticoagulantes utilizados en el hemograma son las sales sódicas o potásicas del acido etilendiaminotetraacético ( EDTA) , se pueden utilizar en forma líquida o sólida . 3. PRUEBAS DE LABORATORIO A continuación encontrara una serie de pruebas más frecuentes en el laboratorio para la correlación clínica de los pacientes con trastornos hematológicos -PRUEBAS DE LABORATORIO EL HEMOGRAMA (determinación de hemoglobina, hematocrito, recuentos de leucocitos, recuento diferencial de Hay pruebas de laboratorio en hematología que son células blancas o fórmula leucocitaria) utilizadas como de rutina para evaluar la salud del paciente, Determinación de reticulocitos estas pruebas se denominan básicas .Entre estas están: Velocidad de sedimentación globular o eritrosedimentación Recuento de plaquetas 28
  • 29. HEMOGRAMA AUTOMATIZADO : hematíes, hemoglobina Productos de degradación del fibrinógeno (PDF) ( Hb), hematocrito (Hto), Volumen corpuscular medio Indice de saturación de transferrina (VCM),concentración de hemoglobina corpuscular media Inmunoglobulinas (IgA, IgD, IgE, IgG, IgM ) (CHCM), Amplitud de la distribución del tamaño de Lactato deshidrogenasa (LDH) suero eritrocitos (ADE) Plomo (suero) Reticulocitos Proteínas totales (suero) Leucocitos Proteínas fraccionadas (albúmina, globulinas) Fórmula leucocitaria: neutrófilos, linfocitos, monocitos, Hepcidina eosinófilos, basófilos. Recuento de plaquetas OTRAS PRUEBAS ESPECIALES COMO: Valor absoluto de leucocitos. Homocisteína Acido metilmalónico ESTUDIOS BIOQUIMICOS Eritropoyetina (radioinmunoanálisis) Acido fólico (suero) Fosfatasa alcalina granulocítica Acido úrico (suero) Cromosoma Filadelfia Beta2 microglobulina (suero) Protoporfirina eritrocitaria libre Bilirrubina total, directa, indirecto (suero) Receptor sérico de la transferrina Calcio (ionizado) Fragilidad osmótica Cobalamina o vitamina B12, (suero) Test de Ham Complemento (suero) Electroforesis de Proteínas Creatinina (suero) Test de la sacarosa Ferritina Test de falciformia Fibrinógeno (plasma ) Electroforesis de hemoglobina Hierro Hierro, capacidad de fijación 29
  • 30. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía ,para la recolección de la sangre, identificación de los principales anticoagulantes y las pruebas básicas y específicas utilizadas en las ayudas diagnósticas de las alteraciones hematológicas COMPETENCIAS LOGROS 1. Capacidad de realizar una buena I. Reconozco el protocolo para una buena toma de muestra venosa y capilar recolección de la muestra para las II. Ejecuto una buena toma de muestra con un compañero teniendo en cuenta la pruebas de células sanguíneas. punción capilar y venosa 2. Capacidad de identificar los I. Identifico los diferentes anticoagulantes utilizados en hematología diferentes anticoagulantes utilizados en el laboratorio de hematología II. Preparo material con anticoagulante para hemogramas III. Conozco las diferentes ventajas del EDTA –K3. 3. Demuestra capacidad de asociar las I. Desarrollo e interpreto las diferentes pruebas básicas y especificas, más usadas pruebas básicas y especificas mas en el laboratorio para las ayudas diagnósticas de las diferentes patologías en usadas en el laboratorio , para las hematología ayudas diagnósticas de las diferentes patologías en hematología EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: 1.) Realice una consulta amplia bibliográfica (mínimo 4 autores) ,observe el video de toma de muestra y plasme el conocimiento adquirido en el desarrollo del siguiente taller : a.) Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total. b.) ¿Por qué la sangre se coagula? c.) ¿Como actúa el anticoagulante frente a la sangre? d.) Describa la importancia de la utilización de cada uno de los anticoagulantes que usted investigo e.) Qué importancia tiene la relación anticoagulante sangre para la realización de un cuadro hemático. f.) El EDTA es el anticoagulante de elección en células sanguíneas. De una explicación a esta afirmación. g.) Sí una muestra presenta un coagulo pequeño. Qué implicaciones trae los resultado 30
  • 31. 2.) Por grupos seleccionados en el aula de clase , identifique y fundamente las pruebas básicas y específicas mas usadas en el laboratorio para las diferentes patologías en hematología . 3.) Cada estudiante deberá realizar un protocolo para la toma de muestra de acuerdo a la lectura del documento del manual de toma de muestra venosa y capilar . EJERCICIO INVESTIGATIVO GRUPAL En el aula de clase se socializara el taller y la fundamentación encontrada por los diferentes grupos sobre las pruebas básicas y específicas . Después de socializar el protocolo elaborado del documento, se realizara una flebotomía con un compañero elegido previamente en la práctica, dicha actividad requiere de un estricto cumplimiento de las normas de bioseguridad , descarte de desechos y los cuidados observadas en el video . El estudiante tendrá que explicar al docente y sus compañeros cuales son los requerimientos necesarios en el laboratorio cuando tiene en sus manos una orden para la toma de muestra en un examen de hemograma. Bibliografía requerida Manual de toma de muestras Becton, Dickinson BD Bibliografía complementaria  MARY LOUISE TURGEON. Hematología clínica teoría y procedimientos. Manual moderno México 2006.capitulo 2 paginas 21-42.  RODAK. B. Hematología fundamentos y Aplicaciones clínicas segunda edición. Editorial medica Panamericana 2005  DACIE Y LEWIS. Hematología practica. 10 a edición.  JOAN LUIS VIVES. AGUILAR. Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología , 3 edición 2005. Motores de búsqueda:  Base de datos Hinari  Base de datos Proquest.  REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología.  Internet: www.Scielo.org.  www.genereviews.org 31
  • 32. UNIDAD III UNIDAD III TEORIA ERITROPOYESIS 32
  • 33. 1—CICLO DE VIDA Y FISIOLOGIA NORMALES DEL ERITROCITO a.) Eritropoyesis b.) Eritropoyetina c.) Trastornos de la eritropoyetina d.) Aumento de eritrocitos 2- DESARROLLO Y MADURACION DE LOS ERITROCITOS a.) Características generales b.) Etapas del desarrollo c.) Maduración defectuosa d.) Reticulocitos 3- CARACTERISTICAS Y PROPIEDADES DE LA HEMOGLOBINA a.) Composición química y configuración de La Hemoglobina b.) El papel del 2,3-difosfoglicerato c.) Disociación y alteraciones en la disociación del oxigeno d.) Transporte del dióxido de carbono e.) Síntesis de la Hemoglobina f.) Tipos, formas variantes y herencia de Hemoglobinas normal 4.) CARACTERISTICAS DE MEMBRANA Y ACTIVIDADES METABOLICAS DE LOS ERITROCITOS a.) Características de membrana b.) Característica citoplasmáticas c.) Actividades Metabólicas d.) Catabolismo de los eritrocitos 5 ) MEDICION DE LOS ERITROCITOS a.) Volumen corpuscular medio b.) Hemoglobina corpuscular medio c.) Concentración media de hemoglobina corpuscular 33
  • 34. 6.) MORFOLOGIA E INCLUSIONES DE LOS ERITROCITOS a.) Eritrocitos normales y anormales b.) Alteraciones en tamaño y forma c.) Alteraciones en el color d.) Inclusiones eritrocitaria 7.) CLASIFICACION Y EVALUACION DE LAS ANEMIAS EN EL LABORATORIO a.) Causas de anemias b.) Signos y síntomas clínicos de la anemia c.) Clasificación de las anemias d.) Valoración de laboratorio de las anemias teniendo en cuenta las bases químicas, fisiológicas, genéticas y biología molecular. 8. ANEMIAS POR PERDIDA DE SANGRE AGUDAS Y CRONICA a.) Anemia por perdida aguda de sangre : Etiología, datos de laboratorio. b.) Anemia por perdida crónica de sangre : Etiología 9.ANEMIA APLASICA Y RELACIONADAS a.) Anemia aplásica ; Etiología, fisiopatología, características clínicas, datos de laboratorio b.) Anemia de Fanconi: Signos y síntomas , datos de laboratorio c.) Trastornos relacionados como aplasia eritrocitaria pura , Anemia diseritropoyética congénita : Fisiología y datos de laboratorio 10.) ANEMIAS HIPOCROMICAS Y TRASTORNOS EN EL METABOLISMO DEL HIERRO a.) Anemia por perdida de hierro : Etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, datos de laboratorio. b.) Anemia por trastornos inflamatorios o crónicos : Etiología, Fisiopatología, datos de laboratorio. c.) Anemia Sideroblástica: Etiología, fisiología, datos de laboratorio d.) Hemocromatosis Hereditaria: clasificación y etiología , datos de laboratorio. 11.) ANEMIA MEGALOBLASTICA a. Anemia Megaloblástica: Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntoma datos por el laboratorio. 34
  • 35. b.) Anemias no megaloblásticas 12.) ANEMIAS HEMOLITICAS a.) Anemia hemolítica hereditaria: Etiología, fisiopatología, pruebas diagnósticas. b.) Hemoglobinuria paroxística nocturna: Etiología, epidemiología, fisiología,, signos y síntomas, datos de laboratorio. c. Anemia hemolítica adquirida: Etiología . d.) Anemia hemolítica por mecanismos inmunitarios. e.) Anemia hemolítica por agentes físicos 13 HEMOGLOBINOPATIAS a.) Enfermedad de células falciformes : Etiología, epidemiología, fisiopatología, signos y síntomas clínicos, datos por el laboratorio . b.) Talasemia (Beta ) Etiología, fisiología, datos de laboratorio, GLOBULO ROJO Abordaje teórico El eritrocito maduro es un disco bicóncavo con una palidez central que ocupa el tercio medio de la célula. Cerca del 33 % del volumen de la célula madre consiste en la proteína respiratoria hemoglobina, que realiza la función de transporte de oxigeno y dióxido de carbono. Con un promedio de vida de 120 días, esta célula blanda y flexible se mueve con facilidad por los capilares titulares y la circulación esplénica. Con forme la célula envejece, las enzimas citoplasmáticas se catabolizan, lo que aumenta la rigidez de la membrana, y conduce a la destrucción mediante la fagocitosis por los macrófagos. HEMOGLOBINA Abordaje teórico La hemoglobina es una heteroproteína de la sangre, de peso molecular 68.000, de color rojo característico, que transporta el oxígeno desde los órganos respiratorios hasta los tejidos, en mamíferos y otros animales. La forman cuatro cadenas polipeptídicas (globina) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo átomo de hierro es capaz de unirse de forma reversible al oxígeno. La hemoglobina se encuentra en el interior de los glóbulos rojos. La hemoglobina es la proteína transportadora de oxigeno. Representa en promedio el 32% de la masa total del eritrocito. La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno como para 35
  • 36. bicarbonato por parte del eritrocito. Tanto la concentración de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa el número de eritrocitos. Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de eritrocitos. Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes anémicos) están definidas por la concentración de la hemoglobina. La determinación de la hemoglobina por métodos electrónicos, se obtiene por el método de la cianometahemoglobina que determina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la carboxihemoglobina, mediante un pequeño hemoglobinómetro incorporado al equipo. El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para la Estandarización de Hematología (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más recomendado. Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares satisfactorios y la capacidad de cuantificar todas las formas de Hb de importancia clínica. Es el método de elección para efectuar estudios científicos sobre anemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pública. (González, 2005) METABOLISMO DEL HIERRO El contenido en hierro del organismo y su distribución se resume en la siguiente tabla: DISTRIBUCION DEL HIERRO EN EL ORGANISMO PROTEINA LOCALIZACION CONTENIDO EN HIERRO (mg) Hemoglobina Hematíes 3.000 Mioglobina Músculo 400 Citocromo y proteínas con hierro y azufre Todos los tejidos 50 Transferrina Plasma y liquido extravascular 5 Ferritina y Hemosiderina Hígado, Bazo, Médula Osea 100- 1000 La mayor parte del hierro se encuentra en la proteína transportadora del oxigeno en los hematíes : La Hemoglobina . El recambio metabólico del hierro esta dominado por la síntesis y degradación de la hemoglobina. El grupo Hemo se sintetiza en los hematíes nucleados en la médula ósea a través de una ruta que finaliza con la incorporación del hierro en la protoporfirina 36
  • 37. IX mediante la ferroquelasa. La ruptura del grupo hemo se produce en las células fagocíticas , principalmente en el bazo, hígado y la médula ósea. El hierro se libera del grupo hemo por la hemoxigenasa y se reutiliza en su mayor parte para sintetizar el hemo. Cada día se usan alrededor de 30 mg de hierro para fabricar nueva hemoglobina y la mayor parte de esta se obtiene de la lisis de los hematíes viejos . La cantidad de hierro perdida por el organismo es de 1 mg/ día en los hombres , en las mujeres la menstruación y el parto incrementan la perdida de hierro en 2 mg/día. Es posible que la absorción de hierro no aumente lo suficiente para compensar esta perdida debido a esto aparece la anemia ferropénica. La proteína fijadora del hierro , la transferrina , es responsable del transporte extracelular , la mayoría de las células obtienen el hierro a partir de la transferrina . El hierro se une a los receptores de la transferrina en la superficie celular y luego se produce un intercambio con la liberación del hierro en las células y la devolución de la apotransferrina (proteína sin hierro) al plasma para ser reciclado. METABOLISMO DE LA VIT B 12 Y ACIDO FOLICO. La investigación del estado del folato y de la vitamina B12 en los individuos no está restringida a la investigación de los que presentan las características de anemia megaloblástica , ya que en el déficit de Vitamina B12 se pueden producir cambios neuropáticos y neurosiquiátricos en ausencia de macrocitos y anemia .Se ha postulado que valores elevados de Homocisteína plasmática y de Acido metilmalónico ( AMM) séricos podrían ser indicadores sensibles del déficit , incluso subclínico , de folatos y cobalamina. Una deficiencia de Vitamina B12 y de folatos ocasionan alteraciones en la Hematopoyesis ya que originan una anomalía en la síntesis de DNA y como consecuencia anemias con alteraciones megaloblásticas ( eritrocitos grandes y asincronismo madurativo). Es importante que se conozca como se ingieren y absorben la vitamina B12 y el ácido fólico, pues es la clave para el diagnóstico etiológico. Dentro del déficit de la vitamina B12 se incluye la anemia perniciosa. El diagnóstico requiere de un hemograma (hemoglobina baja y VCM alto), examen de medula ósea (cambios megaloblásticos) y de determinaciones bioquímicas (Vit. B12 y Acido fólico). 37
  • 38. MORFOLOGIA CELULAR EN FROTIS DE SANGRE PERFERICA Observación de la Línea Eritroide DOCUMENTO APORTADO POR LA DOCENTE ANEMIAS Los tejidos del organismo requieren oxígeno continuamente, nutrientes y electrolitos para su función normal, en estados de anemias el aporte de O2 a los tejidos es inadecuado debido a la disminución en la capacidad transportadora de este gas por la masa eritrocitaria circulante. La anemia no es una enfermedad sino un signo o síntoma que como la fiebre, el dolor, la cefalea y la fiebre está relacionada con muchas enfermedades y como en todos estos casos, el médico antes de tratar el síntoma, debe identificar la causa e intervenirla. Frente a un paciente con anemia el médico debe tener como principal objetivo establecer el diagnóstico, incluido el tipo de anemia y su causa. (Campuzano, 2007). Cuando la anemia se instaura en un periodo de días o semanas, el volumen total de sangre es normal o aumentado, a expensas del plasma y los cambios que se producen en el gasto cardíaco y en el flujo sanguíneo, facilitan la compensación de la pérdida global de la capacidad de transporte de O2. Los cambios de la posición de la Curva de disociación de O2- Hemoglobina explican en parte la respuesta compensatoria frente a la anemia. DOCUMENTO SOBRE ANEMIAS DEL DR. GERMAN CAMPUZANO ,DADO POR EL DOCENTE En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la Eritropoyesis e interpretar las alteraciones morfológicas y las inclusiones de los eritrocitos. COMPETENCIAS LOGROS 1. Capacidad de Interpretar el ciclo I. Reconozco los diferentes procesos para la producción de eritrocitos de vida y fisiología normales del II. Explico las condiciones normales que estimulan la producción de eritrocito Eritropoyetina. III. Establezco la diferencia entre los términos policitemia secundaria y policitemia relativa 38
  • 39. 2. Demostrar comprensión en el I. Describo las principales características morfológicas de cada etapa de desarrollo y maduración del eritrocito Maduración del eritrocito. II. Explico los sucesos que ocurren durante la maduración de los reticulocitos III. Defino el concepto de reticulocitos de estrés. 3. Capacidad de expresar las I .Describo la configuración química de la Hemoglobina normal del adulto características y propiedades de la II. Relaciono el papel fisiológico del 2,3-difosfoglicerato en la oxigenación de Hemoglobina La molécula de hemoglobina. III. Describo el efecto Bohr IV. Describo brevemente la síntesis del Hem V. Reconozco la síntesis y el mecanismo de transporte e inserción del hierro en la producción de hemoglobina. 4. Capacidad de Describir las I. Explico las diferentes vías metabólicas en el eritrocito características de membrana y II. Conozco las principales características de la membrana del eritrocito actividades metabólicas de los III Conozco las principales características citoplasmáticas eritrocitos IV. Describo e interpreto el catabolismo de los eritrocitos extravascular e Intravascular. 5. Para evaluar los trastornos de I. Conozco los procedimientos que valoran las cantidades de eritrocitos o los eritrocitos debe hacer hemoglobina. mediciones cuantitativas y evaluar el frotis de sangre periférica como II. Interpreto los valores normales para los eritrocitos ,hemoglobina, información básica. Hematocrito de acuerdo a los diferentes grupos de edad. III. Conozco e interpreto los índices eritrocitarios como: volumen corpuscular medio (VCM),Hemoglobina corpuscular media (HCM), concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC) IV. Aplico las formulas apropiadas y calculo el VCM, HCM y CMHC cuando me aportan los valores de eritrocitos. 6. El estudiante debe reconocer I. Relaciono las alteraciones observadas en el tamaño del eritrocito . las diferentes alteraciones en el II. Relaciono las alteraciones de la forma del eritrocito. tamaño, forma, color e inclusiones III. Interpreto las variaciones del color del eritrocito. de los eritrocitos. IV. Identifico las inclusiones observadas en el eritrocito. V. Reconozco las inclusiones parasitarias en los eritrocito 39
  • 40. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante dará respuesta al siguiente taller : 1.Qué Función cumple el eritrocito? 2.Cuales son los componentes de la membrana del eritrocito, cual es su función y qué importancia tienen. Qué implicaciones trae su ausencia. 3.Qué entiende por Eritropoyesis. 4.Como explica el concepto de Eritropoyesis ineficaz? 5.Qué importancia tiene el recuento de reticulocitos? Sustente la respuesta. 6. Que sustancias alimenticias son necesarias para la maduración nuclear y citoplasmática, las cuales evitan las llamadas anemias carenciales. 7.Defina Hemólisis. 8.Que funciones ejerce la EPO.(eritropoyetina) y donde se origina. 9.Elabore un mapa conceptual de la hemólisis intravascular y extravascular, 10.Mediante un esquema realizo una presentación de la estructura de la hemoglobina. 11.Que importancia tiene el efecto Bohr y Aldane en el transporte de oxigeno. 12.Esquematice la curva de disociación de hemoglobina. 13.Qué importancia tiene el 2,3 DPG en el transporte de oxigeno? TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL Mediante un debate en el aula se socializa el taller y los mapas conceptuales de la hemólisis intravascular y extravascular, esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes. 40
  • 41. Bibliografía requerida. TURGEON, Mary Louise. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. Edición 2006.Capitulo 5,6,7,8,9,10,11,12,13. , Paginas 79- 191. BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA NARANJO A, BEATRIZ. Atlas de hematologías células sanguíneas. Editorial Universidad Católica de Manizales. 2da. edición 2008 cap. 3 Pág. 26-47 RUIZ, Arguelles. G, J. Fundamentos de Hematología. Tercera edición 2001. RODAK, Bernadette F. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Segunda edición 2005. Capitulo 7, Paginas 83-97 MCKENZIE, Shirlin. Hematología clínica. Segunda edición 2000. Capitulo 3, paginas 39-64 MOTORES DE BUSQUEDA  Hinari.  Proquest.  REVISTAS COMO; Medicina y laboratorio, revista colombiana de gastroenterología.  Internet: www.Scielo.org.  www.genereviews.org En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender la clasificación y evaluación de las anemias en el laboratorio. COMPETENCIAS LOGROS 1. Argumentar con claridad las causas de la I. Conozco las alteraciones fisiológicas de las diferentes anemias anemia. II. Explico los factores que contribuyen con la anemia 2. Capacidad de Reconocer los diferentes signos I. Interpreto las causas , signos y síntomas de la anemia. y síntomas de las diferentes anemias . II. Describo las molestias más frecuentes en pacientes anémicos. 3. Demostrar coherencia en la interpretación de la I. Relaciono las alteraciones morfológicas observadas en el frotis clasificación de las anemias teniendo en cuenta la de sangre periférica . morfología, fisiología y la posible etiología. II. Reconozco las pruebas de laboratorio que se utilizan como ayudas en el diagnóstico de las anemias . 41
  • 42. III. Identifico otras pruebas específicas para las ayudas Diagnósticas de las anemias. 4.Reconocer las diferencias en las anemias por I. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida aguda pérdida de sangre aguda y crónica. de sangre. II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología en la pérdida aguda de sangre. III. Describo la etiología y fisiología de la anemia por pérdida crónica de sangre. II. Interpreto los datos significativos del laboratorio de hematología en la perdida crónica de sangre 5. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, fisiopatología ,las características clínicas y los anemia aplásica y el grupo que se relaciona con datos de laboratorio que se puedan relacionar con este grupo de ellas . anemias . 6. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los anemia hipocrómica y los trastornos en el datos por el laboratorio. metabolismo del hierro. II. Establezco la diferencia entre la anemia ferropénica y las anemias por trastornos inflamatorios o crónicos. III. Interpreto el metabolismo del Hierro 7. Capacidad de expresar el concepto de las I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los anemias megaloblásticas, datos por el laboratorio. II. Establezco la diferencia entre la anemia megaloblástica y no megaloblástica. III. Interpreto el metabolismo de la vitamina B12 y los folatos 8. Capacidad de expresar el concepto de una I. Conozco la etiología, epidemiología, fisiología, signos y síntomas, los anemia hemolítica . datos por el laboratorio. II. Establezco la diferencia entre la anemia hemolíticas hereditarias Y anemias hemolíticas adquiridas. 9. Capacidad de interpretar las Pruebas de I. Reconozco algunas de las pruebas de biología molecular para el Biología Molecular mas utilizadas para el diagnóstico de algunas anemias. diagnóstico de algunas anemias. 42
  • 43. EJERCICIO INVESTIGATIVO INDIVIDUAL: Por medio de una revisión bibliográfica (mínimo 4 autores) y los documentos aportados por el docente ; el estudiante dará respuesta al siguiente vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicas encontradas en los eritrocitos Anexo 1 TRABAJO INVESTIGATIVO GRUPAL Mediante un debate en el aula se socializa el vocabulario científico (VAC) de las diferentes alteraciones morfológicas encontradas en los eritrocitos, esto permitirá una confrontación de saberes y a la vez el docente podrá visualizar la apropiación del conocimiento de los estudiantes. UNIDAD III PRACTICA 1- PRINCIPIOS Y METODOS DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA, TINCION DE WRIGHT. Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 2- DETERMINACION DE HEMOGLOBINA , HEMATOCRITO Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 3. DETERMINACION DE RETICULOCITOS Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 4. DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 5. RECUENTO DE LEUCOCITOS . Fundamento, materiales y métodos, interpretación clínica y reporte de las pruebas de laboratorio. 3-HEMOGRAMA MANUAL. 4- HEMOGRAMA AUTOMATIZADO 5- OBSERVACION DE LA MORFOLOGIA NORMAL Y ANORMAL DEL ERITROCITO Con los parámetros de la OMS. 6- OBSERVACION DE LAS INCLUSIONES ERITROCITARIA Con los parámetros de la OMS. 7- PRUEBAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO CLINICO PARA EL DIAGNOSTICO DE ANEMIAS . 43
  • 44. En la siguiente tabla encontrará una serie de competencias que le servirán de guía para comprender los principios y métodos del extendido de sangre periférica y la coloración de Wright, también le permitirán tener claridad sobre el hemograma manual y automatizado , recuento de reticulocitos VSG, recuento de leucocitos. COMPETENCIAS LOGROS 1. Aplicar los conocimientos para realizar un I. Comprendo el método para un frotis de sangre periférica y una coloración con buen frotis de sangre periférica buen control de calidad. 2. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento de la determinación de los procedimientos del cuadro correlacionar los procedimientos del hemático manual ( Eritrograma) Eritrograma (Frotis de sangre periférica, coloración de Wright, determinación de II. Identifico equipos, materiales, reactivos y procedimientos que se utilizan para hemoglobina y hematocrito, citología realizar el cuadro hemático manual en el laboratorio clínico. eritrocitaria, manual.) III. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos del cuadro hemático manual ( Eritrograma) IV. interpreto y correlaciono las alteraciones de un hemograma en las anemias más comunes que se evidencien en el laboratorio. V. Reporto las alteraciones morfológicas en el frotis de sangre periférica de las patologías más comunes encontradas en el laboratorio. VI. interpreto el control de calidad aplicado en los procedimientos del hemograma manual . 3. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento para la determinación de la VSG. y la correlaciono correlacionar los procedimientos de con la clínica . Velocidad de sedimentación globular y su II Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos de la importancia clínica . VSG. 4. Capacidad de Analizar e interpretar y I. Conozco el fundamento para el conteo de reticulocitos y su importancia correlacionar los procedimientos para el clínica . recuento de reticulocitos , y su importancia II. Desarrollo habilidades y destrezas, relacionadas con los procedimientos de clínica . los reticulocitos. 5. Demuestro capacidad de analizar e I. Conozco el fundamento para el conteo de leucocitos interpretar el recuento de leucocitos. II. Adquiero habilidades y destrezas en los cálculos y conteo en cámara de leucocitos. 44
  • 45. 6.Capacidad de Interpretar el cuadro I. Interpreto el cuadro hemático automatizado ,incluyendo las alarmas . hemático automatizado. II. Identifico el principio de la impedancia eléctrica y la dispersión de la luz. III. interpreto el control de calidad aplicado en los hemogramas ABORDAJE TEORICO DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA Y LA COLORACION DE WRIGHT HEMATOLOGIA RODAK El estudio de las células sanguíneas por medio de la observación en un microscopio de las preparaciones coloreadas, conocido como ESP, ha sido uno de los exámenes más antiguos e importantes en el laboratorio clínico. La práctica del ESP es de gran utilidad en hematología ya que permite visualizar la morfología celular, estimar el número de células en sangre periférica y determinar la eventual presencia de elementos atípicos. Los resultados obtenidos con este estudio son un reflejo del funcionamiento de la médula ósea y de los factores que influyen en las diferentes poblaciones celulares. El extendido de sangre periférica permite la evaluación del estado de maduración de las células sanguíneas , las características tinto riales, el contenido de los gránulos, las inclusiones y formas celulares, una adecuada orientación en la evaluación de la respuesta inmune , todo lo cual se correlaciona con la fisiopatología de ciertas enfermedades, permitiendo esto un manejo inicial simplificado de los pacientes. 45
  • 46. TINCION DEL FROTIS DE SANGRE PERIFERICA El propósito de teñir los frotis sanguíneos es identificar las células y reconocer fácilmente la morfología a través del microscopio . La tinción de Wright o Wright- Giemsa es la más utilizada con mayor frecuencia en el frotis de sangre periférica y médula ósea. Ambas contienen eosina y azul de metileno , por lo tanto , se denominan tinciones policromáticas . Las células se fijan sobre el portaobjetos con el metanol de la tinción . Las reacciones de tinción dependen del Ph; y la tinción real de los componentes celulares sucede cuando se agrega una solución amortiguadora (pH 6,4) a la tinción . El azul de metileno libre es básico y tiñe de azul los componentes celulares ácidos como por ejemplo, el RNA. La eosina libre es ácida y tiñe de rojos los componentes básicos , como la hemoglobina o los gránulos eosinófilos . Los neutrófilos posen gránulos citoplasmáticos que tiñen pH neutro y admiten algunas características de ambas tinciones. Un frotis teñido de manera adecuada tiene las siguientes características : 1. Los eritrocitos deben ser de color rosa a salmón 2. Los núcleos son de color azul oscuro a violeta 3. Los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos son de color lila 4. Los gránulos citoplasmáticas de los basófilos son de color azul oscuro a negro. 5. Los gránulos citoplasmáticas de los eosinófilos son de color rojo a anaranjado. 6. El área entre las células deben estar limpia y libre de precipitado de colorantes. Los mejores resultados de la tinción se obtienen de frotis recientemente preparados en un periodo de 2 a 3 horas de recolectada la muestra. Los frotis se deben dejar secar completamente antes de teñirse .Carr Rodak. FUNDAMENTO DE LA TECNICA DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA Consiste en la extensión de una gota de sangre sobre un portaobjeto (25 x 75 mm) mediante una lámina con borde esmerilado. MATERIALES Y REACTIVOS Materiales Sangre venosa con K2- EDTA o sangre capilar Alcohol de 70ºC Algodón Lanceta descartable 46