Guía de experimentación para el cultivo de bacterias en el laboratorio de la escuela.

1. Educación para la Salud – año 2011 – Unidad I – Noxas Biológicas – Docente: José Miguel Palma
TRABAJO EXPERIMENTAL Nº 1 – CULTIVO DE BACTERIAS
Objetivos del trabajo:
1.Reconocer la importancia de la higiene personal en la prevención de enfermedades de origen
bacteriano y fúngico.
2.Conocer técnicas básicas para el cultivo de bacterias in Vitro.
3.Desarrollar habilidades para la comunicación.
4.Adquirir destrezas en el manejo de dispositivos de laboratorio.
Materiales:
1. Placas de Petri con agar 5. Marcador indeleble
2. Alcohol en gel 6. Estufa de cultivo
3. Jabón líquido 7. Hisopos esterilizados
4. Guantes descartables 8. Cinta scotch o similar
Procedimiento:
IMPORTANTE: LEE ATENTAMENTE TODAS LAS CONSIGNAS ANTES DE EMPEZAR EL TRABAJO.
NO ABRAS LAS CAJAS DE PETRI, LOS GUANTES NI LOS HISOPOS HASTA QUE EL PROFESOR LO INDIQUE.
1. Cada grupo cuenta con tres cajas de Petri con agar nutritivo, hisopos, un juego de guantes
descartables, alcohol en gel, jabón líquido y marcador indeleble.
2. Rotulen las cajas de Petri de la siguiente forma:
a) En la superficie de la “tapa” más grande (la que no contiene el agar) escriban en letra
pequeña el nombre de los integrantes del grupo). Deben escribirlos lo más pequeño posible
para que no interfieran en la visualización del contenido de la placa. NO ABRAN POR NINGUN
MOTIVO LA PLACA HASTA QUE SE LES AVISE.
b) Den vuelta la placa y en las bases de dos de las placas (la más pequeña, que contiene el
agar), realicen con el marcador el siguiente trazado:
Consideren la placa como un reloj, con tres cuadrantes: el
cuadrante entre las 12 hs y las 15 hs (1) lleva las letras AG (alcohol
en gel); el cuadrante entre las 21 hs y las 12 hs (2), lleva las letras
JL (jabón líquido). El semicírculo inferior (3) lleva las letras SL (sin
lavarse). Vuelvan a dar vuelta la placa SIN ABRIRLA.
c) Repitan el mismo procedimiento con otra de las placas, pero esta
vez, escriban las letras MM (mi mesa) en el cuadrante 1, PM (piso
debajo de la mesa) en el cuadrante 2 y MP (manija de la puerta) en
el semicírculo 3.
d) En la tercera placa sólo se escriben los integrantes del grupo en
la tapa superior, y en la parte inferior: FAUCES.
3. Elijan a un integrante del equipo para ser el “extraccionista”. Para ello, deberá lavarse las
manos con jabón líquido durante 30 segundos y luego aplicarse alcohol en gel y frotar manos y
dedos por 20 segundos. Una vez que hizo esto, podrá manipular los hisopos. Si el grupo es
numeroso, pueden ser dos los extraccionistas.
Un miembro del grupo deberá lavarse las manos sólo con jabón líquido durante 30 segundos y
luego no tocar nada con sus manos. Otro miembro del grupo se limpiará las manos sólo con
alcohol en gel durante 20 segundos y tampoco deberá tocar nada.
Una vez hecho esto, el o los extraccionistas realizarán la siguiente actividad:
Abren el envase de hisopos y toman un hisopo por su parte media (el plástico). Frotan
suavemente las yemas de los dedos del compañero/a que se lavó con alcohol en gel. Abren
entonces la placa de petri rotulada como se explicó arriba y van realizando pequeños toques
sobre el agar, en la zona delimitada con la letra AG, sin que el hisopo lo rompa o perfore. El
toque debe ser suave y breve. Cierren la placa y tiren el hisopo a una bolsa de residuos.
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Repitan el procedimiento ahora con la alumna o alumno que se lavó las manos con jabón
líquido. Esta vez, realicen los toques en el cuadrante JL. Vuelvan a cerrar la placa y tiren el
hisopo. Por último, el extraccionista, irá frotando con un hisopo nuevo, las yemas de los
dedos de los demás compañeros del equipo que no se lavaron las manos e hicieron haciendo
toques sobre el semicírculo que queda en la placa. Un toque por cada compañero. Cierren la
placa y asegúrenla con cinta adhesiva. Coloquen la placa en la estufa de cultivo, que debe
estar a 37º C. Si marca otro valor, avísenle al profesor.
4. Ahora, todos los miembros del equipo deberán lavarse las manos con alcohol en gel durante
30 segundos. Cada uno tomará un hisopo y frotará sobre la mesa de trabajo, el piso debajo de
la mesa y la manija de la puerta del aula o de las ventanas. Luego, por turnos, irán haciendo
toques en cada una de las zonas de la 2ª placa. Apenas terminen, cierren la placa, asegúrenla
con cinta y tiren los hisopos.
5. Ahora uno de los extraccionistas deberá volver a lavarse las manos con alcohol en gel y una
vez que éste secó, ponerse los guantes descartables. Toma un hisopo esterilizado y con
suavidad, realizará el frotado del hisopo sobre la cara interna de la mejilla de los
compañeros.
DEBERÁ UTILIZAR UN NUEVO HISOPO POR CADA COMPAÑERO.
Esta técnica es similar a la técnica de hisopado de fauces que se utiliza para realizar cultivos
de bacterias de boca y garganta. Cada vez que realiza el hisopado, abrirá la tercera placa de
cultivo e irá tocando la placa, dos o tres veces por cada hisopo. Los hisopos utilizados se tiran
inmediatamente. Una vez que se hizo el hisopado con todos los compañeros, se tapa la placa,
se asegura con cinta y se lleva a la estufa de cultivo a 37ºC.
A la semana se abre la estufa y se observan los resultados. Dibujen el estado de las placas, e
indiquen en cuáles cuadrantes hubo menos o más crecimiento de bacterias.
¿Preveían que el crecimiento iba a ser como lo ven? ¿Cómo será el cultivo si realizamos un
hisopado en los pasamanos de un colectivo? Sugieran hipótesis que expliquen estas
observaciones. Propongan acciones que permitan llevar al mínimo de bacterias las zonas en
donde hubo más crecimiento.
Placa 1 Placa 3 Placa 2
Apellido y nombres: Curso:
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