Praktikum 1 Organizační záležitosti Úvod do klinické genetiky a cytogenetiky Mikroskopická technika
Vyplnit prezenční karty <ul><li>Uveďte čitelně své příjmení a jméno, číslo kruhu, domácí a pražskou adresu do předtištěnýc...
Organizační záležitosti
Ústav biologie a lékařské genetiky <ul><li>Věra Tůmová  </li></ul><ul><li>Dr. Eduard Kočárek </li></ul><ul><li>[email_addr...
Praktikum z lékařské biologie <ul><li>Koná se vždy v TPÚ Plzeňská v posluchárně ÚBLG </li></ul><ul><li>Jednorázově lze tol...
Kritétria k udělení zápočtu z lékařské biologie v letním semestru 1. ročníku <ul><li>Maximálně dvě neomluvené absence na p...
Studenti nesplňující některou z uvedených podmínek pro udělení zápočtu <ul><li>budou podrobeni ústnímu přezkoušení v závěr...
Doporučená literatura ke studiu <ul><li>Kočárek E., Pánek M., Novotná D.:  Klinická cytogenetika I. skriptum UK 2.LF, Karo...
Od příštího týdne najdete prezentace k cytogenetickým praktikám na www: <ul><li>http://camelot2.lf2.cuni.cz/turnovec/ublg/...
Doplňující literatura <ul><li>Kočárek E.:  Genetika. Scientia, Praha, 2004 </li></ul><ul><li>Nussbaum R. L., McInnes R. R....
Skripta pro ostatní LF <ul><li>Kapras J. a kol.:  Kapitoly z lékařské biologie a genetiky I. skriptum UK 1.LF, Karolinum, ...
Prosíme vyplnit lístky na stolech – slouží jako kontrola a podklad pro prezenci.
Laboratorní vyšetření v klinické genetice,  základy cytogenetiky
Jak vzniká geneticky podmíněné onemocnění? DNA RNA protein znak, resp. fenotypový projev Změna sekvence DNA, změna struktu...
Jak geneticky podmíněná onemocnění vyšetřujeme? pacient rodina genealogické vyšetření chromozomy cytogenetické vyšetření D...
Základem cytogenetického vyšetření je analýza chromozomů.
Chromozom krátké (p-) raménko dlouhé (q-) raménko centromera chromatida tel omera tel omera repetitivní (satelitní) sekven...
Telomery lidských chromozomů
Kolik má chromozom chromatid? syntéza (replikace) DNA DNA chromozom 1 chromatida = 1 molekula DNA
Typy chromozomů metacentrický (mediocentrický) submetacentrický (submediocentrický) akrocentrický telocentrický satelity (...
Vizualizace a pozorování chromozomů,  mikroskopická technika
Úkol 1: Pojmenujte jednotlivé části mikroskopu 1 2 4 5 6 7 3 okulár objektiv stolek kondenzor stativ šroub hrubého zaostře...
Stereomikroskop
Stereomikroskopy vybavené zdroji studeného světla „ husí krk“
Studené světlo <ul><li>Tradiční světelné zdroje jako žárovky nebo plynem plněné výbojky vyzařují světlo i teplo stejným sm...
Měření velikosti mikroskopických objektů v optickém mikroskopu okulárové měřítko (okulárový mikrometr)
Kalibrace okulárového měřítka
Měření velikosti mikroskopických objektů
Barvení chromozomů pro účely světelné mikroskopie <ul><li>Giemsa-Romanowski (Wrightovo barvivo) </li></ul><ul><li>(Hematox...
Barvení Giemsou leukocyty chromozomy
Úkol 2: Pozorování chromozomů <ul><li>Preparáty byly získány z dělících se  lymfocytů lidské periferní krve .  </li></ul><...
Prohlídka skel pod mikroskopem <ul><li>Sklo položíme (buňkami nahoru!)  na stolek mikroskopu a prohlížíme  objektivem o ma...
Úkol 3: Na obrázku jsou znázorněny chromozomy lidské somatické buňky obarvené Giemsovým barvivem. A) Jaké chromozomy jsou ...
velké metacentry malé metacentry velké akrocentry malé akrocentry zbytek - submetacentry
14 8 10 14 14 + 8 + 14 + 10 = 46 Počet chromozomů
Fluorescenční mikroskop Princip fluorescence:
Schéma fluorescenčního mikroskopu
Fluorescenční barviva v genetice <ul><li>DAPI ( 4',6- d i a midino-2- p henyl i ndole ) </li></ul><ul><li>PI ( p ropidium ...
Příprava na příští týden <ul><li>Skripta Klinická cytogenetika I. </li></ul><ul><ul><li>Kapitola 5 (str. 34 – 36) </li></u...
Na shledanou!
Upcoming SlideShare
Loading in …5
×

Praktikum 1 07

2,834 views

Published on

Published in: Education, Business
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
2,834
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
55
Actions
Shares
0
Downloads
23
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

Praktikum 1 07

  1. 1. Praktikum 1 Organizační záležitosti Úvod do klinické genetiky a cytogenetiky Mikroskopická technika
  2. 2. Vyplnit prezenční karty <ul><li>Uveďte čitelně své příjmení a jméno, číslo kruhu, domácí a pražskou adresu do předtištěných řádků. </li></ul><ul><li>Na volné místo doplňte mailovou adresu, kterou si pravidelně vybíráte, popř. číslo mobilu. </li></ul><ul><li>Karta slouží k registraci vaší prezence, testových výsledků, popř. dalších poznámek k vaší účasti na praktikách. </li></ul>
  3. 3. Organizační záležitosti
  4. 4. Ústav biologie a lékařské genetiky <ul><li>Věra Tůmová </li></ul><ul><li>Dr. Eduard Kočárek </li></ul><ul><li>[email_address] </li></ul><ul><li>telefon FN Motol: 224 435 980 (E. Kočárek) </li></ul><ul><li>telefon TPÚ Plzeňská: 257 296 151 (pí.Tůmová) </li></ul><ul><li>Sekretariát ÚBLG – FN Motol, dětská část, 4.patro – G </li></ul>PROSÍME, MLUVTE S NÁMI!
  5. 5. Praktikum z lékařské biologie <ul><li>Koná se vždy v TPÚ Plzeňská v posluchárně ÚBLG </li></ul><ul><li>Jednorázově lze tolerovat pozdní příchod do 15 minut po začátku praktika, jinak nelze uznat prezenci. </li></ul><ul><li>V letním semestru se přestávky během výuky nekonají, každý student má možnost se na krátkou dobu (cca 5 minut) vzdálit. </li></ul>
  6. 6. Kritétria k udělení zápočtu z lékařské biologie v letním semestru 1. ročníku <ul><li>Maximálně dvě neomluvené absence na praktiku/semináři </li></ul><ul><ul><li>Další absenci lze omluvit pouze při závažných důvodech a po předložení příslušného potvrzení. </li></ul></ul><ul><ul><li>Nekázeň nebo zásadní neznalosti mohou vést k vyloučení z praktik a neuznání prezence. </li></ul></ul><ul><ul><li>Jakákoliv absence má za následek ztrátu bodů za zameškaný test. </li></ul></ul><ul><ul><li>Přestupy studentů do jiných kruhů jsou nepřípustné . </li></ul></ul><ul><li>Minimálně 80% maximálního možného bodového zisku za testy </li></ul><ul><ul><li>Každý test bude bez ohledu na počet otázek hodnocen stupnicí 0 - 10 bodů. Bodové zisky z jednotlivých testů se v závěru semestru sčítají. </li></ul></ul><ul><ul><li>Až 5 bodů navíc lze udělit za referát . </li></ul></ul><ul><li>Osobní přítomnost na zápočtovém praktiku </li></ul>
  7. 7. Studenti nesplňující některou z uvedených podmínek pro udělení zápočtu <ul><li>budou podrobeni ústnímu přezkoušení v závěrečném praktiku, případně v jiném termínu (v odůvodněných případech a po předchozí dohodě se zkoušejícím) </li></ul><ul><li>Při neúspěchu lze přezkoušení na zápočet ještě dvakrát opakovat. </li></ul><ul><li>Studenti s neuděleným zápočtem budou nuceni opakovat 1.ročník. </li></ul>
  8. 8. Doporučená literatura ke studiu <ul><li>Kočárek E., Pánek M., Novotná D.: Klinická cytogenetika I. skriptum UK 2.LF, Karolinum, Praha, 2006 </li></ul><ul><li>Kočárek E.: Praktická cvičení z klinické cytogenetiky. skriptum UK 2.LF, Karolinum, Praha, 2006 </li></ul><ul><li>Goetz P. a kol.: Kapitoly z lékařské biologie I. skriptum UK 2.LF, H &H, Praha, 1993 </li></ul><ul><li>Goetz P. a kol.: Vybrané kapitoly z lékařské biologie II. skriptum UK 2.LF, Karolinum, Praha, 2002 </li></ul>
  9. 9. Od příštího týdne najdete prezentace k cytogenetickým praktikám na www: <ul><li>http://camelot2.lf2.cuni.cz/turnovec/ublg/vyuka/ </li></ul>
  10. 10. Doplňující literatura <ul><li>Kočárek E.: Genetika. Scientia, Praha, 2004 </li></ul><ul><li>Nussbaum R. L., McInnes R. R., Willard H. F.: Thompson & Thompson – Klinická genetika. Triton, Praha, 2004 </li></ul>
  11. 11. Skripta pro ostatní LF <ul><li>Kapras J. a kol.: Kapitoly z lékařské biologie a genetiky I. skriptum UK 1.LF, Karolinum, Praha, 1996 </li></ul><ul><li>Soukupová M., Soukup F.: Kapitoly z lékařské biologie a genetiky II. skriptum UK 1.LF, Karolinum, Praha, 1998 </li></ul><ul><li>Kapras J., Kohoutová M.: Kapitoly z lékařské biologie a genetiky III. skriptum UK 1.LF, Karolinum, Praha, 1999 </li></ul><ul><li>Reischig J.: Obecná genetika – praktická cvičení. skriptum UK LF Plzeň, Karolinum, Praha, 1998 </li></ul>
  12. 12. Prosíme vyplnit lístky na stolech – slouží jako kontrola a podklad pro prezenci.
  13. 13. Laboratorní vyšetření v klinické genetice, základy cytogenetiky
  14. 14. Jak vzniká geneticky podmíněné onemocnění? DNA RNA protein znak, resp. fenotypový projev Změna sekvence DNA, změna struktury a počtu chromozomů Změna genové exprese, vznik RNA o chybné sekvenci Změna enzymové aktivity, poruchy stavby buněk a tkání Změna stavby a funkce orgánů, poruchy metabolismu, poruchy vývoje mutace
  15. 15. Jak geneticky podmíněná onemocnění vyšetřujeme? pacient rodina genealogické vyšetření chromozomy cytogenetické vyšetření DNA molekulárně-biologické vyšetření
  16. 16. Základem cytogenetického vyšetření je analýza chromozomů.
  17. 17. Chromozom krátké (p-) raménko dlouhé (q-) raménko centromera chromatida tel omera tel omera repetitivní (satelitní) sekvence DNA repetitivní sekvence (TTAGGG) n repetitivní sekvence (TTAGGG) n DNA
  18. 18. Telomery lidských chromozomů
  19. 19. Kolik má chromozom chromatid? syntéza (replikace) DNA DNA chromozom 1 chromatida = 1 molekula DNA
  20. 20. Typy chromozomů metacentrický (mediocentrický) submetacentrický (submediocentrický) akrocentrický telocentrický satelity (nesměšovat se satelitní DNA)
  21. 21. Vizualizace a pozorování chromozomů, mikroskopická technika
  22. 22. Úkol 1: Pojmenujte jednotlivé části mikroskopu 1 2 4 5 6 7 3 okulár objektiv stolek kondenzor stativ šroub hrubého zaostření šroub jemného zaostření
  23. 23. Stereomikroskop
  24. 24. Stereomikroskopy vybavené zdroji studeného světla „ husí krk“
  25. 25. Studené světlo <ul><li>Tradiční světelné zdroje jako žárovky nebo plynem plněné výbojky vyzařují světlo i teplo stejným směrem. Osvětlovaný objekt se proto během osvětlování ohřívá. </li></ul><ul><li>Diody LED (Light-Emitting Diode) vyzařují světelnou a tepelnou energii (infračervené záření) v rozdílných směrech. </li></ul>
  26. 26. Měření velikosti mikroskopických objektů v optickém mikroskopu okulárové měřítko (okulárový mikrometr)
  27. 27. Kalibrace okulárového měřítka
  28. 28. Měření velikosti mikroskopických objektů
  29. 29. Barvení chromozomů pro účely světelné mikroskopie <ul><li>Giemsa-Romanowski (Wrightovo barvivo) </li></ul><ul><li>(Hematoxylin – v cytogenetice zřídka) </li></ul><ul><li>Acetokarmín </li></ul><ul><li>Acetoorcein </li></ul><ul><li>Fuchsin – Feulgenova reakce </li></ul>
  30. 30. Barvení Giemsou leukocyty chromozomy
  31. 31. Úkol 2: Pozorování chromozomů <ul><li>Preparáty byly získány z dělících se lymfocytů lidské periferní krve . </li></ul><ul><li>Krev jsme po odběru kultivovali v médiu, kde byly buňky přinuceny k mitotickému dělení. </li></ul><ul><li>Vzniklou suspenzi jsme fixovali, nakapali na skla a po zaschnutí obarvili roztokem Giemsa-Romanowski. </li></ul><ul><li>Blíže viz skripta Praktická cvičení </li></ul><ul><ul><li>str. 9 – 2.4.Úkol 1 </li></ul></ul>
  32. 32. Prohlídka skel pod mikroskopem <ul><li>Sklo položíme (buňkami nahoru!) na stolek mikroskopu a prohlížíme objektivem o malém zvětšení (4x–10x). </li></ul><ul><li>Po zaostření na plochu obsahující větší počet buněk (výrazně modrofialově zbarvená jádra nebo skupinky chromozomů) použijeme objektiv s vyšším zvětšením (nejlépe 40x – 45x) – pozor při zaostřování (nebezpečí poškození preparátu a znehodnocení objektivu!) </li></ul><ul><li>Vyhledáme chromozomy a zkusíme je spočítat. Obraz v mikroskopu srovnáme s přiloženou fotografií. </li></ul>
  33. 33. Úkol 3: Na obrázku jsou znázorněny chromozomy lidské somatické buňky obarvené Giemsovým barvivem. A) Jaké chromozomy jsou na obrázku : jednochromatidové nebo dvouchromatidové? B) Určete jednotlivé typy chromozomů. C) Zjistěte, kolik chromozomů obsahuje lidská somatická buňka.
  34. 34. velké metacentry malé metacentry velké akrocentry malé akrocentry zbytek - submetacentry
  35. 35. 14 8 10 14 14 + 8 + 14 + 10 = 46 Počet chromozomů
  36. 36. Fluorescenční mikroskop Princip fluorescence:
  37. 37. Schéma fluorescenčního mikroskopu
  38. 38. Fluorescenční barviva v genetice <ul><li>DAPI ( 4',6- d i a midino-2- p henyl i ndole ) </li></ul><ul><li>PI ( p ropidium i odide) </li></ul><ul><li>Chinakrin </li></ul><ul><li>Ethidium bromid </li></ul>
  39. 39. Příprava na příští týden <ul><li>Skripta Klinická cytogenetika I. </li></ul><ul><ul><li>Kapitola 5 (str. 34 – 36) </li></ul></ul><ul><li>Skripta Praktická cvičení </li></ul><ul><ul><li>Kapitola 3 (str. 13 – 15) </li></ul></ul><ul><li>Referát – konfokální mikroskopie </li></ul>
  40. 40. Na shledanou!

×