Espectroscopía U V   - V I S I B L E  QFB Pedro Ayala MC
Antecedentes
Los  Métodos  y/o  Técnicas  que emplean instrumentos , analizan las muestras con el proposito de conocer alguna caracterí...
Cuando el  Analito  es sometido a un estudio bajo un instrumento, existen dos formas de generar una señal. Estas son :  A)...
Componentes básicos de un instrumento analítico Generador  de señal Transductor De entrada Transformador de señales Transd...
Componentes básicos de un instrumento analítico Generador  de señal Transductor De entrada Transformador de señales Transd...
Ejemplos de Instrumentos Analíticos Balanza pHmetro Microondas Refractómetro Espectrofotómetro GC HPLC AA IR HRMN Turbidim...
ESPECTROFOTOMETRO
Radiación electromagnética  C=    (Ciclos/s)  (Hz) E = h    Ciclo Longitud de onda Frecuencia  (nm)
Radiación electromagnética C=    E = h       =  450 nm C =  3 X10 17  nm/s    =  6.6 X 10 14  Hz C/   =    h = ...
REFRACCIÓN
Radiación  monocromática Refracción Prisma Luz blanca Radiación monocromática   630 – 780  590 – 630 560 – 590 490 – 560 4...
REFRACCIÓN
Rayos   Rayos X Ultravioleta Visible Infrarojo Microondas Longitud de onda (  ) Fracción VIS del Espectro EM T V Radio
Espectrofotómetro [email_address] Lámpara Selector Celda Detector computadora
Espectrofotometro [email_address] Lampara Selector Celda Detector computadora
Espectrofotometro [email_address] Lampara Celda Detector computadora Selector
 
 
Espectrofotómetro  (doble haz) Absorbancia y Transmitancia   A = Log I  / Io  A=  -  log T  A=  -  log (%T/100)  I  = Inte...
Absorbancia y Transmitancia Absorbancia A  = Log  I  o / I I o I Transmitancia   T  =  I / I o Absorbancia   y  transmitan...
? Absorbancia  A   =  - Log   ( %T /100) transmitancia   %T   =  (100) (AntiLog   –A ) A  = Ejercicio 0.251 %T   = 56 ABSO...
A = - log  T   A =   cl   Ley de Beer 1) 2) Absorbancia Lámpara Celda de muestra Selector I o I
A = Absorbancia    =coeficiente de extinción  C = concentración molar  l = longitud de celda (cm) POR EJEMPLO.   ¿Cuál e...
Curva de calibración Absorbancia Concentración A
¿ABSORBANCIA? Muestra Problema
Conc.   Prob   =  (A  Prob /A  Patrón )(Conc.  Patrón ) A Problema = 0.458  A Patrón = 0.765  Conc. Patrón= 145mg%  Conc. ...
Espectro de Absorción Absorbancia Longitud de onda (nm)  A 25 mM 5 mM   Max
Azul de metileno Absorbancia Longitud de onda (nm)  A 660 nm En general un compuesto puede absorber en la región VIS si c...
Calibración  Exactitud  Incertidumbre (Límite de detección) CONFIABILIDAD <ul><li>Debe existir: </li></ul><ul><li>Exactitu...
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Espectrofotometro

  1. 1. Espectroscopía U V - V I S I B L E QFB Pedro Ayala MC
  2. 2. Antecedentes
  3. 3. Los Métodos y/o Técnicas que emplean instrumentos , analizan las muestras con el proposito de conocer alguna característica física o química del analito y esto permite caracterizarlo , identificarlo o cuantificarlo . A) Señal o Respuesta B) Tiempo de respuesta C) Resolución (purificación) El equipo genera :
  4. 4. Cuando el Analito es sometido a un estudio bajo un instrumento, existen dos formas de generar una señal. Estas son : A) midiendo directamente la actividad del analito B) con un estimulo y midendo su respuesta Actividad iónica Electrodo (VOLTAJE) (Muestra) A) Luz (Muestra) Fototubo (CORRIENTE) B)
  5. 5. Componentes básicos de un instrumento analítico Generador de señal Transductor De entrada Transformador de señales Transductor De salida Señal De Salida Señal Eléctrica , luminosa o Mecánica Señal Analítica EJEMPLO Medidor o escala Registrador 12.301 Unidad Digital Luz Fuente Mta Detector Electricidad Luz Dispositivo de lectura
  6. 6. Componentes básicos de un instrumento analítico Generador de señal Transductor De entrada Transformador de señales Transductor De salida 1. Fuente luminosa 2. Estimulo eléctrico Dispositivos Analógicos 1. Electrodo 2. Fototubo 3. Termopar 1. Amplificador 2. Convertidor 3. Filtro 4. Integrador 1. Impresora alfa numérica 2. Medidores (A/D) 3. Monitor 4. Osciloscopio 5. Registrador
  7. 7. Ejemplos de Instrumentos Analíticos Balanza pHmetro Microondas Refractómetro Espectrofotómetro GC HPLC AA IR HRMN Turbidimetro Fluorómetro
  8. 8. ESPECTROFOTOMETRO
  9. 9. Radiación electromagnética  C=   (Ciclos/s) (Hz) E = h  Ciclo Longitud de onda Frecuencia  (nm)
  10. 10. Radiación electromagnética C=   E = h   =  450 nm C =  3 X10 17 nm/s  =  6.6 X 10 14 Hz C/  =  h =  6.62 X10 -27 ergs-s E =  4.36 X10 -12 ergs
  11. 11. REFRACCIÓN
  12. 12. Radiación monocromática Refracción Prisma Luz blanca Radiación monocromática 630 – 780 590 – 630 560 – 590 490 – 560 450 – 490 380 - 450 Espectro visible  (nm) Color
  13. 13. REFRACCIÓN
  14. 14. Rayos  Rayos X Ultravioleta Visible Infrarojo Microondas Longitud de onda (  ) Fracción VIS del Espectro EM T V Radio
  15. 15. Espectrofotómetro [email_address] Lámpara Selector Celda Detector computadora
  16. 16. Espectrofotometro [email_address] Lampara Selector Celda Detector computadora
  17. 17. Espectrofotometro [email_address] Lampara Celda Detector computadora Selector
  18. 20. Espectrofotómetro (doble haz) Absorbancia y Transmitancia A = Log I / Io A= - log T A= - log (%T/100) I = Intensidad A = Absorbancia T = transmitancia Log IR / IM = A Lámpara computadora Detector Celda de muestra Celda de referencia IR IM Selector
  19. 21. Absorbancia y Transmitancia Absorbancia A = Log I o / I I o I Transmitancia T = I / I o Absorbancia y transmitancia A = Log 1/ T Absorbancia y transmitancia A = - Log T Lámpara Celda de muestra Selector
  20. 22. ? Absorbancia A = - Log ( %T /100) transmitancia %T = (100) (AntiLog –A ) A = Ejercicio 0.251 %T = 56 ABSORBANCIA %TRANSMITANCIA 0 100 2 0 50 0.3 1
  21. 23. A = - log T A =  cl Ley de Beer 1) 2) Absorbancia Lámpara Celda de muestra Selector I o I
  22. 24. A = Absorbancia   =coeficiente de extinción C = concentración molar l = longitud de celda (cm) POR EJEMPLO. ¿Cuál es la A de una substancia al 2.5 X 10 -5 M , con un   = 7,500 M -1 cm -1 ?. A= 0.18 Absorbancia En función de la naturaleza y de la concentración de la muestra A=  cl Ley de Lambert- Beer
  23. 25. Curva de calibración Absorbancia Concentración A
  24. 26. ¿ABSORBANCIA? Muestra Problema
  25. 27. Conc. Prob = (A Prob /A Patrón )(Conc. Patrón ) A Problema = 0.458 A Patrón = 0.765 Conc. Patrón= 145mg% Conc. Problema= ? Conc. Problema = (0.458/0.765)(145mg%) Problema Patrón Conc. Problema= 86.8 mg%
  26. 28. Espectro de Absorción Absorbancia Longitud de onda (nm)  A 25 mM 5 mM   Max
  27. 29. Azul de metileno Absorbancia Longitud de onda (nm)  A 660 nm En general un compuesto puede absorber en la región VIS si contiene al menos 5 grupos cromoforos conjugados y grupos auxocrómicos.   Max
  28. 30. Calibración Exactitud Incertidumbre (Límite de detección) CONFIABILIDAD <ul><li>Debe existir: </li></ul><ul><li>Exactitud </li></ul><ul><li>Precisión </li></ul><ul><li>Sensibilidad </li></ul><ul><li>Especificidad </li></ul>
  29. 31. Fin
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