El cariotipo espectral (SKY) permite visualizar todos los cromosomas humanos de una sola vez, con cada par de cromosomas pintados en un color fluorescente diferente. SKY se utiliza para detectar translocaciones crípticas y determinar el origen de las adiciones cromosómicas. Proporciona una interpretación visual fácil de los resultados cromosómicos complejos.

1. Cariotipo espectral (SKY)
SKY: enfoque de la
fluorescencia en la
técnica de
hibridación in situ
Permite visualizar
todos los
cromosomas
humanos de una
sola vez
cada par de
cromosomas pintados
en un color
fluorescente diferente

2. Combinación de cinco
fluorocromos
1. Naranja
PRINCIPIO:
2.rojo Texas
3. Cy5
4. espectro verde
Crear 2N - 1
número: 31 tipos de
colores se pueden
crear
5. Cy5.5
Dos técnicas FISH :
pintura cromosoma y
fluorescencia
multicolor .
Se necesita:
• PRIMERA : técnica de
dibujar una imagen entera
de cierto cromosoma
1. software especial
para detectar y
discriminar :
• SEGUNDA: técnica de
elaboración de imágenes de
varias señales de hibridación
Sondas de ADN que se
hibridan
simultáneamente.

3. Cada cromosoma es
marcado con una
combinación de
fluorocromos diferente.
Se hibridan las sondas
fluorescentes esencialmente
pintan el conjunto completo de
cromosomas en un arco iris de
colores
SKY implica la preparación de
sondas (secuencias cortas de
ADN de cadena simple).
Cada sondas individual en este
ADN " library " es
complementario a una región
de un cromosoma

4. EMPLEO:
en
Enfermedades :
FISH también
se ha utilizado
en aneuploidía
cromosómica
Asociadas
con
anormalidades
cromosómicas
particulares.
Por ejemplo en el cáncer:
• Los cromosomas presentan
aberraciones (translocaciones)
• La identificación de tales
anormalidades cromosómicas y
la determinación importantes
en el desarrollo de nuevos
métodos para el diagnóstico

5. Los resultados de esta técnica pueden
abrir campos a nuevas investigaciones
Ayuda a identificar alteraciones genéticas
recurrentes que identifiquen subtipos
específicos de una enfermedad.
En las leucemias agudas: el SKY ha
permitido la detección de translocaciones
crípticas en cromosomas

6. VENTAJAS
Convencionalmente: cuando un cromosoma de origen
desconocido se nota en un niño que sufre con alguna
anormalidad , se realiza un análisis cromosómico en
ambos padres con el fin de hacer un diagnóstico
definitivo del cromosoma en cuestión .
revelar si uno de los padres es portador de una
anomalía estructural equilibrada .
Esta ventaja de SKY es muy útil en la práctica clínica de
consejo genético.

7. Este método per
mite detectar
translocaciones
crípticas.
Detectar: origen
de las adiciones
en el brazo largo
del cromosoma
14, tan frecuentes
en neoplasias
linfoides.
El límite de
resolución de la
detección es de
aproximadamente
1-2 Mb
Fácil
interpretación
visual al analizar
los resultados .

8. No es posible evaluar las
anomalías estructurales :
1. Inversión
No detecta :
DESVENTAJAS
2. Deleción,
* Inversiones
3. Inserción
* pequeñas delecciones.
4. Duplicación
en el mismo cromosoma,
ya que estos se muestran
con el mismo color
No pueden ser
detectados :
1. El segmento Q positivo
2. Región satélite del
brazo largo del
cromosoma Y cerca del
centrómero .

9. CASO 1 : LA TRISOMÍA 11/22:
Los resultados de análisis de los cromosomas en la trisomía 11/22 usando SKY.
Se llevó a cabo después de que se detecta un marcador cromosómico extra en el Grupo
G, mediante bandas G y los resultados mostraron la trisomía del cromosoma 22 .
Uno de los cromosomas adicionales se distinguió por dos colores , y se dedujo a ser un cromosoma
derivado [ der ( 22 ) ] , probablemente como resultado de la translocación recíproca en la que los
brazos largos del cromosoma 11 ( q23.3 ) y el cromosoma 22 ( q11.2 ) fueron los puntos de
interrupción.
El cariotipo de este caso se describe como + der ( 22 ) t ( 11:22 ) ( q23.3 ; q11.2 )
Con el uso de la técnica de SKY , fue posible hacer un diagnóstico definitivo de la trisomía 11/22 en el
niño sin realizar ninguna prueba de cromosomas de los padres

11. Cromosoma 22.
• Incluye:
– la deleción 22q11.2
(Velocardiofacial y el
Síndrome de DiGeorge)
– Síndrome
microduplicación 22q11
– síndrome de Emanuel
– La translocación 11/22,
el síndrome del ojo de
gato
– Mosaico y completa
Trisomía 22

12. CASO 2: 13Q, SÍNDROME
Los resultados del análisis de los cromosomas de 13q - síndrome usando SKY indican anomalías
estructurales en los cromosomas 2 , 4 , y 13.
Para los cromosomas 2 y 4, la translocación recíproca t ( 2 ; 4 ) con puntos de interrupción en el brazo
largo del cromosoma 2 ( q24.2 ) y el brazo corto del cromosoma 4 ( p14 ).
Esta t ( 2 ; 4 ) puede implicar [ inv ( 4 ) ( p15.1p15.32 ) ] , que es una inversión paracéntrica con puntos de
interrupción en p15.1 y p15.32 en la parte del brazo corto del cromosoma 4 que ha sido translocado del
cromosoma 2 , y esto exige una verificación a través de cromosomas de alta resolución de bandas.
Así, en este caso , es necesario para un diagnóstico ulterior detallada prueba de cromosomas de los
padres a través de cromosoma de alta resolución de bandas.

15. Cariotipo espectral (SKY)
• Lo que detecta:
– Microscópicos anormalidades genómicas (> 5-10 Mb)
– Translocaciones balanceadas y no balanceadas
– aneuploidías
• Lo que no detecta:
– Anomalías submicroscópicas (<5Mb anormalidades genómicas)
– inversiones
– Las duplicaciones / deleciones
• Cuándo utilizar:
–
–
–
–
Como complemento de la g-banda cariotipo
Para definir reordenamientos complejos
Para identificar cromosomas marcadores
Cuando se necesitan cariotipos espectrales con calidad de
publicación
• Resultados disponibles en 10-15 días.