1. LEUCEMIAS
Prof. Dra. Maria Regina A. Azevedo
mraao@uol.com.br

2. LEUCEMIAS - HISTÓRICO
1845 – Bennet / Virchow (“sangue branco”)
1877 – Paul Ehrlich – classificação
- LEUCEMIAS AGUDAS (blastos)
- LEUCEMIAS CRÔNICAS (céls.diferenciadas)

3. LEUCEMIAS - HISTÓRICO
1976 – F.A.B. Classificação morfológica
Provas citoquímicas
1980 – Diferentes métodos diagnósticos
- estudo citogenético
- marcadores celulares (imunofenotipagem)
- microscopia eletrônica
- biologia molecular

4. Etiologia - Oncogenes
v-oncogenes => transformação malígna
c-oncogenes (proto oncogenes)  reguladores do ciclo cel.
- fosforilação
- sinais intracelulares via GTP
- controle da expressão genes RNA
- duplicação do DNA
Ex: c-abl (tirosina quinase) – LMC; c-ras (GDP / GTP) – LMA
c-myc (ligação DNA – transcrição) – Linfoma Burkitt

5. Proto-oncogenes

6. LEUCEMIAS - CONCEITO
 Distúrbio genético:
=> expressão anormal de proto oncogenes
↓
proliferação de células malígnas
Progressão malígna

7. LEUCEMIAS – FATORES DE RISCO
AMBIENTAIS DO HOSPEDEIRO
Radiação Ionizante Anormalidades cromossômicas
Agentes Químicos Hereditariedade
Retrovírus (HTLVI/II, HIV) Imunodeficiência
Disfunção crônica M.O.

8. LEUCEMIAS - FISIOPATOLOGIA
Alterações genéticas adquiridas (numéricas ou estruturais)
↓
Expressão anormal dos proto oncogenes
↓
Perda de controle do ciclo cel (proliferação lenta e indefinida)
↓
Transformação malígna – dominância clonal
↓
Neoplasia

9. HEMATOPOESE

10. LEUCEMIAS - CLASSIFICAÇÃO
Leucemia Mielóide Aguda – LMA
Agudas
“blastos”
Leucemia Linfóide Aguda - LLA
Leucemia Mielóde Crônica - LMC
Crônicas
“céls maduras”
Leucemia Linfóide Crônica - LLC

11. LEUCEMIAS AGUDAS

12. Presença de “ BLASTOS ”
LMA LLA

13. LEUCEMIAS AGUDAS
CLASSIFICAÇÃO F.A.B.
LEUCEMIA MIELÓIDE AGUDA - LMA:
(mieloblastos)
M0 – mieloblastos agranulares, CF com marc. Mielóides
M1 – mieloblastos sem maturação (90%) > 3% MPO + Bt. Auer
M2 – 30 a 90% mieloblastos, monocitos < 20%, Bt. Auer
M3 – predomínio promielócitos, Bt. Auer
M4 - > 30% blastos com > 20% comp. monocítico
M5 - > 80% comp. monocíticos imaturos (M5a) ou #(M5b)
M6 - > 50% eritroblastos, > 3% blastos não eritróides
M7 - > 30% megacarioblastos

15. CLASSIFICAÇÃO OMS (2001)

16. LEUCEMIAS AGUDAS – CLASSIFICAÇÃO F.A.B.
LEUCEMIA LINFÓIDE AGUDA - LLA: (linfoblastos)
L1 – linfoblastos pequenos e uniformes
L2 – linfoblastos grandes e pleomórficos
L3 – linfoblastos com mais basofilia e vacúolos (tipo Burkitt)

17. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL – L.A
Hemograma
Mielograma
Testes Complementares
- citoquímica, citogenética, imunofenotipagem, BM

18. CASO CLÍNICO
Homem, 35 anos apresentando febre
Hemograma
GV 2.70 x 10[12]/L
Hb 9.9 g/dL
ANEMIA Ht 28.7 %
VCM 106.3 fL
HCM 36.9 pg
CHCM 34.8 g/dL
GB 9.9 x 10[9]/L
Neutrófilos 4 %
Linfócitos 16
NEUTROPENIA Monócitos 1
Eosinófilos 0
Basófilos 0
Blastos 79
PLAQUETOPENIA Plaquetas 50 x 10[9]/L

19. MIELOGRAMA
> 20% de Blastos na M.O

20. PROVAS CITOQUÍMICAS
PRINCÍPIO:
Demonstração de enzimas/proteinas específicas nos
leucócitos
APLICAÇÃO:
 Diferenciação de blastos
 Caracterização das LLC
 Diferenciação entre infecção grave e leucemia

21. PROVAS CITOQUÍMICAS – L. AGUDAS
LMA LLA
Mieloperoxidase (gr. Azurófila) + (- M0) _
benzidina
Sudan Black + (- M0) _
PAS (glicogênio) - (+ M6) +
G* => aldeído + Base Shiff
Esterase (ANAE) - (+M4/M5) _
(Não específica)
TdT
(terminal deoxinucleotidil transf.) - +

22. ANÁLISE CITOGENÉTICA
- Estudo dos cromossomos na metáfase através da
inibição do fuso mitótico ( S.P. ou M.O. )
ALTERAÇÕES CROMOSSÔMICAS:
- Numéricas ( monossomia, trissomia )
- Estruturais ( translocação, deleção, inversões )
APLICAÇÃO:
- Prognóstico e resposta terapêutica das L.A
- Etiologia e fisiopatologia das leucemias
- Detecção de doença residual mínima

23. ANÁLISE CITOGENÉTICA

24. ANORMALIDADES CROMOSSÔMICAS
LMC – t (9, 22) – cr. Philadelphia (bcr/abl ) – 99%
LMA – t (8, 21) – 15 a 20% dos casos ( M2 )
t (15, 17) – 90% dos casos ( M3 )
inv (16) – 15% dos casos (M4 + eosinofilia)
LLA – t (4, 11) – leucemia congênita/bifenotípica
t (9, 22) - adultos com LLA
t (1, 19) – LLA pré B em crianças
LLC – trissomia cr 12 ( linhagem B )
t (14, 19) – linfócitos pequenos

25. IMUNOFENOTIPAGEM (marcadores)
PRINCÍPIO:
“Anticorpos monoclonais” para detecção de Ag:
- receptores de membrana, mIg / cIg, enzimas nucleares (TdT)
APLICAÇÃO:
 Diferenciação entre linfócitos B, T e subtipos
 Identificação de blastos das diferentes linhagens
 Prognóstico e tratamento das LLA, LLC e L. bifenotípicas
 Maturação celular, doença residual

26. Imunofenotipagem
Leucemias Agudas
Painel Primário
Anticorpos Linhagem
MPO/CD13/CD33 Mielóide
CD79a/CD19/CD22c Linfóide B
CD3c/CD7/CD2/CD5 Linfóide T

27. MÉTODOS DE ESTUDO:
Suspensão de células viáveis (Ag membrana) – CF
Imunocitoquímica – secções teciduais e esfregaços – IF
Citômetro de fluxo

28. LEUCEMIAS AGUDAS
“LEUCEMIA MIELÓIDE AGUDA”
Tipo celular predominante:
mieloblasto M0, M1, M2 (peroxidase +, CD33+)
promielócito M3 (peroxidase +)
monoblasto M4 e M5 (esterase +)
eritroblasto M6 (PAS +)
megacarioblasto M7 (CD41+)

29. M1

30. M1 PEROXIDASE +

31. M2

32. M3

33. M3 PEROXIDASE+

34. M4

35. M4 ESTERASE +

36. M5a

37. M5b

38. M6

39. M6 PAS+

40. M7

41. M7 GPIIbIIIa +

42. LEUCEMIA LINFÓIDE AGUDA
Tipo celular predominante - linfoblasto

43. L1

44. L2

45. LLA Peroxidase -

46. L3

47. Diagnóstico e conduta terapêutica na L.A

48. LEUCEMIAS CRÔNICAS

49. LEUCEMIAS CRÔNICAS
LINFÓIDES - LLC: (classificação imunológica)
CÉLULAS B CÉLULAS T
LLC ( linfócitos, +comum) LGL ( linfócitos granulares)
LPL- B (prolinfócitos) LPL -T ( prolinfócitos )
Tricoleucemia (Hairy cells) ATLL – HTLV (flower cells)
Linfomas não Hodgkin em fase Sínd. de Sézary (nc clivado)
leucêmica

50. LEUCEMIA LINFÓIDE CRÔNICA
HEMOGRAMA
Leucocitose com linfocitose (linfócitos maduros, atipias)
Fragilidade celular (manchas de Grumpet)
Anemia (AHAI)
Plaquetopenia
MIELOGRAMA
Infiltração de linfócitos

51. LLC (manchas de Grumpet)

52. Leucemia Pró Linfocítica

53. Linfócitos Granulares

54. Hairy cell - Tricoleucemia

55. Linfócitos Clivados (Sezary)

56. LEUCEMIA MIELÓIDE CRÔNICA
“Distúrbios mieloproliferativos”
1. Leucemia Mielóide Crônica (LMC)
14% das leucemias
Hiperplasia mielóide, hiperleucocitose, neutrofilia,
basofilia, desvio a esquerda, esplenomegalia
Presença de cromossomo Filadelfia (bcr-abl)
Curso trifásico (fase crônica, fase acelerada e crise
blástica)

57. LMC : hiperleucocitose em SP - DE

58. LMC – desvio a esquerda

59. MIELOGRAMA - LMC

60. Citogenética LMC - t(9,22)

61. LMC - t(9,22) → bcr-abl

62. Hibridização “in situ”
FISH
bcr-abl
FISH - normal

63. TRATAMENTO – INIBIDOR DA TIROSINA QUINASE

64. Mielofibrose

65. TRATAMENTO
- Quimioterapia
- Radioterapia
- Transplante de medula óssea
1891: uso da medula como forma terapêutica (uso oral);
1945: após Hiroshima – estudos intensificados;
1964: esclarecido o sistema HLA;
1972: 1º transplante de MO alogênico.

66. TMO
CTH: células-tronco do tecido hematopoético
> origina todas as células (gv,gb,plaquetas)
> marcador fenotípico: CD34+
> alta capacidade proliferativa
COLETADAS INFUNDIDAS RECEPTOR
(doador) (paciente)

67. REGIME DE CONDICIONAMENTO:
- Caracterizado por altas doses de quimioterapia
e/ou radioterapia.
- Objetivos:
> efeito imunossupressor
> efeito tumoricida
> baixa toxicidade

68. TIPOS DE TRANSPLANTE:
QUANTO A FONTE DAS CÉLULAS:
- Cordão Umbilical
- Sangue Periférico (aferese)

69. -Medula Óssea (punção)

70. TMO: Presente e futuro
- BRASIL: 2,5 transplantes medula/milhão de hab./ano.
 Países desenvolvidos: 7 a 10.
 Limitações: custo e ↓ disponibilidade de doadores
 Tempo de espera: 1 ano.
- Alternativa: uso de sangue do cordão umbilical (SCUP)
menos imunoreativas: < complicações.

71. Ninguém é tão pequeno que não possa ensinar...
...Nem tão grande que não possa aprender
Voltaire