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Biologia molecular 2_clase
 

Biologia molecular 2_clase

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    Biologia molecular 2_clase Biologia molecular 2_clase Presentation Transcript

    • Biología Molecular aplicada a la Microbiología Docente Marcela Jacobi S 17 de agosto
    • ARN La función del ARN es transcribir el mensaje genético presente en el DNA y traducirlo a proteínas. ARN posee Ribosa y URACILO en lugar de TIMIDINA La molécula es monocatenaria Existen tres tipos de ARN • Mensajero, • Transferencia, • Ribosomal
    • Caracteres DNA RNA Pentosa Desoxirribosa Ribosa Bases nitrogenadas Adenina, Guanina Adenina, Guanina Citosina, Timina Citosina, Uracilo Numero de 2 1 polinucleotidos(cadenas) Función Almacena la información Permite la expresión de la biológica de los seres información biológica vivos Ubicación Núcleo, mitocondrias, Núcleo, ribosomas cromatina, cloroplastos, cromosoma Estructura Doble hélice Lineal, globular y trébol
    • Dogma central de la Biología molecular La información genética se almacena en la doble hélice del DNA cuya estructura es idónea para mantener la integridad de dicha información. Cuando una célula se divide, transcribe su información genética a las células hijas, para ello duplica previamente su DNA mediante la replicación. Crick en 1970 anuncia el dogma central de la Biología Molecular “La información genética contenida en el DNA es transcrita en forma de RNA y traducida a proteínas”
    • Biología molecular La Biología Molecular es una rama moderna de la Biología, concerniente a la explicación de los fenómenos biológicos en términos moleculares. Las técnicas de Biología Molecular son aquellas que usan métodos y técnicas con ácidos nucleícos recombinantes para un propósito determinado, que puede ser con fines diagnósticos, de monitoreo o de estimación de riesgos y pronóstico, tanto en patologías genéticas y no genéticas, las cuales incluyen a las enfermedades infecciosas. Esta tecnología utiliza el ADN , ARN y proteínas de un agente infeccioso de una muestra clínica para poder identificarlo. Estas tienen muchas ventajas que radican en su sensibilidad, especificidad y seguridad .
    • Biología molecular • Quizás el área médica donde mayor aplicabilidad ha encontrado la Biología Molecular ha sido en el área de diagnóstico de enfermedades genéticas. • Sin embargo, el uso de técnicas de Biología Molecular en el diagnóstico de enfermedades infecciosas está siendo aplicado con bastante aceptación por los médicos, en la medida que se conozca mejor la genética de los microorganismos involucrados en la enfermedad.
    • Técnicas de estudio del DNA Nucleasas de restricción PLFR Secuenciación Hibridación por sondas PCR DNA chips; microarrays
    • Fragmentos de Restricción de Longitud Polimórfica (PLFR) Son el resultado de variaciones naturales -mutaciones- que eliminan o alteran la secuencia de reconocimiento para una enzima de restricción.
    • Electroforesis Es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. La separación se realiza sobre un soporte solido hidratado, que puede ser un papel o acetato de celulosa o sobre matriz porosa como un gel.
    • Secuenciación de DNA • la Secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y técnicas bioquímicas cuya finalidad es la determinación del orden de los nucleótidos A, C, G y T en un oligonucleótido de ADN. Equipo: Secuenciador ABI PRISM 310 Genetic Analyzer PE Applied Biosystems. Este secuenciador se basa en un sistema automatizado de electroforesis capilar. Con una capacidad de lectura de 400-600 bases por corrida, puede analizar cadenas sencillas, cadenas dobles y fragmentos de DNA generados por PCR.
    • Hibridación por sondas • Las sondas (probes) son segmentos de ADN o ARN que han sido marcados con enzimas, sustratos antigénicos, quimioluminiscencia o radioisótopos, los que se pueden unir con una alta especificidad a una secuencia complementaria de ácido nucleico, estos pueden detectar secuencias especificas en una célula o tejido.
    • ORGANISMOS QUE PUEDEN SER DETECTADOS POR MEDIO DE SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS DISPONIBLES COMERCIALMENTE
    • Polymerase Chain Reaction PCR • Es un método para amplificar selectivamente un segmento de ADN. • El segmento puede ser una pequeña parte o una larga y compleja parte de ADN. • Es un método para copiar trozos de ADN • El producto del PCR puede ser digerido, secuenciado o clonado
    • Ciclos del PCR D) Denaturación (95°C), 30 sec. A) Annealing o hibridación (55–60°C), 30 sec. E) Extensión (72°C), Durante la desnaturalización, que se realiza por calentamiento de la mezcla a 95 ºC, se separan las dos cadenas del DNA molde. Durante la hibridación, la temperatura de incubación se reduce para permitir el apareamiento de las bases de ambos cebadores en el sitio donde encuentran una secuencia complementaria. Durante la fase de elongación, la mezcla se calienta a 72 ºC, temperatura a la cual la DNA polimerasa termoestable extiende la cadena complementaria
    • Aplicaciones • Entre muchas de las aplicaciones que la PCR pone a disposición se encuentran la detección precoz o prenatal de enfermedades genéticas, la detección de infecciones virales latentes o la producción de grandes cantidades de fragmentos de DNA humano a una velocidad muy superior a la posible mediante otros métodos. • Esta técnica también se aplica para estudios de identidad y filiación.
    • Biochips o microarrays • Nuevo método que permitan monitorizar elevados volúmenes de información genética en paralelo y que reduzcan tanto el tiempo empleado como el coste por análisis. • Los biochips, estas fabricados de láminas de vidrio y lo que se deposita en dichas láminas son cadenas de ADN con distintas secuencias.