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 Sector: urbano de carácter oficial
 Medellín
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Se pretende crear un espacio educativo
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seguimiento de los procesos se realicen
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ENFOQUE TEORICO
 Los estudiantes, docentes y comunidad
tienen un sin numero de conocimientos
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 Se fundamenta en la relación participante
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 Se tiene en cuenta la naturaleza
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CULTURA
BIOTICO ABIOTICO
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INDIVIDUO SOCIEDAD
SISTEMA SOCIAL
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METODOLOGIA
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generales
1. Delimitación del problema
2. Determinación de las condiciones
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PRINCIPALES ACTIVIDADES
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educativas
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LOGROS
 Parte activa en la construcción de la I.E. Sol
de Oriente , y en la solución de sus
problemas.
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“PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN
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CONSERVACIÓN Y
COMERCIALIZACIÓN”
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SISTEMA AMBIENTAL
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IMPACTO
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su conservación y comercialización en el
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OBJETIVOS ESPECIFICOS
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de Azúcar y parque Arví
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 Construir un invernadero para el cultivo de
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extinción.
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METODOLOGÍA
El cultivo in vitro se define como el cultivo
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estériles, de plantas, sem...
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Técnicas mediante las
cuales un explante se
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ESTABLECIMIENTO
DEL CULTIVO
ASEPTICO
Fase 0 o Preparativa
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CRECIMIENTO DEL INOCULO
Fase II o
Multiplicación
↓
Organogénesis y
embriogénesis
↓
Miles de plantas en
corto tiempo
5.65.55.55.7-5.85.5pH
-20-30--Sacarosa (g/L)
0.01-0.5---Biotina
100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol
--0.5---Acido Fólico...
 Hacer las soluciones
macro y micro
Vitaminas, Hormonas
y Azúcar
 Adición del agente
gelificante (Si lo
requiere) y
calentamiento
 Ajuste del volumen
final.
 Medición del pH
 Servida y tapado del
medio, empaque en
los frascos con medio
para ser esterilizados.
ORGANOGENESIS
 Proceso de iniciación y
desarrollo de una
estructura que muestra
la forma y/o función
del órgano natural:
...
ENRAIZAMIENTO
Fase III o
Enraizamiento
↓
preparar al material
vegetal para su
reacondicionamiento
en campo
↓
sistema radic...
ACLIMATACIÓN
Fase IV o Aclimatación
o Endurecimiento
↓
Condiciones para el
transplante definitivo a
campos comerciales o
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ETAPA I
MONTAJE DE LABORATORIO
CONSECUCIÓN DE
RECURSOS-
PROYECTO
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ETAPA II
PROPAGACIÓN ORQUIDEAS
RECOLECCIÓN PLANTAS
MADRES EN EL CERRO
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PARQUE ARVÍ.
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ETAPA II
PROPAGACIÓN ORQUIDEAS
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MADRES EN EL CERRO
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PARQUE ARVÍ.
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ETAPA III
PROCESO EX-VITRO
PRODUCCIÓN
SUSTRATO PARA
SIEMBRA EX-VITRO.
ACLIMATACIÓN EN
BANDEJAS
PRODUCCIÓN EN
INVERNADERO
 Aclimatación:
- Extraer la plántula del tubo y lavar las raíces para eliminar
los restos del medio de cultivo, seccionar...
RESULTADOS
Etapa I
Equipos y reactivos
 Cámara de asepsia
 pHmetro
 Lámpara Ultravioleta
 Estantería para crecimiento
 Lámparas ...
Plantas madre
 Se recolectaron 42
individuos de los
géneros
masdevallia y
cattleya
 Se recolectaron 2
capsulas verdes de...
Áreas del laboratorio
PREPARACION
TRANSFERENCIA
LAVADO
ESTERILIZACION
Incubación in vitro
Crecimiento in vivo Crecimiento ...
ETAPA II
Protocolo para semilla
Medio de cultivo
 Extracto de banano: una papilla de
banano, se adiciona agua destilada
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Protocolo para semilla
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 Se remueve la flor con bisturí.
 Se limpia con solución jabonosa
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RESULTADOS
Se realizaron 5 siembras de
20 frascos cada una, con
un intervalo de 30 días.
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las siembras
50% siembras
contaminadas
50% siembras sin
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5% de germinación
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TAMAÑO DEL EXPLANTE
 Grande → Posibilidad de formar callos
 Heterogeneidad y contaminación con
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Protocolo Murashige Skoog
SOLUCIÓN MADRE CONCENTRACIÓN GRAMOS (500 mL)
A. Na2EDTA (EDTA Sal de sodio) 37,3 mg/L 0.01865
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Contaminación
 Se realizaron 6 siembras para un total de
135 frascos sembrados con ex plantes
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Producción de callo
97,8% de explantes
sin callo
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ANALISIS Y
RECOMENDACIONES
FACTORES QUE AFECTAN
 En la planta donadora tener en cuenta su estado fisiológico de
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MEDIO DE CULTIVO
Murashige o sus modificaciones.
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Benéficas para el desarrollo de callos
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Sacarosa → 12% El...
LIMITACIONES DEL CULTIVO DE
TEJIDOS
 La planta madre como material de partida
debe ser cuidadosamente seleccionado
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ETAPA IV
GENERAR CULTURA AMBIENTAL
DAR A CONOCER EL
PROYECTO
CAPACITACIÓN EN
BIOTECNOLOGIA
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HACIA DONDE NOS
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Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever
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Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

  1. 1. IDENTIFICACIÓN  INSTITUCIÓN EDUCATIVA SOL DE ORIENTE  Sector: urbano de carácter oficial  Medellín  GRUPO DE ESTUDIO PARA EL MEJORAMIENTO AMBIENTAL - GEMA  Dirigida a estudiantes de la institución, la comunidad, la ciudad, el país y el mundo  Año de inicio 2005
  2. 2. ORIGEN DE LA EXPERIENCIA  La institución educativa atiende una población conformada a partir del desplazamiento y localizada en una zona de alto riesgo  Los comportamientos que asume esta población son generadores de problemas que afectan las condiciones naturales y sociales.  Exige respuestas urgentes de distintos ordenes.
  3. 3. Se pretende crear un espacio educativo ambiental que desde la investigación y seguimiento de los procesos se realicen trabajos de concientización, capacitación y aplicación que permitan construir futuro y garantizar calidad de vida.
  4. 4. ENFOQUE TEORICO  Los estudiantes, docentes y comunidad tienen un sin numero de conocimientos previos, creencias, valores, costumbres, cosmovisiones, normas, alegrías y tristezas.  En el espacio educativo se obvia esta rica y diversa experiencia acumulada, así como el proceso de vivencia en la escuela.
  5. 5.  Se fundamenta en la relación participante (observador y observando).  Se tiene en cuenta la naturaleza cualitativa y cuantitativa de una investigación.  La clave es el desarrollo de competencias que permitan descubrir el entorno, entrar en contacto con la realidad y ser creativos en la búsqueda de soluciones.
  6. 6. CULTURA BIOTICO ABIOTICO SISTEMA NATURAL INDIVIDUO SOCIEDAD SISTEMA SOCIAL CRISIS GENERALIZADAS ORIEGEN ACCIONES REGIONAL NACIONAL MUNDIAL ? IMPACTO EDUCACIÓN AMBIENTAL
  7. 7. METODOLOGIA Este modelo supone cuatro pasos generales 1. Delimitación del problema 2. Determinación de las condiciones 3. Análisis de alternativas de solución 4. Planeación y desarrollo de propuestas
  8. 8. PRINCIPALES ACTIVIDADES  Realización de actividades lúdico- educativas  Capacitación  Implementación de material didáctico  Capacitación para la elaboración de proyectos.  Accesoria y apoyo a proyectos
  9. 9. LOGROS  Parte activa en la construcción de la I.E. Sol de Oriente , y en la solución de sus problemas.  Premio Nacional Unilever Andina con el proyecto “PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN VIA DE EXTINCIÓN PARA SU CONSERVACIÓN Y COMERCIALIZACIÓN  Reconocimiento programa ONDAS proyecto plantas medicinales, barrio Villatina.  Ganadores del 4to concurso Capital Semilla con la propuesta de capacitaciones ambientales.
  10. 10. “PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN VIA DE EXTINCIÓN PARA SU CONSERVACIÓN Y COMERCIALIZACIÓN”
  11. 11. INTRODUCCIÓN Este proyecto ha sido conformado con el propósito de generar investigación en la comunidad estudiantil, para recuperar especies que están en vía de extinción además de generar conciencia en el tema ambiental. Partiendo de una idea innovadora como lo es el cultivo in Vitro.
  12. 12. INTRODUCCIÓN Colombia mega diversidad orquídeas 205 géneros 3500 especies 10% Ampliamente distribuidas en todo el territorio
  13. 13. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA SISTEMA AMBIENTAL RECUPERACIÓN EXTINCION DE ESPECIES IMPACTO
  14. 14. OBJETIVO GENERAL Propagar orquídeas en vía de extinción para su conservación y comercialización en el cerro “Pan de Azucar” y parque “Arví”.
  15. 15. OBJETIVOS ESPECIFICOS  Recolección plantas madres en el cerro Pan de Azúcar y parque Arví  Adecuar en el Aula Ambiental de la I.E. Sol de Oriente el laboratorio para el cultivo in Vitro de orquídeas.  Estandarizar protocolo para reproducción de orquídeas a partir de semillas y explantes  Propagar especies nativas en vía de extinción por cultivo in Vitro.
  16. 16.  Construir un invernadero para el cultivo de orquídeas y especies nativas en vía de extinción.  Formar a los estudiantes en los principios fundamentales que intervienen en la propagación vegetal, así como con los métodos y las técnicas útiles a emplear en este campo.  Generar cultura ambiental.
  17. 17. METODOLOGÍA El cultivo in vitro se define como el cultivo en un medio nutritivo, en condiciones estériles, de plantas, semillas, órganos, explantos, tejidos, células y protoplastos de plantas superiores.
  18. 18. CULTIVO DE TEJIDOS Técnicas mediante las cuales un explante se cultiva asépticamente en un medio de composición química definida y se incuba en condiciones ambientales controladas. - Estudios básicos de fisiología, genética y bioquímica. - Bioconversión y producción de compuestos. - Incremento en la variabilidad genética. - Obtención de plantas libres de patógenos. - Propagación de plantas. - Conservación e intercambio de germoplasma.
  19. 19. FASES DE LA PROPAGACIÓN ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO ASEPTICO Fase 0 o Preparativa Fase I o Establecimiento o de Iniciación Selección de la planta donadora Asepsia y viabilidad de los cultivos
  20. 20. CRECIMIENTO DEL INOCULO Fase II o Multiplicación ↓ Organogénesis y embriogénesis ↓ Miles de plantas en corto tiempo
  21. 21. 5.65.55.55.7-5.85.5pH -20-30--Sacarosa (g/L) 0.01-0.5---Biotina 100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol --0.5---Acido Fólico 1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH 1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl 1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico --2.02.0-3.0Glicina COMPUESTOS ORGANICOS ----1.0-Fe3Cl3 · 6 H2O -----2.5Fe2(SO4)3 --27.827.8--FeSO4 · 7 H2O --37.337.3--Na2EDTA · 2H2O FE – EDTA ----0.03-NiCL2 · 6 H2O ----0.03-AlCL3 0.0250.025-0.025--CoCl2 · 6 H2O 0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4 · 5 H2O -0.0250.25---CuSO4 0.250.250.250.25--Na2MoO4 · 2 H2O 0.750.75-0.830.010.75KI 3.03.010.06.21.01.5H3BO3 2.02.010.08.61.03.0ZnSO4 · 7 H2O 10.010.0----MnSO4 · H2O --25.022.30.17.0MnSO4 · 4 H2O MICRONUTRIENTES -150--12519NaH2PO4 · H2O -----200Na2SO4 300---75065KCl 170-68170--KH2PO4 300250185370250720MgSO4 · 7 H2O --166---CaCL2 600150-44075-CaCL2 · 2 H2O 190025009501900-80KNO3 -134----(NH4)2SO4 600-7201650--NH4NO3 ----600-NaNO3 -----300Ca(NO3)2 · 4 H2O MACRONUTRIENTES KMB5NITSCHMSHELLERWHITE MEDIOS COMPONENTES 5.65.55.55.7-5.85.5pH -20-30--Sacarosa (g/L) 0.01-0.5---Biotina 100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol --0.5---Acido Fólico 1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH 1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl 1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico --2.02.0-3.0Glicina COMPUESTOS ORGANICOS ----1.0-Fe3Cl3 · 6 H2O -----2.5Fe2(SO4)3 --27.827.8--FeSO4 · 7 H2O --37.337.3--Na2EDTA · 2H2O FE – EDTA ----0.03-NiCL2 · 6 H2O ----0.03-AlCL3 0.0250.025-0.025--CoCl2 · 6 H2O 0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4 · 5 H2O -0.0250.25---CuSO4 0.250.250.250.25--Na2MoO4 · 2 H2O 0.750.75-0.830.010.75KI 3.03.010.06.21.01.5H3BO3 2.02.010.08.61.03.0ZnSO4 · 7 H2O 10.010.0----MnSO4 · H2O --25.022.30.17.0MnSO4 · 4 H2O MICRONUTRIENTES -150--12519NaH2PO4 · H2O -----200Na2SO4 300---75065KCl 170-68170--KH2PO4 300250185370250720MgSO4 · 7 H2O --166---CaCL2 600150-44075-CaCL2 · 2 H2O 190025009501900-80KNO3 -134----(NH4)2SO4 600-7201650--NH4NO3 ----600-NaNO3 -----300Ca(NO3)2 · 4 H2O MACRONUTRIENTES KMB5NITSCHMSHELLERWHITE MEDIOS COMPONENTES
  22. 22.  Hacer las soluciones macro y micro Vitaminas, Hormonas y Azúcar
  23. 23.  Adición del agente gelificante (Si lo requiere) y calentamiento
  24. 24.  Ajuste del volumen final.
  25. 25.  Medición del pH
  26. 26.  Servida y tapado del medio, empaque en los frascos con medio para ser esterilizados.
  27. 27. ORGANOGENESIS  Proceso de iniciación y desarrollo de una estructura que muestra la forma y/o función del órgano natural: Citoquininas Auxinas Yemas (Caulogénesis) Raices (Rizogénesis) Callos Explantes
  28. 28. ENRAIZAMIENTO Fase III o Enraizamiento ↓ preparar al material vegetal para su reacondicionamiento en campo ↓ sistema radical
  29. 29. ACLIMATACIÓN Fase IV o Aclimatación o Endurecimiento ↓ Condiciones para el transplante definitivo a campos comerciales o de producción.
  30. 30. ETAPA I MONTAJE DE LABORATORIO CONSECUCIÓN DE RECURSOS- PROYECTO UNILEVER ADECUACIÓN DE ESPACIO
  31. 31. ETAPA II PROPAGACIÓN ORQUIDEAS RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ. ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA ESPLANTES
  32. 32. ETAPA II PROPAGACIÓN ORQUIDEAS RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ. ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA Ex PLANTES
  33. 33. ETAPA III PROCESO EX-VITRO PRODUCCIÓN SUSTRATO PARA SIEMBRA EX-VITRO. ACLIMATACIÓN EN BANDEJAS PRODUCCIÓN EN INVERNADERO
  34. 34.  Aclimatación: - Extraer la plántula del tubo y lavar las raíces para eliminar los restos del medio de cultivo, seccionar según el número de esquejes posibles de obtener. - Aparte agujerear la tapa de las cajas rectangulares de plástico (18 cm largo x 12 cm ancho x 7 cm profundidad) y colocar sustrato orgánico comercial. Con una varilla marcar sobre el sustrato los lugares donde se colocarán los esquejes (aproximadamente 20 esquejes/caja), plantarlos y regar con agua destilada. - Llevar las cajas a cámara de cultivo a 20ºC, fotoperíodo 16 hs de luz y 8 hs oscuridad, intensidad lumínica de 3000 lux. - Una vez enraizados los esquejes, llevar las cajas al invernáculo y se colocarlas bajo mesada por una o dos semanas hasta su plantación final en macetas.
  35. 35. RESULTADOS
  36. 36. Etapa I Equipos y reactivos  Cámara de asepsia  pHmetro  Lámpara Ultravioleta  Estantería para crecimiento  Lámparas de neón  Reactivos para protocolo casero y protocolo M.S.
  37. 37. Plantas madre  Se recolectaron 42 individuos de los géneros masdevallia y cattleya  Se recolectaron 2 capsulas verdes de cattleya
  38. 38. Áreas del laboratorio PREPARACION TRANSFERENCIA LAVADO ESTERILIZACION Incubación in vitro Crecimiento in vivo Crecimiento in vivo Observación Terapia y Control ALMACEN
  39. 39. ETAPA II
  40. 40. Protocolo para semilla Medio de cultivo  Extracto de banano: una papilla de banano, se adiciona agua destilada y abono que posea nitrógeno, fosforo y potasio) vitamina, acido micotinico, piroxidina, glicina y mioinositol.  con extracto de banano ya listo y para dar consistencia se utiliza agar y como medio energético sacarosa. para un litro de medio, 3 gr de agar y 30 gr/L de extracto de banano.
  41. 41. Protocolo para semilla siembra  Se remueve la flor con bisturí.  Se limpia con solución jabonosa  Se enjuaga con agua destilada.  Se introduce en solución de hipoclorito al1% durante 10 minútos.  Se sumergen en alcohol industrial y se flamea.  Se hace corte de la capsula, y se extraen las semillas llevándolas al medio.  Se añade agua destilada sobre cada frasco para su distribución.
  42. 42. RESULTADOS Se realizaron 5 siembras de 20 frascos cada una, con un intervalo de 30 días.
  43. 43.  contaminación en las siembras 50% siembras contaminadas 50% siembras sin contaminar  germinación 5% de germinación 95% sin germinar
  44. 44. TAMAÑO DEL EXPLANTE  Grande → Posibilidad de formar callos  Heterogeneidad y contaminación con microorganismos  Muy pequeño → No hay formación de callos
  45. 45. Protocolo Murashige Skoog
  46. 46. SOLUCIÓN MADRE CONCENTRACIÓN GRAMOS (500 mL) A. Na2EDTA (EDTA Sal de sodio) 37,3 mg/L 0.01865 FeSO47H2O (Sulfato Ferroso) 27,8 mg/L 0.0139 B NH4NO3 (Nitrato de amonio) 1,65 g/L 0.825 KNO3 (Nitrato Potásico) 1,9 g/L 0.95 C H3BO3 (Ácido bórico) 0,62 g/L 0.31 KH2PO4 (Fosfato de potasio) 170 mg/L 0.085 KI (Iodo de Potasio) 83 g/L 0.0415 Na2MO4.2H2O (Molibdato de sodio) 25 mg/L 0.0125 CoCL2.5H2O (Dicloruro de cobalto) 2,5 mg/L 0.00125 D MgSO47H2O (Sulfato de magnesio) 370 mg/L 0.185 MnSO4$H2O (Sulfato de manganeso) 1,69 g/L 0.845 ZnSO4 (Sulfato de Zinc) 0,86 g/L 0.43 CuSO5H2O (Sulfato de cobre ) 2,5 mg/L 0.00125 E CaCl2.2H2O (Cloruro de calcio) 440 mg/L 0.22 Vitaminas H Mioinositol 10 g/L 0.005 F Tiamina 10 mg/L 0.005 I Ác. Nicotínico 50 mg/L 0.025 J Piridoxina 50 mg/L 0.025 K Glicina 0,2 g/L 0.1 sacarosa 30 g/ l 15 pH 5,7
  47. 47. Contaminación  Se realizaron 6 siembras para un total de 135 frascos sembrados con ex plantes  En las cuatros primeras siembras dieron como resultado un 83.7% de frascos contaminados.  La quinta y sexta siembra dieron como resultado un 65% de muestras contaminadas .
  48. 48. Producción de callo 97,8% de explantes sin callo 2,2% de explantes con callo
  49. 49. ANALISIS Y RECOMENDACIONES
  50. 50. FACTORES QUE AFECTAN  En la planta donadora tener en cuenta su estado fisiológico de desarrollo y fitosanitario además de su genotipo y especie en los que en ocasiones pueden ofrecer diferentes respuestas.  En el explante la edad fisiológica, la ubicación en la planta madre y el tamaño, un explante muy grande puede contaminarse fácilmente y muy pequeño puede no responder al cultivo.  Los factores físicos y químicos como luz temperatura y pH pueden ser cruciales, algunos explantes responden mejor a condiciones de baja temperatura que otros, o de acidez.  En cuanto al medio de cultivo es pertinente realizar una revisión bibliográfica para tratar de aproximarnos al medio de cultivo más adecuado para la planta, además la consistencia del medio también puede afectar la respuesta.
  51. 51. MEDIO DE CULTIVO Murashige o sus modificaciones. ↓ Benéficas para el desarrollo de callos embriogénicos. Sacarosa → 12% Eleva el potencial. Carbón Activado → Evita la oxidación
  52. 52. LIMITACIONES DEL CULTIVO DE TEJIDOS  La planta madre como material de partida debe ser cuidadosamente seleccionado  Conocimiento de las técnicas para elegir la más adecuada a las necesidades.
  53. 53. ETAPA IV GENERAR CULTURA AMBIENTAL DAR A CONOCER EL PROYECTO CAPACITACIÓN EN BIOTECNOLOGIA VEGETAL-FORMACIÓN SEMILLERO EDUCACIÓN AMBIENTAL A LA COMUNIDAD GENERAR EMPRESA
  54. 54. HACIA DONDE NOS DIRIGIMOS
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