Sensibilidad y resistencia bacteriana

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Sensibilidad y resistencia bacteriana

  1. 1. SENSIBILIDAD YRESISTENCIA BACTERIANA María Cecilia Yaneth Giovanetti Bacteriologa, Mestre en Ciencias Biológicas (Microbiología)
  2. 2. FACTORES QUE INFLUYEN ENLA ELECCIÓN DEL ANTIMICROBIANO FACTORES DEL MICROORGANISMO Diagnostico etiológico Sensibilidad FACTORES DEL HUESPED Antecedentes Edad Estado inmunitario Localización de la infección Gestación Función renal y hepática Alteraciones Genéticas y metabólicas
  3. 3. FACTORES QUE INFLUYEN EN LAELECCIÓN DEL ANTIMICROBIANO FACTORES DEL ANTIMICROBIANO Espectro Mecanismo de acción Mecanismo de resistencia Farmacocinética Dosis y vía de administración Efectos secundarios
  4. 4. FARMACOCINÉTICA Es el estudio de la relación que existe entre la dosis terapéutica de un antibiótico y la concentración del antibiótico en el plasma y el lugar de la infección a lo largo del tiempo
  5. 5. CUANDO DEBE PROCESARSEUN ANTIBIOGRAMA ?• Germen clínicamente importante• Cuando este germen no tenga un comportamiento uniforme frente a la mayoría de los Antibióticos
  6. 6. MÉTODOSMIC – Concentración mínima inhibitoria:Dilución en caldo o en agarDifusión con discos: Método Kirby- BauerDifusión por Gradiente: Test- ECMB: Concentración bactericida minimaCalculo de la curva de crecimiento:VitekConcentracion Bactericina minimaDetección antibioticos en sueroDetección molecular: gen de resistencia
  7. 7. MICMétodo que permite cuantificar la sensibilidad delmicroorganismo a diferentes concentraciones delantibiótico determinando la CONCENTRACIÓNMINIMA QUE INHIBE el crecimiento bacterianoSe utiliza para microorganismos de crecimientolento, exigentes y anaerobiosCuando los resultados del ATB por difusión sonde dudosa interpretaciónPara evidenciar sinergismo o antagonismo entreagentes antimicrobianos contra algúnmicroorganismo en particular
  8. 8. MIC – DILUCIÓN EN CALDO
  9. 9. MIC- DILUCIÓN EN AGARTomado libro Microbiología Delgado-Ibarren, A, Polanco, A
  10. 10. DIFUSIÓN CON DISCOSMétodo Kirby-Bauer Ténica estandarizada para microorganismos de crecimeinto rápido: Enterobacterias, Staphylococcus spp., Enterococcus spp. Kirby-Bauer Modificado para microorganismos exigentes: Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae Streptococcus pneumoniae
  11. 11. MÉTODO DE KIRBY-BAUERMEDIO DE CULTIVO: Mueller HintonpH: 7,2 - 7,4Grosor: 4 mmCantidad:25-30 mlPREPARACIÓN DEL INOCULO: Turbidez equivalente0,5 de la escala de Mac-FarlandELECCIÓN DE LOS DISCOS DE SENSIBILIDAD
  12. 12. CRECIMIENTO DENTRO DEL HALO DE IHIBICIÓN Cultivo mixto Cepa mutante
  13. 13. INVACIÓN DE LOS BORDES DE LOS HALOS DE IHNIBICIÓNCaracterístico de las especies de ProteusCuando se mide el halo debe utilizarse la segundazona externa de inhibición del crecimiento
  14. 14. ATB ERROR TECNICO No se debe leer, ni reportar
  15. 15. TEST- E Epsilometría E 256Método que combina los 192 128principios de la difusión en 96 64disco y la dilución en agar en 48 32 24el estudio de la 16 12susceptibilidad in vitro. 8 6 4Esta metodología puede ser 3 2utilizada en una variedad de 1,5 1,0 .75microorganismos incluyendo .50 .38 .25fastidiosos y anaerobios. .19 .125 .094Corresponde a 20 diluciones .064 .047dobles seriadas de CIM. .032 .023 .016
  16. 16. TEST- EEl E-test es más simple que otrosmétodos para obtener una CIM.Utiliza una tira de plástico quecontiene concentraciones crecientesde un determinado antibiótico que vandesde 0,016 ug/ml hasta 256 ug/ml/Esta tira se pone sobre una placa deagar que ha sido inoculada con elorganismo en estudio
  17. 17. TEST- ETest- E deS. pneumoniae.Lectura MICPn G: 0,25 µg/ml
  18. 18. SISTEMAS SEMIAUTOMATICOS YAUTOMATICOS Sistema ViteK MicroScan Walkaway Sistema Phoenix
  19. 19. SISTEMA VITEK
  20. 20. MicroScan Los paneles realizan a la vez la identificación y el Antibiograma
  21. 21. MicroScan
  22. 22. NO DEBE REALIZARSE LAS PRUEBAS PARAANTIBIOTICOS O NO SE DEBEN COMUNICARLOS RESULTADOS  Sensibilidad predecible  Resistencia predecible  El antibiotico no se acumula en el sitio de la infección  Las pruebas in vitro no preciden confiablemente resistencia
  23. 23. SENSIBILIDAD PREDECIBLE TODOS LOS SITIOS S. pyogenes Penicilina S. agalactiae Penicilina ORINA S. saprophyticus Nitrofurantoina Trimetoprim-sulfametoxazol NO ESTA INDICADA LA EVALUACIÓN
  24. 24. El antibiotico no se acumula enel sitio de la infección LCRCefalosporina 1ª ,2ª ,Clindamicina, macrólidos,Tetracilinas, Fluoroquinolonas, antibioticos administrados por la boca VIAS URINARIAS CloranfenicolEliminación por vias biliares, no por orinaNorfloxacina y Nitrofurantoina, no se evalua en sitios distintos de orina, alcanza la concentración
  25. 25. Las pruebas in vitro no precidenconfiablemente resistencia  Cefalosporinas Enterococcus spp. L. monocytogenes Enterococcus : Aminoglucósidos (dosis bajas) Trimetoprim Trimetoprim-sulfametoxazol RESULTADOS ENGAÑOSOS
  26. 26. PERFILES DE RESISTENCIABACTERIANA  B-lactamasa  BLEE (B_lactamasa de Espectro extendido)  MRSA - Oxacilina (1 ug)  MRSA y S. lugdunensis: Cefoxitin(30ug)  MRS(SCN): Cefoxitin (30ug) y MIC Oxacilina
  27. 27. METODOS PARA DETECTAR LAS B-LACTAMASAS  Método Acidométrico  Método Yodométrico  Cefarosporinas cromógenas (nitrocefin) Para detectar penicilinasas Microorganismos: Staphylococcus spp., N. gonorrheae, H.influenzae, M. catarrhalis, Enterococcus, anaerobios
  28. 28. METODOS PARA DETECTAR LAS BLEE PRUEBA CONFIRMATORIA CON SENSIDISCOS: CAZ, CAZ/AC.CLAV CTX,CTX/AC.CLAVMICROORGANISMOS:K. pneumoniae, K. oxytoca y E.coli,P. mirabilis
  29. 29. BLEE Resistente a Pn Resistente a Cefalosporinas 1ª 2ª 3ª 4ª Resistente a AztreonamSensibles:Carbacepemicos: imipenem, meropenem
  30. 30. METODOS PARA DETECTAR MRSA y MRS Sensidiscos Oxacilina 1 µg Sensidiscos Cefoxitin 30 µg Placa de screen AMH 4%NaCl+6 µg/dl Ox MIC (caldo MH con ajuste de cationes) 2%NaCl Test E (AMH + 2%NaCl PCR y sondas de DNA (detectar gen mecAMicroorganismos:Staphylococus aureusStaphylococus coagulasa negativa
  31. 31. Staphylococcus aureus Oxacilina 1 µg Método disco ≤ 10 11 - 12 ≥ 13 Informar Intermedio InformarOxacilina Resistente (Realizar MIC) Oxacilina Sensible
  32. 32. Staphylococcus aureus MIC Oxacilina ( µg/dl) ≤4 ≥2 Informar Informar Oxacilina Resistente Oxacilina Sensible
  33. 33. Staphylococcus aureus y S. lugdunensis Método de difusión Cefoxitin 30 µg ≤ 21 mm ≥ 22 mm Informar Informar Oxacilina Resistente Oxacilina Sensible
  34. 34. Staphylococcus coagulasa negativaexcepto S. lugdunensis Método de difusión Oxacilina Cefoxitin 30 µg 1 µg ≤ 2417 ≤ mm ≥ 25 mm ≥ 18 Informar Informar Informar Oxacilina Resistente Informar Oxacilina Resistente Oxacilina Sensible Oxacilina Sensible
  35. 35. S. lugdunensisSolo se detecta la S o Ra Meticilina con Cefoxitin (30 ug ),no con Oxacilina (1 ug) discoMIC Oxacilina R ≥ 4 S≤2
  36. 36. Staphylococcus coagulasa negativaexcepto S. lugdunensis MIC Oxacilina ( µg/dl) ≥0.5 ≤ 0.25 Informar Informar Oxacilina Resistente Oxacilina Sensible
  37. 37. REQUISITOS Para detectar Staphylococcus meticilina resistente debe ser incubado 24 hs completas a T° ≤ 35 ° C La lectura debe realizarse con luz transmitida, para observar las colonias pequeñas dentro de la zona de inhibición La mayoría de los SMR, usualmente son resistente a varios antibióticos además de los B lactamicos, aminoglucosidos, macrólidos, clindamicina, tetra Ensayo dudoso o intermedio usar prueba screen o MIC
  38. 38. MRS Los MRSA, Staphylococus coagulasa negativa Meticilino resistente(SCN), deben ser informado como resistentes a todos los β lactamicos y combinaciones de β lactamicos con ihibidores de β lactamasas (ácido clavulanico, sulbactam, tazobactam)
  39. 39. MRSA y MRS Resistente a B-lactamicos Resistente a Aminoglucosidos (Ak, Gn,Tb, Net) Resistentes a Macrolidos (Eri,Clari,diri,azi) Resistente a Quinolonas (Cip, , NA, levo, Nor, oflo, Resistente a Lincomicinas (cli, Resistente a Carbapenemicos (imi, mero, erta, dori) Resistente a Fenicoles (cl)
  40. 40. Resistente a β lactamicos  Penicilinas Penicilina Aminopenicilina(Amx, Amp,) Ureidopenicilina (pip, azlocilina,mezlocilina) Carboxipenicilina (Car, Ticar) Penicilinas estables a las penicilinasas (Ox, Met,naf,diclo,clox) β lactamicos / combinación con inhibidores de β lactamasa (Amx/ac.clav, Amp/Sulb, Pip/Taz, Tir/ac. Clav)  Cefalosporinas 1ª generación (Cef, cefra, cefapirin,cefazolin, 2ª generación (Cefuroxime, Fox, cefamandole,cefonicid, 3ª generación (CAZ, CTX,ceftriaxona, ceftizoxime,cefoperazona 4ª generación (Cefepima,cefpiroma)
  41. 41. Clinical and Laboratory Standards Intitute CLSI  “ El control de calidad de las pruebas de susceptibilidad con cepas ATCC no garantiza la presición de los resultados en cepas aisladas de pacientes: es importante revisar los resultados obtenidos frente a cada antimicrobiano antes de informar”
  42. 42. Qué hacer frente a resultados “raros”?  Evaluar contaminación de la prueba  Uso de placa, discos, tarjeta, panel inadecuado o defectuoso  Confirmar identificación de la cepa  Repetir pruebas de susceptibilidad  Buscar errores de trascripción  Buscar antecedentes de pruebas similares confirmadas del paciente  Enviar cepas a Laboratorio de Referencia
  43. 43. Puedes cambiar tu vida cambiando solo tu manera de pensar

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