Seminario molecular
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MDMSNP309 cancer cervical y VPH

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Seminario molecular Seminario molecular Presentation Transcript

  • MDM2 SNP 309 human papillomavirus infection in cervical carcinogenesisBy:OsamuNunobiki
    Laura Mejía Cardona
    III Semestre
    2010
  • INTRODUCTION
    Human papillomaviruses (HPVs) may cause warts .
    (100 )30 types of HPV are associated with cancer (16,18,11,6…).
    Transition zone selectivity.
  • INTRODUCTION: cervical cancer
    Thetisuueonthecervixbecomeabnormal.
    Cellsstarttogrowuncontrollabyforming neoplasias.
  • SYMPTONS
    Unusual vaginal discharge .
    Light vaginal bleeding or spots of blood outside of normal menstruation .
    Pain or vaginal bleeding with sexual intercourse .
    Post-menopausal vaginal bleeding .
  • Hpv and cancer
    Displasia precancerouscells CANCER
    Cervical intraepithelial neoplasia (CIN).
    NORMAL CERVIX
  • Hpv and cancer
    CIN I
    CIN II
  • Hpv and cancer
    NIC III
    INVASIVE CERVICAL CANCER
  • microscopy
  • GENERAL OBJECTIVE
    Is to investigate the biological significance of single nucleotide polymorphism (SNP) at murine double-minute 2 homolog (MDM2) promoter 309 in cervical carcinogenesis.
  • MUESTRAS
    195 muestras de frotis cervical.
    Toma de muestras
    bastoncillos de algodón
    Sln salina de tampón fosfato
    Almacenaron -20c
  • LINEA CELULAR
    Cultivo de células con un periodo de vida indefinido, pueden ser transformadas genéticamente o derivadas de un tumor.
  • USOS LINEAS CELULARES
    Mantenimiento y producción de tejidos para transplante.
    Ingeniería de proteínas
    Inmunologia
    Virologia
    AnalisisDx
  • LINEA CELULAR
    Análisis genotípico de MDM2-SNP309.
    Tipificación del virus papiloma humano (50,102,41)
    8 líneas de células escamosas (SKG-I, SKG-II, SKG-IIIa, SKG-IIIb, OMC-1, YUMOTO, QG-U and QG-H)
  • Pcr: reacción en cadena de polimerasa
    Amplificación enzimática: Directa-Indirecta.
    # copias.
    Desnaturalización
    Alineamiento
    Síntesis
    Detección, Dx, clonación, etc.
  • Preparación del dna
    Líneas celulares.
    Lisis.
    Buffer (20 mMNaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 10 mM EDTA (pH 8,0),0,5% SDS y 50 mg / ml de proteinasa K).
    Extracción del ADN genómico: fenol-cloroformo
    Precipitado con etanol utilizando técnicas estándar.
  • RESULTADOS
    Genotipo T / genotipo TG+GG.
    41 pacientes (HSIL): riesgo VPH.
    TT : lineacelular SKG-IIIa.
    TG o GG: 6 lineas(ex:YUMOTO) (87.5 %): riesgo VPH.
  • RESULTADOS
    21 pacientes (HPV16-18): TG+GG , alelo G.
    47pacientes tiposdiferentes de HSIL-VPH.
    OR :TG+GG en los casos de HSIL / controles entre los 68 pacientes con alto riesgo VPH.
  • FIGURA 1 : REPRESENTANTE GENOTIPADO DE MDM2-SNP309
    Carriles 1, 5 y 7: TG heterocigotos. Carriles 2, 4 y 6: homocigotos GG. Carril 3:TT homocigota.El tipo salvaje (T)el mutante (G) alelo 121-bp y 168 pb-
  • FIGURA 2: GENOTIPADO DE MDM2-SNP309 EN 8 LÍNEAS DE CUELLO UTERINO CON CARCINOMA DE CÉLULAS ESCAMOSAS
    El genotipo TT :SKG-IIIa el genotipo de la TG de SKG-I, SKG-II, III b SKG-1-y el MACel genotipo GG de Yumoto, QG QG-U y H
  • DISCUSSION
  • CONCLUsIONS
    Por la relación del P53 con el MDM2SNP309, este puede ser usado como marcador en la detección precoz del cáncer.
    Los pacientes que presentan los tipos 16 y 18 desarrollan mas fácilmente el cáncer.
    Se pueden implementar otras estrategias de tratamiento para los pacientes que padecen VPH, probablemente con la regulación de la sobreexpresión del MDM2.
  • conclusiones
    Es necesaria la buena educación sexual desde edades tempranas para disminuir las cifras de enfermedades de transmisión sexual.
    El mal estilo de vida genera sobreexpresión del P53.
    El VPH aumenta la expresión del MDM2SNP309.
  • BIBLIOGRAPHY
    MARTINEZ SÁNCHEZ, Lina María. Biología molecular. 5. ed. Medellín: UPB. Fac. de Medicina, 2009.139p-147p, 305p-306p.
    LODISH, H. Biología celular y molecular. 5 edición. Buenos Aires: Médica Panamericana, 2004.236p-237p.
    http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20538323
    http://www.hpv-cancer.com/2007/11/imagenes-del-cuello-uterino-cervix.html
    http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/cervical+cancer
  • MAPA CONCEPTUAL
  • "El nacimiento y la muerte no son dos estados distintos, sino dos aspectos del mismo estado.“ Mahatma Gandhi
  • Mdm2 is an important negative regulator of the p53 tumor suppressor. It is the name of a gene as well as the protein encoded by that gene. Mdm2 protein functions both as an E3 ubiquitinligase that recognizes the N-terminal trans-activation domain (TAD) of the p53 tumor suppressor and an inhibitor of p53 transcriptional activation
  • Low-grade SIL refers to early changes in the size, shape, and number of cells that form the surface of the cervix. They may go away on their own, or, with time, may grow larger or become more abnormal, forming a high-grade lesion. High-grade SIL means there are a large number of precancerous cells, and, like low-grade SIL, these precancerous changes involve only cells on the surface of the cervix. The cells often do not become cancerous or invade deeper layers of the cervix for many months, perhaps years.