prelekcja do ćwiczen z oceny antybiotykowrażliwości dla studentów Mikrobiologii UŁ część 3

1. ANTYBIOTYKI. LEKOWRAŻLIWOŚĆ III
Część teoretyczna do ćwiczeń z Diagnost yki
Zakażeń I I
mgr Karolina Rudnicka
rudnicka@biol.uni.lodz.pl
Kat edra I mmunologii i Biologii I nf ekcyj nej
Pracownia Gast roimmunologii, p.278 t el. 42 635-45-41

2. Inne szybkie metody oceny antybiotykowrazliwości
2. Testy lateksowe – np. do oceny MRSA – MAST LATEX-MRSA; zawiesina bakterii podejrzanej o MRSA
jest odpowiednio przygotowana (ekstrakcja w odpowiednim reagencie, gotowanie); supernatant jest
badany na obecność białka PBP’ za pomocą kulek latexu opłaszczonych przeciwciałem
monoklonalnym anty PBP’. Utworzenie aglutynatu = wynik dodatni. MAST DIAGNOSTICS.[Ryc.2]
1. MAST – ID –Pierścienie identyfikacyjne zawierające zestawy krążków z antybiotykiem dotowane do
wykonania odpowiednich antybiogramów dla Haemophilus spp., S.pneumoniae, Staphylococcus,
Micrococcus . MAST DIAGNOSTICS. [Ryc. 1]
Ryc. 1
Ryc. 2
Fot.P.Skibińska/A.Niewiadomska
MRSAMSSA

3. 3. CHROM-ID-Agar – podłoża chromogenne do identyfikacji mechanizmów u określonych gatunków bakterii.
Pozwala na identyfikację drobnoustroju i mechanizmu oporności na podstawie uzyskanej barwy kolonii.
Odczyt po 18-24h.Nie jest to metoda referencyjna. Może być metodą przeglądową. [Ryc 3]
- CHROM-ID MRSA (S.aureus)
- CHROM-ID ESBL (Klebsiella, Proteus, E.coli)
Ryc. 3

4. Inne szybkie metody oceny antybiotykowrazliwości
4. Systemy ATB – test wrażliwości na antybiotyki (20-30 antybiotyków ) przeprowadza się na pasku ze
studzienkami zawierającymi dany antybiotyk w dwóch krytycznych stężeniach (wysokim i niskem) .
Do studzienek wprowadza się po 135ul mieszaniny zawiesiny drobnoustrojów w podłożu
komercyjnym i inkubuje 18-24h. Odczyt polega na zaobserwowaniu zmętnienia w studzienkach dla
każdego stężenia i każdego antybiotyku. DOSTĘPNE SĄ TESTY RAPID ATB (inkubacja 4-18h) ; oraz systemy
automatyczne do odczytu pasków
5. Zautomatyzowane systemy – VITEC 2 – automatyczny system do identyfikacji drobnoustrojów i
oznaczania ich lekowrażliwości.
• manualne przygotowanie inoculum
• panele z substratami biochemicznymi (testy identyfikacyjne) i antybiotyki wraz z podłożem (testy
antybiogramowe)
• system dokonuje odczytu każdej karty co 15 minut
• otrzymywanie wyników tego samego dnia, średnio od 6-8 godzin.

5. Inne metody oceny antybiotykowrazliwości
MAST– ID –Pierścienie identyfikacyjne zawierające zestawy krążków z antybiotykiem dotowane do
wykonania odpowiednich antybiogramów dla Haemophilus spp., S.pneumoniae, Staphylococcus,
Micrococcus . MAST DIAGNOSTICS. [Ryc. 1]

6. • Podłoże przeznaczone do wykrywania i wstępnej identyfikacji
izolatów bakteryjnych z rodziny Enterobacteriaceae o fenotypie ESBL.
• Zawiera mieszaninę antybiotyków (m.in. cefpodoksym).
• Kolonie E. coli koloru od różowego do koloru ciemnoczerwonego
wina
• Pałeczki grupy KESC (Klebsiella spp., Enterobacter spp., Serratia spp.,
Citrobacter spp.) - kolonie barwy od zielone do niebieskiej
• Pałeczki grupy Proteus, Morganella - kolonie barwy brunatnej
Ocena ESBL przy pomocy podłóż typu ChromAgar

7. Inne szybkie metody oceny antybiotykowrażliwości
Zautomatyzowane systemy – VITEC 2 – automatyczny system
do identyfikacji drobnoustrojów i oznaczania ich
lekowrażliwości.
• otrzymywanie wyników tego samego dnia, średnio od 6-8
godzin.
• substraty są dobrane w zestawy odpowiednie dla rodzaju
oznaczanego drobnoustroju. Każdy z testów zawiera 64 dołki,
w których znajdują się substraty biochemiczne (testy
identyfikacyjne) i antybiotyki wraz z podłożem (testy
antybiogramowe).
• do każdej karty, umieszczonej w oddzielnym opakowaniu
dołączone są rurki doprowadzające zawiesinę bakteryjną.
• przygotowanie inoculum odbywa się manualnie
• napełnianie kart, ich inkubacja i odczyt odbywa się w aparacie
• karty są umieszczane w komorze inkubacyjno-pomiarowej
aparatu.
• system dokonuje odczytu każdej karty co 15 minut.
• wyniki testów lekowrażliwości są podawane w postaci
najmniejszych stężeń hamujących (MIC) oraz kategorii (S,I,R).

9. AKTYWNOŚĆ ANTYBIOTYKU
FARMAKOKINETYKA (PK) – kinetyka dystrybucji leku w organizmie czyli profil absorbcji, stężenia
w surowicy, dystrybucji do tkanek, eliminacji.
CZYLI TO „CO ORGANIZM ROBI Z LEKIEM”
FARMAKODYNAMIKA (PD)– biochemiczny i fizjologiczny efekt działania leku; odpowiedź organizmu
na lek. Zależność od czasu, zależność od stężenia, efekt poantybiotykowy.
CZYLI TO „CO LEK ROBI Z ORGANIZMEM”
Model PK / PD
- zależność od stężenia i czasu
- efekt poantybiotykowy

10. • Cel: maksymalny czas
powyżej MIC
• Dawkowanie: powtórna
wysoka dawka, skrócenie
odstępów między dawkami
lub ciągły wlew
• Grupa antybiotyków: β-
laktamy, makrolidy,
linezolid
MODEL PK/PD – ZALEZNOŚĆ OD CZASU

11. Parametry indeksów farmakodynamiki leku:
T>MIC – tj. czas pomiędzy dawkami, w jakim stężenie leku w surowicy jest wyższe od MIC.
Cmax/MIC- maksymalne stężenie powyżej wartości MIC
MODEL PK/PD – ZALEZNOŚĆ OD CZASU
• Cel: maksymalne stężenie
(iloraz Cmx/MIC)
• Dawkowanie: jednorazowa,
wysoka dawka
• Grupa antybiotyków: β-
aminoglikozydy