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Determinación de grupo sanguíneo abo y rh

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  • 1. “Determinación de grupo sanguíneo ABO y Rh”Introducción:Un grupo sanguíneo es una forma de agrupar ciertas características de la sangre quedependen de los antígenos presentes en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de lasangre.Esta ha sido la base para que se pueda clasificar a la sangre en cuatro grupos en cuanto alsistema ABO: grupo A, grupo AB, grupo B y grupo O; y en dos con respecto al sistema Rh: Rhnegativo o Rh positivo. Lo que a la postre trae ocho grupos posibles por las combinacionesposibles entre ambos sistemas.Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccióninmunológica que puede desembocar en muerte.Las personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresan antígenos de tipo A ensu superficie y anticuerpos contra los antígenos B en el suero de su sangre.Las personas con sangre del tipo B tiene la combinación contraria, glóbulos rojos con antígenosde tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antígenos A en el suero de su sangre.Los individuos con sangre del tipo O no expresan ninguna de los dos antígenos (A o B) en lasuperficie de sus glóbulos rojos pero pueden fabricar anticuerpos contra ambos tipos, mientrasque las personas con tipo AB expresan ambos antígenos en su superficie y no fabrican ningunode los dos anticuerpos.A causa de estas combinaciones, el tipo O puede ser transfundido sin ningún problema acualquier persona con cualquier tipo ABO y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O- escompatible con todos, por lo que quien tiene dicho grupo se dice que es un donante universal.Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+ podrá recibir sangre de cualquier grupo, y sedice que es un receptor universal.Material y equipo: 40 tubos de ensayo de 12 x 75 4 pipetas Pasteur 1 gradilla de unicel 3 tubos Vacutiner con muestra sanguínea anticoagulada con EDTA 1 tubo Vacutainer con muestra sanguínea sin anticoagulante Antisuero Anti-A, Anti-AB, Anti-B y Anti-D * Eritrocitos con antígenos conocidos A1, A2, B y O 1 centrifuga*Reactivos:Antisuero A monoclonal Lafon Antisuero AB monoclonal LafonLote:9662 Lote: 8764Cad: 09NOV08 Cad: 31OCT08Aspecto: transparente Aspecto:transparenteColor: azul Color: incoloroAntisuero B monoclonal Lafon Antisuero D monoclonal NOVACLONELote: 9762A Lote: NDMG04305Cad:09NOV08 Cad: 29MAR08Aspecto: transperente Aspecto: transperenteColor: amarillo Color: incoloro
  • 2. TécnicaMétodo directo1. Centrifugar los 3 tubos Vacutiner con muestra sanguínea anticoagulada con EDTA y eltubo Vacutainer con muestra sanguínea sin anticoagulante, a una velocidad de 2500r.p.m. por 10 minutos, pues se utilizaran plasma y eritrocitos por separado.2. Rotular los tubos de ensayo de la siguiente manera: en cada tubo rotular dos númerosen la muestra, uno correspondiente del 1 al 4, el otro numero corresponde al que yatraía la muestra, y con el tipo de antisuero: Anti-A, Anti-AB, Anti-B ó Anti-D. Ejemplo:1,13, Anti-A; 1,13, Anti-AB, etc. El procedimiento se repite para las tres muestrasrestantes.3. En cuatro tubos limpios hacer una dilución de 2-5 % de eritrocitos con aguadestilada,de cada muestra. La dilución tomara un color rojo tenue, similar a la sangría.4. Colocar en cada tubo rotulado una gota de la dilución de eritrocitos preparada y unagota de antisuero, según corresponda.5. Al concluir lo anterior, llevar los tubos a la centrifuga y centrifugar por solo 15segundosa una velocidad de 1000 r.p.m. para observar mejor la reacción antigeno-anticuerpo(formación de un botón).OBTENIDO DE: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 46. Por ultimo leer los tubos, observando si hubo reacción o no, y correlacionando losdatos obtenidos con el método inverso para determinar el grupo sanguíneo.Metodo inverso1. Centrifugar los 3 tubos Vacutiner con muestra sanguínea anticoagulada con EDTA y eltubo Vacutainer con muestra sanguínea sin anticoagulante, a una velocidad de 2500r.p.m. por 10 minutos, pues se utilizaran plasma y eritrocitos por separado.2. Rotular los tubos de ensayo de la siguiente manera: en cada tubo rotular dos númerosen la muestra, uno correspondiente del 1 al 4, el otro numero corresponde al que yatraía la muestra, y con el tipo de eritrocitos con antigeno conocido: A1, A2, B y O.Ejemplo: 1,13, A1; 1,13, A2; etc. El procedimiento se repite para las tres muestrasrestantes.3. Colocar en cada tubo rotulado dos gotas ya sea de plasma o suero según corresponday una gota de los eritrocitos con antigeno conocido.4. Al concluir lo anterior, llevar los tubos a la centrifuga y centrifugar por solo 15segundosa una velocidad de 1000 r.p.m. para observar mejor la reacción antigeno-anticuerpo(formación de un botón).5. Por ultimo leer los tubos, observando si hubo reacción o no, y correlacionando losdatos obtenidos con el método inverso para determinar el grupo sanguíneo.Resultados:Muestra Método directo Método inversoAnti-A Anti-AB Anti-B Anti-D A1 A2 B OGrupo yRh
  • 3. 1 - - - + + + + - O +2 - + + + + + - - B +3 + + - + - - + - A +4 + + + + + - - - AB +Interpretación:Para el método directo la lógica fue: si en un tubo hay formación de botón (reacciónantigenoanticuerpo)quiere decir que los eritrocitos ensayados tienen el antigeno que reacciona con losanticuerpos presentes en el antisuero para ese tubo; y si no presentan aglutinación querrádecir que no corresponde el antigeno del eritrocito con el anticuerpo del antisuero, o que elantigeno esta ausente en esos eritrocitos. De ahí que pueda observarse que una muestrasanguínea muestre un solo tipo de antígenos del sistema ABO sobre su membrana (A o B),ambos antígenos (AB), o ninguno de ellos (O). lo mismo sucede para el sistema Rh ; alpresentarlo (Rh +) o no (Rh -).Para el método inverso el razonamiento fue: si en un tubo hay formación del botón (reacciónantigeno-anticuerpo) quiere decir que el plasma del paciente ensayado tiene los anticuerposque reaccionan con los eritrocitos con antigeno conocido, los cuales sirven de reactivo paraesta prueba. Por lo tanto una reacción positiva en este método definitivamente indica que elpaciente no tiene eritrocitos con antígenos que reaccionarían con los anticuerpos de su plasma.De ahí que el método se le nombre inverso.