Your SlideShare is downloading. ×
Guía III: Identificación de Enterobacterias
Upcoming SlideShare
Loading in...5
×

Thanks for flagging this SlideShare!

Oops! An error has occurred.

×
Saving this for later? Get the SlideShare app to save on your phone or tablet. Read anywhere, anytime – even offline.
Text the download link to your phone
Standard text messaging rates apply

Guía III: Identificación de Enterobacterias

50,496
views

Published on

Published in: Health & Medicine

11 Comments
45 Likes
Statistics
Notes
  • Muy buena información , me la puedes enviar a mi correo diegomar2024@hotmail.com
       Reply 
    Are you sure you want to  Yes  No
    Your message goes here
  • Hola por favor podrias facilitarme la presentación, tiene Muy buena información, Podrías enviarmelas a mi correo, te lo agradecería enormemente
       Reply 
    Are you sure you want to  Yes  No
    Your message goes here
  • Hola, quisiera saber si es posible que me pases este documento a mi correo manu_chum13@hotmail.com
    Gracias
       Reply 
    Are you sure you want to  Yes  No
    Your message goes here
  • Gracias por la presentación, tiene Muy buena información, Podrías enviarmelas a mi correo, te lo agradecería enormemente

    mi E-Mail: fernando.oviedo.06@gmail.com
       Reply 
    Are you sure you want to  Yes  No
    Your message goes here
  • Hola me gustaria que me enviaras el documento mayra-369@hotmail.com, muchas gracias
       Reply 
    Are you sure you want to  Yes  No
    Your message goes here
No Downloads
Views
Total Views
50,496
On Slideshare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
0
Actions
Shares
0
Downloads
587
Comments
11
Likes
45
Embeds 0
No embeds

Report content
Flagged as inappropriate Flag as inappropriate
Flag as inappropriate

Select your reason for flagging this presentation as inappropriate.

Cancel
No notes for slide

Transcript

  • 1. UNIVERSIDAD CATÓLICA SANTO TORIBIO DE MOGROVEJO Facultad de Medicina Escuela de Medicina MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA Práctica N°03 Identificación de Enterobacterias Jesús Alonso Custodio Marroquín Código: 062ac03464 Ciclo 2009 - IV
  • 2. Aislamiento de Bacterias Gram – Agar Mc Conkey La bacteria E. coli forma colonias rojas por un viraje del indicador de pH (rojo neutro), dando como resultado lactosa +. La bacteria Salmonella typhi forma colonias incoloras y no vira el indicador de pH, por lo que es lactosa - . Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. Fundamento En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. 1 Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones Peptona 17.0 Pluripeptona 3.0 Lactosa 10.0 Suspender 50 g del polvo por litro de agua Mezcla de sales biliares 1.5 destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 Cloruro de sodio 5.0 minutos hasta disolver. Esterilizar en Agar 13.5 autoclave a 121°C durante 15 minutos. Rojo neutro 0.03 Cristal violeta 0.001 pH final: 7.1 ± 0.2
  • 3. Incubación Durante 18-48 horas, a 35-37 ºC, en atmósfera aeróbica Resultados Microorganismos Colonias Escherichia coli ATCC 25922 Rojas con halo turbio Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas mucosas Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras, transparentes Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras, transparentes Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras, transparentes Enterococcus faecalis ATCC 29212 Diminutas, incoloras, opacas Características del medio Medio preparado: rojo púrpura .1
  • 4. Salmonella Shigella Agar. Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia. Fundamento Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro. Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo.2 Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones Pluripeptona 5.0 Extracto de carne 5.0 Lactosa 10.0 Suspender 60 g del polvo por litro de agua Mezcla de sales biliares 8.5 destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta Citrato de sodio 8.5 homogeneizar. Calentar a ebullición durante 2 o 3 minutos. NO ESTERILIZAR EN Tiosulfato de sodio 8.5 AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50°C y distribuir Citrato férrico 1.0 unos 20 ml por placa. Secar la superficie del Agar 13.5 medio unos minutos en la estufa. Verde brillante 0.00033 Rojo neutro 0.025 pH final: 7.0 ± 0.2 Resultados Microorganismos Colonias Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro Shigella flexneri Incoloras Shigella sonnei Incoloras Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas
  • 5. Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento Características del medio Medio preparado: rojo naranja. Identificación de bacterias Gram negativas E.coli E. coli es una de las especies bacterianas más minuciosamente estudiadas, y no solamente por sus capacidades patogénicas, sino también como sustrato y modelo de investigaciones metabólicas, genéticas, poblacionales y de diversa índole Ella está integrada por bacilos Gram negativos no esporulados, móviles con flagelos peritricos o inmóviles, aerobios-anaerobios facultativos, capaces de crecer en agar MacConkey y en medios simples con o sin agregado de NaCl, fermentadores y oxidativos en medios con glucosa u otros carbohidratos, catalasa positivos, oxidasa negativos, reductores de nitratos a nitritos, y poseedores de una proporción G+C de 39 a 59% en su DNA. Se trata de bacterias de rápido crecimiento y amplia distribución en el suelo, el agua, vegetales y gran variedad de animales. E. coli es la especie tipo del género Escherichia. Incluye gérmenes generalmente móviles, que producen ácido y gas a partir de la glucosa, la arabinosa, y habitualmente de la lactosa y otros azúcares. Producen reacción positiva de rojo de metilo, y negativa de Vogues-Proskauer. Son inhibidos por KCN e incapaces de crecer en medio con citrato como única fuente de carbono y energía, pero sí en caldo acetato. Son H2S, ureasa y fenilalanina negativos, pero en general son indol positivos y decarboxilan la lisina. Se clasifican en más de 170 serogrupos O según las características antigénicas de su LPS, y en serotipos por la combinación de antígenos O y H flagelares. Otros antígenos presentes en distintas cepas (capsulares, fimbriales y otros) han sido empleados para su clasificación o identificación. E. coli coloniza el tracto gastrointestinal a las pocas horas de vida del niño, y establece con el huésped una relación estable de mutuo beneficio).Como integrante de la flora normal del hombre y de muchos animales, se lo considera un germen indicador de contaminación fecal cuando está presente en el ambiente, agua y alimentos, junto con otros similares agrupados bajo la denominación de "bacterias coliformes". Estas son enterobacterias que pertenecen al género Escherichia y a otros relacionados como Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter o Serratia, y que tienen en común la capacidad de fermentar la lactosa en un lapso no mayor de 48 horas, con producción de ácido y gas. Son gérmenes de gran ubicuidad y capacidad de proliferación, y a la vez de fácil cultivo e identificación, y por lo tanto muy útiles como indicadores de contaminación, pero no son enteropatógenos como grupo (como tampoco lo es E.coli), y por lo tanto su presencia en alimentos, ambiente o pacientes no certifica la etiología de una infección intestinal o un brote de ETA. E. coli puede ser causa de enfermedad endógena en pacientes debilitados o en situación de alteración de la pared intestinal (peritonitis, sepsis, etc.), pero las infecciones entéricas provocadas por este
  • 6. germen no son causadas por las cepas que habitan normalmente el intestino, sino por líneas especialmente patógenas en esta localización, que se transmiten por vía fecaloral de persona a persona o a través del agua y alimentos. 3 Salmonella typhi Salmonella es un género de bacteria que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, formado por bacilos gram negativos, anaerobios facultativos, con flagelos perítricos y que no desarrollan cápsula ni esporas. Son bacterias móviles que producen sulfuro de hidrógeno (H2S). Fermentan glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa, y no producen ureasa. Es un agente zoonótico de distribución universal. Se transmite por contacto directo o contaminación cruzada durante la manipulación, en el procesado de alimentos o en el hogar, también por vía sexual. Para la bacteriología clínica, Salmonella es un bacilo patógeno primario (como Shigella, Yersinia y ciertas cepas de E. coli), anaerobio facultativo, algunos móviles y no fermentan la lactosa. S. typhi es la única serovariedad que no produce gas en la fermentación de los azúcares. Clásicamente se distinguían tres únicas especies patógenas primarias: S. typhy, S. cholerae-suis y S. enteritidis. A su vez, según la serotipificación de Kauffman y White, eran clasificadas en más de 2000 serotipos en base a los antígenos flagelares H (proteicos) y antígenos somáticos O (fracción polisacárida del lipopolisacárido bacilar). S. typhi posee además un antígeno de virulencia (Vi). Salmonella crece con facilidad en agar sangre formando colonias de 2 a 3 milímetros. En laboratorios de microbiología clínica se aísla con medios selectivos, Selenito, Hektoen, SS o XLD para inhibir el crecimiento de otras bacterias patógenas y de la flora intestinal saprófita. Tienen los siguientes antígenos:t • Somático O, del lipopolisacárido en la pared celular, termoestable y es la base de la clasificación en subgrupos. • Flagelar H, de la proteína flagelina, termolábil, es la base de la clasificación de especies. • Envoltura Vi, termolábil, responsable de la virulencia de varias especies patogénicas. Patogenia Produce salmonelosis con un período de incubación de entre 5 horas y 5 días, diarrea y dolor abdominal, a través de las heces del enfermo se elimina un gran número de esta bacteria y fiebre entérica con un periodo de incubación de 7 a 28 días, causante de dolor de cabeza, fiebre, dolor abdominal y diarrea, erupción máculo-papulosa en pecho y espalda, los enfermos presentan un período de convalecencia entre 1 y 8 semanas, las personas curadas eliminan Salmonella. También puede ocasionar fiebres entéricas o infección intestinal por intoxicación con algunos alimentos.
  • 7. Virulencia Salmonella al igual que otras bacterias Gram negativas usan un sistema secretor especializado (denominado tipo III) para inyectar dentro de células eucariotas ciertas proteínas efectoras que manipulan las vías de señalización celular y de la bacteria. Se ha observado la entrega de la proteína SipA a células que debilitan la maquinaria intracelular del huésped y promueven la virulencia en mamíferos en aproximadamente 10 minutos, dejando la bacteria virtualmente desprovista de SipA, efectivamente estableciendo un nicho para la multiplicación intracelular de la bacteria.4 Resultados de Pruebas E. coli Salmonella typhi INDOL + - A/A K/A TSI H2S- H2S- CO2 + CO2+ CITRATO - - LIA + +
  • 8. Prueba TSI Medio diferencial complejo (de color rojo) compuesto por 3 azúcares: 10% lactosa, 10% sucrosa y 1% dextrosa y un ligador que es en este caso el hierro. La siembra se realiza tanto en la superficie del agar (aerobiosis) como en la profundidad de éste (anaerobiosis). Medio K (alcalino) de color rojo. Medio A (ácido) de color amarillo. K/A Si la bacteria metaboliza sólo la glucosa: en la superficie la utilizará por vía respiratoria, y donde la tensión de oxígeno disminuya lo suficiente, empleará una pequeña proporción por vía fermentativa. Esto generará una pequeña cantidad de ácidos que serán neutralizados por las aminas derivadas de la decarboxilación oxidativa de las proteínas. Como resultado, el medio mantendrá su color rojo en la superficie, al no haber cambiado de pH. Por el contrario, las bacterias crecidas en la profundidad emplearán desde el primer momento la glucosa por vía fermentativa, generando ácidos que no serán neutralizados, provocándose un descenso del pH y el color del medio en el fondo del tubo cambiará a amarillo. A/A Si la bacteria, además fermenta lactosa: los ácidos producidos modificarán también el pH de la superficie del medio. Las aminas no son capaces de neutralizar la cantidad de ácidos producidos en esta fermentación, ya que la lactosa se encuentra en el medio a mayor concentración que la glucosa. El color del medio en la superficie cambiará a amarillo. K/K Si la bacteria es aerobia estricta (no fermentadora), el medio permanece de color rojo. Los azúcares son respirados, degradándose completamente hasta CO2, que se elimina y no modifica el pH. A/A(g) Aparición de burbujas, rotura o elevación del agar del fondo del tubo. K/A(H2S) Aparición de un precipitado de color negro en el fondo del tubo. Algunas bacterias respiradoras anoxobiónticas son capaces de emplear el tiosulfato sódio como aceptor final de electrones en la
  • 9. cadena transportadora. Este compuesto se reduce a ácido sulhídrico que reacciona con el hierro Fe2+ presente en el medio formando un precipitado negro de sulfuro de hierro.5 Resultados: 1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa. 2-Pico ácido/fondo ácido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/ o sacarosa. 3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares. 4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas. 5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce ácido sulfhídrico. Microorganismo Pico/Fondo Producción de gas Producción deácido sulfhídrico E. coli ATCC 25922 A/A + - K. pneumoniae ATCC 700603 A/A + - P. mirabilis ATCC 43071 K/A + + S. typhimurium ATCC 14028 K/A - + S. enteritidis ATCC 13076 K/A + + S. flexneri ATCC 12022 K/A - - P. aeruginosa ATCC 27853 K/K - - A: ácido K: alcalino Características del medio Medio preparado: rojo.6
  • 10. INDOL La prueba del indol es una prueba bioquímica realizada en especies bacterianas para determinar la habilidad del organismo de romper el indol del aminoácido triptófano. Esta división molecular es lograda por una serie de enzimas intracelulares diferentes, un sistema que en conjunto se le llama con frecuencia triptofanasa. Se genera el indol por una desaminación reductiva del triptófano via la molécula intermediaria ácido indolpirúvico. Las triptofanasas catalizan la reacción de desaminación, durante el cual se remueve el grupo amino (NH2) de la molécula de triptófano. Los productos finales de la reacción son el indol, ácido pirúvico, amoníaco (NH3) y energía. Como coenzima de la reacción se requiere al fosfato de piridoxal Tal como ocurre con muchas pruebas bioquímicas, los resultados de una prueba de indol se indican con el cambio de color que sigue a la reacción. El cultivo bacteriano puro debe ser sembrado en un caldo con triptofano o peptona estériles o ambos por 24 a 48 horas antes de realizar la prueba. Luego de la incubación, se añaden cinco gotas de reactivo Kovac (alcohol isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehído y ácido clorhídrico concentrado al caldo del cultivo. Una variante de la prueba se realiza usando el reactivo de Ehrlich's (usando alcohol etílico en lugar del alcohol isoamilo, desarrollado por Paul Ehrlich), en especial si se tiene un organismo que no sea fermentador y en organismo anaeróbico. Los resultados positivos se muestran por la presencia de un color rojo o rojo-violeta en la superficie de la capa de alcohol en el cultivo. Un resultado negativo se muestra amarillo. Un resultado variable puede ocurrir cuando se muestra un color anaranjado. Ello es debido a la presencia de escatol, también conocido como metil-indol o indol metilado, otro posible producto de la degradación del triptófano.7 Bacteria indol positiva • Haemophilus influenzae, • La mayoría de los Proteus spp. (más no Las bacterias que resultan indol positivas al el P. mirabilis), romper el indol del triptófano, incluyen: • Plesiomonas shigelloides, • Pasturella multocida, Pasturella • Aeromonas hydrophilia, Aeromonas pneumotropica, y punctata, • Vibrio spp. • Bacillus alvei, • La mayoría de los Citrobacter spp., • Edwardsiella spp., • Escherichia coli, Bacteria indol negativa • Flavobacterium spp.,
  • 11. Las bacterias que generan un indol negativo en • La mayoría de los Klebsiella spp., esta prueba, incluyen: • Neisseria spp., • Pasturella haemolytica, Pasturella • Actinobacillus spp., ureae, • Aeromonas salmonicida, • Proteus mirabilis, • Alcaligenes spp., • Pseudomonas spp., • La mayoría de los Bacillus spp., • Salmonella spp., • Bordtella spp., • Serratia spp., • Enterobacter spp., • Yersinia spp. • La mayoría de los Haemophilus spp., Citrato Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y energía. Fundamento En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono, usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad. El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.8 Resultados -Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad. -Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color. Microorganismo Citrato permeasa Color del medio Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Positivo Azul S. typhimurium ATCC 14028 Positivo Azul E. coli ATCC 25922 Negativo Verde S. flexneri ATCC 12022 Negativo Verde Características del medio Medio preparado: verde.
  • 12. LIA (Lisina Hierro Agar.) Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilación / desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico. Fundamento En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y desaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8 Por decarboxilación de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el viraje del indicador al color violeta. La decarboxilación de la lisina, tiene lugar en medio ácido, por lo que es necesario que la glucosa sea previamente fermentada. Los microorganismos que no producen lisina decarboxilasa, pero que son fermentadores de la glucosa, producen un viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de incubación se observa el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo amarillo. La producción de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formación de sulfuro de hierro. Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto produce un ácido alfa-ceto-carbónico, el cual, con la sal de hierro y bajo la influencia del oxígeno forma un color rojizo en la superficie del medio.9 Resultados 1- Decarboxilación de la lisina: -Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta. -Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo. 2-Desaminación de la lisina: Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp.
  • 13. 3-Producción de ácido sulfhídrico: -Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo) Color en el pico de flauta Color en la base del Ennegrecimiento del Microorganismos tubo medio Proteus mirabilis ATCC 43071 Rojo Amarillo Negativo Salmonella typhimurium ATCC 14028 Púrpura Púrpura Positivo Salmonella enteritidis ATCC 13076 Púrpura Púrpura Positivo Providencia spp. Rojo Amarillo Negativo Citrobacter freundii Púrpura Amarillo Positivo Morganella spp.* Rojo Amarillo Negativo Edwarsiella spp. Púrpura Púrpura Positivo Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Púrpura Púrpura Negativo Escherichia coli ATCC 25922 Púrpura Púrpura Negativo Características del medio Medio preparado: color violeta.
  • 14. V. CUESTIONARIO 1. ¿Existen otras coloraciones que permitan la diferenciación de estructuras bacterianas? Examen directo: • Examen en freso. • KOH al 10% • Tinta china • Yodo de lugol Tinciones diferenciales • Tinción Gram • Tinción de hematoxilina férrica • Tinción de metenamina argéntica • Tinción de azul O de toluidina • Tinción tricrómica • Tinción de Wright-Giemsa Tinciones acidorresistentes • Tinción de Zhiehl-Neelsen • Tinción de Kinyoun • Tinción auramina-rodamina • Tinción acidorresistente modificada. Tinciones fluorescentes • Tinción naranja de acridina • Tinción auramina-rodamina • Tinción blanca de calcoflúor. • Tinción directa con anticuerpos fluorescentes.10
  • 15. 2. ¿Tienen utilidas diagnóstica el uso de estas tinciones?
  • 16. 3. ¿Por qué es importante utilizar Agar Mc Conkey en el aislamiento de enterobacterias y Cuál es su indicador? Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. 1
  • 17. VI. CONCLUSIONES Los resultados de las pruebas realizadas fueron: VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Britanialab.com. Mc Conkey Agar [Sede Web]. Argentina: Britanialab.com; 2009-[acceso el 04 de septiembre de 2009] Disponible en: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm 2. Britanialab.com. Salmonella Shigella Agar [Sede Web]. Argentina: Britanialab.com; 2009- [acceso el 04 de septiembre de 2009] Disponible en: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/salmoshigagar.htm 3. Biblioteca Virtual en Salud. E.coli [Sede Web]. Uruguay: bvsops.org; 2009 –[ acceso el 04 de septiembre de 2009]. Disponible en: http://www.bvsops.org.uy/php/index.php?lang=es 4. Wikipedia.org. Salmonella [Sede Web]. España: Wikipedia.org; 2009- [actualizado el 28 de agosto de 2009; acceso el 04 de septiembre de 2009]. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Salmonella 5. Henríquez K, Donado C. Atlas Virtual de Medicina: Bacterilogía [Sede Web]. Panamá: Universidad de Panamá; 2009-[actualizado en febrero de 2009; acceso el 04 de septiembre de 2009]. Disponible en:
  • 18. http://www.telmeds.org/AVIM/Abacterio/bacilos%20gram %20negativos/bacilos_gram_negativos_fermentad.htm 6. Britanialab.com. TSI [Sede Web]. Argentina: Britanialab.com; 2009-[acceso el 04 de septiembre de 2009] Disponible en: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tsiagar.htm 7. Henríquez K, Donado C. Atlas Virtual de Medicina: Bacterilogía: INDOL [Sede Web]. Panamá: Universidad de Panamá; 2009-[actualizado en febrero de 2009; acceso el 04 de septiembre de 2009]. Disponible en: http://www.telmeds.org/AVIM/Abacterio/bacilos%20gram %20negativos/images/indole.jpg 8. Britanialab.com. Citrato [Sede Web]. Argentina: Britanialab.com; 2009-[acceso el 04 de septiembre de 2009] Disponible en: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/simmonscitagar.htm 9. Britanialab.com. LIA [Sede Web]. Argentina: Britanialab.com; 2009-[acceso el 04 de septiembre de 2009] Disponible en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lisinahierroagar.htm 10. Murray P. Microbiología Clínica. 5ed. España: Elsevier; 2006.