1. Tema 3
CONCEPTE DE LINEALITAT

2. Continguts
• Corbes de calibratge
• Concepte d’absorció selectiva
• Concepte de linealitat
• Selecció de la longitud d’ona
• Càlcul de la concentració d’una substància per
extrapolació
• Exemple: determinació de l’àcid úric sèric
• Procés de calibratge. Resum
• Relació entre els resultats obtinguts i les possibles
patologies associades

3. Objectius específics
• Definir el concepte de linealitat entre dos
paràmetres
• Confeccionar gràfics de calibrat i interpolar
resultats
• Descriure com es prepara un “blanc”
• Definir la utilitat d’un calibrador, estàndard o
patró
• Identificar la relació entre els resultats i les
possibles patologies associades.

4. Corbes de calibratge
• Espectrofotòmetre
• Reactiu i mètode de la tècnica a calibrar
• Mesurar les ≠ absorbàncies o les ≠ trasmitàncies per a les ≠ λ
• Representació gràfica (A o T en l’eix y o ordenada i λ en l’eix x o abscissa)
• http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/2/2c/3D_coordinate_system.svg

5. Absorció selectiva
• En la zona de màxima absorció (banda A) hi ha
una absorbància màxima per a una
determinada λ
• Direm que la substància posseeix absorció
selectiva per a la radiació que li correspon a
aquella λ

6. Concepte de linealitat
• Gràfica amb valors d’absorbàncies (A) en
ordenades i valors de concentració (c) en
abscisses

7. • Diluïm progressivament el patró (estàndard o
calibrador)
• Mesurem l’absorbància de cada dilució en la
λ dins la banda A
• Obtindrem una recta (línia contínua) que
demostra el compliment de la llei de Lambert-
Beer
• Per a mostres molt concentrades, ens cal
diluir-les..
• Si utilitzem una λ dins la banda B, obtindríem
una corba i no compliríem la llei de L-B

8. Selecció de la λ
• L’estructura química d’una molècula és la
responsable de que s’absorbeixi una radiació
d’una determinada λ
• Hem de seleccionar λ dins la banda A
• A vegades utilitzem radiacions diferents, per
exemple: Amàx (pic màxim) i altres equidistants
als costats de la màxima (A1 i A2). Aleshores,
utilitzarem per a calcular la concentració,
l’anomenada Aco(absorbància corregida
d’Allen)

9. Aco(absorbància corregida d’Allen)
Aco = Amàx - [(A1+A2)/2]
Així evitem interferències, però sempre hem de
trobar-nos dins la linealitat

10. Càlcul de la [ ] d’una substància
per extrapolació
• Material necessari:
• Mostra (sèrum, plasma, orina, LCR,..)
• Reactius (solucions i patró)
• Mètode o tècnica
• Espectrofotòmetre
• Corbes: A/λ , A/c o T/c