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Preparada por
Barbara Heard,
Atlantic Cape Community
College; traducida,
adaptada y modificada por
Gustavo Toledo C. SFC,
2014
Expresión
génica
© 2013 Pearson Education, Inc.© Annie Leibovitz/Contact Press Images
© 2013 Pearson Education, Inc.
• DNA es la receta maestra de la Síntesis
de proteínas
• Gen – segmento de DNA con la receta
para un polipéptido
• Los Tripletes (tres bases nitrogenadas de
de DNA) forman una biblioteca genética
– Bases en el DNA son A, G, T y C
– Cada triplete codifica para un amino ácido de
un polipéptido
PLAYPLAY Animation: DNA y RNA
Síntesis de proteínas
Use esta animación en 3D sobre biología molecular del gen que he traducido para Uds. y cuyo URL
está escrito al inicio del texto.http://www.Diapo.share.net/gustavotoledo/3-d-biologa-molecular-del-
genok
© 2013 Pearson Education, Inc.
Síntesis de proteínas
• Los Genes están compuestos de exones
e intrones
– Exones codifican para amino ácidos
– Intrones–segmentos no codificantes
• Rol del RNA
– Mecanismo de decodificación del DNA y
mensajero
– Tres tipos–todos formados en el DNA núclear
de eucariotas
• RNA mensajero (mRNA); RNA ribosómico
(rRNA); RNA de transferencia (tRNA)
• RNA se diferencia del DNA
– Uracilo es sustituido por timina
© 2013 Pearson Education, Inc.
Roles de los tres principales tipos de RNA
• RNA mensajero (mRNA)
– Transporta instrucciones para la síntesis de
un polipéptido, desde el gen en el DNA a los
ribosomas en el citoplasma
© 2013 Pearson Education, Inc.
Roles de los tres principales tipos de RNA
• RNA ribosómico (rRNA)
– Componente Estructural de ribosomas que,
junto con el tRNA, ayuda a traducir el
mensaje que trae el mRNA
© 2013 Pearson Education, Inc.
Roles de los tres principales tipos de RNA
• RNA de transferencias (tRNAs)
– Se une a amino ácidos y se parea con bases
de codones del mRNA en el ribosoma para
empezar el proceso de Síntesis de proteínas
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.10 esquema simplificado del flujo de información desde el gen (DNA) al mRNA al polipéptido durante la
Transcripción y Traducción.
Procesamiento del RNA Pre-mRNA
DNA
Transcripción
polipéptido
ribosoma
Poros del
Núcleo
Traducción
Membrana
Nuclear
mRNA
© 2013 Pearson Education, Inc.
Síntesis de proteínas
• Ocurre en dos pasos
– Transcripción
• La información del DNA information es codificada
en el mRNA
– Traducción
• Decodificación del mRNA para ensamblar los
polipéptidos
© 2013 Pearson Education, Inc.
Transcripción http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/transcription/movie-flash.htm
• Transfiere secuencias de bases del gen
en el DNA a las secuencias de bases
complementarias del mRNA
• Factores de Transcripción –Activadores
del gen
– Afloja las histonas del DNA en el área que
será transcrita
– Se unen a la secuencia promotora-del DNA
que especifica el sitio de inicio del gen en la
hebra molde
– Hacen de mediadores para la unión de la
RNA polimerasa al promotor
© 2013 Pearson Education, Inc.
Transcripción
• Tres fases
– Iniciación
• RNA polimerasa separa las hebras de DNA
– Elongación
• RNA polimerasa añade nucleótidos
complementarios
– Terminación
• La señal de Terminación indica ”parar"
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Procesamiento del mRNA
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnaprocessing/movie-flash.htm
• El mRNA es editado y procesado antes de
la Traducción
– intrones removidos por espliceosomas
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnasplicing/movie-flash.htm
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Fig. 1.11 Visión general de los estados de la Transcripción.
El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares
de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más
recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se
llama Híbrido DNA-RNA.
RNA
polimerasa
DNA
No
desenrollado
hebra codificante de DNA
Hebra
moldemRNA
Región híbrida de DNA-RNA
Dirección de la
Transcripción
Reenrollamiento
del DNA
Nucleótidos de RNA
RNA polimerasa
Región
promotora
hebra molde Señal de
Terminación
DNA
hebra codificante
mRNA
hebra molde
Transcrito de mRNA
Transcrito de mRNA completado
RNA polimerasa
Terminación: La síntesis de mRNA termina cuando se alcanza la
señal de terminación. La RNA polimerasa y el transcrito de mRNA que
se ha completado son liberados.
2
Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA
polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e
iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde.
Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo
de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base cada vez;
la doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa
y se vuelve a enrollar por detrás de ella.
1
3
Diapo. 1
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción.
RNA polimerasa
Región
promotora
hebra molde Señal de
Terminación
DNA
hebra codificante
Diapo. 2
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción.
RNA polimerasa
Región
promotora
hebra molde Señal de
Terminación
DNA
mRNA
hebra molde
Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA
polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e
iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde.
1
hebra codificante
Diapo. 3
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción.
El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares
de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más
recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se
llama Híbrido DNA-RNA.
RNA
polimerasa
DNA
No
desenrollado
hebra codificante of DNA
Hebra
moldemRNA
Región híbrida de DNA-RNA
Dirección de la
Transcripción
Reenrollamiento
del DNA
Nucleótidos de RNA
RNA polimerasa
Región
promotora
hebra molde Señal de
Terminación
DNA
mRNA
hebra molde
Transcrito de mRNA
2
Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA
polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e
iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde.
Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo
de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base a la vez, la
doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa y
se vuelve a enrollar por detrás de ella.
1
hebra codificante
Diapo. 4
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción.
El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares
de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más
recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se
llama Híbrido DNA-RNA.
RNA
polimerasa
DNA
No
desenrollado
hebra codificante of DNA
Hebra
moldemRNA
Región híbrida de DNA-RNA
Dirección de la
Transcripción
Reenrollamiento
del DNA
Nucleótidos de RNA
RNA polimerasa
Región
promotora
hebra molde Señal de
Terminación
DNA
mRNA
hebra molde
Transcrito de mRNA
Transcrito de mRNA completado
RNA polimerasa
Terminación: La síntesis de mRNA termina cuando se alcanza la
señal de terminación. La RNA polimerasa y el transcrito de mRNA que
se ha completado son liberados.
2
Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA
polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e
iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde.
Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo
de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base cada vez;
la doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa
y se vuelve a enrollar por detrás de ella.
1
3
hebra codificante
Diapo. 5
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Traducción http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/translation/movie-flash.htm
• Convierte la secuencia de bases de los
ácidos nucleicos en secuencia de amino
ácidos de las proteínas
• Están involucrados los mRNAs, tRNAs y
rRNAs
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Código genético
• Cada secuencia de tres bases en el DNA
(triplete) está representado por un codón
– Codón—secuencia de bases complementaria
en el mRNA
– Algunos amino ácidos están representados
por más de un codón
© 2013 Pearson Education, Inc.
G
U
C
A
U
C
GA
U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G
TERCERABASE
PRIMERABASE
SEGUNDA BASE
GGG
GGU
GGA
GGC
lle
Phe
GUG
GUU
GUA
GUC
Trp
GCG
GCU
GCA
GCC
Stop
Thr
Stop
GAG
GAU
GAA
GAC
Tyr Cys
Stop
UGG
UGU
UGA
UGC
UUG
UUU
UUA
UUC
UCG
UCU
UCA
UCC
UAG
UAU
UAA
UAC
Leu
Ser
Lys
Asn Ser
CGG
CGU
CGA
CGC
Leu
CUG
CUU
CUA
CUC
CCG
CCU
CCA
CCC
Pro
CAG
CAU
CAA
CAC
Gln
His
Arg
Met o
Inicio
Glu
AGG
AGU
AGA
AGC
AUG
AUU
AUA
AUC
ACG
ACU
ACA
ACC
AAG
AAU
AAA
AAC
Arg
Val
Asp
GlyAla
Fig. 1.13 El código genético.
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Rol de los tRNAs
• 45 tipos diferentes
• Se unen a amino ácidos específicos en un
extremo (tallo aceptor)
• El anticodón en el otro extremo (cabeza)
se une por puentes de Hidrógeno al
codón del mRNA en el ribosoma
– Ej., Si el codón = AUA, el anticodón = UAU
• El ribosoma coordina el acoplamiento del
mRNA y tRNA; contiene tres sitios:
– Sitio Aminoacil; Sitio Peptidil; Sitio Exit
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Secuencia de eventos en la Traducción
• Tres fases que requieren ATP, factores
proteicos y enzimas
– Iniciación
– Elongación
– Terminación
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Traducción: Iniciación
• La subunidad ribosómica pequeña se une
al tRNA iniciador y al mRNA para ser
decodificado; explora en busca del codón
de inicio
• Las subunidades ribosómicas grande y
pequeña se unen, formando el ribosoma
funcional
• Al final de la Iniciación
– El tRNA está en el sitio P; el sitio A está
vacante
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Traducción: Elongación
• Tres pasos
– Codón de reconocimiento
• El tRNA se une al codón complementario en el
sitio A
– Formación del enlace peptídico
• El amino ácido del tRNA en el sitio P es enlazado
al amino ácido del tRNA en el sitio A
– Translocación
• Los tRNAs se mueven una posición–A P; P E
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Traducción: Elongación
• Nuevos amino ácidos son añadidos por
otros tRNAs a medida que el ribosoma se
mueve a lo largo del mRNA
• La porción inicial del mRNA puede ser
”leído" por ribosomas adicionales
– Poliribosoma
• Complejo mRNA-ribosomas múltiples
– Produce múltiples copias de la misma
proteína
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Fig. 1.14 Polyribosoma arrays.
Polipéptidos
crecientes Polipéptido
completado
Ingreso de
Subunidades
ribosomales
Poliribosoma
Inicio del
mRNA Fin del
mRNA
Cada poliribosoma está compuesto por una hebra de
mRNA que está siendo leída simultáneamente por
muchos ribosomas. En este diagrama, el mRNA se está
moviendo a la izquierda y el ribosoma funcional, que primero
comenzó la traducción, es el que está más a la derecha.
Esta microfotografía hecha mediante un MET
muestra un poliribosoma grande (400.000x).
ribosomas
mRNA
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Traducción: Terminación
• Cuando el codón stop (UGA, UAA, UAG)
entra al sitio A:
– Terminan las señales de Traducción
– Unas Proteínas llamadas factores de
liberación (RF-1, RF-2 y RF-3) se unen al
codón stop  transfieren al polipéptido
terminado a una molécula de agua  se
libera la cadena polipeptídica; se separan las
subunidades ribosómicas; se degrada el
mRNA
– La Proteína es procesada para darle su
estructura funcional 3-D
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Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 1
Elongación. Los amino ácidos son enlazados
uno a la vez a la cadena peptídica creciente via
un proceso que tiene tres pasos repetidos.
2
amino ácido
Correspondiente
al anticodón
Hebra de
DNA
molde
Pre-mRNA
mRNA
Núcleo (sitio de
la Transcripción)
amino ácido
correspondiente
al anticodón
Met
tRNA
El amino ácido correcto
es unido a cada especie
de tRNA por una enzima
sintetasa. Ile
Pro
Leu
Anticodón
del tRNA
polipéptido
Ile
Pro
Codón de mRNA
complementario
Leu
Enlace
Peptídico
Nuevo
tRNA
liberado
Pro
Leu
Ile
APE
APE
Formación del enlace
peptídico. El polipéptido
creciente unido al
tRNA en elsitio P es
transferrido al amino
Ácido transportado por
el tRNA en el sitio A
y se forma un nuevo
enlace peptídico.
2b
2c Translocación. A medida
que el ribosoma se transloca, se
desplaza un codón a lo largo del
mRNA:
• El tRNA descargado en el sitio
P se mueve al sitio E y luego
es liberado.
• El tRNA en el sitio A se mueve
al sitio P.
• El próximo codón a ser
traducido ahora está en el
sitio A vacío, listo para iniciar
nuevamenteel paso 2a.
Dirección del
Movimiento del ribosoma
polipéptido
factor de liberación
codón stop
PE
Terminación. Cuando un codón stop
(UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la
elongación. La liberación del polipéptido recién
hecho es gatillada por un factor de liberación y se
separan las subunidades ribosómicas, liberando al
mRNA.
3
Reconocimiento
del codón. El
anticodón de un tRNA
entrante se une con el
codón complementario
del mRNA (A a U y C a
G) en el Sitio A del
ribosoma.
2a
Subunidad
ribosómica
pequeña
Codón de
inicio
Sitio
A
Sitio
P
Sitio
E
Iniciación. La Iniciación ocurre
al combinarse 4 componentes:
• una subunidad ribosómica pequeña
• Un tRNA iniciador que transporta
el amino ácido metionina
• El mRNA
• Una subunidad ribosómica grande
Una vez logrado esto, comienza la
próxima fase, la elongación.
1
tRNA iniciador
llevando el anticodón
Aminoacil-tRNA
sintetasaMet
Citosol (sitio de
la Traducción)
Met
El mRNA
recién hecho
(y editado)
deja el Núcleo
y viaja a un
ribosoma libre
o adherido para
la decodificación.
metionina
(amino ácido)
Subunidad
Ribosómica
grande
U A C
U
A
C
C
C
C
U
A
U
U
U
A
A
G
G
APE
GGC
GGC
GAU
GAU
GAUACC CUA
ACCGCU CUC
ACUGGG UGA
CCU
GAUACC CUA
GAU
GGC
GAC
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Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 2
Hebra de
DNA molde
Pre-mRNA
Núcleo (sitio de
la Transcripción)
amino ácido
correspondiente
al anticodón
Met
El amino ácido correcto
es unido a cada especie
de tRNA por una enzima
sintetasa.
Aminoacil-tRNA
sintetasa
metionina
(amino ácido)El mRNA
recién hecho
(y editado)
deja el Núcleo
y viaja a un
ribosoma libre
o adherido para
la decodificación.
tRNA
tRNA iniciador
llevando un anticodón
Subunidad
Ribosómica
grande
Codón de
inicio
Subunidad
ribosómica
pequeña
Sitio
E
Met
Sitio
P
Sitio
A
Met
Citosol (sitio de
la Traducción)
Iniciación. La Iniciación ocurre
al combinarse 4 componentes:
• una subunidad ribosómica pequeña
• Un tRNA iniciador que transporta
el amino ácido metionina
• El mRNA
• Una subunidad ribosómica grande
Una vez logrado esto, comienza la
próxima fase, la elongación.
1
U A C
U
A
C
C
C
U
A
U
U
U
A
A
G
G
C
mRNA
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 3
Elongación. Los amino ácidos son enlazados
uno a la vez a la cadena peptídica creciente vía
un proceso que tiene tres pasos repetidos.
2
Amino ácido
que corresponde
con el anticodón
Pro
Anticodón
del tRNA
Codón de mRNA
complementario
Reconocimiento del codón
El anticodón de un tRNA
entrante se une con el codón
complementario del mRNA
(A a U y C a G) en el Sitio A del
ribosoma.
lle
Leu
APE
GGC
GAUACC CUA
GAU
2a
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Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 4
polipéptido
Enlace
Peptídico
nuevo
Ile
Pro
Leu
GAUA CC CUA
GGGC AU
E P A
Formación del
Enlace peptídico. El
Polipéptido creciente unido al
tRNA en el sitio P es
transferido al amino ácido
transportado por el tRNA en el
sitio A y se forma un nuevo
enlace peptídico.
2b
Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 5
tRNA
liberado
E P A
G AU
C CG CUA CUC
GGC Leu
Pro
Ile
Translocación. A medida que el ribosoma se transloca, se desplaza un codón a lo largo del
mRNA:
• El tRNA descargado en el sitio P se mueve al sitio E y luego es liberado.
• El tRNA en el sitio A se mueve al sitio P.
• El próximo codón a ser traducido ahora está en el sitio A vacío, listo para el paso 2a
nuevamente.
Dirección del movimiento del ribosoma
2c
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Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 6
factor de
liberación
codón stop
AC
U
G GGU GA
CC
U
E P
GAC
Terminación. Cuando un codón stop (UGA,
UAA o UAG) llega al sitio A, termina la elongación.
La liberación del polipéptido recién sintetizado es
gatillada por un factor de liberación y se separan
las subunidades ribosómicas, liberando al mRNA.
3
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 7
polipéptido
factor de
liberación
codón stop
AC
U
G GGU GA
CC
U
E P
GAC
Terminación. Cuando un codón stop
(UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la
elongación. La liberación del polipéptido recién
hecho es gatillada por un factor de liberación y se
separan las subunidades ribosómicas, liberando al
mRNA.
3
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es
decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular.
Diapo. 8
Elongación. Los amino ácidos son enlazados
uno a la vez a la cadena peptídica creciente via
un proceso que tiene tres pasos repetidos.
2
amino ácido que
se corresponde
con el anticodón
Hebra de
DNA molde
Pre-mRNA
mRNA
Núcleo (sitio de
la Transcripción)
amino ácido
correspondiente
al anticodón
Met
tRNA
El correcto amino
Ácido es unido a
cada especie de
tRNA por una enzima
sintetasa. Ile
Pro
Leu
Anticodón
del tRNA
polipéptido
Ile
Pro
Codón
complementario
del mRNA
Leu
Enlace
Peptídico
nuevo
tRNA
liberado
Pro
Leu
Ile
APE
APE
Formación del
Enlace peptídico.
El polipéptido en
crecimiento unido al
tRNA en el sitio P es
transferido al amino
Ácido transportado por
el tRNA en el sitio A y
se forma un nuevo
enlace peptídico.
2b
2c Translocación. A medida
que el ribosoma se transloca, se
desplaza un codón a lo largo del
mRNA:
• El tRNA descargado en el sitio
P se mueve al sitio E y luego
es liberado.
• El tRNA en el sitio A se mueve
al sitio P.
• El próximo codón a ser
traducido ahora está en el
sitio A vacío, listo para iniciar
nuevamenteel paso 2a.
Dirección del
Movimiento ribosómico
polipéptido
factor de liberación
codón stop
PE
Terminación. Cuando un codón stop
(UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la
elongación. La liberación del polipéptido recién
hecho es gatillada por un factor de liberación y se
separan las subunidades ribosómicas, liberando al
mRNA.
3
Reconocimiento
del codón. El anticodón
de un tRNA entrante se
une con el codón
complementario del
mRNA (A a U y C a G)
en el Sitio A del ribosoma.
2a
Subunidad
ribosómica
pequeña
Codón de
inicio
A
site
P
site
E
site
Iniciación. La Iniciación ocurre
al combinarse 4 componentes:
• una subunidad ribosómica pequeña
• Un tRNA iniciador que transporta
el amino ácido metionina
• El mRNA
• Una subunidad ribosómica grande
Una vez logrado esto, comienza la
próxima fase, la elongación.
1
tRNA iniciador
Llevando el anticodón
Aminoacil-tRNA
sintetasaMet
Citosol (sitio de
la Traducción)
Met
El mRNA
recién hecho
(y editado)
deja el Núcleo
y viaja a un
ribosoma libre
o adherido para
la decodificación.
metionina
(amino ácido)
Subunidad
Ribosómica
grande
U A C
U
A
C
C
C
C
U
A
U
U
U
A
A
G
G
APE
GGC
GGC
GAU
GAU
GAUACC CUA
ACCGCU CUC
ACUGGG UGA
CCU
GAUACC CUA
GAU
GGC
GAC
© 2013 Pearson Education, Inc.
Rol del RER en la Síntesis de proteínas
• El SRP (partículas de reconocimiento de
señales) guía al complejo mRNA–
ribosoma hacia el RER
• Las proteínas en formación entran al RER
• Pueden ser añadidos grupos azúcar a la
proteína y su forma puede ser alterada
• La proteína es encerrada en vesículas
para transportarla al aparato de Golgi
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 1
El SRP guía al complejo
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Una vez unido al RE, el SRP es
liberado y el polipéptido creciente
ingresa a la cisterna a través del
poro de membrana del RE.
Una enzima en el interior de RE
elimina la secuencia señal. A medida que
continúa la síntesis de proteína, pueden
ser enlazados grupos azúcar a la proteína.
En este ejemplo, la proteína terminada
es liberada del ribosoma y se pliega en su
conformación 3-D, un proceso ayudado
por chaperonas moleculares.
La proteína es encerrada en una
vesícula de transporte revestidas de
proteínas. Estas vesículas hacen su
viaje hacia el aparato de Golgi, donde
ocurre luego un procesamiento de la
proteína.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
Receptor
Cisterna del RE
Polipéptido
creciente
Secuencia
Señal
removida
Grupo
azúcar
Prroteína
liberada
Secuencia
señal del
RE ribosoma
mRNA
Citosol
Vesícula de
transporte
desprendiéndose
Vesícula de
transporte
revestida de
proteínas
1 2
3
4
5
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 2
El SRP guía al complejo
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
Receptor
Cisterna del RE
Secuencia
señal del
RE
mRNA
Citosol
1
ribosoma
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 3
El SRP guía al complejo
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
Receptor
Cisterna del RE
Secuencia
señal del
RE
mRNA
Citosol
1 U Una vez unido al RE, el SRP es
liberado y el polipéptido creciente
ingresa a la cisterna a través del
poro de membrana del RE.
Polipéptido
creciente
2
ribosoma
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Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 4
El SRP guía al complejo
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
Receptor
Cisterna del RE
Secuencia
señal del
RE
mRNA
Citosol
1 U Una vez unido al RE, el SRP es
liberado y el polipéptido creciente
ingresa a la cisterna a través del
poro de membrana del RE.
Polipéptido
creciente
2
Secuencia
señal
removida
Grupo
azúcar
ribosoma
Una enzima en el interior de RE
elimina la secuencia señal. A medida que
continúa la síntesis de proteína, pueden
ser enlazados grupos azúcar a la proteína.
3
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso. Diapo. 5
El SRP guía al complejo
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
receptor
Cisterna del RE
Secuenci
a
señal del
RE
mRNA
Citosol
1 U Una vez unido al RE, el SRP es
liberado y el polipéptido creciente
ingresa a la cisterna a través del
poro de membrana del RE.
Polipéptido
creciente
2
Secuencia
señal
removida
Grupo
azúcar
Proteína
liberada
En este ejemplo, la proteína terminada
es liberada del ribosoma y se pliega en su
conformación 3-D, un proceso ayudado
por chaperonas moleculares.
4
ribosoma
Una enzima en el interior de RE
elimina la secuencia señal. A medida que
continúa la síntesis de proteína, pueden
ser enlazados grupos azúcar a la proteína.
3
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas por el RErugoso Diapo. 6
El SRP dirige al complejo the
mRNA-ribosoma hacia el
RERugoso. Allí el SRP se une
a un sitio receptor.
Una vez unido al RE, el SRP es
liberado y el polipéptido creciente
ingresa a la cisterna a través del
poro de membrana del RE.
Una enzima en el interior de RE
elimina la secuencia señal. A medida que
continúa la síntesis de proteína, pueden
ser enlazados grupos azúcar a la proteína.
En este ejemplo, la proteína terminada
es liberada del ribosoma y se pliega en su
conformación 3-D, un proceso ayudado
por chaperonas moleculares.
La proteína es encerrada en una
Vesícula de transporte revestidas de
proteínas. Estas vesículas hacen su
viaje hacia el aparato de Golgi, donde
ocurre luego un procesamiento de la
proteína.
Partícula de
reconocimiento
de señal
(PRS o
SRP)
Sitio
receptor
Cisterna del RE
Polipéptido
creciente
Secuencia
señal
removida
Grupo
azúcar
Proteína
liberada
Secuenci
a
señal del
RE ribosoma
mRNA
Citosol
Vesícula de
transporte
desprendiéndose
Vesícula de
transporte
revestida de
proteínas
1 2
3
4
5
© 2013 Pearson Education, Inc.
Fig. 1.17 Transferencia de información del DNA al RNA al polipéptido.
DNA: La secuencia de
bases en el DNA del gen
(Tripletes) codifica para la
síntesis de una cadena
polipéptídica particular.
Molécula
de DNA
Gen 1
Gen 2
codones
Tripletes
anticodón
tRNA
Stop;
Proteína
liberada
Inicio de la
Traducción
mRNA: Secuencia de Base
(codones) del mRNA
Transcrito.
tRNA: secuencia de bases
consecutivas de anticodo-
nes de tRNA reconocen los
codones de mRNA
requeridos para los amino
ácidos que transportan.
polipéptido: secuencia de
amino ácidos de la cadena
Polipeptídica.
Gen 4
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Expresión Génica. PowerPoint sobre transcripción y traducción para alumnos de primero hasta 4º año de la enseñanza media.

  • 1. PowerPoint® Lecture Preparada por Barbara Heard, Atlantic Cape Community College; traducida, adaptada y modificada por Gustavo Toledo C. SFC, 2014 Expresión génica © 2013 Pearson Education, Inc.© Annie Leibovitz/Contact Press Images
  • 2. © 2013 Pearson Education, Inc. • DNA es la receta maestra de la Síntesis de proteínas • Gen – segmento de DNA con la receta para un polipéptido • Los Tripletes (tres bases nitrogenadas de de DNA) forman una biblioteca genética – Bases en el DNA son A, G, T y C – Cada triplete codifica para un amino ácido de un polipéptido PLAYPLAY Animation: DNA y RNA Síntesis de proteínas Use esta animación en 3D sobre biología molecular del gen que he traducido para Uds. y cuyo URL está escrito al inicio del texto.http://www.Diapo.share.net/gustavotoledo/3-d-biologa-molecular-del- genok
  • 3. © 2013 Pearson Education, Inc. Síntesis de proteínas • Los Genes están compuestos de exones e intrones – Exones codifican para amino ácidos – Intrones–segmentos no codificantes • Rol del RNA – Mecanismo de decodificación del DNA y mensajero – Tres tipos–todos formados en el DNA núclear de eucariotas • RNA mensajero (mRNA); RNA ribosómico (rRNA); RNA de transferencia (tRNA) • RNA se diferencia del DNA – Uracilo es sustituido por timina
  • 4. © 2013 Pearson Education, Inc. Roles de los tres principales tipos de RNA • RNA mensajero (mRNA) – Transporta instrucciones para la síntesis de un polipéptido, desde el gen en el DNA a los ribosomas en el citoplasma
  • 5. © 2013 Pearson Education, Inc. Roles de los tres principales tipos de RNA • RNA ribosómico (rRNA) – Componente Estructural de ribosomas que, junto con el tRNA, ayuda a traducir el mensaje que trae el mRNA
  • 6. © 2013 Pearson Education, Inc. Roles de los tres principales tipos de RNA • RNA de transferencias (tRNAs) – Se une a amino ácidos y se parea con bases de codones del mRNA en el ribosoma para empezar el proceso de Síntesis de proteínas
  • 7. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.10 esquema simplificado del flujo de información desde el gen (DNA) al mRNA al polipéptido durante la Transcripción y Traducción. Procesamiento del RNA Pre-mRNA DNA Transcripción polipéptido ribosoma Poros del Núcleo Traducción Membrana Nuclear mRNA
  • 8. © 2013 Pearson Education, Inc. Síntesis de proteínas • Ocurre en dos pasos – Transcripción • La información del DNA information es codificada en el mRNA – Traducción • Decodificación del mRNA para ensamblar los polipéptidos
  • 9. © 2013 Pearson Education, Inc. Transcripción http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/transcription/movie-flash.htm • Transfiere secuencias de bases del gen en el DNA a las secuencias de bases complementarias del mRNA • Factores de Transcripción –Activadores del gen – Afloja las histonas del DNA en el área que será transcrita – Se unen a la secuencia promotora-del DNA que especifica el sitio de inicio del gen en la hebra molde – Hacen de mediadores para la unión de la RNA polimerasa al promotor
  • 10. © 2013 Pearson Education, Inc. Transcripción • Tres fases – Iniciación • RNA polimerasa separa las hebras de DNA – Elongación • RNA polimerasa añade nucleótidos complementarios – Terminación • La señal de Terminación indica ”parar"
  • 11. © 2013 Pearson Education, Inc. Procesamiento del mRNA http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnaprocessing/movie-flash.htm • El mRNA es editado y procesado antes de la Traducción – intrones removidos por espliceosomas http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnasplicing/movie-flash.htm
  • 12. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.11 Visión general de los estados de la Transcripción. El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se llama Híbrido DNA-RNA. RNA polimerasa DNA No desenrollado hebra codificante de DNA Hebra moldemRNA Región híbrida de DNA-RNA Dirección de la Transcripción Reenrollamiento del DNA Nucleótidos de RNA RNA polimerasa Región promotora hebra molde Señal de Terminación DNA hebra codificante mRNA hebra molde Transcrito de mRNA Transcrito de mRNA completado RNA polimerasa Terminación: La síntesis de mRNA termina cuando se alcanza la señal de terminación. La RNA polimerasa y el transcrito de mRNA que se ha completado son liberados. 2 Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde. Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base cada vez; la doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa y se vuelve a enrollar por detrás de ella. 1 3 Diapo. 1
  • 13. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción. RNA polimerasa Región promotora hebra molde Señal de Terminación DNA hebra codificante Diapo. 2
  • 14. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción. RNA polimerasa Región promotora hebra molde Señal de Terminación DNA mRNA hebra molde Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde. 1 hebra codificante Diapo. 3
  • 15. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción. El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se llama Híbrido DNA-RNA. RNA polimerasa DNA No desenrollado hebra codificante of DNA Hebra moldemRNA Región híbrida de DNA-RNA Dirección de la Transcripción Reenrollamiento del DNA Nucleótidos de RNA RNA polimerasa Región promotora hebra molde Señal de Terminación DNA mRNA hebra molde Transcrito de mRNA 2 Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde. Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base a la vez, la doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa y se vuelve a enrollar por detrás de ella. 1 hebra codificante Diapo. 4
  • 16. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.12 Visión general de los estados de la Transcripción. El híbrido DNA-RNA: en algún momento dado, 16–18 pares de bases del DNA están desenrollados y el RNA hecho más recientemente aún está unido al DNA. Esta pequeña región se llama Híbrido DNA-RNA. RNA polimerasa DNA No desenrollado hebra codificante of DNA Hebra moldemRNA Región híbrida de DNA-RNA Dirección de la Transcripción Reenrollamiento del DNA Nucleótidos de RNA RNA polimerasa Región promotora hebra molde Señal de Terminación DNA mRNA hebra molde Transcrito de mRNA Transcrito de mRNA completado RNA polimerasa Terminación: La síntesis de mRNA termina cuando se alcanza la señal de terminación. La RNA polimerasa y el transcrito de mRNA que se ha completado son liberados. 2 Iniciación: Con la ayuda de Factores de transcripción, la RNA polimerasa se une al promotor, abriendo las dos hebras del DNA e iniciando la síntesis de mRNA en el punto de inicio en la hebra molde. Elongación: A medida que la RNA polimerasa se mueve a lo largo de la hebra molde, se alarga el transcrito de mRNA una base cada vez; la doble hélice del DNA se desenrolla por delante de la ARN polimerasa y se vuelve a enrollar por detrás de ella. 1 3 hebra codificante Diapo. 5
  • 17. © 2013 Pearson Education, Inc. Traducción http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/translation/movie-flash.htm • Convierte la secuencia de bases de los ácidos nucleicos en secuencia de amino ácidos de las proteínas • Están involucrados los mRNAs, tRNAs y rRNAs
  • 18. © 2013 Pearson Education, Inc. Código genético • Cada secuencia de tres bases en el DNA (triplete) está representado por un codón – Codón—secuencia de bases complementaria en el mRNA – Algunos amino ácidos están representados por más de un codón
  • 19. © 2013 Pearson Education, Inc. G U C A U C GA U C A G U C A G U C A G U C A G TERCERABASE PRIMERABASE SEGUNDA BASE GGG GGU GGA GGC lle Phe GUG GUU GUA GUC Trp GCG GCU GCA GCC Stop Thr Stop GAG GAU GAA GAC Tyr Cys Stop UGG UGU UGA UGC UUG UUU UUA UUC UCG UCU UCA UCC UAG UAU UAA UAC Leu Ser Lys Asn Ser CGG CGU CGA CGC Leu CUG CUU CUA CUC CCG CCU CCA CCC Pro CAG CAU CAA CAC Gln His Arg Met o Inicio Glu AGG AGU AGA AGC AUG AUU AUA AUC ACG ACU ACA ACC AAG AAU AAA AAC Arg Val Asp GlyAla Fig. 1.13 El código genético.
  • 20. © 2013 Pearson Education, Inc. Rol de los tRNAs • 45 tipos diferentes • Se unen a amino ácidos específicos en un extremo (tallo aceptor) • El anticodón en el otro extremo (cabeza) se une por puentes de Hidrógeno al codón del mRNA en el ribosoma – Ej., Si el codón = AUA, el anticodón = UAU • El ribosoma coordina el acoplamiento del mRNA y tRNA; contiene tres sitios: – Sitio Aminoacil; Sitio Peptidil; Sitio Exit
  • 21. © 2013 Pearson Education, Inc. Secuencia de eventos en la Traducción • Tres fases que requieren ATP, factores proteicos y enzimas – Iniciación – Elongación – Terminación
  • 22. © 2013 Pearson Education, Inc. Traducción: Iniciación • La subunidad ribosómica pequeña se une al tRNA iniciador y al mRNA para ser decodificado; explora en busca del codón de inicio • Las subunidades ribosómicas grande y pequeña se unen, formando el ribosoma funcional • Al final de la Iniciación – El tRNA está en el sitio P; el sitio A está vacante
  • 23. © 2013 Pearson Education, Inc. Traducción: Elongación • Tres pasos – Codón de reconocimiento • El tRNA se une al codón complementario en el sitio A – Formación del enlace peptídico • El amino ácido del tRNA en el sitio P es enlazado al amino ácido del tRNA en el sitio A – Translocación • Los tRNAs se mueven una posición–A P; P E
  • 24. © 2013 Pearson Education, Inc. Traducción: Elongación • Nuevos amino ácidos son añadidos por otros tRNAs a medida que el ribosoma se mueve a lo largo del mRNA • La porción inicial del mRNA puede ser ”leído" por ribosomas adicionales – Poliribosoma • Complejo mRNA-ribosomas múltiples – Produce múltiples copias de la misma proteína
  • 25. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.14 Polyribosoma arrays. Polipéptidos crecientes Polipéptido completado Ingreso de Subunidades ribosomales Poliribosoma Inicio del mRNA Fin del mRNA Cada poliribosoma está compuesto por una hebra de mRNA que está siendo leída simultáneamente por muchos ribosomas. En este diagrama, el mRNA se está moviendo a la izquierda y el ribosoma funcional, que primero comenzó la traducción, es el que está más a la derecha. Esta microfotografía hecha mediante un MET muestra un poliribosoma grande (400.000x). ribosomas mRNA
  • 26. © 2013 Pearson Education, Inc. Traducción: Terminación • Cuando el codón stop (UGA, UAA, UAG) entra al sitio A: – Terminan las señales de Traducción – Unas Proteínas llamadas factores de liberación (RF-1, RF-2 y RF-3) se unen al codón stop  transfieren al polipéptido terminado a una molécula de agua  se libera la cadena polipeptídica; se separan las subunidades ribosómicas; se degrada el mRNA – La Proteína es procesada para darle su estructura funcional 3-D
  • 27. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 1 Elongación. Los amino ácidos son enlazados uno a la vez a la cadena peptídica creciente via un proceso que tiene tres pasos repetidos. 2 amino ácido Correspondiente al anticodón Hebra de DNA molde Pre-mRNA mRNA Núcleo (sitio de la Transcripción) amino ácido correspondiente al anticodón Met tRNA El amino ácido correcto es unido a cada especie de tRNA por una enzima sintetasa. Ile Pro Leu Anticodón del tRNA polipéptido Ile Pro Codón de mRNA complementario Leu Enlace Peptídico Nuevo tRNA liberado Pro Leu Ile APE APE Formación del enlace peptídico. El polipéptido creciente unido al tRNA en elsitio P es transferrido al amino Ácido transportado por el tRNA en el sitio A y se forma un nuevo enlace peptídico. 2b 2c Translocación. A medida que el ribosoma se transloca, se desplaza un codón a lo largo del mRNA: • El tRNA descargado en el sitio P se mueve al sitio E y luego es liberado. • El tRNA en el sitio A se mueve al sitio P. • El próximo codón a ser traducido ahora está en el sitio A vacío, listo para iniciar nuevamenteel paso 2a. Dirección del Movimiento del ribosoma polipéptido factor de liberación codón stop PE Terminación. Cuando un codón stop (UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la elongación. La liberación del polipéptido recién hecho es gatillada por un factor de liberación y se separan las subunidades ribosómicas, liberando al mRNA. 3 Reconocimiento del codón. El anticodón de un tRNA entrante se une con el codón complementario del mRNA (A a U y C a G) en el Sitio A del ribosoma. 2a Subunidad ribosómica pequeña Codón de inicio Sitio A Sitio P Sitio E Iniciación. La Iniciación ocurre al combinarse 4 componentes: • una subunidad ribosómica pequeña • Un tRNA iniciador que transporta el amino ácido metionina • El mRNA • Una subunidad ribosómica grande Una vez logrado esto, comienza la próxima fase, la elongación. 1 tRNA iniciador llevando el anticodón Aminoacil-tRNA sintetasaMet Citosol (sitio de la Traducción) Met El mRNA recién hecho (y editado) deja el Núcleo y viaja a un ribosoma libre o adherido para la decodificación. metionina (amino ácido) Subunidad Ribosómica grande U A C U A C C C C U A U U U A A G G APE GGC GGC GAU GAU GAUACC CUA ACCGCU CUC ACUGGG UGA CCU GAUACC CUA GAU GGC GAC
  • 28. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 2 Hebra de DNA molde Pre-mRNA Núcleo (sitio de la Transcripción) amino ácido correspondiente al anticodón Met El amino ácido correcto es unido a cada especie de tRNA por una enzima sintetasa. Aminoacil-tRNA sintetasa metionina (amino ácido)El mRNA recién hecho (y editado) deja el Núcleo y viaja a un ribosoma libre o adherido para la decodificación. tRNA tRNA iniciador llevando un anticodón Subunidad Ribosómica grande Codón de inicio Subunidad ribosómica pequeña Sitio E Met Sitio P Sitio A Met Citosol (sitio de la Traducción) Iniciación. La Iniciación ocurre al combinarse 4 componentes: • una subunidad ribosómica pequeña • Un tRNA iniciador que transporta el amino ácido metionina • El mRNA • Una subunidad ribosómica grande Una vez logrado esto, comienza la próxima fase, la elongación. 1 U A C U A C C C U A U U U A A G G C mRNA
  • 29. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 3 Elongación. Los amino ácidos son enlazados uno a la vez a la cadena peptídica creciente vía un proceso que tiene tres pasos repetidos. 2 Amino ácido que corresponde con el anticodón Pro Anticodón del tRNA Codón de mRNA complementario Reconocimiento del codón El anticodón de un tRNA entrante se une con el codón complementario del mRNA (A a U y C a G) en el Sitio A del ribosoma. lle Leu APE GGC GAUACC CUA GAU 2a
  • 30. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 4 polipéptido Enlace Peptídico nuevo Ile Pro Leu GAUA CC CUA GGGC AU E P A Formación del Enlace peptídico. El Polipéptido creciente unido al tRNA en el sitio P es transferido al amino ácido transportado por el tRNA en el sitio A y se forma un nuevo enlace peptídico. 2b
  • 31. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 5 tRNA liberado E P A G AU C CG CUA CUC GGC Leu Pro Ile Translocación. A medida que el ribosoma se transloca, se desplaza un codón a lo largo del mRNA: • El tRNA descargado en el sitio P se mueve al sitio E y luego es liberado. • El tRNA en el sitio A se mueve al sitio P. • El próximo codón a ser traducido ahora está en el sitio A vacío, listo para el paso 2a nuevamente. Dirección del movimiento del ribosoma 2c
  • 32. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 6 factor de liberación codón stop AC U G GGU GA CC U E P GAC Terminación. Cuando un codón stop (UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la elongación. La liberación del polipéptido recién sintetizado es gatillada por un factor de liberación y se separan las subunidades ribosómicas, liberando al mRNA. 3
  • 33. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 7 polipéptido factor de liberación codón stop AC U G GGU GA CC U E P GAC Terminación. Cuando un codón stop (UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la elongación. La liberación del polipéptido recién hecho es gatillada por un factor de liberación y se separan las subunidades ribosómicas, liberando al mRNA. 3
  • 34. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.15 Traducción es el proceso en el cual la información genética transportada por un mRNA es decodificada en el ribosoma para formar un polipéptido particular. Diapo. 8 Elongación. Los amino ácidos son enlazados uno a la vez a la cadena peptídica creciente via un proceso que tiene tres pasos repetidos. 2 amino ácido que se corresponde con el anticodón Hebra de DNA molde Pre-mRNA mRNA Núcleo (sitio de la Transcripción) amino ácido correspondiente al anticodón Met tRNA El correcto amino Ácido es unido a cada especie de tRNA por una enzima sintetasa. Ile Pro Leu Anticodón del tRNA polipéptido Ile Pro Codón complementario del mRNA Leu Enlace Peptídico nuevo tRNA liberado Pro Leu Ile APE APE Formación del Enlace peptídico. El polipéptido en crecimiento unido al tRNA en el sitio P es transferido al amino Ácido transportado por el tRNA en el sitio A y se forma un nuevo enlace peptídico. 2b 2c Translocación. A medida que el ribosoma se transloca, se desplaza un codón a lo largo del mRNA: • El tRNA descargado en el sitio P se mueve al sitio E y luego es liberado. • El tRNA en el sitio A se mueve al sitio P. • El próximo codón a ser traducido ahora está en el sitio A vacío, listo para iniciar nuevamenteel paso 2a. Dirección del Movimiento ribosómico polipéptido factor de liberación codón stop PE Terminación. Cuando un codón stop (UGA, UAA o UAG) llega al sitio A, termina la elongación. La liberación del polipéptido recién hecho es gatillada por un factor de liberación y se separan las subunidades ribosómicas, liberando al mRNA. 3 Reconocimiento del codón. El anticodón de un tRNA entrante se une con el codón complementario del mRNA (A a U y C a G) en el Sitio A del ribosoma. 2a Subunidad ribosómica pequeña Codón de inicio A site P site E site Iniciación. La Iniciación ocurre al combinarse 4 componentes: • una subunidad ribosómica pequeña • Un tRNA iniciador que transporta el amino ácido metionina • El mRNA • Una subunidad ribosómica grande Una vez logrado esto, comienza la próxima fase, la elongación. 1 tRNA iniciador Llevando el anticodón Aminoacil-tRNA sintetasaMet Citosol (sitio de la Traducción) Met El mRNA recién hecho (y editado) deja el Núcleo y viaja a un ribosoma libre o adherido para la decodificación. metionina (amino ácido) Subunidad Ribosómica grande U A C U A C C C C U A U U U A A G G APE GGC GGC GAU GAU GAUACC CUA ACCGCU CUC ACUGGG UGA CCU GAUACC CUA GAU GGC GAC
  • 35. © 2013 Pearson Education, Inc. Rol del RER en la Síntesis de proteínas • El SRP (partículas de reconocimiento de señales) guía al complejo mRNA– ribosoma hacia el RER • Las proteínas en formación entran al RER • Pueden ser añadidos grupos azúcar a la proteína y su forma puede ser alterada • La proteína es encerrada en vesículas para transportarla al aparato de Golgi
  • 36. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 1 El SRP guía al complejo mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Una vez unido al RE, el SRP es liberado y el polipéptido creciente ingresa a la cisterna a través del poro de membrana del RE. Una enzima en el interior de RE elimina la secuencia señal. A medida que continúa la síntesis de proteína, pueden ser enlazados grupos azúcar a la proteína. En este ejemplo, la proteína terminada es liberada del ribosoma y se pliega en su conformación 3-D, un proceso ayudado por chaperonas moleculares. La proteína es encerrada en una vesícula de transporte revestidas de proteínas. Estas vesículas hacen su viaje hacia el aparato de Golgi, donde ocurre luego un procesamiento de la proteína. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio Receptor Cisterna del RE Polipéptido creciente Secuencia Señal removida Grupo azúcar Prroteína liberada Secuencia señal del RE ribosoma mRNA Citosol Vesícula de transporte desprendiéndose Vesícula de transporte revestida de proteínas 1 2 3 4 5
  • 37. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 2 El SRP guía al complejo mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio Receptor Cisterna del RE Secuencia señal del RE mRNA Citosol 1 ribosoma
  • 38. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 3 El SRP guía al complejo mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio Receptor Cisterna del RE Secuencia señal del RE mRNA Citosol 1 U Una vez unido al RE, el SRP es liberado y el polipéptido creciente ingresa a la cisterna a través del poro de membrana del RE. Polipéptido creciente 2 ribosoma
  • 39. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso Diapo. 4 El SRP guía al complejo mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio Receptor Cisterna del RE Secuencia señal del RE mRNA Citosol 1 U Una vez unido al RE, el SRP es liberado y el polipéptido creciente ingresa a la cisterna a través del poro de membrana del RE. Polipéptido creciente 2 Secuencia señal removida Grupo azúcar ribosoma Una enzima en el interior de RE elimina la secuencia señal. A medida que continúa la síntesis de proteína, pueden ser enlazados grupos azúcar a la proteína. 3
  • 40. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas en el RERugoso. Diapo. 5 El SRP guía al complejo mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio receptor Cisterna del RE Secuenci a señal del RE mRNA Citosol 1 U Una vez unido al RE, el SRP es liberado y el polipéptido creciente ingresa a la cisterna a través del poro de membrana del RE. Polipéptido creciente 2 Secuencia señal removida Grupo azúcar Proteína liberada En este ejemplo, la proteína terminada es liberada del ribosoma y se pliega en su conformación 3-D, un proceso ayudado por chaperonas moleculares. 4 ribosoma Una enzima en el interior de RE elimina la secuencia señal. A medida que continúa la síntesis de proteína, pueden ser enlazados grupos azúcar a la proteína. 3
  • 41. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.16 Procesamiento de proteínas por el RErugoso Diapo. 6 El SRP dirige al complejo the mRNA-ribosoma hacia el RERugoso. Allí el SRP se une a un sitio receptor. Una vez unido al RE, el SRP es liberado y el polipéptido creciente ingresa a la cisterna a través del poro de membrana del RE. Una enzima en el interior de RE elimina la secuencia señal. A medida que continúa la síntesis de proteína, pueden ser enlazados grupos azúcar a la proteína. En este ejemplo, la proteína terminada es liberada del ribosoma y se pliega en su conformación 3-D, un proceso ayudado por chaperonas moleculares. La proteína es encerrada en una Vesícula de transporte revestidas de proteínas. Estas vesículas hacen su viaje hacia el aparato de Golgi, donde ocurre luego un procesamiento de la proteína. Partícula de reconocimiento de señal (PRS o SRP) Sitio receptor Cisterna del RE Polipéptido creciente Secuencia señal removida Grupo azúcar Proteína liberada Secuenci a señal del RE ribosoma mRNA Citosol Vesícula de transporte desprendiéndose Vesícula de transporte revestida de proteínas 1 2 3 4 5
  • 42. © 2013 Pearson Education, Inc. Fig. 1.17 Transferencia de información del DNA al RNA al polipéptido. DNA: La secuencia de bases en el DNA del gen (Tripletes) codifica para la síntesis de una cadena polipéptídica particular. Molécula de DNA Gen 1 Gen 2 codones Tripletes anticodón tRNA Stop; Proteína liberada Inicio de la Traducción mRNA: Secuencia de Base (codones) del mRNA Transcrito. tRNA: secuencia de bases consecutivas de anticodo- nes de tRNA reconocen los codones de mRNA requeridos para los amino ácidos que transportan. polipéptido: secuencia de amino ácidos de la cadena Polipeptídica. Gen 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Editor's Notes

  1. El retículo endoplasmático como el hangar, factoría y cadena de montaje de los trenes intracelulares Lípidos y proteínas son sintetizados en el retículo endoplasmático (RE), que está formado por una red continua de cisternas aplanadas, recubiertas de ribosomas y que se extiende por todo el citoplasma. Los ribosomas son estructuras citoplasmáticas encargadas del proceso de traducción de proteínas a partir de los ARN mensajeros (ARNm) presentes en el citoplasma, que a su vez provienen del núcleo una vez transcritos del ADN. Los ARNms codifican las proteínas celulares, algunas de las cuales se situarán en el citoplasma y otras en el RE. De éstas últimas, unas permanecerán solubles en el interior (o lumen) de las cisternas del RE y otras se insertarán en la membrana del mismo. Las proteínas del RE equivaldrían a los pasajeros que tienen asiento (proteínas de membrana) y los que permanecen de pie (proteínas solubles o luminales). Del conjunto de proteínas sintetizadas en el RE, unas residirán en orgánulos y otras serán secretadas al exterior de la célula. Por consiguiente, las proteínas que pertenecen a otros orgánulos que no sean el RE y las de secreción deben transportarse a otras estaciones intracelulares (aparato de Golgi, lisosomas, membrana plasmática), mientras que las proteínas residentes del RE deben retenerse. Hay que mencionar que la mayoría de las proteínas sintetizadas en el RE son también glicosiladas al mismo tiempo. Todas las proteínas presentan una estructura tridimensional. Para adquirirla deben plegarse paulatinamente sobre sí mismas. Solamente las proteínas que se han plegado correctamente serán susceptibles de ser transportadas. Este plegamiento puede tener lugar enforma espontánea, pero suelen producirse errores que las incapacitan funcionalmente. Para resolvereste problema, dentro del lumen del RE se encuentran unas proteínas que ayudan a sus compañeras en este ejercicio de contorsionismo molecular y que son conocidas con el nombre de chaperonas. Las chaperonas facilitan el plegamiento lento y ordenado de otras proteínas, así como un correcto ensamblaje cuando se componen de varias subunidades (Ellgaard et al., 1999). Estos procesos post-traduccionales equivaldrían a que los viajeros (proteínas) dejen las maletas, se quiten el abrigo, lean el periódico, etc. Sin embargo, necesitan lo más esencial: el billete. ¿Qué es el billete? ¿Cuáles pasajeros pueden viajar y cuáles no? Intuitivamente, al igual que sucede en la vida cotidiana, uno supone que para viajar hay que adquirir un billete pero... sorprendentemente dentro de la célula, el viajar es para algunos gratis y para otros no. Hasta hace poco tiempo se pensaba que no hacía falta ninguna señal que determinase la salida de las proteínas solubles y de membrana (conocidas genéricamente como "cargo") fuera del RE. Es la teoría de la "flujo a granel" (bulk-flow) (Wieland et al., 1987). Sin embrago, datos experimentales recientes demuestran que algunas proteínas sí presentan una señal de salida en el extremo carboxilo y que consiste en dos aminoácidos fenilalanina (di-fenilalanina) o, por lo menos, dos aminoácidos de naturaleza ácida (Nishimura & Balch, 1997). Más claro es el caso de las señales que implican la retención de las proteínas propias o residentes del RE. Así, tenemos los aminoácidos en la posición carboxilo-terminal (1) di-lisina o di-arginina para las proteínas de membrana de tipo I y tipo II, respectivamente (Nilsson et al., 1989; Jackson et al., 1990; Schutze et al., 1994) y (2) lisina-asparragina-glutámico-leucina (KDEL -código de una letra-) para las proteínas solubles (Munro & Pelham, 1987). En principio, todas las proteínas que no contengan esta señal de retención saldrán del RE. El destino inmediato: el aparato o complejo de Golgi. Sin embargo, antes de llegar al aparato de Golgi, hay que explicar cómo y en qué vehículo se realiza el transporte, ya que el RE y el aparato de Golgi no están físicamente interconectados. Por lo tanto, se ven obligados a utilizar unos intermediarios de membrana que son las vesículas de transporte y que vienen a representar los vagones del tren en que vamos a realizar nuestro viaje intracelular. Las vesículas de transporte o cómo se forman y ensamblan los distintos vagones intracelulares Tanto las proteínas solubles como las de membrana que van a seguir la ruta secretora, deben salir del RE camino al aparato de Golgi para ser completadas en su estructura molecular (como por ejemplo, la glicosilación y la fosforilación), empaquetadas y finalmente enviadas a sus respectivos destinos. La salida del RE es un proceso complejo, del que se conoce bastante bien su maquinaria molecular. Hay que tener en cuenta que el volumen y la extensión del RE es muchísimo mayor que el volumen del aparato de Golgi. Esto significa que las proteínas dentro del RE están diluidas y por consiguiente deben concentrarse a lo largo de su viaje hasta el aparato de Golgi. Esta concentración se realiza de forma paralela al proceso de formación de vesículas de transporte en determinados lugares del RE carentes de ribosomas y conocidos como zonas de salida (exiting sites). Esto significa que no todo el RE es susceptible de concentrar cargo y producir las vesículas de transporte. Siguiendo con nuestro símil, los vagones o trenes (las vesículas) sólo se encuentran en los andenes (zonas de salida del RE). Asociado al transporte tienen lugar dos hechos importantes: (1) la carga del cargo en la vesícula y (2) la deformación de la membrana en los lugares de salida del RE para seguidamente desprenderse y formar la vesícula de transporte. Siguiendo con nuestro símil, los pasajeros (proteínas y lípidos) están diseminados por toda la estación hasta que se van agrupando (concentrando) en el andén (zonas de salida del RE) conforme se acerca la hora de salida del tren (conjunto de vesículas de transporte). Las vesículas de transporte que viajan desde el RE hasta el aparato de Golgi presentan una serie de cubiertas (coats) formadas por complejos multiprotéicos que al autoensamblarse deforman la membrana donadora para formar las vesículas de transporte. Son las vesículas con cubiertas de tipo COP (coat protein). Así tenemos las de tipo COP I y las de tipo COP II (Kreis and Pepperkok, 1994). Estas vesículas actúan en tandem (Nickel et al., 1998). Es decir, primero se forman vesículas tipo COPII en el retículo endoplasmático y luego las COP I en un compartimiento lábil y pleomórfico formado por estructuras túbulo-vesiculares (VTCs, vesicular-tubular clusters) situado a medio camino entre el RE y el aparato de Golgi y denominado ERGIC (endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment) (Fig. 2) (Hauri et al., 2000). En este compartimiento se produce la concentración de ciertas proteínas solubles destinadas a la secreción (Martínez-Menárguez et al., 1999). Hay otro tipo de cubierta conocida como clatrina. La clatrina está constituida por la asociación de tres cadenas pesadas y tres ligeras que forman unas unidades llamadas triskelion y que se ensamblan formando figuras poliédricas a modo de red de canasta de baloncesto. Originariamente se descubrieron en relación con la endocitosis mediada por receptor y posteriormente se han visto también en los procesos de salida de las proteínas del aparato de Golgi destinadas a los lisosomas (Le Borgue & Hoflack, 1998). Hay que tener en cuenta que la formación de vesículas es un proceso que está altamente regulado por otras moléculas, muchas de las cuales están directamente implicadas también en procesos de señalización intracelular (Stow, 1995; De Camilli et al., 1996). Esto es importante porque permite a la célula regular su tráfico intracelular en función de lo que acontece en un momento determinado del exterior. Sería equivalente a que en función de terminados sucesos (espectáculos deportivos, políticos, musicales, etc.g) o épocas del año (temporadas alta, media y baja) se produce una mayor o menor demanda para viajar. Para ajustarse a dicha demanda hay que regular o ajustar el número de vagones o su capacidad y/o la frecuencia de paso de los trenes. De este modo se evita que el tráfico se colapse al no dar salida a las demandas de membrana y/o de alguno de sus componentes, o bien que se infrautilice, lo que comportaría un despilfarro de membrana y energía. Hay que tener en cuenta que la formación de vesículas requiere energía.