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Enterobacterias Enterobacterias Presentation Transcript

  • ENTEROBACTERIAS P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
    • Las Enterobacteriaceae habitan en:
      • Distribuidas en suelo,
      • agua,
      • alimentos.
      • Flora normal del intestino de humanos y
      • animales.
    Características Generales:
    • MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES
      • Bacilos o cocobacilos cortos gram negativos,
      • no esporulados,
      • mótiles (flagelos perítricos) o no,
      • capsulados o no,
      • pilis.
    • BIOQUÍMICAS
      • Anaerobios facultativos,
      • catalasa positiva, (excepto Shigella dysenteriae Tipo 1)
      • oxidasa negativa,
      • fermentan la glucosa,
      • reducen nitratos a nitritos.
  • Reacción de catalasa
    • Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas
    • La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso.
    • L a prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil.
  • P rueba de la catalasa
  • R eacción de citocromo oxidasa
    • Los citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua.
    • El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos , pero nunca en anaerobios estrictos.
    Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
    • Los modos de transmisión a los seres humanos son:
      • Infecciones Nosocomiales
        • ( E. coli )
      • Ingesta de alimentos o agua.
        • Salmonella,
        • Shigella,
        • Yersinia enterocolitica.
  • Enterobacteriaceae Patógenos oportunistas. Patógenos evidentes. Citrobacter. Enterobacter. Klebsiella. Proteus. Serratia
    • Salmonella tiphy – (fiebre tifoidea.)
    • Shigella – (Disentería).
    • Y. Pestis (peste negro).
    • MEDIOS DE CULTIVO
    • 1 . Medios no selectivos: agar sangre
    • 2. Medios selectivos-diferenciales : agar McConkey, agar EMB, SS agar, agar XLD.
    • McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes
    • (no fermentan lactosa).
    • Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes
    • (no fermentan lactosa).
  • Mac Conkey
    • Gram positivas ven inhibido - sales biliares y cristal violeta.
    • Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro .
  •  
  • Aspectos de las colonias.
    • En agar sangre y agar chocolate las colonias son:
      • Grandes.
      • Gris.
      • Lisas.
    • Klebsiella o Enterobacter.
      • Mucoides – (polisacáridos).
    • E. Coli – ( Beta hemolítica).
    • P. mirabilis.
    • Motilidad. P. penneri.
    • P. Vulgaris.
    • PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
    • 1. Pruebas bioquímicas
    • 2. Pruebas serológicas
    • 3. Pruebas de biología molecular
  • Pruebas bioquimicas
    • Estudia el metabolismo de la bacteria
    • Estudio basado en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por el material genético del cromosoma bacteriano
    • Se detecta a través de medios de cultivo especiales
    Pruebas bioquímicas
    • Los medios de cultivo generalmente están formados por:
    • El sustrato sobre los cuales actúan las enzimas
    • Un indicador que puede detectar la disminución del sustrato o la presencia de un producto metabólico especifico
    • La medición de las diferentes características metabólicas de un microorganismo permiten identificar la especie
    • Metabolismo fermentativo
    • Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono
    • Microorganismo actúa sobre los carbohidratos y acidifica el medio
    • El indicador presente vira
    Pruebas bioquímicas
    • PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
    • Prueba TSI (triple azúcar hierro)
    • Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.
    • Resultados:
    • Superficie inclinada/fondo:
    • - ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella,
    • Citrobacter, Enterobacter, etc
    • - alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
  • TSI
  • TSI
  • CITRATO DE SIMMONS
    • Mide la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono
    • Citrato compuesto orgánico constituye uno de los metabolitos del ciclo de Klebs
    • Las bacterias al utilizar citrato extraen nitrógeno de la sal de amonio con producción de amoniaco que hace vire el indicador
    CITRATO DE SIMMONS
    • Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de Simmons que contiene citrato de sodio y azul de timol como indicador.
    • La única fuente de carbono en este medio es el citrato.
    • Si la reacción es positiva el indicador vira a azul.
    • En la reacción negativa los microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde
    CITRATO DE SIMMONS
    • El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuentes de nitrógeno
    • Fosfato de amonio amoniaco alcalinización del medio
    CITRATO DE SIMMONS
  • CITRATO DE SIMMONS
  • CITRATO DE SIMMONS
  • CITRATO DE SIMMONS
  • Descarboxilasas de aminoácidos (arginina, lisina, ornitina
    • Los medios contienen:
    • Peptona
    • Extracto de carne
    • Glucosa
    • Aminoácido
    • Purpura de bromocresol
    MEDIO DE LIA
  • Descarboxilasas de aminoácidos lisina, ornitina
    • Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo se convierten en aminas lo que incrementa el pH del medio y el indicador ( púrpura del bromocresol ) vira a violeta
    R – CH - NH 2 - COOH R- CH 2 - NH 2 + CO 2 Aminoácido Amina Dióxido de carbono pH alcalino
  • Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO) Ejemplo: Aminoácido amina + dióxido de carbono Lisina lisina descarboxilasa cadaverina L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
  • Descarboxilaciòn lisina (LIA)
  • Descarboxilaciòn lisina (LIA)
  •  
  • Prueba que se utiliza para investigar: Motilidad (M) Producción de Indol (I) Descarboxilación Ornitina. INDOL MEDIO DE MIO
  • INDOL
  • Indol
    • El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano.
    • Las bacterias que poseen la triptofanasa .
    • La prueba de indol está basada cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído .
  • Medio de MIO (p-dimetilaminobenzaldehído )
  • INDOL Prueba positiva
  • INDOL Prueba negativa
  • E. coli
  • Escherichia coli .
    • Mac Conkey.
      • Colonias Planas.
      • Colonias secas.
      • Colonias Rosadas. (LF)
        • INDOL (+)
    k/A Ó A/A K/A LIA TSI
    • Escherichia coli
    • Clasificación de las cepas productoras de diarrea
    • E. coli enterotoxigénica
    • E. coli enteropatógena
    • E. coli enterohemorrágica
    • E. coli enteroinvasiva
    • E. coli enteroagregante
  • E. coli
  • Klebsiella pneumoniae
  • Klebsiella.
    • Mac Conkey
      • LF.
      • Mucoides. (polisacáridos).
    • Indicaciones de laboratorio:
      • Lysine +
      • Citrato +
      • Indol –
      • +/+ TSI (con gas)
      • No-motile
      • Ornithine –
  • Klebsiella pneumoniae Cápsula
  • Klebsiella pneumoniae
  • Proteus
  • Proteus.
    • Género que contiene varias especies, de las cuales dos tienen importancia médica:
      • P. mirabais . INDOL (-)
      • P. vulgaris. INDOL (+)
    • Mac Conkey.
      • NFL.
      • Swarning.
      • Olor a podrido.
  • Enterobacter
  • Enterobacter.
    • Mac Conkey.
      • LF.
      • Pueden ser Mucoides.
      • MIO:
      • *MOVILIDAD (+)
      • *INDOL: (+) E. agglomeras.
      • *INDOL: (-)
      • E. aerogenas (LIA +),
      • E. cloacae (LIA-).
  • Enterobacter
  • Shigella
    • Shigella
    • S. dysenteriae
    • S. flexneri
    • S. sonnei
    • S. boydii
    • Shigella
    • Mac Conkey:
      • NLF.
    • TSI: alcalina/ácida, H2S negativo.
    • LIA: K/A o A/A.
  • Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
  • Salmonella
    • Salmonella
    • Clasificación
    • S. enteritidis
    • S. typhimurium
    • S. typhi
    • S. paratyphi A
    • S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)
    • S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
    • Salmonella enteritidis
    • Mac Conkey: NFL.
    • TSI: alcalina/ácida y H 2 S +
    • S. typhimurium.
    • INDOL (-)
  • SALMONELLA SSA
  • Salmonella XLD
  • Bibliografía:
    • MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA. 1990.
    • DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988.
    • DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.