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    Enterobacterias Enterobacterias Presentation Transcript

    • ENTEROBACTERIAS P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
      • Las Enterobacteriaceae habitan en:
        • Distribuidas en suelo,
        • agua,
        • alimentos.
        • Flora normal del intestino de humanos y
        • animales.
      Características Generales:
      • MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES
        • Bacilos o cocobacilos cortos gram negativos,
        • no esporulados,
        • mótiles (flagelos perítricos) o no,
        • capsulados o no,
        • pilis.
      • BIOQUÍMICAS
        • Anaerobios facultativos,
        • catalasa positiva, (excepto Shigella dysenteriae Tipo 1)
        • oxidasa negativa,
        • fermentan la glucosa,
        • reducen nitratos a nitritos.
    • Reacción de catalasa
      • Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas
      • La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso.
      • L a prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil.
    • P rueba de la catalasa
    • R eacción de citocromo oxidasa
      • Los citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua.
      • El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos , pero nunca en anaerobios estrictos.
      Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
      • Los modos de transmisión a los seres humanos son:
        • Infecciones Nosocomiales
          • ( E. coli )
        • Ingesta de alimentos o agua.
          • Salmonella,
          • Shigella,
          • Yersinia enterocolitica.
    • Enterobacteriaceae Patógenos oportunistas. Patógenos evidentes. Citrobacter. Enterobacter. Klebsiella. Proteus. Serratia
      • Salmonella tiphy – (fiebre tifoidea.)
      • Shigella – (Disentería).
      • Y. Pestis (peste negro).
      • MEDIOS DE CULTIVO
      • 1 . Medios no selectivos: agar sangre
      • 2. Medios selectivos-diferenciales : agar McConkey, agar EMB, SS agar, agar XLD.
      • McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes
      • (no fermentan lactosa).
      • Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes
      • (no fermentan lactosa).
    • Mac Conkey
      • Gram positivas ven inhibido - sales biliares y cristal violeta.
      • Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro .
    •  
    • Aspectos de las colonias.
      • En agar sangre y agar chocolate las colonias son:
        • Grandes.
        • Gris.
        • Lisas.
      • Klebsiella o Enterobacter.
        • Mucoides – (polisacáridos).
      • E. Coli – ( Beta hemolítica).
      • P. mirabilis.
      • Motilidad. P. penneri.
      • P. Vulgaris.
      • PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
      • 1. Pruebas bioquímicas
      • 2. Pruebas serológicas
      • 3. Pruebas de biología molecular
    • Pruebas bioquimicas
      • Estudia el metabolismo de la bacteria
      • Estudio basado en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por el material genético del cromosoma bacteriano
      • Se detecta a través de medios de cultivo especiales
      Pruebas bioquímicas
      • Los medios de cultivo generalmente están formados por:
      • El sustrato sobre los cuales actúan las enzimas
      • Un indicador que puede detectar la disminución del sustrato o la presencia de un producto metabólico especifico
      • La medición de las diferentes características metabólicas de un microorganismo permiten identificar la especie
      • Metabolismo fermentativo
      • Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono
      • Microorganismo actúa sobre los carbohidratos y acidifica el medio
      • El indicador presente vira
      Pruebas bioquímicas
      • PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
      • Prueba TSI (triple azúcar hierro)
      • Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.
      • Resultados:
      • Superficie inclinada/fondo:
      • - ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella,
      • Citrobacter, Enterobacter, etc
      • - alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
    • TSI
    • TSI
    • CITRATO DE SIMMONS
      • Mide la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono
      • Citrato compuesto orgánico constituye uno de los metabolitos del ciclo de Klebs
      • Las bacterias al utilizar citrato extraen nitrógeno de la sal de amonio con producción de amoniaco que hace vire el indicador
      CITRATO DE SIMMONS
      • Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de Simmons que contiene citrato de sodio y azul de timol como indicador.
      • La única fuente de carbono en este medio es el citrato.
      • Si la reacción es positiva el indicador vira a azul.
      • En la reacción negativa los microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde
      CITRATO DE SIMMONS
      • El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuentes de nitrógeno
      • Fosfato de amonio amoniaco alcalinización del medio
      CITRATO DE SIMMONS
    • CITRATO DE SIMMONS
    • CITRATO DE SIMMONS
    • CITRATO DE SIMMONS
    • Descarboxilasas de aminoácidos (arginina, lisina, ornitina
      • Los medios contienen:
      • Peptona
      • Extracto de carne
      • Glucosa
      • Aminoácido
      • Purpura de bromocresol
      MEDIO DE LIA
    • Descarboxilasas de aminoácidos lisina, ornitina
      • Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo se convierten en aminas lo que incrementa el pH del medio y el indicador ( púrpura del bromocresol ) vira a violeta
      R – CH - NH 2 - COOH R- CH 2 - NH 2 + CO 2 Aminoácido Amina Dióxido de carbono pH alcalino
    • Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO) Ejemplo: Aminoácido amina + dióxido de carbono Lisina lisina descarboxilasa cadaverina L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
    • Descarboxilaciòn lisina (LIA)
    • Descarboxilaciòn lisina (LIA)
    •  
    • Prueba que se utiliza para investigar: Motilidad (M) Producción de Indol (I) Descarboxilación Ornitina. INDOL MEDIO DE MIO
    • INDOL
    • Indol
      • El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano.
      • Las bacterias que poseen la triptofanasa .
      • La prueba de indol está basada cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído .
    • Medio de MIO (p-dimetilaminobenzaldehído )
    • INDOL Prueba positiva
    • INDOL Prueba negativa
    • E. coli
    • Escherichia coli .
      • Mac Conkey.
        • Colonias Planas.
        • Colonias secas.
        • Colonias Rosadas. (LF)
          • INDOL (+)
      k/A Ó A/A K/A LIA TSI
      • Escherichia coli
      • Clasificación de las cepas productoras de diarrea
      • E. coli enterotoxigénica
      • E. coli enteropatógena
      • E. coli enterohemorrágica
      • E. coli enteroinvasiva
      • E. coli enteroagregante
    • E. coli
    • Klebsiella pneumoniae
    • Klebsiella.
      • Mac Conkey
        • LF.
        • Mucoides. (polisacáridos).
      • Indicaciones de laboratorio:
        • Lysine +
        • Citrato +
        • Indol –
        • +/+ TSI (con gas)
        • No-motile
        • Ornithine –
    • Klebsiella pneumoniae Cápsula
    • Klebsiella pneumoniae
    • Proteus
    • Proteus.
      • Género que contiene varias especies, de las cuales dos tienen importancia médica:
        • P. mirabais . INDOL (-)
        • P. vulgaris. INDOL (+)
      • Mac Conkey.
        • NFL.
        • Swarning.
        • Olor a podrido.
    • Enterobacter
    • Enterobacter.
      • Mac Conkey.
        • LF.
        • Pueden ser Mucoides.
        • MIO:
        • *MOVILIDAD (+)
        • *INDOL: (+) E. agglomeras.
        • *INDOL: (-)
        • E. aerogenas (LIA +),
        • E. cloacae (LIA-).
    • Enterobacter
    • Shigella
      • Shigella
      • S. dysenteriae
      • S. flexneri
      • S. sonnei
      • S. boydii
      • Shigella
      • Mac Conkey:
        • NLF.
      • TSI: alcalina/ácida, H2S negativo.
      • LIA: K/A o A/A.
    • Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
    • Salmonella
      • Salmonella
      • Clasificación
      • S. enteritidis
      • S. typhimurium
      • S. typhi
      • S. paratyphi A
      • S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)
      • S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
      • Salmonella enteritidis
      • Mac Conkey: NFL.
      • TSI: alcalina/ácida y H 2 S +
      • S. typhimurium.
      • INDOL (-)
    • SALMONELLA SSA
    • Salmonella XLD
    • Bibliografía:
      • MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA. 1990.
      • DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988.
      • DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.