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Materiales microbiologia

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  • 1. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN QUIMICA FACULTAD DE INGENIERÍA, ARQUITECTURA Y URBANISMO ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL Y COMERCIO EXTERIOR NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y RECONOCIMIENTOS DE MATERIALES EN EL LABORATORIO CURSO: Microbiología Aplicada DOCENTE: Patricia Fernández Pérez CICLO: III INTEGRANTES:  Leonardo López Wilson  Asenjo Manrique Iván  Gastelo Fernández Leila  Granda alberca Neissor  Pimentel 7 de abril del 2010
  • 2. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 PRACTICA N° 1 RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Y CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD INTRODUCCIÓN • En este trabajo de investigación se dan a conocer los instrumentos de laboratorio microbiológico básicos para tener en cuenta que instrumentos debemos utilizar adecuadamente en nuestras prácticas. • A través de este trabajo que hemos realizado, damos a conocer información elemental sobre lo aprendido durante la práctica de laboratorio así como también profundizamos y damos explicaciones sencillas y de gran importancia sobre cada proceso que se lleva a cabo en el laboratorio de microbiología con cada de uno de los instrumentos y equipos. • la mejor forma de aprender la teoría y llevando a la práctica, los conocimientos teóricos, de manera que podamos enriquecer y fortalecer nuestra experiencia en el amplio mundo de la química general. • Queremos que al terminar la lectura de nuestro informe, sea fácil comprender y tener una idea clara y general de los temas tratados. Con el fin de contribuir con el aumento de nuestro conocimiento de cada uno de nosotros, esperamos de usted querida docente la crítica que sea necesaria para así ir mejorando en nuestros posteriores informes. Los autores PÁGINA 8
  • 3. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 II.- OBJETIVOS: Objetivo general: • EL objetivo general de nuestro trabajo investigado o elaborado es dar a conocer un conocimiento previo de: Normas de bioseguridad, Materiales y Equipos de un laboratorio de microbiología y temas relacionados entre sí. Objetivos específicos: El alumno podrá: • Reconocer el ambiente del laboratorio de Microbiología y los equipos y materiales necesarios para realizar las prácticas. • Tener un conocimiento general y saber su uso adecuado de los materiales y equipos utilizados en un laboratorio químico. • Saber conocer y practicar las normas de bioseguridad para evitar accidentes en un laboratorio químico. • Conocer los símbolos de riesgo y peligrosidad para evitar accidentes de gran contusión a las personas que manipulen objetos peligrosos que se encuentran en un laboratorio químico. PÁGINA 9
  • 4. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 III.- MEDIDAS DE SEGURIDAD  Nivel de Bioseguridad 1 En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mínimo para el personal del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se realiza por lo regular en mesas estándar de laboratorio. En este nivel no se requiere equipo especial ni tampoco un diseño específico de las instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por experto con entrenamiento en microbiología.  Nivel de Bioseguridad 2 Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes características: 1. El personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes patógenos 2. El acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo 3. Se toman precauciones extremas con instrumentos punzocortantes contaminados 4. Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles se llevan a cabo en gabinetes de trabajo biológico.  Nivel de Bioseguridad 3 El laboratorio cuenta con un diseño y con características especiales y todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de protección. Sin embargo, se reconoce que no todos los laboratorios llegan a cumplir con las normas recomendadas para este nivel de bioseguridad. En estas circunstancias, es aceptable el realizar las siguientes prácticas para poder seguir operando de una manera segura: 1. Ventilar el aire del laboratorio al exterior 2. La ventilación del laboratorio se tiene que hacer con un flujo de aire direccional controlado PÁGINA 10
  • 5. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 3. El acceso al laboratorio está restringido 4. Seguir el estándar de prácticas microbiológicas y equipamiento de seguridad impuesto para el nivel de bioseguridad 2. . Normas de bioseguridad 1. Debes aprender dónde está ubicado y cómo se usa todo el equipo de seguridad: el equipo de primera ayuda, el extintor, campana de seguridad, lavados para los ojos, todas las salidas del laboratorio, etcétera. 2. Lee todas las instrucciones para realizar la actividad antes de comenzar a trabajar y presta especial atención a las notas que indican precaución. 3. Mantener siempre las precauciones debidas en el área de trabajo en el laboratorio; alejar los objetos innecesarios. 4. Usar los implementos adecuados en cada práctica como guantes, cofia, tapaboca, blusa o guardapolvo de laboratorio, para que protejas tu ropa y evitar accidentes cuando estés trabajando. Y obtener un mejor control de la contaminación en el laboratorio así como la confiabilidad de los análisis que se realizan. 5. Utiliza permanentemente los anteojos de seguridad; en caso contrario ten el cuidado de no acercar la cara a ningún recipiente en el que se esté efectuándose algún tipo de reacción química. 6. Nunca dirijas hacia ti o hacia tus compañeros la boca del recipiente en el que se efectúa alguna reacción química. 7. Antes de utilizar un reactivo verifica la forma de cómo debe utilizarse correctamente. Lea la etiqueta si la tiene o consulta al docente, o al responsable del laboratorio. Rotula siempre el contenido de los envases en que deposites los materiales. 8. No realices nunca ningún experimento diferente al autorizado. Utiliza la sustancia que especifica la actividad. 9. Evitar el contacto con fuentes de electricidad y de calor. Apagar los instrumentos eléctricos antes de manipular las conexiones. 10. No se deben guardar ni consumir alimentos y bebidas dentro del laboratorio. PÁGINA 11
  • 6. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 11. Todos los productos inflamables se deben almacenar en un lugar adecuado, separados de los ácidos y las bases y de los reactivos oxidantes. 12. No mire directamente a los recipientes donde ocurra una reacción química. 13. Nunca pruebe ningún reactivo sólido o líquido, excepto que haya sido autorizado por el docente. 14. Cuando sea necesario testificar el olor de una sustancia por medio de un vapor. Hágalo siempre llevando el vapor a la nariz por medio de la mano. Nunca lo inhale directamente del tubo de ensayo. 15. Lavar los recipientes de vidrio después de realizar el proceso o experimento. 16. En ningún caso coja con la mano los tubos de vidrio que han sido calentados por largo rato. 17. No caliente frascos herméticamente cerrados, Estos pueden explotar. 18. Barre con una escoba los cristales y vidrios rotos. Recoge con una toalla de papel húmeda los pedazos pequeños y echarlos en los envases apropiados. 19. No abandone el laboratorio sino ha concluido cualquier actividad que requiera constante precaución. 20. Cualquier accidente por pequeño que sea, debe ser reportado inmediatamente al responsable del laboratorio. 21. Todo alumno debe observar las normas de seguridad y responsabilidad que se requieren en la ejecución de la práctica. 22. La seguridad en el laboratorio es tu responsabilidad. Por lo tanto tienes la obligación de hacer uso de todos los medios suministrados para la seguridad. PÁGINA 12
  • 7. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 LOS MICROORGANISMOS COMO AGENTES PATÓGENOS TRANSMITIDOS POR ALIMENTOS Algunos microorganismos patógenos son transmisibles a través de los alimentos. Las patologías son generalmente gastrointestinal, septicemias Pueden causar:  infecciones alimentarias  Intoxicaciones alimentarias  Alergias alimentarias EN LABORATORIO Al realizar controles microbiológicos de alimentos se debe tener en cuenta:  Las Fuentes de contaminación de alimentos  Las Rutas de infección del patógeno  Resistencia de los patógenos a condiciones adversas  Necesidades de crecimiento de los patógenos.  Minimizar la contaminación y el crecimiento de los microorganismos.  Técnicas de detección y aislamiento.  Métodos de muestreo proporcional al riesgo.  La variedad de criterios para una correcta evaluación microbiológica de alimentos hace que se forme una regulación legal de las características microbiológicas de cada alimento,  donde se define el alimento en si.  Están las regulaciones sobre tolerancia del número de microorganismos permisibles (valores de referencia) PÁGINA 13
  • 8. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 Primeros Auxilios en el Laboratorio. • Si se ingiere o inhala un ácido no vomitar y tomar abundante agua hasta llegar donde él medico. Porque al vomitar se devuelve el efecto del ácido. • Al tener contacto directo entre un compuesto químico peligroso y la piel, lavar con abundante agua y jabón para evitar que se infecte la zona afectada y dirigirse de inmediato al médico. • En caso de hemorragia el procedimiento que se debe utilizar depende del tamaño de la herida y de la disponibilidad de material sanitario. El mejor método es la aplicación de presión sobre la herida y la elevación del miembro. Esto es suficiente en lesiones de vasos de calibre medio. Lo ideal es utilizar compresas quirúrgicas estériles, o en su defecto ropas limpias, sobre la herida y aplicar encima un vendaje compresivo. Cuando este apósito se empapa de sangre no debe ser retirado: se aplican sobre él más compresas y más vendaje compresivo. Si el sangrado de una extremidad es muy abundante se puede aplicar presión sobre el tronco arterial principal para comprimirlo sobre el hueso y detener la hemorragia. • Para atender a una persona envenenada es primordial la identificación del tóxico. Las quemaduras, las manchas o un olor característico también pueden servir para identificar el veneno. La primera medida es diluir la sustancia tóxica haciendo beber a la persona gran cantidad de leche, agua o ambas. La dilución retrasa la absorción y la difusión del veneno en órganos vitales. Excepto en los casos de ácidos o bases fuertes, estricnina (alcaloide venenoso) queroseno (fracción del petróleo bruto que destila). • En caso de corte de la piel lavar e inmunizar con una sustancia como el isodine, cubrir con un gas limpia. PÁGINA 14
  • 9. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 TABLA DE ALGUNOS SÍMBOLOS DE RIESGO O PELIGROSIDAD PÁGINA 15
  • 10. SÍMBOLO DE SIGNIFICADO EJEMPLOS RIESGO Y (DEFINICIÓN Y NOMBRE PRECAUCIÓN) UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 Clasificación: Estos productos químicos IV.- DESCRIPCIÓN DE LOS EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE UN causan destrucción de • Ácido clorhídrico. C tejidos vivos y/o Corrosiv materiales inertes. • Ácido o fluorhídrico. Precaución: No inhalar y evitar el contacto con la piel, ojos y ropas. Clasificación: Sustancias y preparaciones que pueden explotar bajo efecto de una llama o que E son más sensibles a los Explosiv choques o fricciones que o el Dinitrobenceno. • Nitroglicerina Precaución: evitar golpes, sacudidas, fricción, flamas o fuentes de calor. Clasificación: Sustancias • Oxígeno que tienen la capacidad O de incendiar otras • Nitrato de potasio Combure sustancias, facilitando la nte combustión e impidiendo • Peróxido de el combate del fuego. hidrógeno Precaución: evitar su contacto con materiales combustibles. F Clasificación: Sustancias Extrema y preparaciones líquidas, • Hidrógeno damente cuyo punto de inflamación se sitúa entre los 21 ºC y Inflamabl los 55 ºC; • Etino e Precaución: evitar • Éter etílico contacto con materiales aire, agua. PÁGINA 16 Clasificación: Sustancias y preparaciones: *que pueden calentarse y
  • 11. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 1. Matraz de Enlermeyer El matraz o frasco de Enlermeyer es un frasco transparente de forma cónica con una abertura en el extremo angosto, generalmente prolongado con un cuello cilíndrico, suele incluir algunas marcas. Por su forma es útil para realizar mezclas por agitación y para la evaporación controlada de líquidos; además, su abertura estrecha permite la utilización de tapones. El matraz de Enlermeyer no se suele utilizar para la medición de líquidos ya que sus medidas son imprecisas. Fue diseñado en el año 1861 por el químico alemán Emil Enlermeyer 2. Probeta La probeta o cilindro graduable es un instrumento volumétrico, que permite medir volúmenes superiores y más rápidamente que las pipetas, aunque con menor precisión. Está formado por un tubo generalmente transparente de unos centímetros de diámetro, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) desde 0 ml (hasta el máximo de la probeta) indicando distintos volúmenes. En la parte inferior está cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras que la superior está abierta (permite introducir el líquido a medir) y suele tener un pico (permite verter el líquido medido). Generalmente miden volúmenes de 25 ó 50 ml, pero existen probetas de distintos tamaños; incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml. Puede estar constituido de vidrio (lo más común) o de plástico. En este último caso puede ser menos preciso; pero posee ciertas ventajas, por ejemplo, es más difícil romperla, y no es atacada por el ácido fluorhídrico. 3. Vaso de precipitados PÁGINA 17
  • 12. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 Un vaso de precipitados es un simple contenedor de líquidos, usado muy comúnmente en el laboratorio. Son cilíndricos con un fondo plano; se les encuentra de varias capacidades, desde 1 ml. hasta de varios litros. Normalmente son de vidrio (Pyrex en su mayoría) o de plástico. Aquéllos cuyo objetivo es contener ácidos o químicos corrosivos tienen componentes de teflón u otros materiales resistentes a la corrosión. Suelen estar graduados, pero esta graduación es inexacta por la misma naturaleza del artefacto; su forma regular facilita que pequeñas variaciones en la temperatura o incluso en el vertido pasen desapercibidas en la graduación. Es recomendable no utilizarlo para medir volúmenes de sustancias, ya que es un material que se somete a cambios bruscos de temperatura, lo que lo des calibra y en consecuencia nos entrega una medida errónea de la sustancia. Debido a que su graduación es inexacta, es comúnmente usado para transportar líquidos hacia otro recipiente como a una probeta o a un tubo de ensayo por un embudo. Son resistentes a los cambios bruscos de temperatura. Tiene múltiples usos en el laboratorio: calentar, disolver, etc. 4. Pipeta La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir alícuotas de líquido con bastante precisión. Suelen ser de vidrio. Está formado por un tubo hueco transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) indicando distintos volúmenes.  Metodología de uso  Se introduce la pipeta (con la punta cónica para abajo) en el recipiente del cual se desea extraer un volumen determinado de muestra.  Se disminuye leve y lentamente la presión ejercida por el dedo, hasta que el líquido comience a descender. Se vuelve a presionar cuando el menisco del líquido llegó a 0. Si el líquido descendió demasiado, se comienza nuevamente.  Se traslada la pipeta al recipiente destino. PÁGINA 18
  • 13. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010  Se disminuye nuevamente la presión del dedo hasta llegar a la cantidad de mililitros necesarios. 5. Tubos de ensayo Consiste en un pequeño tubo de vidrio con una punta abierta (que puede poseer una tapa) y la otra cerrada y redondeada, que se utiliza en los laboratorios para contener pequeñas muestras líquidas. Aunque pueden tener otras fases. Como realizar reacciones en pequeña escala, etc. Metodología de uso Para calentar durante intervalos cortos a llama directa puede sostenerse el tubo con la mano mediante su parte superior. Si se desea exponerlo más intensamente al calor es necesaria la utilización de pinzas. En ambos casos debe tenerse la precaución de no apuntar con la boca del tubo hacia alguna persona (para evitar proyecciones de la muestra). Los tubos de ensayo no han de llenarse más allá del primer tercio. 6. Placas petri La placa de Petri es un recipiente redondo, de cristal o plástico, con una cubierta de la misma forma que la placa, pero algo más grande de diámetro, para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente. Técnicas de uso Se utiliza en los laboratorios principalmente para el cultivo de bacterias y otros microorganismos, soliéndose cubrir el fondo con distintos medios de cultivo (por ejemplo agar) según el microorganismo que se quiera cultivar. Si se quieren observar colonias, durante el tiempo de incubación del microorganismo sembrado en la placa esta se mantiene boca abajo, es decir, apoyada sobre la tapa. De este modo, el agar queda en la parte superior y al condensarse el vapor de agua que generan los microorganismos por su metabolismo, cae sobre la tapa, evitando que los microorganismos se diluyan, manteniéndose fijos al sustrato y formando colonias. 7. Balanza digital Las balanzas digitales son instrumentos de pesaje de funcionamiento no automático que utilizan la acción de la gravedad para determinación de la masa. Se compone de un PÁGINA 19
  • 14. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 único receptor de carga (plato) donde se deposita el objeto para medir. Una célula de carga de carga mide la masa a partir de la fuerza (peso) ejercida por el cuerpo sobre el receptor de carga. El resultado de esa medición (indicación) aparecerá reflejado en un dispositivo indicador; con un grado de exactitud 0.0001g por lo cual nos arrojan mejores resultados. La balanza digital suele ser un equipo de laboratorio y resultan equipos imprescindibles en operaciones químicas, analíticas y de formulación en industrias y en laboratorios de calidad 8. Baño María. El baño María o baño de María es un método empleado en las industrias (farmacéutica, cosmética, de alimentos y conservas), en laboratorio de química y en la cocina, para conferir temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en otro mayor con agua que se lleva a o está en ebullición. El concepto de baño maría implica el calentamiento indirecto, por convección térmica del medio agua. Para calentar al baño maría hay que introducir un recipiente pequeño dentro de otro más grande lleno de agua y llevarlo al fuego. De este modo, lo que se calienta en primer lugar es el agua contenida en el recipiente de mayor tamaño y ésta es la que poco a poco va calentando el contenido del recipiente menor, de un modo suave y constante. 9. Incubadora La Incubadora es un equipo con funciones específicas que permite controlar, según su diseño, temperatura y humedad para crear un ambiente adecuado apto para la reproducción y desarrollo de organismos vivos. Algunas de las aplicaciones mas comunes son los cultivos microbiológicos, micológicos y virales, entre otros. Las incubadoras de laboratorio pueden ser diseñadas para aplicaciones donde se puede controlar parámetros como temperatura, demanda biológica de oxigeno (DBO) o condiciones atmosféricas, estos parámetros van acorde a las aplicaciones que se pretendan realizar en el laboratorio, estas incubadoras suministran CO2 (Bióxido de carbono). PÁGINA 20
  • 15. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 10. Laminas portaobjetos In-vitro diagnostica. El día 7 de diciembre de 2003 la directiva europea 98/79/EG ha entrado en vigor; y son fabricadas de vidrio sódico-cálcico de la clase hidrolítica 3 de acuerdo con la norma ISO 8037-1. Las láminas porta-objeto son láminas de vidrio de cerca de 1 mm. de espesor sobre las cuales los objetos pueden ser observados microscópicamente bajo una cubierta de vidrio. Hay también especiales para microscopio con una indentación en el medio, lo cual facilita el examen de líquidos. Dentro de los diagnósticos nativos, la secreción a ser examinada es extraída mediante un aplicador de algodón y luego mezclada con una solución salina fisiológica sobre una lamina portaobjetos de microscopio. Se le añade una cubierta de vidrio y luego la secreción puede ser evaluada bajo el microscopio. 11. Ozono El generador de ozono para desinfección permite la desinfección y también esterilización de agua, envases, utensilios, alimentos, y también en algún ambiente que se cierre puede purificar, esterilizar, oxigenar el aire de ese espacio. Existe un tipo de generador de ozono para desinfección para uso del hogar Este proceso de desinfección mediante generación de ozono permite retardar notablemente la descomposición, ya que permite antes de refrigerarlos esterilizarlos, y así se mantiene mas saludables y frescos por mas tiempo. Permite también la esterilización de utensilios, así podemos esterilizar elementos de cocina, mamaderas. 12. Cámara de neubauer La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc. Se introduce el líquido a contar, al que generalmente se ha sometido a una dilución previa con un diluyente, por capilaridad entre la cámara y el cubrecámara; puesto que tiene dos zonas esto permite hacer dos recuentos PÁGINA 21
  • 16. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 simultáneamente. Para contar las células se observa el retículo al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las células. Con base en la cantidad de células contadas, conociendo el volumen de líquido que admite el campo del retículo, se calcula la concentración de células por unidad de volumen de la muestra líquida inicial. 13. autoclave Un autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizar material de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presión y temperatura, evitando con las altas presiones que el agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del autoclave es que coagula las proteínas de los microorganismos debido a la presión y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de algunas formas acelulares, tal como los priones, que pueden soportar las temperaturas de autoclave. Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generación de vapor de agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presión interna de 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121 grados centígrados. Un tiempo típico de esterilización a esta temperatura y presión es de 15-20 minutos. Ciertos materiales no pueden ser esterilizados en autoclave, como el papel y muchos plásticos (a excepción del polipropileno). Este producto es de uso general en laboratorio y no es un producto sanitario por tanto no lleva marcado CE según la directiva 93/42/EEC ni le es de aplicación esta legislación. Cuando el autoclave esta destinado a la esterilización de productos sanitarios tiene unos requisitos especiales. 14. Esterilizador Especialmente para la destrucción de los microorganismos, sean cuáles sean sus características, siendo lo mismo que sean patógenos o no, que estén sobre el material o dentro de el mediante el calor seco. PÁGINA 22
  • 17. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 Se trabaja a una temperatura de 180° C por un tiempo de 2 horas con determinados materiales; ya sean de vidrio, madera o metal. MEDIOS DE CULTIVO A. MAC CONKEY AGAR. Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. Fundamento En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. B. OGYE La formulación de este medio corresponde a la formulación dada por Mossel y colaboradores en 1970 para el recuento de hongos y levaduras. Fundamento La Glucosa y el Extracto de Levadura son la base nutritivadel medio. La adición de la Oxitetraciclina o de la Gentamicina confiere el carácter selectivo al medio. Se presentan ciertas variaciones en la formulación de este medio, según las publicaciones consultadas; principalmente a nivel de la concentración de glucosa. Modo de empleo La muestra se diluye y se siembra en superficie. Se incu-ba entre 22-25ºC durante 5 días. Pueden precisarse mayores tiempos de incubación para microorganismos de crecimiento lento. C. LAURIL SULFATO CALDO. PÁGINA 23
  • 18. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 Medio recomendado por A.P.H.A. para detección y recuento de coliformes en aguas, aguas residuales y alimentos. Fundamento Medio rico en nutrientes, que permite un rápido desarrollo de los microorganismos fermentadores de la lactosa, aún de los fermentadores lentos. La triptosa es la fuente de nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, las sales de fosfato proveen un sistema buffer, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico Es un medio selectivo, ya que el lauril sulfato de sodio inhibe el desarrollo de la flora acompañante. Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas, éste último se evidencia al utilizar las campanas Durham. D. LEIFSON El medio Hugh – Leifson es un medio diferencial que nos permite clasificar a las bacterias en oxidativas y/o fermentativas. También es usado para la identificación de las bacterias fitopatógenas, principalmente para el género Erwinia, ya que tienen la capacidad de oxidar y fermentar la glucosa, aunque el género Bacillus y Clostridium lo pueden hacer, sin embargo estos últimos son Gram Positivos. Las Pseudomonas, Xanthomonas, Agrobacterium y Corynebacterium, solo pueden oxidar la glucosa, mas no fermentarla. E. OXOID Oxoid, una marca líder mundial de microbiología, se complace en anunciar la adición de cuatro medios de cultivo importante para la creciente gama de productos de Oxoid compatible con ISO para el examen microbiológico de alimentos y muestras ambientales, permitiendo que los microbiólogos de alimentos para confiar en que las formulaciones de cumplir con el requerido ISO especificaciones. Oxoid Modificado semi-sólidos Rappaport Vassiliadis (MSRV) Agar (ISO) se utiliza para el enriquecimiento selectivo de las especies de Salmonella de alimentos, muestras de heces de los animales y del medio ambiente y se ajusta a la norma ISO 6579:2002 anexo D. Este medio se ha demostrado para detectar más de Salmonella muestras positivas que los procedimientos tradicionales para el PÁGINA 24
  • 19. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 enriquecimiento de las heces animales y muestras ambientales 1-4. V.- METODOS • Se observaran los materiales y su respectivo uso para un buen manejo en el laboratorio. • Se escuchara con atención las medidas de Bioseguridad dentro de un Laboratorio de Microbiología • Se describirá cada uno de los equipos y materiales con sus respectivos usos en el laboratorio. VI.- RESULTADOS  Logramos comprender el uso y funcionamiento adecuado de los distintos materiales que utilizaremos en el transcurso de nuestras prácticas de laboratorio.  Conocimiento de las normas de bioseguridad que debemos de tener en cuenta en el momento que desarrollamos nuestras prácticas, evitar accidentes y obtener mejores resultados.  Tener el conocimiento de los símbolos de riesgo químico. VII.- DISCUSIONES • Se observo los materiales de laboratorio y sus usos mas no se toco el tema de sus restricciones. • Si no usamos adecuadamente los equipos, automáticamente nuestros resultados analíticos nos saldrán erróneos. • Si no tenemos en cuenta todas las normas de bioseguridad podemos ocasionarnos un accidente y hasta llegar a extremos. • Si programamos mal el esterilizador o el autoclave o no controlamos el tiempo durante la esterilización los microorganismos pueden quedar vivos debido a un tiempo menor a lo necesario, o por lo contrario el producto PÁGINA 25
  • 20. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 analizado puede que se pierda todos sus componentes y nutrientes debido al exceso de tiempo. VIII.- CONCLUSIONES • Se logró reconocer y saber como se llaman y se utilizan los materiales de laboratorio. • Gracias a esta investigación podemos tener más en cuenta LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD que debemos seguir en un laboratorio de investigación, para evitar accidentas inesperados al momento de hacer nuestras prácticas en el laboratorio químico. • Hemos aprendido a reconocer LOS SÍMBOLO DE RIESGO QUÍMICO para poder saber la peligrosidad de los compuestos que estamos utilizado en nuestras prácticas, en un laboratorio de química para así evitar consecuencias de grandes daños. • También hemos reconocidos los distinto medios de cultivo que se utilizan para los distintos análisis de alimentos. • Finalmente pudimos llagar a entender y describir LOS EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE UN LABORATORIO QUÍMICO para poder así realizar nuestras prácticas y tereas realizadas en un laboratorio químico con responsabilidad y seriedad que debe tener un Ingeniero Agroindustrial. PÁGINA 26
  • 21. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 IX.- CUESTIONARIO A. ¿Explique las diferencias entre la esterilización en autoclave y un esterilizador? Esterilizador.- • Emplea aire caliente para matar microorganismos. • No causa corrosión. • Esta operación comprende todos los procedimientos físicos, mecánicos y químicos, que se emplean para destruir, inactivar o retener gérmenes en general y patógenos en particular Autoclave.- • proceso mediante el cual se somete a los microorganismos a la acción del calor (121 - 134ºC) con la inyección de vapor saturado y seco a presión. • La esterilización en autoclave por vapor de agua es el método de esterilización por excelencia al presentar una elevada eficacia por su capacidad de penetración, fiabilidad, facilidad de monitorización, seguridad (ausencia de residuos tóxicos). B. ¿Que otras medidas de Bioseguridad se pueden considerar en un Laboratorio de Microbiología?  Para calentar con mechero una solución en un tubo de ensayo, acercar la llama a éste, agitando constantemente. Asegúrese de que el tubo no apunte a un compañero o a usted mismo ya que el contenido puede proyectarse.  Cualquier material muy caliente debe colocarse sobre una placa protectora de vidrio o malla de asbesto, no sobre el mesón PÁGINA 27
  • 22. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010  Nunca pipetear líquidos con la boca, sino usando peras para pipetas.  Llevar a cabo todos los procedimientos técnicos en forma tal que sea mínimo el riesgo de producir aerosoles, gotitas, salpicaduras o derrames de productos tóxicos o sustancias potencialmente infectantes. C. ¿Qué opinas: En un laboratorio se pueden hacer análisis de alimentos y a su vez análisis clínicos?  No; porque el análisis clínico se utiliza otro tipo de microorganismos que pueden afectar o interferir los análisis microbiológicos de los alimentos o así también como viceversa.  No porque en cada uno de estos análisis se trabajan con distintas normas y materiales apropiados para cada uno de los mismos. D. Dentro de un Laboratorio de alimentos se deben seguir ciertas normas internacionales para certificarse como un Laboratorio. El sistema Internacional de Normalización ha creado uno. Cuál es? NORMA ISO/IEC 17025:2005 Su nombre es: Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y calibración. Las secciones de esta norma son las siguientes.  Objetivos y campo de aplicación  Referencias normativas.  Términos y definiciones.  Requisitos relativos a la gestión.  Requisitos técnicos.  Anexos.  Bibliografía E. ¿fundamentos del esterilizador? Está provisto de un gran ventilador circulante que asegura la uniformidad de la temperatura en todas las partes del contenido. El material que puede esterilizarse por este método incluye placas de petri, matraces y pipetas de vidrio y objetos de metal, madera. Almacenan convenientemente el material de vidrio durante la esterilización y lo conservan estéril hasta su utilización. PÁGINA 28
  • 23. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS BIBLIOGRAFÍA:  Mg. Obbesso Terrones, Walter (1996). Laboratorio clínico. I Edición. Trujillo, Perú  Chang, Raymond (1992). ``Química`` 4a Edición México, México.  Armas, Carlos (1996). ´´ciencias química-conceptos Fundamentales`` 1a Edición. , Editorial Libertad. Trujillo-Perú.  UNPRG (2008). ´´Anatomía, Biología y Química`` 4a Edición. , Editorial Impresiones Chiclayo-Perú. LINKOGRAFIA http://es.wikipedia.org/wiki/Placa_de_Petri http://www.femto.es/instrumentos/Balanza-digital.html http://blog.acequilabs.com/incubadora-de-laboratorio-usos-y-funcionamiento http://www.marienfeld-superior.com/2007/espanol/portaobjetos.htm http://www.plagasydesinfeccion.com/desinfeccion/generador-de-ozono-para- desinfeccion.html http://es.wikipedia.org/wiki/Autoclave_de_laboratorio http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lauril.htm http://www.thermofisher.com/global/en/home.asp http://www.ingenieria.peru-v.com/estadistica_muestreo/iso_iec_17025.htm PÁGINA 29
  • 24. UNIVERSIDAD SEÑOR DE SIPAN 7 de abril de 2010 PÁGINA 30

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