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Fiches Milieux De Culture
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Fiches Milieux De Culture

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  • 1. Ensemencement Composition Caractères Résultats (Technique) recherchés Isolement par la • extrait de viande 1,0g Ces milieux Certaines colonies méthode des cadrans. • extrait de levure 2,0g permettent la peuvent avoir des • peptone 5,0g culture des bactéries couleurs caractéristique. • chlorure de sodium 5,0g peu exigeantes • Agar 15,0g • pH 7.4 Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
  • 2. Ensemencement Composition Caractères Résultats (Technique) recherchés • Milieu présenté en Gélose nutritive additionnée Mise en évidence L’hydrolyse de la caséine se boîte. à 45 °C d’un volume de lait stérile. de l’hydrolyse de traduit par l’apparition • Faire une strie centrale la caséine, d’une zone claire autour de à la surface du milieu. protéine du lait. la culture. • Incuber 24H à 7jours à la température désirée. Aspect du milieu Aspect du milieu Caséinase - Caséinase +
  • 3. Principe Composition Technique • Gélose de base : • Ajouter 5 % de sang dans une gélose • Ce milieu contient des facteurs de croissance Gélose Mueller-Hinton fondue dont la température a été variés par la présence d’un mélange de ou Gélose Columbia. ramenée aux environs de 45°C. peptone. C’est un milieu riche. • Ajouter au moment de Bien mélanger. L’amidon de maïs neutralise les substances l’emploi à la gélose • Porter le tube ou le flacon dans un toxiques libérées par les cultures. fondue 5 à 10 % de bain-marie dont la température est • C’est un milieu d’isolement enrichi préconisé sang frais défibriné. voisine de 80°C et l’y maintenir pendant pour l’étude des Neisseria notamment le 15 minutes. méningocoque. Il est aussi utilisé pour la • Laisser refroidir aux environs de 45°C. culture de Haemophilus influenza. Bien homogénéiser et couler en boîtes de Pétri. Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
  • 4. Principe Composition Lecture • Ce milieu contient une base nutritive • Bio-Trypcase 10 S. aureus donne des colonies : riche. • Extrait de levure 5 - noires • Il contient des accélérateurs de la • Chlorure de lithium 2 - brillantes, convexes croissance : le pyruvate de sodium et le • Pyruvate de sodium glycocolle • Glycocolle 5 - de 1 à 2 mm de diamètre • Il contient 2 inhibiteurs : le chlorure de • Tellurite de potassium 10 - entourées d'un halo clair. lithium et le tellurite de potassium. • Emulsion de jaune d'oeuf à 10 % 12 • Il contient 3 critères de différenciation: • Agar 1mL La plupart des autres espèces de - réduction du tellurite en tellure noir 1mL staphylocoques sont inhibées ou ne - protéolyse des protéines du jaune pH = 7,2 15 produisent pas de colonies d'oeuf ⇒ halo clair autour de la colonie - hydrolyse par une lécithinase des caractéristiques en 24 heures. lécithines du jaune d'oeuf ⇒ liseré blanc Les microcoques, Bacillus et quelques opaque autour de la colonie levures peuvent pousser sur ce lécithine + H20 diglycérides + choline milieu. Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
  • 5. Intérêt Principe Composition Lecture Ce milieu facilite la C’est un milieu non sélectif qui est utilisé • Peptone 5g La fermentation du lactose différenciation des pour l’isolement de nombreuses espèces • Extrait de viande 3g se traduit par le virage du colonies par le appartenant aux entérobactéries. • Lactose 10g bromocrésol pourpre à sa caractère lactose. • C’est un milieu contenant une base Il inhibe nutritive ordinaire permettant la pousse • Agar 15g teinte acide jaune. l’envahissement des bactéries non exigeantes. • BCP 0,025g de la surface de la • Il contient un critère de différenciation : • Eau qsp 1 L Colonies jaunes → bactéries boite par des la fermentation du lactose révélée par le lactose + nappes de Proteus virage en milieu acide de l’indicateur Colonies bleues → bactéries car il ne contient coloré de pH, le bromocrésol pourpre. pH = 7 pas d'électrolytes. • Il est déficient en électrolytes : absence lactose – d'ions minéraux. Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
  • 6. Intérêt Principe Composition Lecture (en g/L) Milieu • Ce milieu contient une base nutritive • Bio-Trypcase 17 •Pousse de petites colonies d'isolement riche grâce aux 2 peptones et à l’extrait •Bio-Thionz 3 sur le milieu → de levure. •Extrait de levure 5 sélectif des 10 Streptocoques D • Il contient 2 inhibiteurs : la bile de boeuf •Bile de boeuf Streptocoques et l’azide de sodium. Ces 2 inhibiteurs •Chlorure de sodium 5 D permettent de sélectionner la culture des •Citrate de sodiu 1 •Colonies entourées d'un 1 (entérocoques streptocoques du groupe D •Esculine 0,5 halo noir → esculine + et non • Il contient un critère de différenciation : •Citrate de fer 0,25 entérocoques). l’hydrolyse de l’esculine révélée par le •Ammoniacal 13,5 citrate de fer ammoniacal : Esculine + H2O → Glucose + Esculétine ↓ citrate de fer ammoniacal Coloration noire •Les bactéries esculines + présentent des colonies noires. • C’est un milieu sélectif des streptocoques peu exigeants. Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
  • 7. Intérêt Principe Composition Lecture (en g/L) La gélose au • Ce milieu gélosé est relativement • Peptone 20 • Sur ce milieu de très cétrimide est pauvre, et contient un antiseptique: le • Sulfate de potassium 10 nombreuses bactéries sont cétrimide (bromure de N-cétyl-N, N, N- • Chlorure de 3 inhibées de par la présence de un milieu triméthylammonium). magnésium l'antiseptique cétrimide, ainsi sélectif, qui • Ce milieu, proche du milieu King A, • Hydrogénophospate 0,3 que par la présence de permet favorise aussi la production de pigments de potassium l'antibiotique acide nalidixique l'isolement des par P.aeruginosa. • Cétrimide 0,2 (inhibiteur de nombreuses Pseudomonas • Acide nalidixique 0,015 bactéries à Gram négatif). et notamment • Agar 13 •A 37°C se développent • Eau distillée (qsp) 1L P.aeruginosa, et éventuellement, de P.putida, P.stutzeri et P.aeruginosa. P.maltophilia. •A 42°C il y a développement presque exclusif de P.aeruginosa. Milieu bleu : pyocyanine Milieu jaune- vert : pyoverdine Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation