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Detección rápida de microorganismos
Tendencias




Detección rápida de microorganismos
Tendencias


César Fernández Sánchez
Detección rápida de microorganismos
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Contaminación por microorganismos




                                      E. Coli O157:H7
Detección rápida de microorganismos
Tendencias


Niveles y análisis en aguas
 Aguas de consumo
 Valor máximo admisible (VMA) = 0 UFC/mL

 Aguas embotelladas
 VMA = 0 UFC/mL

 Aguas de baño
 VMA = 0 UFC/mL

 Aguas residuales regeneradas (según su uso)
 Urbano = 0‐2 UFC/mL
 Agrícola = 1‐100 UFC/mL
 Industrial = 0‐100 UFC/mL
 Recreativo = 2‐100 UFC/mL
 Ambiental = 0‐100 UFC/mL
Detección rápida de microorganismos
Tendencias


Análisis de parámetros microbiológicos
Métodos de análisis estandarizados
• Fermentación en tubos múltiples
• Cultivo de tubos positivos en medio de confirmación
• Recuento según la cantidad más probable  o filtrado en 
  membrana, cultivo en medio apropiado, sub‐cultivo e 
  identificación de cepas sospechosas
  Tiempo de análisis: 16‐48 h, pudiendo extenderse hasta 72 h.
     Robustos 
     Fiables
     Largos
     Caros
     Laboratorios especializados
     Personal entrenado
Detección rápida de microorganismos
Tendencias


Biosensores
Robustos, compactos, fiables, fáciles de manejar, instrumentación sencilla 
       Aguas de consumo 
       (embotelladas, baño)
                                    Aguas residuales regeneradas
       Muestreo y cultivo
                                    Detección directa (sensibilidad)
             Detección 

                                              • Rapidez
 • Disminución tiempo de cultivo      • Frecuencia de muestreo
 • Mínimo consumo de reactivos             • Medida in situ



                          COSTE POR ANÁLISIS
Detección rápida de microorganismos
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Biosensores: dispositivo GTQ
     Inmunosensor impedimétrico para la medida directa de E.coli




     • Pequeño tamaño, robustez – técnicas de microfabricación
     • Selectividad ‐ Inmunodetección
     • Detección directa ‐ Una única incubación
     • Sensibilidad ‐ límite de detección de 300 UFC/mL
     • Selectividad añadida – Impedancia ‐ detección de células viables
     • Rapidez – 1 h tiempo de análisis
Detección rápida de microorganismos
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Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento
Detección rápida de microorganismos
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Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento




                                         LOD = 300 UFC/mL




             • Concentración más baja medida: 100 UFC/ml
             • Límite de detección: 300 UFC/ml
Detección rápida de microorganismos
Tendencias


Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Selectividad
                               Detección de células viables

             Células vivas                 105 UFC/mL



                                           Vivas


             Células muertas
                                                   Muertas
Detección rápida de microorganismos
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Biosensores: Inmunosensor GTQ ‐ Perspectivas

Inmunosensor GTQ
• Potencial para la detección rápida y fiable de microorganismos en aguas
• Medida directa
• Detección eléctrica – instrumentación compacta y sencilla
• Selectividad a la detección de microorganismos vivos – menos falsos positivos
• Mínima interferencia de contaminantes – medida robusta y reproducible

Trabajo a realizar
• Mejora de la sensibilidad – Optimización de la geometría
• Versatilidad – aplicación a la detección de otros microorganismos
• Automatización – medida in‐situ
Detección rápida de microorganismos
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                                      Gracias por su atención


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  • 1. Detección rápida de microorganismos Tendencias Detección rápida de microorganismos Tendencias César Fernández Sánchez
  • 2. Detección rápida de microorganismos Tendencias Contaminación por microorganismos E. Coli O157:H7
  • 3. Detección rápida de microorganismos Tendencias Niveles y análisis en aguas Aguas de consumo Valor máximo admisible (VMA) = 0 UFC/mL Aguas embotelladas VMA = 0 UFC/mL Aguas de baño VMA = 0 UFC/mL Aguas residuales regeneradas (según su uso) Urbano = 0‐2 UFC/mL Agrícola = 1‐100 UFC/mL Industrial = 0‐100 UFC/mL Recreativo = 2‐100 UFC/mL Ambiental = 0‐100 UFC/mL
  • 4. Detección rápida de microorganismos Tendencias Análisis de parámetros microbiológicos Métodos de análisis estandarizados • Fermentación en tubos múltiples • Cultivo de tubos positivos en medio de confirmación • Recuento según la cantidad más probable  o filtrado en  membrana, cultivo en medio apropiado, sub‐cultivo e  identificación de cepas sospechosas Tiempo de análisis: 16‐48 h, pudiendo extenderse hasta 72 h. Robustos  Fiables Largos Caros Laboratorios especializados Personal entrenado
  • 5. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores Robustos, compactos, fiables, fáciles de manejar, instrumentación sencilla  Aguas de consumo  (embotelladas, baño) Aguas residuales regeneradas Muestreo y cultivo Detección directa (sensibilidad) Detección  • Rapidez • Disminución tiempo de cultivo • Frecuencia de muestreo • Mínimo consumo de reactivos • Medida in situ COSTE POR ANÁLISIS
  • 6. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores: dispositivo GTQ Inmunosensor impedimétrico para la medida directa de E.coli • Pequeño tamaño, robustez – técnicas de microfabricación • Selectividad ‐ Inmunodetección • Detección directa ‐ Una única incubación • Sensibilidad ‐ límite de detección de 300 UFC/mL • Selectividad añadida – Impedancia ‐ detección de células viables • Rapidez – 1 h tiempo de análisis
  • 7. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento
  • 8. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento LOD = 300 UFC/mL • Concentración más baja medida: 100 UFC/ml • Límite de detección: 300 UFC/ml
  • 9. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Selectividad Detección de células viables Células vivas 105 UFC/mL Vivas Células muertas Muertas
  • 10. Detección rápida de microorganismos Tendencias Biosensores: Inmunosensor GTQ ‐ Perspectivas Inmunosensor GTQ • Potencial para la detección rápida y fiable de microorganismos en aguas • Medida directa • Detección eléctrica – instrumentación compacta y sencilla • Selectividad a la detección de microorganismos vivos – menos falsos positivos • Mínima interferencia de contaminantes – medida robusta y reproducible Trabajo a realizar • Mejora de la sensibilidad – Optimización de la geometría • Versatilidad – aplicación a la detección de otros microorganismos • Automatización – medida in‐situ
  • 11. Detección rápida de microorganismos Tendencias Gracias por su atención Detección rápida de microorganismos Tendencias César Fernández Sánchez