Flora Normal.

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Flora Normal.

  1. 1. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 1 FLORA CORPORAL Y DEL AIRE Stella Restrepo G. Los Prokaryotes son miembros esenciales de la biosfera y habitan todos los sitios posibles donde está la vida y desde los que ofrecen las condiciones ideales para el crecimiento y la reproducción, hasta aquellos ambientes extremos donde las condiciones son limitantes para otros seres. La ubicuidad de los microorganismos está basada en sus características de tamaño muy pequeño, fácilmente dispersables por aire y agua, de su versatilidad metabólica y de su capacidad para tolerar ambientes desfavorables. Los microorganismos autóctonos son los que están siempre presentes en un microambiente y tienen un flujo de nutrientes más o menos constante, mientras que los transeúntes son aquellos que se localizan por períodos de tiempo; es necesario tener en cuenta que las condiciones físico-químicas (temperatura, humedad, pH, oxígeno, concentración de sal), las floras de los otros seres, la disponibilidad de nutrientes y el contacto son las variables que determinan su ubicación y cantidad. Para un microbiólogo es necesario el conocimiento de la flora humana y del aire, ya que le permite, en términos prácticos, entender la infección y/ó la enfermedad como también la contaminación, la toma y el procesamiento de las muestras, como también la decisión en la identificación, aspectos fundamentales en su trabajo: por lo tanto, a continuación se revisan los conceptos de flora de aire y humana. FLORA DEL AIRE El aire no es un medio apto para la multiplicación bacteriana ya que carece de los nutrientes necesarios para ella, pero si puede albergar, como flora transeúnte, microbios que están asociados a gotas de agua, polvo u otra materia particulada. Dichos microorganismos son en general bacterias de bajo poder patógeno y generalmente pigmentados (con carotenoides que presentan más de siete enlaces dobles), ya que estos metabolitos secundarios los protegen de las radiaciones de luz ultravioleta y del ozono presentes en nuestra atmósfera. (Ver capítulo anterior) El aire puede considerarse como un vector de microorganismos ya que su movimiento puede arrastrar gérmenes de un lugar a otro, los vientos pueden levantar flora de tierras y desiertos y en los fenómenos de evaporación transportar gotitas de agua con microorganismos. Por lo tanto, como ya se dijo, si bien alberga bacterias de poca patogenicidad, en algunos momentos puede transportar patógenos con el consecuente peligro para los humanos.
  2. 2. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 2 El aire en ambientes cerrados sí puede contener un gran número de microorganismos procedentes de los otros seres que allí se encuentran y, por lo tanto, albergaría bacterias de baja, media y alta virulencia; tal es el caso del aire de un galpón, de una sala de cirugía, de un teatro o de un laboratorio de microbiología. Tabla 1 MICROORGANISMOS GENERALMENTE ASOCIADOS AL AIRE Micrococcus Bacillus spp Bacilos gram negativos ambientales Corynebacterium Como se leerá más adelante, la flora humana de piel, cuero cabelludo y vías respiratorias, así como la flora que aparece en la tabla, puede ser contaminante de cultivos en un laboratorio como también llevarnos al error de pasarla desapercibida, cuando se trate de una infección oportunista en un paciente con algún tipo de compromiso y, por ello, es imprescindible trabajar con un mechero encendido y, cuando las condiciones lo permiten, en una cámara de bioseguridad. En el primer caso, debido a la termodinámica la cual precisa que el calor se difunde y, por lo tanto, crea un ambiente de cierta esterilidad al trabajar cerca al mechero, o a la esterilidad que tienen las cámaras de flujo laminar, necesarias en la bioseguridad y el autocuidado. Cuando se presentan contaminaciones masivas en los laboratorios de microbiología, se puede emplear la vaporización de compuestos fenólicos o glutaraldehìdo durante 24 horas o, si se cuenta con ellas, el encendido de lámparas de luz ultravioleta por 6 - 8 horas, las cuales logran una reducción muy efectiva de todo tipo de flora ambiental. FLORA CORPORAL La flora normal se refiere a microorganismos de baja virulencia que siempre están presentes en un hospedero adulto, cuya colonización se hizo en la infancia, y se localizan en un microambiente específico, mantienen una población estable y se asocian íntimamente con un epitelio. En los humanos, esta flora se encuentra en sus superficies externas y algunas de las internas y no presenta un peligro para la salud siempre que se conserven intactas las defensas naturales. No obstante, esta flora puede causar infecciones graves cuando ella “cambia de ubicación en un momento equivocado “ debido a algún trastorno en el hospedero y a esto se llama
  3. 3. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 3 infección oportunista. Los microorganismos de la flora normal pueden ser clasificados como parásitos (viven a expensas del hospedero), simbiontes (se beneficia el hospedero) o comensales (un efecto neutro). En condiciones normales, durante el período de gestación el feto es estéril y al momento del nacimiento por vía vaginal o cuando se practica una cesárea, el bebé empieza a colonizarse, primero la piel, luego la orofaringe, tracto gastrointestinal y por último otras zonas mucosas, con la flora normal transmitida por la madre, el obstetra, las enfermeras, las familias y hasta las mascotas y en cuestión de 24 horas ya tiene una buena cantidad en su piel, boca y tracto intestinal, ya que las bacterias encuentran sus nichos en los diferentes sitios anatómicos llegando a ser predominantes, otras serán transeúntes y otras no lograrán establecerse. En poco tiempo la flora del bebé será igual a la de los otros individuos. La presencia de la flora normal no es esencial para la vida. Pacientes con enfermedad granulomatosa u otro tipo de desorden de este tipo son criados en cápsulas que impiden su contacto con microorganismos, (como también animales) y son llamados individuos gnotobióticos y presentan un desarrollo normal; sin embargo esta flora presenta acciones benéficas al organismo como proteger contra flora especialmente dañina, bien sea porque ocupa los receptores de adherencia presentes en las células o porque segrega bacteriocinas como sustancias letales para otras poblaciones microbianas, inducen producción de anticuerpos contra flora no residente, ya que el sistema inmune es retado por el contacto con estos microorganismos, porque están en lugares cercanos a ganglios linfáticos, y porque ayudan a la absorción de nutrientes como la vitamina K, producida en la membrana por un amplia gama de bacterias, (menaquinonas) como metabolitos encargados del paso de electrones en la cadena respiratoria. En el humano la flora normal está ubicada en la superficie interna y externa de la piel, en el tracto intestinal y en algunos sitios del tracto genitourinario, siendo estos órganos ecosistemas microbianos con poblaciones específicas de flora autóctona o no y un gran número de factores determinan cuales microorganismos pueden colonizar (condiciones nutricionales, potenciales de oxido-reducción, anticuerpos o sustancias antibacterianas, pH, otra flora, etc.) y todas estas condiciones están permanentemente variando con la edad, la nutrición, la limpieza, las enfermedades, los hábitos y los efectos de antibióticos o medicamentos Piel Es un hábitat homogéneo respecto a la temperatura, sin embargo la humedad varía y crea diferentes microambientes y es precisamente la humedad el factor ambiental que influye el tamaño de la población.
  4. 4. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 4 Tabla 2 MICROBIOS MÁS COMUNES QUE COLONIZAN LA PIEL Acinetobacter spp Propionibacterium spp Aerococcus spp Staphylococcus spp. Bacillus spp Streptococcus spp Clostridium spp Bacteroides spp Corynebacterium spp Moraxella spp Micrococcus spp Bacilos Gram negativos Peptotococcus spp Peptostreptococcus spp Fuente: Murray, P. Med. Microb. 2002 Debido a su constante exposición y contacto con el ambiente, la piel alberga una buena cantidad de microorganismos y esta flora puede modificarse por el hábito de llevar determinado tipo de ropas, los ambientes en los que vive el individuo, la cercanía a mucosas (áreas perineales y genitales, boca, etc.), pero en términos generales las bacterias más comúnmente encontradas son Staphylococcus coagulasa negativa, Corynebacterium spp y Propionibacterium spp. En este tegumento, los nutrientes los da el sudor y los ácidos grasos volátiles producidos por los Propionibacterium spp actúan como agentes antibacterianos como también la lisosima secretada por las glándulas sudoríparas; las bacterias pueden alojarse también en éstas últimas y en los folículos pilosos; por lo tanto, no son barridas ni modificadas significativamente por la sudoración y el lavado normal y esto garantiza la repoblación permanente a pesar de la exfoliación constante. Por lo tanto, la flora normal de piel contribuye a mantener un pH bajo, compite por los nutrientes o con otros microorganismos extraños, produce sustancias bactericidas, todos ellos efectos favorecedores de la salud. Pabellón auricular Los organismo colonizantes más comunes en pabellón auricular son los Staphylococcus coagulasa negativa, pero otros microorganismos como S. pneumoniae y Pseudomonas spp pueden aislarse de allí y comportarse como productores de otitis en personas inmunosuprimidas y en nadadores. Las enterobacterias y otros microorganismos patógenos primarios también se aíslan. El oído medio y el interno son lugares estériles en condiciones normales.
  5. 5. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 5 Ojo La superficie del ojo está colonizada por Staphylococcus coagulasa negativa, Streptococcus viridans y Corynebacterium spp y la cantidad de lisosima que se secreta junto con la Ig A de las lágrimas ayudan a controlar la población microbiana. Fosas nasales La flora predominante de la nariz son los Staphylococcus coagulasa negativa y las Corynebacterium spp Tracto respiratorio (boca, orofaringe) El tracto respiratorio superior esta colonizado con numerosos microorganismos, con 10 -100 anaerobios por cada aerobio, y es importante anotar que la boca es un ecosistema con sus propias características por su desarrollo anatómico y fisiológico, como también por la composición de la saliva. Tabla 3 MICROORGANISMOS COLONIZANTES DEL TRACTO RESPIRATORIO Acinetobacter Moraxella Actinobacillus Mycoplasma Actinomyces Neisseria Cardiobacterium Peptostreptococcus Corynebacterium Porphyromonas Eikenella Prevotella Enterobcteriaceae Propionibacterium Eubacterium Staphylococcus Fusobacterium Streptococcus Haemophilus Stomatococcus Kingella Treponema Lactobacillus Veillonella Fuente: Murray, P. Med. Microb. 2002 Los anaerobios más comunes son Peptostreptococcus, Veillonella, Actinomyces y Fusobacterium y entre los aerobios Streptococcus, Haemophilus y Neisseria spp. La proporción relativa de estos microorganismos varía según el sitio anatómico. Es diferente la flora en la superficie de un diente, que la de la saliva o de una
  6. 6. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 6 cripta gingival. La mayoría de la flora es relativamente avirulenta y se asocia raramente con enfermedad, a menos que pase a sitios “estériles “. En la cavidad oral muchos microorganismos se unen a la mucosa y a las piezas dentales formando placas o biopelículas, estas estructuras permiten potenciales de óxido-reducción bajos en su superficie permitiendo el crecimiento de anaerobios estrictos particularmente en las encías y entre las piezas dentales. Naríz y nasofaringe Las poblaciones de la nasofaringe son un espejo de la flora nasal, aunque la humedad del ambiente puede ser tan diferente que seleccione organismos adicionales Tabla 4 FLORA DE NARÍZ Y NASOFARINGE Staphylococcus coagulasa negativa Difteroides Streptococcus spp Moraxella spp Tracto respiratorio inferior La laringe, tráquea, bronquios y vías inferiores son generalmente estériles aunque puede ocurrir colonización transitoria con secreciones del respiratorio alto, cuando se aspira. (Paso de garganta a pulmón). Estos sitios están protegidos por la acción de las células epiteliales ciliares y por el movimiento del moco producido por las células de Clara Tracto gastrointestinal Este tracto es el ecosistema con mayor densidad de población, ya que el número de bacterias puede exceder el número de células del hospedero. Es un sistema “abierto“ que semeja un tubo, que recibe alimentación por un extremo y, por el otro, libera los deshechos y el proceso está acompañado por enzimas digestivas del hospedero; aparte de su flora normal pueden encontrarse colonizaciones con otros microorganismos que ingresan permanentemente con la ingestión de comida y agua. Este tracto comprende seis áreas mayores: boca, esófago, estómago, intestino delgado, ciego e intestino grueso.
  7. 7. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 7 Tabla 5 MICROBIOS QUE COLONIZAN EL TRACTO GASTROINTESTINAL Acinetobacter Lactobacillus Actinomyces Mobiluncus Bacteroides Peptostreptococcus Bifidobacterium Porphyromonas Campylobacter Prevotella Clostridium Propionibacterium Corynebacterium Pseudomonas Eubacterium Staphylococcus Enterobacteriaceae Streptococcus Enterococcus Veillonella Fusobacterium Haemophilus Fuente: Murray, P. Med. Microb. 2002 Esófago Las bacterias orofaríngeas y las que colonizan estómago pueden aislarse del esófago; sin embargo se cree que son colonizadores transitorios, ya que la saliva y el bolo alimentario, remueven estas poblaciones, por lo que no se multiplican acá. Estómago Debido a que el estómago produce ácido clorhídrico y pepsinógeno su pH es sumamente ácido y por lo tanto, alberga solamente y en poco número microorganismos tolerantes al ácido, tales como bacterias que producen ácido láctico (Lactobacillus y Streptococcus) y Helicobacter pilori. Esta población puede cambiar dramáticamente en número y diversidad en personas que toman medicamentos para neutralizar o reducir la producción de ácido clorhídrico, o en personas gastrectomizadas o vaguectomizadas. Intestino delgado En duodeno, yeyuno e íleon se aumenta el número de microorganismos que dependen del pH, enzimas peptolíticas y lipolíticas, ácidos biliares y productos de degradación, siendo la mayoría anaerobios y se encuentran Peptostreptococcus, Porphyromonas y Prevotella. Cuando se presenta una obstrucción, el éstasis lleva a la colonización y proliferación de organismos presentes en el intestino grueso.
  8. 8. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 8 También en este ecosistema se encuentran E. coli, Bacteroides, Fusobacterium y Eubacterium. Intestino grueso Se encuentran más bacterias en el intestino grueso que en cualquier otra parte del cuerpo siendo las más comunes Bifidobacterium, Eubacterium, Bacteroides, Enterococcus y Enterobacteriaceae. Y aunque este último representa menos del 1% de la población intestinal es el aerobio más responsable de infecciones intraabdominales y marcador de potabilidad de aguas. Sistema genitourinario En general la uretra anterior y la vagina son las únicas áreas de este sistema permanentemente colonizadas. Aunque la vejiga puede colonizarse transitoriamente, el flujo urinario y las secreciones bactericidas de las células uroepiteliales rápidamente las barren. Tabla 6 MICROORGANISMOS COLONIZANTES DEL TRACTO GENITOURINARIO Actinomyces Lactobacillus Bacteroides Mobiluncus Bifidobacterium Mycoplasma Clostridium Peptostreptococcus Corynebacterium Porphyromonas Enterococcus Prevotella Enterobacteriaceae Propionibacterium Eubacterium Staphylococcus Fusobacterium Streptococcus Gardnerella Treponema Haemophilus Ureaplasma Uretra anterior La población más numerosa de la uretra anterior esta conformada por Lactobacillus, Streptococcus y Staphylococcus coagulasa negativa que son de baja virulencia y escasamente asociados a enfermedad humana. Algunas veces se presenta colonización transitoria con organismos fecales.
  9. 9. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 9 Vagina Su flora normal es muy diversa y esta bastante influida por los factores hormonales. En el momento del nacimiento se coloniza con Lactobacillus, hasta las 6 semanas aproximadamente, y luego, cuando se deprimen los estrógenos maternos se coloniza con enterobacterias, Staphylococcus y Streptococcus. Cuando en la pubertad se producen los estrógenos, reemergen los Lactobacillus como organismos predominantes acompañados de Enterococcus, Gardnerella, Micoplasma, Ureaplasma, Corynebacterium, Staphylococcus y bacterias anaerobias. Esta flora residente al acidificar la vagina, como resultado del desdoblamiento del glucógeno en ácido láctico tiende a inhibir la colonización y por lo tanto la multiplicación de organismos patógenos. BIBLIOGRAFÍA MURRAY, P. 2002. ” Comensal and pathogenic microbial flora in humans.” En Medical Microbiology. San Louis. 4 ed. Mosby SHARP, S.E. 1999. “ Comensal and pathogenic M.O. of humans.” En: MURRAY, P. Manual of Clinical Microbiology Washington. 7 ed. A.S.M. BERCHE, P. 1989. “Flores commensales de l’homme.” En: BERCHE, P. et al. Bactériologie. Les bactéries et des infections humaines. Paris, 2 ed. Flammarion LARSEN, H. 1995. ” Normal microbial flora. ” En: MAHON, C.R. and MANUSELIS, George. Textbook of diagnostic microbiology. Philadelphia. W.B. Saunders Co.
  10. 10. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 10 PRÁCTICA DE LABORATORIO BACTERIAS DEL AIRE I. OBJETIVOS 1. Conocer las bacterias que se encuentran en el aire. 2. Describir la morfología macro y microscópica, así como las características tintoriales de algunas bacterias del ambiente. II. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Colocar una caja de Petri con agar nutritivo durante 60 minutos en un sitio expuesto al medio ambiente (cocina, baño, habitación, cafetería, jardín, etc.); destapándola para permitir el contacto de las bacterias con el agar. Marcar la caja y dejarla a temperatura ambiente durante 24 horas – 48 horas. Lectura: Terminada la incubación, describir como mínimo 4 de las colonias encontradas en ella y realizar los Gram respectivos. NOTA: Si usted quiere tomar la muestra de la superficie de un objeto (teléfono, llave de agua, pomo de una puerta, etc.), tome un escobillón estéril humedecido con solución salina, frote fuertemente el área y luego siembra por trapeado. BACTERIAS DEL CUERPO I. OBJETIVOS 1. Conocer las principales bacterias que hacen parte de la flora normal de diferentes sitios del cuerpo. 2. Describir morfológica y microscópicamente, las características tintoriales de algunas bacterias del cuerpo. II. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Gram y cultivo de garganta: Con un escobillón estéril frotar amígdalas y orofaringe. (Leer capítulo sobre toma de muestras). Sembrar en una caja de agar sangre, incubar 24 horas
  11. 11. Manual de Bacteriología Flora Corporal y del Aire Stella Restrepo G. 11 a 37ºC. Con el mismo escobillón hacer un extendido en un portaobjetos y colorearlo con Gram. Lectura: A las 24 horas de incubación, leer el cultivo. Observe si hay predominio de alguna bacteria y realizar como mínimo Gram a 4 colonias diferentes. NOTA: Si usted desea, puede tomar la muestra de pabellón auricular, fosas nasales, cuero cabelludo, vagina, etc. Y para ello debe revisar el capítulo de toma de muestras. Aca se recomienda la toma de cavidad oral por la gran cantidad de M.O. que usted puede obtener.

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