Virus del papiloma humano

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Tecnicas de deteccion del virus del papiloma humano

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Virus del papiloma humano

  1. 1. Pruebas de ADN para la detección de HPV
  2. 2. <ul><li>Se requiere la infección de tipos específicos de HPV para el desarrollo de cáncer cervical y precursores de alto grado. </li></ul><ul><li>Esta realización se debe a: </li></ul><ul><li>1. Estudios epidemiológicos. </li></ul><ul><li>2. Estudios de biología molecular. </li></ul>
  3. 3. <ul><li>Hoy en día, los exámenes de ADN del HPV son considerados como el mejor acercamiento para el manejo de mujeres con un resultado citológico de ASCUS (Atypical squamous cells of undetermined significance). </li></ul>
  4. 4. El Virus del Papiloma Humano <ul><li>Los HPV son un grupo complejo de viruses neoplásicos. </li></ul><ul><li>Están ampliamente distribuidos en el reino animal. </li></ul>
  5. 5. <ul><li>Poseen una cápside proteica la cual es icosahédrica. </li></ul><ul><li>Más de 120 tipos de HPV se han identificado. </li></ul>
  6. 6. <ul><li>Cada tipode HPV posee una predilección en infectar ciertas áreas del cuerpo: </li></ul><ul><li>HPV 1 verrugas plantares. </li></ul><ul><li>HPV 2 verrugas palmares. </li></ul><ul><li>Más de 30 tipos se consideran genitales ya que preferencialmente infectan a mucosa y piel genital del cérvix, vagina, vulva, pene y áreas perianales con epitelio escamoso estratificado </li></ul>
  7. 7. Tipos de HPV Anogenitales Tipos de Bajo Riesgo 6,11,40,42,43,44,53,54,61,72,73,81 Tipos de Alto Riesgo 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,82 Tipos posiblemente de Alto Riesgo 26,66,73
  8. 8. <ul><li>El más común de los viruses de alto riesgo es el HPV 16 </li></ul><ul><li>Se encuentra en el 50 % de mujeres con cáncer cervical. </li></ul><ul><li>El más identificado en NIC 2 y NIC 3. </li></ul><ul><li>El segundo más común es el HPV 18 </li></ul>
  9. 9. <ul><li>La infección con los viruses de alto riesgo incrementa considerablemente el riego de desarrollar cáncer cervical. </li></ul><ul><li>Riesgo relativo de cáncer cervical fue de 435 para infección de HPV 16 y 248 para infección con HPV 18 </li></ul><ul><li>Los HPV 6 y 11 son los viruses más asociados a verrugas genitales (condyloma accuminata): </li></ul><ul><li>Aproximadamente 1 % de la población sexualmente activa posee verrugas genitales </li></ul>
  10. 10. Historia Natural de la Infección por HPV
  11. 11. Historia Natural de la Enfermedad: <ul><li>Existen dos caminos en las cuales se puede llegar con una infección con HPV: una infección limitada y temporal y otra persistente. </li></ul><ul><li>En el estudio Rutgers realizado en mujeres universitarias, la duración media de detección del ADN de HPV fue de ocho meses. El 70 % de las mujeres infectadas con HPV se convirtieron en ADN HPV negativas y a los 24 meses más del 92 % eran negativas al ADN de HPV. </li></ul>
  12. 12. <ul><li>Las mujeres infectadas con el HPV 16 tardaron más tiempo de convertirse en ADN HPV negativas (10.3 meses), pero la mayoría se convirtió en negativas en el primer año. </li></ul><ul><li>Muchas mujeres con una infección temporal de HPV desarrollan anormalidades citológicas. Esto ocurre ya que el ciclo de vida viral está altamente relacionado con el estado de diferenciación epitelial. </li></ul>
  13. 13. <ul><li>Cuando el HPV se está replicando en las células produce efectos citopáticos característicos. </li></ul><ul><li>Agrandamiento nuclear, multinucleación, hipercromasia y un alo perinuclear. </li></ul><ul><li>Células con estas características son llamadas koilocitos. </li></ul>
  14. 14. <ul><li>No está claro qué proporción de mujeres que son ADN HPV positivas y subsecuentemente se vuelven negativas quitan el virus de su cuerpo. </li></ul><ul><li>Existen varias explicaciones para esto: </li></ul><ul><li>El sistema inmunológico de la mujer elimina completamente la infección. </li></ul><ul><li>Cuando el sistema inmunológico se activa, la cantidad de virus presente en los tejidos se reduce a niveles indetectables la los métodos </li></ul>
  15. 15. Desarrollo de NIC/SIL en mujeres infectadas con HPV <ul><li>Mujeres con niveles detectables de ADN de HPV de alto riesgo presentan un alto riesgo de desarrollar una anormalidad citológico y una neoplasia cervical de alto grado (NIC 2,3) y cáncer cervical invasivo) comparado con las mujeres que no presentan niveles detectables de ADN de HPV de alto riesgo. </li></ul><ul><li>En los estudios reportados, 17 al 36 % de mujeres infectadas con HPV desarrollaron anormalidades en el papanicolao. </li></ul>
  16. 16. <ul><li> </li></ul><ul><li>La mayoría de anormalidades citológicas son ASCUS </li></ul><ul><li>En conclusión: la detección persistente del mismo tipo d HPV es un evento poco común i se asocia a un riesgo significativamente incrementado de desarrollar una neoplasia cervical o cáncer invasivo. </li></ul>
  17. 17. Métodos para detectar el ADN del HPV <ul><li>Los tres métodos más utilizados para detectar el ADN de HPV en muestras son: </li></ul><ul><li>1. Solution hybridization methods. </li></ul><ul><li>2. Polymerase chain reaction based assays </li></ul><ul><li>3. In situ hybridization (ISH) </li></ul>
  18. 18. Solution Hybridization Methods
  19. 19. Polymerase Chain Reaction (PCR) <ul><li>Proveen la oportunidad de amplificar la secuencia genómica del material. </li></ul><ul><li>Es extremadamente sensible </li></ul>
  20. 20. Polymerase Chain Reaction (PCR) <ul><li>Detectan el ADN del HPV en biopsias o en muestras de citología. </li></ul><ul><li>La ventaja de este método es que mantiene la morfología del tejido. </li></ul>
  21. 21. Manejo de resultados citológicos anormales con ADN de HPV <ul><li>Existen seis áreas en donde los exámenes de ADN de HPV poseen un potencial: </li></ul><ul><li>1. Mujeres con ASCUS </li></ul><ul><li>2. Mujeres post – menopáusicas con LSIL </li></ul><ul><li>3. Seguimiento de adolescentes con LSIL </li></ul><ul><li>4. Seguimiento post colposcopía </li></ul><ul><li>5. Seguimiento post tratamiento de NIC 2 o 3. </li></ul><ul><li>5. Tamizaje de cáncer primario de cérvix conjuntamente con papanicolao. </li></ul>
  22. 22. Mujeres con ASCUS <ul><li>Cada año en U.S.A. se realizan 50 a 60 millones de Papanicolaos y 2.5 millones son reportados coo ASCUS (Atypical squamous cells of undetermined significance). </li></ul><ul><li>En el 2001, la ASCCP desarrolló las guías para el manejo de mujeres con resultados anormales de citología. </li></ul>
  23. 23. <ul><li>Para la elaboración de estas guías se tomó en cuenta la nueva terminología del Sistema Bethesda el cual divide los precursores cervicales de cáncer en bajo grado (LSIL) y en alto grado (HSIL) y dividía a las células escamosas atípicas (ASC) en dos categorías: ASCUS y y atypical squamous cells – cannot exclude HSIL (ASC – H) </li></ul>
  24. 24. <ul><li>Hay tres formas para el manejo de ASC: </li></ul><ul><li>1. Repetir citología cada 4 a 6 meses hasta que salgan 2 resultados negativos. </li></ul><ul><li>2. Colposcopía </li></ul><ul><li>3. Realizar ADN de HPV </li></ul><ul><li>Los estudios indican que los exámenes de ADN son mucho más sensibles que sólo una citología pero que ambos refieren el mismo número de mujeres a colposcopía </li></ul>
  25. 25. <ul><li>Aproximadamente sólo 2/3 de las biopsias confirmadas con NIC 2 o 3 fueron identificadas por colposcopía. Esto indica una colposcopía no excluye un NIC. </li></ul><ul><li>Por lo que se concluyó que el ADN para HPV es el mejor método para manejar una mujer con ASCUS. </li></ul>

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