Your SlideShare is downloading. ×
0
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
la tesis
Upcoming SlideShare
Loading in...5
×

Thanks for flagging this SlideShare!

Oops! An error has occurred.

×
Saving this for later? Get the SlideShare app to save on your phone or tablet. Read anywhere, anytime – even offline.
Text the download link to your phone
Standard text messaging rates apply

la tesis

1,505

Published on

dscripcion de la tesis

dscripcion de la tesis

Published in: Education
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total Views
1,505
On Slideshare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
0
Actions
Shares
0
Downloads
24
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

Report content
Flagged as inappropriate Flag as inappropriate
Flag as inappropriate

Select your reason for flagging this presentation as inappropriate.

Cancel
No notes for slide

Transcript

  • 1. UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA<br />ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA<br />“Estandarización del Ensayo Clonogénico en el Centro de Biología Celular y Molecular utilizando como control positivo de citotoxicidad Doxorrubicina, en las líneas celulares tumorales: MCF- 7 y SK-LU-1”.<br /> Tesis previa a la obtención del título de:<br /> Bioquímico-Farmacéutico<br />Autor:<br />Gabriela Elizabeth Parra Celi<br />Directora:<br />Dra. Natalia Bailón Moscoso<br />
  • 2. UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA<br />“Estandarización del Ensayo Clonogénico en el Centro de Biología Celular y Molecular utilizando como control positivo de citotoxicidad Doxorrubicina, en las líneas celulares tumorales: MCF- 7 y SK-LU-1”.<br /> Tesis previa a la obtención del título de:<br /> Bioquímico-Farmacéutico<br />Autor:<br />Gabriela Elizabeth Parra Celi<br />Directora:<br />Dra. Natalia Bailón Moscoso<br />
  • 3. INTRODUCCIÓN<br />Procesos de disección<br />
  • 4. INTRODUCCIÓN<br />Factores de Crecimiento, Hormonas, extractos embrionarios, <br />CULTIVOS CELULARES<br />Medio Estéril<br />Humedad<br />pH<br />Temperatura<br />
  • 5. UTILIDAD DE LOS CULTIVOS CELULARES <br />Sistemas Modelo<br />Ensayo Tóxico<br />Investigación sobre Cáncer<br />Investigación y desarrollo de Fármacos<br />
  • 6.  CULTIVOS CELULARES Y CÁNCER<br />
  • 7. CITOTOXICIDAD<br />Viabilidad<br />Supervivencia<br />Metabólicos<br />Transformación<br />Irritabilidad<br />
  • 8.  ENSAYO CLONOGÉNICO<br />
  • 9. OBJETIVOS ESPECÍFICOS :<br />Establecer la densidad celular adecuada para el Ensayo Clonogénico, en MCF-7 y SK-LU-1<br />Establecer el tiempo de incubación adecuado post-tratamiento para el ensayo clonogénico en ambas líneas celulares tumorales humanas utilizadas.<br />Establecer mediante curvas dosis-respuesta, las concentraciones más efectivas a ser usadas como controles positivos en el Ensayo Clonogénico. <br />
  • 10. MATERIALES Y METODOS<br />Modelos Biológicos<br />MCF-7<br />SK-LU-1<br />
  • 11.  REALIZACIÓN DEL ENSAYO CLONOGÉNICO<br />DENSIDAD CELULAR<br /> Y<br />TIEMPO DE INCUBACIÓN<br />POST-TRATAMIENTO<br />100 cel/caja<br />200 cel/caja<br />300 cel/caja<br />9 cajas por cada día de incubación<br /> <br />Incuba a 37ºC por (7, 10 y 13 días)<br /> <br /> Incubaron 27 cajas por cada ensayo<br />
  • 12. Tratamiento con DOX<br /> <br />Incuba a 37ºC por (10 días)<br /> <br /> Incubaron 18 cajas por cada ensayo<br />
  • 13. RESULTADOS Y DISCUSIÓN<br />DENSIDAD CELULAR<br /> Y<br />TIEMPO DE INCUBACIÓN<br />POST-TRATAMIENTO<br />Gráfico 3.1.Porcentaje de supervivencia celular de células tumorales humanas de adenocarcinoma de mama (MCF-7) a diferentes densidades y tiempos de incubación post-tratamiento. Cada barra representa la media ± la desviación estándar del promedio de tres experimentos por triplicado. **(P&amp;gt;0.01)<br />
  • 14. DENSIDAD CELULAR<br /> Y<br />TIEMPO DE INCUBACIÓN<br />POST-TRATAMIENTO<br />Grafico 3.2.Porcentaje de supervivencia celular de células tumorales humanas de adenocarcinoma de pulmón (SK-LU-1) a diferentes densidades y tiempos de incubación post-tratamiento. Cada barra representa la media ± la desviación estándar del promedio de tres experimentos por triplicado.<br />
  • 15. TRATAMIENTO CON DOX<br />Grafico 3.3. Estandarización de la dosis de Doxorrubicina como control positivo en células MCF-7 (Cáncer de mama). Cada barra representa la media ± la desviación estándar del promedio de tres experimentos por triplicado. Se indica el error estándar en cada caso. *(P&amp;lt;0.05) **(P&amp;lt;0.01)<br />
  • 16. Gráfico 3.4Estandarización de la dosis de Doxorrubicina como control positivo en células SK-LU-1 (Cáncer de pulmón). Cada barra representa la media ± la desviación estándar del promedio de tres experimentos por triplicado. Se indica el error estándar en cada caso.**(P&amp;gt;0.01) *** (P&amp;lt;0.001).<br />
  • 17. CONCLUSIONES<br />Al establecer la densidad celular en las líneas celulares tumorales MCF-7 y SK-LU-1 para la aplicación del ensayo clonogénico, se determino que la densidad más adecuada sea 200 células/caja<br /> <br />Se determinó que el tiempo mas apropiado para la aplicabilidad de nuestro ensayo para ambas líneas celulares fuera 10 días de incubación.<br /> <br />En nuestro ensayo se comprobó que las dosis elegidas como control estarían entre (0,05 y 0.1ug/ml) para las células SK-LU-1 y para la línea MCF-7 la dosis 0.1ug/ml.<br />
  • 18. Gracias..<br />

×