Fassio cefar 2011

Corso di Aggiornamento Con il patrocinio di XX^ Edizione Corso CEFAR SIBioC LE PROTEINE: Società Italiana di Biochimica Clinica e Biologia Molecolare Clinica dal laboratorio alla clinica 20 ottobre 2011 Firenze Valutazione della introduzione della diagnosticaMicroarray in allergologia dal punto di vista tecnico- analitico e possibili risvolti clinici Maria Totaro Filippo Fassio AOU-Careggi Immunologia e Terapie Cellulari Direttore Prof. E. Maggi

Diagnostica allergologica - Cronologia Diffusione Caratterizzazione Primi allergeni Pannelli con mondiale delle IgE clonati allergeni ImmunoCAP ricombinanti ISAC ® Provocation test RAST* Primo biochip con determinanti allerg.1880 1967 1988-91 1995-1999 2000 2007In-vivo testing In-vitro testing Component-resolved diagnosis

Cosè un biochip ?E’ un supporto solido sul qualedifferenti molecole native ericombinanti sono state fissate inuna precisa disposizione così daformare un array microscopico.Questo permette il monitoraggiosimultaneo e in parallelo delleInterazioni biologiche conpiccole quantità di campione e direagenti. ~ 200 µm Array = disposizione, matrice Micro = microscopica ~ 100 picogrammi allergene / spot > 100 allergeni / cm²

Component Resolved Diagnosis Gli estratti allergenici contengono sia molecole allergeniche che non allergeniche e sono difficili da standardizzare. I cosidetti pan-allergeni sono presenti in diverse fonti allergeniche e inducono cross- reattività tra gli estratti allergenici. Le singole molecole allergeniche sono markers di una reale sensibilizzazione nei confronti di una fonte allergenica.

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari Il microarray: nella pratica… Allergopatie respiratorie Allergia al latex Allergeni meno frequenti Allergia alimentare

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergopatie respiratorie…Discriminare tra co-sensibilizzazione e cross-reazioneIdentificare i pazienti più idonei all’immunoterapia

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergopatie respiratorie… Michele, 47 anni, soffre da alcuni anni di rinocongiuntivite nel periodo primaverile. Il suo medico lo invia all’allergologo, che effettua prick test. Graminacee +++ Betulla ++ Olivo ++

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergopatie respiratorie……co-sensibilizzazione o cross-reazione?

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: questa “ovviamente” è… Co-sensibilizzazione! (Graminacee, Olivo, Betulla)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: oppure no? Cross-reazione! (solo Graminacee con Phl p 12: Profilina)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: latex… Marta, paziente di 38 aa, lavora come cuoca. Soffre di asma bronchiale di grado lieve, con sporadiciattacchi d’asma in vari momenti della giornata, sia a casa che al lavoro. Marta sa già di essere allergica ad alcuni pollini ed all’acaro della polvere, ma….

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: latex…

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergeni meno frequenti…

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergeni meno frequenti… Franco, 44 anni, con rinite ed asma bronchiale, giunge all’osservazione per recente peggioramento della sintomatologia Continua la tp già in atto da 3 anni con CCS nasali ed associazione CCS +beta2agonista inalatorio, che fino a pochi mesi prima aveva garantito un ottimo controllo della sintomatologia Il PT conferma le precedenti polisensibilizzazioni a pollini ed acari, senza sostanziali modifiche Il paziente nega sostanziali modifiche al proprio stile di vita (casa,lavoro, sport, hobbies…)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergeni meno frequenti… Sarebbe emersa la positività senza un test multiplex?

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare…Una giovane paziente si rivolge allo specialista allergologo a causa di episodi recidivanti di angioedema...gli episodi erano iniziati fin dall’infazia ed erano scatenati dall’assunzione di frutta con guscio...

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… Il prick test è risultato positivo per: • Nocciola (+++) • Noce (+/-) • Pinolo (+/-)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… Dosaggio IgE totali (RIST): 37 kU/lDosaggio IgE specifiche per inalanti: tutte < 0.10 kUI/l Dosaggio IgE specifiche per alimenti: • Nocciola 3,07 kUI/l • Noce 0,12 kUI/l

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10) Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2) Cor a 8: LTP Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… A cosa è allergica la paziente? Cor a 1 Cor a 2 Cor a 8 Cor a 9

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… …ed il risultato esatto è… Negativo! …confermato su ImmunoCAP (Cor a 1, Cor a 8, Bet v 2)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari CRD: allergia alimentare… …perché 103 molecole sono molte… …ma in natura ce ne sono DI PIU’…

Università degli Studi di Firenze SOD Immunologia e Terapie Cellulari Ed alla fine… …alla prossima puntata…

Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 fassio.filippo@gmail.com Grazie!

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Fassio cefar 2011

by filfassio on Nov 01, 2011

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