1. Laura Montoya Trejos
Felipe Hernández Restrepo
Teacher Lina Martínez
Medicine Faculty
III Semester

2. STAPHYLOCOCCUS
Are
microorganisms
that are present
in the mucous
and skin of
humans which
includes 35
species and 17
subspecies.
Grow easily on most
bacteriological
media, crop growth
is better in the
middle mannitol salt
and blood agar

3. STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Is resistant to penicillin, and this
has become a major challenge for
the medical community.
 Staphylococcus aureus can kill
heart failure due to endocarditis

4. MICROBIOTA
It can be defined as microorganisms
that are often found in various parts
of the body, associated with normal
tissues skin and mucosa of the
human body in healthy individuals
These help in the digestion of food,
produce vitamins and protect against
colonization by other microorganisms
which may be pathogenic

5. ELECTROPHORESIS
Is called electrophoresis technique whereby the biomolecules in solution
are separated when they are subjected to an electric field.
The separation is given by the electric charge and the molecular weight

6. PCR
The objetive of this
technique is the
amplification of genes
or DNA fragments or
indirectly through
RNA, present in
diverse mixtures of
different sourses

7. GENERAL OBJECTIVE
Theaim of thiswork was to
optimize the study of
Staphylococcus species
diversity in human breast
milk and neonate stool.

8. MATERIALES Y METODOS
CEPAS BACTERIANAS
Un total de 47 cepas de estafilococos se
incluyeron en el estudio
40 aislamientos de la Autoridad de salud
Fracesa
7 cepas tipo de Staphylococcus
obtenidos de la colección Checa de
Microorganismos.

9. MATERIALES Y METODOS
PACIENTES
2
1
El banco de leche materna
proporciona 22 alícuotas de
las muestras de leche
pasteurizada de diferentes
madres
Treinta muestras de heces fueron recolectadas
de 3 niños que habían sido admitidos en la
unidad de cuidado intensivo neonatal del
Hospital de la Universidad de Montpellier.

10. MATERIALES Y METODOS
EXTRACCION DEL DNA
• Se extrajo el ADN de las bacterias
aisladas de heces y muestras de
leche
• Se hicieron algunas modificaciones
en los protocolos publicados
previamente para optimizar la
extracción de ADN de las heces y
la leche

11. FUNDAMENTO DE LA
EXTRACCION DEL DNA
EXTRACCION DEL ADN
1. Lisis celular
2. Precipitación de proteínas
3. Precipitación de DNA
4. Almacenamiento
Precipitación del RNA
(RNAsa)

12. MATERIALES Y METODOS
PCR
FUNDAMENTO PCR
1. Desnaturalización del DNA para dar hebras sencillas
2. Hibridación especifica de la hebra sencilla con un
oligonucleotido
3. Replicación de la hebra sencilla por una DNA polimerasa a
partir del olignonucleotido anterior como cebador
Se realizo esto para amplificar el gen tuf, se hizo por medio de 3 pares de primers

13. MATERIALES Y METODOS
ELECTROFORESIS
Es unatécnica mediante la cual se
separan las biomoléculas en disolución
cuando se ven sometidas a un campo
eléctrico.
Electroforesis en gel de gradiente de
temperatura utiliza ya sea una
temperatura o gradiente químico
para desnaturalizar la muestra
cuando se mueve a través de un gel
para separar acidosnucleicos

14. MATERIALES Y METODOS
ELECTROFORESIS
En un gradiente con
temperatura las hebras de
ADN comenzaran a
separarse y la velocidad
con la que se mueven
comienza a disminuir
TGGE no sólo separa las
moléculas , pero da
información adicional
acerca de comportamiento
de fusión y la estabilidad
TGGE proporciona un
metodo secuencia
dependiente - tamaño
independiente, para
separar moléculas de ADN
.

15. MATERIALES Y METODOS
FRLP
Los RFLP son marcadores genéticos del
ADN y se pueden encontrar en regiones
que codifican proteínas o exones, en los
intrones o en el ADN que separa un gen
de otro.
La técnica RFLP se usa como marcador
para identificar grupos particulares de
personas con riesgo a contraer ciertas
enfermedades genéticas, en ciencia
forense, en pruebas de paternidad.

16. MATERIALES Y METODOS
SECUENCIACION
Es un conjunto de métodos
para la determinación del
orden de
los nucleótidos (A, C, G y T) en
un oligonucleótido de ADN.
Este método es útil en el estudio de
la investigación básica de los
procesos biológicos fundamentales, y
en la ciencia forense.

17. El ADN de un
individuo se
extrae y se
purifica.
El ADN
purificado
puede ser
amplificado
usando la
PCR
Las enzimas
reconocen
secuencias cortas
específicas en el
ADN donde cortan
formando
fragmentos de
distintas
longitudes.
luego tratado con
enzimas de
restricción
específicas para
producir
fragmentos de ADN
de diferentes
longitudes.
Los
fragmentos
de restricción
se separan
mediante elec
troforesis
Esto proporciona
un patrón de
bandas que es
único para un
ADN en
particular

18. RESULTADOS

20. •De las 18 solo se discriminaron 15 bandas.
Se discriminaron con RFLP:
•S. Haemolyticus (182 y 139pb) - S. Scheiferi (no)
(Bmpl)
•S. Cohnni (160 y 161pb) – S. Capitis (no) (Folk)
•S. Caprae (140, 114, 53,13pb) – S. Lugdunensis
(140 y 180pb) (Acul)

22. DISCUSSION

23. AUTHOR
WHAT HE SAID
YES/NO
Ghebremedhin, B
16SrRNA
gene
isinsufficienttoidentifyStaph
ylococcusspecies
and
providesidentificationonlytot
hegenuslevelorfor
a
groupofspecies in thegenus.
YES
Dahllöf, Drancourt and
Raoult
TherpoB
gene,
proposedforcommunityanal
yses,
has
classicallybeenusedfortheid
entificationofstaphylococcib
ecauseitis
more
discriminativethenthe 16S
rRNA
gene
amongstaphylococci.
NO

24. 1. Thisresearchshowedthatifallthehospitals in
theworldmakethisexamtoalloftheneonates,
wecouldpreventthepropagationoftheagent.
2. Thetuf-PCR TTGE examisveryeffective and fasterthanthe culture,
whichfacilitatestheattention in thehospitals.
3. However culture
itsveryimportantbecauseitallowedustoiddentificateotherspeciesthatthe PCR
didnotiddentificate.
4. The diagnosis isveryimportantbecauseitcouldsavethebaby’slife and
makehimnottosuffertheconsequensesofhavingtheagentinsideofhim.

27. THANK YOU