BIOPSIAS

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metodos de la Anatomia Patologica

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  • Lesión de piel sospecha de Melanoma
  • BIOPSIAS

    1. 1. Biopsias Cátedra de Anatomía Patológica. Facultad de Medicina. U. N. T.
    2. 2. OBJETIVOS <ul><li>Definir biopsia </li></ul><ul><li>Señalar los aspectos generales, características primordiales e importancia de una biopsia </li></ul><ul><li>Describir las principales características de los diferentes tipos de biopsias </li></ul><ul><li>Manejar el tejido bajo las normas adecuadas para su fijación, rotulación y envío. </li></ul><ul><li>Interpretar el informe anatomo patológico y su significado clínico terapéutico. </li></ul>
    3. 3. MÉTODOS DE LA ANATOMÍA PATOLÓGICA <ul><li>Patología Postmortem. Autopsias </li></ul><ul><li>Patología Quirúrgica. Biopsias </li></ul><ul><li>Citopatología </li></ul><ul><li>Experimental </li></ul><ul><li>Otros </li></ul>
    4. 4. BIOPSIA <ul><li>“ Método de la anatomía patológica que estudia los tejidos obtenidos de pacientes vivos con fines diagnosticos, pronósticos y de seguimiento” </li></ul>
    5. 5. TIPOS DE BIOPSIA <ul><li>De órgano </li></ul><ul><ul><li>Total </li></ul></ul><ul><ul><li>Parcial </li></ul></ul><ul><ul><li>Intraoperatoria </li></ul></ul><ul><li>Punción Biopsia </li></ul>Incisional Excisional Dirigidas No dirigidas
    6. 6. TIPOS DE BIOPSIA <ul><ul><li>Dirigida </li></ul></ul><ul><ul><li>Endoscopica </li></ul></ul><ul><ul><li>Colposcópica </li></ul></ul><ul><ul><li>Dermatoscópica </li></ul></ul><ul><ul><li>Estereotaxica </li></ul></ul><ul><li>No Dirigida </li></ul><ul><li>A ciegas </li></ul>
    7. 7. BIOPSIA INCISIONAL <ul><ul><li>Cuando toma parte de la lesión. </li></ul></ul><ul><ul><li>Ej: punch de en lesion extensa de piel </li></ul></ul><ul><ul><li>biopsia endoscópica en tumor >2cm </li></ul></ul>
    8. 8. BIOPSIA ESCISIONAL <ul><ul><li>Cuando en la muestra se extrae la lesión en su totalidad. </li></ul></ul><ul><ul><li>Ej: losange de piel </li></ul></ul><ul><ul><li>polipectomía </li></ul></ul>
    9. 9. BIOPSIA ESCISIONAL
    10. 10. BIOPSIA DE ÓRGANO <ul><li>Consiste en el estudio de materiales obtenidos durante un acto quirúrgico, generalmente el material está representado por todo o parte de un órgano. El procesamiento se realiza en base a un protocolo pre establecido que indica pautas que van desde la apertura de la pieza hasta obtención de muestras representativas. </li></ul>
    11. 11. ÓRGANO TOTAL
    12. 12. ÓRGANO TOTAL
    13. 13. ÓRGANO PARCIAL
    14. 14. BIOPSIAS DIRIGIDAS <ul><ul><li>Biopsias endoscópicas: es un tipo de biopsia dirigida que permite la obtención del material de órganos huecos ( tubo digestivo, árbol respiratorio, vias urinarias) o cavidades (pleural, pericardica, abdominal) </li></ul></ul>
    15. 15. BIOPSIAS DIRIGIDAS <ul><ul><li>Biopsias colposcopicas : se utilizan en lesiones precursoras de cuello uterino. </li></ul></ul>
    16. 16. BIOPSIAS DIRIGIDAS <ul><ul><li>Biopsias estereotáxicas: con la ayuda de métodos imagenológicos se localiza tridimensionalmente la lesión y se obtiene tejido. Ej mama y SNC </li></ul></ul>
    17. 17. BIOPSIA DIRIGIDA ENDOSCÓPICA
    18. 18. BIOPSIA INTRAOPERATORIA <ul><li>Es el estudio del material obtenido durante el acto operatorio para determinar la naturaleza de la lesión y emitir un diagnóstico que permita al cirujano adoptar una conducta quirúrgica adecuada. </li></ul>
    19. 19. BIOPSIA INTRAOPERATORIA <ul><li>Requiere de instrumental (criostato) y ambiente adecuados. </li></ul><ul><li>Se utiliza el tejido en fresco. </li></ul><ul><li>Fijador es el frío. </li></ul>
    20. 20. BIOPSIA INTRAOPERATORIA
    21. 21. BIOPSIA INTRAOPERATORIA
    22. 22. BIOPSIA INTRAOPERATORIA
    23. 23. BIOPSIA INTRAOPERATORIA: CONTROL DE MÁRGENES
    24. 24. BIOPSIA DIFERIDA CONTROL DE MÁRGENES
    25. 25. BIOPSIA POR PUNCIÓN <ul><li>Consiste en la obtención de un cilindro de tejido del órgano afectado, utilizando agujas especiales de grueso calibre 0.2cm de diametro. </li></ul><ul><li>Se aplica para el diagnóstico de patologías que afectan a órganos parenquimatosos en forma difusa (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o localizada solida (tumor) </li></ul><ul><li>El material obtenido se incluye totalmente y se procesa en forma seriada. </li></ul>
    26. 26. BIOPSIA POR PUNCIÓN <ul><li>Puede realizarse : </li></ul><ul><li>A ciegas: sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la lesión. </li></ul><ul><li>Dirigida: mediante aparatos que permiten visualizar el sitio de punción (ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de mama con mammotome . </li></ul>
    27. 27. BIOPSIA POR PUNCIÓN
    28. 28. BIOPSIA POR PUNCIÓN DIRIGIDA
    29. 29. BIOPSIA POR PUNCIÓN
    30. 30. BIOPSIA POR PUNCIÓN
    31. 31. PASOS A SEGUIR <ul><li>Recepción del material : todo el material ingresado deberá ir acompañado de los datos personales del paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y características, motivo del estudio solicitado y diagnóstico presuntivo. </li></ul><ul><li>Fijación : permite preservar la estructura y funcion de los tejidos e impedir la autolisis. </li></ul><ul><li>Consiste en sumergir el material en una solución de formol al 10 % en recipiente de boca ancha. </li></ul>
    32. 32. PASOS A SEGUIR <ul><li>Macroscopía: consiste en la inspección del material y su descripción, lo más semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos: </li></ul><ul><li>ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS </li></ul><ul><li>Tamaño, color, forma, superficie externa </li></ul><ul><li>Peso </li></ul><ul><li>Consistencia </li></ul><ul><li>Hallazgos </li></ul><ul><li>Superficie de corte </li></ul>
    33. 33. PASOS A SEGUIR <ul><li>ÓRGANOS HUECOS </li></ul><ul><li>Tamaño, forma, serosa </li></ul><ul><li>Peso </li></ul><ul><li>Pared (espesor, consistencia, hallazgos) </li></ul><ul><li>Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos) </li></ul><ul><li>Luz </li></ul>
    34. 34. PASOS A SEGUIR <ul><li>Existen protocolos de descripción macroscópica tipo. </li></ul><ul><li>Se complementa con la selección de muestras representativas, lo cual también está pre-establecido en los protocolos </li></ul>
    35. 35. PASOS A SEGUIR <ul><li>Procesamiento histológico: Los pasos a seguir son: </li></ul><ul><ul><li>Deshidratación: pases sucesivos en alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2). Permite extraer el agua de los tejidos. </li></ul></ul><ul><ul><li>Baño e inclusión en parafina </li></ul></ul><ul><ul><li>Corte </li></ul></ul><ul><ul><li>Coloración </li></ul></ul>
    36. 36. PASOS A SEGUIR <ul><li>Diagnóstico: en algunos casos se utilizan protocolos microscópicos o breves descripciones microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos que incluirán datos de valor pronóstico y de orientación terapéutica. </li></ul>
    37. 37. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO <ul><li>Debe reunir las siguientes condiciones: </li></ul><ul><li>Datos del paciente </li></ul><ul><li>Descripción macro y microscópica detallada pero concreta </li></ul><ul><li>Protocolo </li></ul><ul><li>Diagnóstico jerarquizado </li></ul><ul><li>Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica. </li></ul>
    38. 38. BIBLIOGRAFÍA <ul><li>Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992 </li></ul><ul><li>Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989. </li></ul><ul><li>Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990 </li></ul><ul><li>“ Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Tucumán, 2001. </li></ul>
    39. 39. Fin de la presentación
    40. 40. BIOPSIA ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS Cátedra de Anatomía Patológica Facultad de Medicina U.N.T.
    41. 41. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO <ul><li>Debe reunir las siguientes condiciones: </li></ul><ul><li>Datos del paciente </li></ul><ul><li>Descripción macro y microscópica detallada pero concreta </li></ul><ul><li>Protocolo </li></ul><ul><li>Diagnóstico jerarquizado </li></ul><ul><li>Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica. </li></ul>
    42. 42. BIOPSIA <ul><li>Técnica de rutina: </li></ul><ul><li>Hematoxilina- eosina </li></ul><ul><li>Coloraciones especiales: </li></ul><ul><li>Giemsa (Helicobacter Pylori) </li></ul><ul><li>Azul Alcian (Esófago de Barret) </li></ul><ul><li>Ziehl Nielsen (BAAR) </li></ul><ul><li>Rojo Congo (Amiloide) </li></ul><ul><li>PAS (Hongos) </li></ul>
    43. 43. OTROS MÉTODOS <ul><li>Microscopía electronica </li></ul><ul><li>Inmunofluoresencia </li></ul><ul><li>Polarización </li></ul><ul><li>Inmunomarcación </li></ul><ul><li>Patología Molecular: </li></ul><ul><li>Captura híbrida </li></ul><ul><li>PCR </li></ul>
    44. 44. MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA <ul><li>- Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos. </li></ul><ul><li>-Utiliza un haz de electrones. </li></ul><ul><li>-Se enfoca por campos magnéticos sobre pantalla fluorescente o placas fotográficas. </li></ul><ul><li>-Se usa por ej. en patología glomerular para detectar cambios mínimos en podocitos,membranas basales,mesangio, etc. </li></ul>
    45. 45. INMUNOFLUORESCENCIA <ul><li>En tejidos sin fijación. </li></ul><ul><li>Usa coloración fluorescente que debe registrarse microfotograficamente por que se degrada. </li></ul><ul><li>Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico </li></ul><ul><li>  </li></ul>
    46. 46. Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture. X 100
    47. 47. POLARIZACIÓN <ul><li>Identifica el carácter birrefringente de ciertos tipos de depósito fibrilar colágeno. </li></ul><ul><li>Por ejemplo: amiloide </li></ul>
    48. 48. INMUNOMARCACIÓN <ul><li>Consiste en la detección de antígenos existentes en células o tejidos </li></ul><ul><li>Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho antígeno. </li></ul><ul><li>Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración marrón del núcleo o citoplasma. </li></ul>
    49. 49. INMUNOMARCACIÓN <ul><li>Epiteliales: citoqueratina 7 y 20. </li></ul><ul><li>Mesenquimáticos: vimentina, desmina. </li></ul><ul><li>Linfoides: antígeno común leucocitario- </li></ul><ul><li>SNC: S100, PGFA- </li></ul><ul><li>HMB 45: melanoma </li></ul>
    50. 50. CANCER DE MAMA Inmunomarcación Estrogénicos Progesterónicos Catepsina D C-erb B-2 (HER2-neu)
    51. 51. PATOLOGÍA MOLECULAR <ul><li>Permite conocer el mecanismo por el cual se origina una neoplasia. </li></ul><ul><li>Aporta información de valor pronóstico. </li></ul><ul><li>Predice en algunos casos la respuesta a la terapia. </li></ul>
    52. 52. VALOR PRONÓSTICO <ul><li>Cambio cromosómico primario: asociado a los mecanismos moleculares responsables de la neoplasia. </li></ul><ul><li>Cambio cromosómico secundario: la enfermedad sigue un curso más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y difícil de obtener una remisión completa. </li></ul><ul><li>Presencia o ausencia de células normales: La ausencia indica peor pronóstico. </li></ul><ul><li>Presencia de dobles diminutos: confiere mayor resistencia a la terapia. </li></ul>
    53. 53. TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS) <ul><li>Permite detectar y localizar secuencias específicas de ADN o ARN. </li></ul><ul><li>Requiere de una desnaturalización (rotura de los enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada. </li></ul><ul><li>Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por complementariedad de bases. </li></ul><ul><li>Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda utilizada. </li></ul>
    54. 54. TIPOS DE SONDA <ul><li>Centroméricas: marcan la región centromérica. Puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas. </li></ul><ul><li>De pintado cromosómico: abarcan todo el cromosoma. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase y translocaciones complejas. </li></ul><ul><li>De secuencia única: marcan regiones cromosómicas muy concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase e interfase. </li></ul>
    55. 55. NUEVAS TÉCNICAS DE HIS <ul><li>Multicolor FISH: 24 sondas de marcado cromosómico marcados con fluorescencia sobre metafase. </li></ul><ul><li>Mulibanding FISH: alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza células en división. </li></ul><ul><li>Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo. </li></ul>
    56. 59. MICROARRAYS <ul><li>Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple se fijan y permiten identificar por hibridación la expresión de una multitud de genes de una muestra biológica. </li></ul><ul><li>Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia. </li></ul><ul><li>Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y Cy5). </li></ul><ul><li>Hibridación sobre el array. </li></ul><ul><li>La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen. </li></ul><ul><li>El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada muestra concreta. </li></ul>
    57. 60. MICROARRAYS <ul><li>Principales aplicaciones: </li></ul><ul><li>Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con comportamiento biológico heterogéneo. </li></ul><ul><li>Evaluación del pronóstico. </li></ul><ul><li>Respuesta al tratamiento. </li></ul>
    58. 61. PCR <ul><li>Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción en cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro de secuencias conocidas del genoma, que permite la detección de deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicos </li></ul>
    59. 62. PCR
    60. 63. NO OLVIDAR <ul><li>Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente. </li></ul><ul><li>Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado. </li></ul><ul><li>Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes. </li></ul><ul><li>Fijación y procesamiento adecuados. </li></ul><ul><li>Descripción macroscópica. </li></ul><ul><li>Diagnósticos microscópicos. </li></ul><ul><li>Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica. </li></ul>
    61. 64. BIBLIOGRAFÍA <ul><li>Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992 </li></ul><ul><li>Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989. </li></ul><ul><li>Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990 </li></ul><ul><li>XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005 </li></ul><ul><li>XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005 </li></ul><ul><li>XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología Molecular. 2005 </li></ul>
    62. 65. Fin de la presentación

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