Metabolitos	
  de	
  excreción	
  de	
  dinoflagelados:	
  
Nuevos	
  retos	
  
	
  
	
  José	
  Javier	
  Fernández	
  
	
...
Producción de poliéteres
Dinoflagelados	
  
TOXINAS
HERRAMIENTAS
FARMACOLÓGICAS
Almería	
  –	
  2012	
  
 Poliéteres	
  fusionados	
  
Brevetoxina B	
  
Organismo:	
   Karenia brevis
Gymnodinium breve
Actividad:	
   Interaccion...
 Macrociclos	
  
ANFIDINOLIDA A	
  
Organismo:	
   Amphidinium sp.
Actividad:	
   Anticancerígeno:	
  
leucemia L1210
cánc...
Poliéteres	
  lineales	
  
PALITOXINA	
  
Organismo:	
   Ostreopsis siamensis	
  
O. ovifrons
Actividad:	
   Interviene en...
Poliéteres	
  lineales	
  
ÁCIDO OKADAICO	
  
Organismo:	
   Prorocentrum: arenarium, belizeanum, concavum,
faustiae, hoff...
Almería	
  –	
  2012	
  
Líneas	
  de	
  inves$gación	
  
I.  Estudio de elucidación estructural de nuevas toxinas
II.  Estudios biosintéticos
III....
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
17
20
24
26
41
40
39
31
35
38
43
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
3
8
19 25
3...
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
17
20
24
26
41
40
39
31
35
38
43
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
3
8
19 25
3...
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
17
20
24
26
41
40
39
31
35
38
43
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
3
8
19 25
3...
O
O
OH
O
O
OO
O
RO
O
OH
OH
OH
OH OH
OH
OH
OH
OH
OOH
OH
OH
OH
OH
OHOH H
OOH
Derivados	
  del	
  Ácido	
  Okadaico	
  
Toxic...
DTX	
  5c	
  
OA	
  diol	
  C-­‐10	
  
	
  	
  Nuevas	
  toxinas	
  DSP	
  
Toxicon	
  2006,	
  47,	
  920-­‐924;	
  Toxic...
Toxicon	
  2006,	
  47,	
  920-­‐924;	
  Toxicon	
  2007,	
  50,	
  470-­‐478,	
  Toxicon	
  2010,	
  56,	
  191-­‐217	
  ...
Prorocentrum	
  belizeanum	
  
Cepa	
  PBMA01	
  
Isla	
  Reunión	
  	
  
(Océano	
  Índico)	
  
	
  
	
  
Almería	
  –	
 ...
20 días
INÓCULO INICIAL
3 ml (7000 células/ml)
TANQUES DE 60 L
42 LITROS DE CULTIVO
ERLENMEYERS 50 ml
20 ml DE CULTIVO
ERL...
Almería	
  –	
  2012	
  
RESIDUO
MEDIO DE
CULTIVO
(1)  Decantación
(2)  Centrifugación, 4 ºC
7000 rpm, 10 min
EXTRACTO EN
ACETONA
18,45 g
CULTIVO
P...
Prorocentrum	
  belizeanum	
  	
  
Extracto	
  de	
  acetona	
  
22.1	
  g	
  
Okadaic	
  Acid	
  
70	
  mg	
  
Belizeanic...
Ácido	
  19-­‐epi-­‐Okadaico	
  
Ácido	
  Okadaico	
  
O
O
OH
O
O
OO
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
17
20
24
26
41
40
3...
Ácido	
  Okadaico	
  
Ácido	
  19-­‐epi-­‐Okadaico	
  
Ácido	
  19-­‐epi-­‐Okadaico	
  :	
  estudio	
  estructrual	
  
Alm...
Ácido	
  19-­‐epi-­‐Okadaico	
  :	
  estudio	
  conformacional	
  
Ácido OkadaicoÁcido 19-epi-Okadaico
C1
C24
C1
C24
R*	
 ...
O
O
OH
O
HO
O
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
24
26
41
40
39
31
35
38
43
OH
OH
16
19
Acido OkadaicoAcido Belizeánico
S*	...
O
O
OH
O
O
O
OH
O
OH
HO
OH
OH
O
44
8
12
43
7 16
25
30
38
O
O
OH
O
O
O
OH
43
16
25
30
38
O
O
HO
HO
OH
OH OH
Ácido	
  Corozá...
O
O
OH
O
O
O
OH
O
OH
HO
OH
OH
O
44
8
12
43
7 16
25
30
38
O
O
OH
O
O
O
OH
43
16
25
30
38
O
O
HO
HO
OH
OH OH
O
O
OH
O
HO
O
O...
Tratamiento del medio de cultivo
RESIDUO
MEDIO DE
CULTIVO
(1)  Decantación
(2)  Centrifugación, 4 ºC
7000 rpm, 10 min
EXTR...
Material Retenido
1,52 g
Fracción H1
0,47 g
Fracción H2
0,38 g
Fracción H3
0,55 g
Lobar® Lichroprep RP-8
CH3OH : H2O 50:50...
 Estudio	
  estructural	
  del	
  Ácido	
  Belizeanólico	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
ESI-
ANÁLISIS LC/MS
MODO TIC
-Total Ion Current-
	
  Análisis	
  mediante	
  HPLC-­‐MS	
  	
  Análisis	
  mediante	
  HPLC...
MALDI-TOF Ácido belizeanólico.MALDI-TOF Ácido belizeanólico.
ESI [M–H]–
m/z 1441,85
MALDI [M+Na]+
m/z 1465,89
MALDI [M+K]+...
 Estudio	
  estructural	
  de	
  Ac.	
  Belizeanólico	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
10 Metilos
21 Metilenos alifáticos
27 Metinos alifáticos
7 Metinos olefínicos
6 Metilenos tipo exo
Heteronuclear Single-Qu...
 Estudio	
  estructural	
  de	
  Ac.	
  Belizeanólico:	
  fragmentos	
  de	
  espin	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
Correlati...
 Estudio	
  estructural	
  de	
  Ac.	
  Belizeanólico:	
  fragmentos	
  de	
  espin	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
Correlati...
 Ac.	
  Belizeanólico:	
  esqueleto	
  de	
  carbono	
  
Heteronuclear Multiple-Bond Correlation spectroscopy (HMBC)
DESPLAZAMIENTO INDUCIDO POR
EFECTO ISOTÓPICO SECUNDARIO
Efecto β en grupos hidroxilo
ΔδC 0,09 - 0,12 ppm
	
  Ac.	
  Belize...
ÁCIDO BELIZEANÓLICO
SINAQO	
  –	
  Córdoba	
  2011	
  
	
  Ac.	
  Belizeanólico:	
  iden$ficando	
  sistemas	
  de	
  anill...
 Belizeanolido	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
BELIZEANOLIDO
Angew. Chem. Int. Ed. 2009, 48, 796.
	
  Belizeanolido	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
Líneas	
  de	
  inves$gación	
  
I.  Estudio de elucidación estructural de nuevas toxinas
II.  Estudios biosintéticos
III....
Cul;vos	
  de	
  Prorocentrum	
  
Medio	
  Guillard	
  K	
  
2,5	
  Litros	
  x	
  7	
  
Adición	
  de	
  an;bió;cos	
  
P...
 Experimento	
  biosinté$co	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
39
4240
35
43
37
32
6
21
44
31
28
11
20
5
29
17
333613
3
18
13
3 ...
c
m
c
m
c
O
O
m
c
m
m
c
m
c
m
O
c
mc
m
c
m
c
O
O
m
m
m
c
m
c
m
O
m
c
m
c
c
O
m
c
m
HO
O
m
OH
m
m
OH
OH
m
m
HO m
m
m:	
  me...
 Experimento	
  biosinté$co	
  
Almería	
  –	
  2012	
  
!
 Propuesta	
  biogené$ca	
  para	
  Ácido	
  Okadaico	
  
Chem.	
  Rec.	
  2004,	
  4,	
  1-­‐9	
  Almería	
  –	
  2012	
  
 Propuesta	
  biogené$ca	
  para	
  Ácido	
  Okadaico	
  
O
O
OH
O
HO
O
O
HO
O
OH
OH
OH
1
44 7
9 11
42
14
24
26
41
40
39
3...
c
m
m
c
m
m
cc
m
c
m
m
c
m
m
O
OH
OHm OH
O
HO
*
*
*
*
*
* OH
*
c
c
m
m
m
m
c
O
O
c
m
c
m
m
c
m
HO
O
m OH
OH
m
**
*
m
c
*
c...
Porpuesta biosintética para Ácido Okadaico
 Propuesta	
  biogené$ca	
  para	
  Ácido	
  Okadaico	
  
O
O
OH
O
O
O
OH
O
OH
HO
OH
OH
O
44
8
12
43
7 16
25
30
38
O
O
OH
...
ÁCIDO COROZÁLICO
ÁCIDO OKADAICO
SN1
-H2O
+H+
	
  Propuesta	
  biogené$ca	
  para	
  Ácido	
  Okadaico	
  
Chem.	
  Eur.	
 ...
 Propuesta	
  biogené$ca	
  para	
  Ácido	
  Okadaico	
  
Chem.	
  Eur.	
  J.,	
  2010,	
  16,	
  11576-­‐11579	
  Almería...
Almería	
  –	
  2012	
  
Nuevos retos
1.-­‐	
  Químicos	
  
Aislamiento	
  y	
  caracterización	
  estructural	
  de	
  me...
Proyectos de Investigación en Curso
PROYECTO COORDINADO SAF2011-28883-CO3	
  
BÚSQUEDA, CARACTERIZACIÓN Y DISEÑO DE
NUEVOS...
 AGL,	
  PPQ,	
  SAF	
  
Agradecimientos
José Franco
Santiago Fraga
Pilar Riobo
Emilio Molina Grima
Francisco García Camac...
Agradecimientos
Grupo de
Productos
Marinos IUBO
Dr. Manuel Norte
Dr. Antonio H. Daranas
Dra. María L. Souto
Dra. Patricia ...
Isla del Hierro (Canarias)!
Volcán submarino!
Noviembre 2011!
Muchas gracias !
Upcoming SlideShare
Loading in …5
×

Metabolitos de excreción de dinoflagelados: nuevos retos

1,045 views
850 views

Published on

Conferencia impartida por José Javier Fenández el 23 de marzo de 2012 en el marco de los Viernes Científicos, actividad organizada por la Facultad de Ciencias Experimentales de la Universidad de Almería

Published in: Education
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
1,045
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
143
Actions
Shares
0
Downloads
0
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

Metabolitos de excreción de dinoflagelados: nuevos retos

  1. 1. Metabolitos  de  excreción  de  dinoflagelados:   Nuevos  retos      José  Javier  Fernández    Ins$tuto  Universitario  de  Bio-­‐Orgánica  “Antonio  González”  (IUBO),  Universidad  de  La  Laguna   (ULL),  Astro@sico  Francisco  Sánchez  2,  38206  La  Laguna,  Tenerife    
  2. 2. Producción de poliéteres Dinoflagelados   TOXINAS HERRAMIENTAS FARMACOLÓGICAS Almería  –  2012  
  3. 3.  Poliéteres  fusionados   Brevetoxina B   Organismo:   Karenia brevis Gymnodinium breve Actividad:   Interacciona con canales de Na+ dependientes de voltaje.   Intoxicación:   NSP   Yessotoxina   Organismo:   Protoceratium reticulatum   Lingulodinium polyedrum Actividad:   Acción sobre fosfodiesterasa   Intoxicación:   DSP   Maitotoxina   Organismo:   Gambierdiscus toxicus   Actividad:   ↑ [Ca2+] intracelular por canales de cationes no selectivos Intoxicación:   CFP   Almería  –  2012  
  4. 4.  Macrociclos   ANFIDINOLIDA A   Organismo:   Amphidinium sp. Actividad:   Anticancerígeno:   leucemia L1210 cáncer de colón carcinoma epidermis KB Intoxicación:   -----   GONIODOMIN A   Organismo:   Goniodoma sp.   G. pseudogoniaulax Actividad:   Reorganiza citoesqueleto   Antifúngico Intoxicación:   -----   ZOOXANTELATOXINA B   Organismo:   Symbiodinium sp. Actividad:   Vasoconstrictora   Intoxicación:   -----   Almería  –  2012  
  5. 5. Poliéteres  lineales   PALITOXINA   Organismo:   Ostreopsis siamensis   O. ovifrons Actividad:   Interviene en las bombas Na+ y K+ Intoxicación:   CFP   ANFIDINOL   Organismo:   Amphidinium klebsii   Actividad:   Disruptor de membrana   Hemolítico Antifúngico Intoxicación:   ----   ÁCIDO OKADAICO   Organismo:   Prorocentrum: arenarium, belizeanum, concavum, faustiae, hoffmanianum, lima, maculosum.   Dinophysis: acuminata, acuta, fortii, mitra, norgevica, rotundata, sacculus, tripos Actividad:   Inhibición PP1 y PP2A   Intoxicación:   DSP   Almería  –  2012  
  6. 6. Poliéteres  lineales   ÁCIDO OKADAICO   Organismo:   Prorocentrum: arenarium, belizeanum, concavum, faustiae, hoffmanianum, lima, maculosum.   Dinophysis: acuminata, acuta, fortii, mitra, norgevica, rotundata, sacculus, tripos Actividad:   Inhibición PP1 y PP2A   Intoxicación:   Diarrhetic Shellfish Poisoning (DSP)   O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 3 8 19 25 347 11 18 20 24 26 33 35 38 Dinophysis sp. Prorocentrum sp. Almería  –  2012  
  7. 7. Almería  –  2012  
  8. 8. Líneas  de  inves$gación   I.  Estudio de elucidación estructural de nuevas toxinas II.  Estudios biosintéticos III.  Aproximación al modo de acción y estudios SAR Almería  –  2012  
  9. 9. O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 3 8 19 25 347 11 18 20 24 26 33 35 38 Ácido  Okadaico   J.  Med.  Chem.  2004,  47,  10-­‐13;  Org.  Le..  2007,  9,  4191-­‐4194      Almería  –  2012  
  10. 10. O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 3 8 19 25 347 11 18 20 24 26 33 35 38 Toxinas  DSP:  análisis    y  control   Ensayo  ratón     Unidad  ratón   Deriva;zar  con     ADAM   Toxicon  2010,  56,  191-­‐217  Almería  –  2012  
  11. 11. O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 3 8 19 25 347 11 18 20 24 26 33 35 38 Toxinas  DSP:  análisis    y  control   Ensayos  de  inhibición  de  proteína  fosfatasa   Toxicon  2010,  56,  191-­‐217  Almería  –  2012  
  12. 12. O O OH O O OO O RO O OH OH OH OH OH OH OH OH OH OOH OH OH OH OH OHOH H OOH Derivados  del  Ácido  Okadaico   Toxicon  2010,  56,  191-­‐217  
  13. 13. DTX  5c   OA  diol  C-­‐10      Nuevas  toxinas  DSP   Toxicon  2006,  47,  920-­‐924;  Toxicon  2007,  50,  470-­‐478,  Toxicon  2010,  56,  191-­‐217           Almería  –  2012  
  14. 14. Toxicon  2006,  47,  920-­‐924;  Toxicon  2007,  50,  470-­‐478,  Toxicon  2010,  56,  191-­‐217           Almería  –  2012   Toxinas  DSP:  análisis    y  control   Análisis  con  ratón   Análisis  HPLC/MS  
  15. 15. Prorocentrum  belizeanum   Cepa  PBMA01   Isla  Reunión     (Océano  Índico)       Almería  –  2012  
  16. 16. 20 días INÓCULO INICIAL 3 ml (7000 células/ml) TANQUES DE 60 L 42 LITROS DE CULTIVO ERLENMEYERS 50 ml 20 ml DE CULTIVO ERLENMEYERS 250 ml 100 ml DE CULTIVO ERLENMEYERS 5 L 2 LITROS DE CULTIVO TRATAMIENTO DEL CULTIVO VOLUMEN TOTAL > 1000 L 50 días 20 días 20 días CULTIVO PARALELO ERLENMEYERS 50 ml 20 ml DE CULTIVO 20 días Medio Guillard-K Temperatura: 22 ºC Irradiancia: 160 µE/m²s Ciclo luz/oscuridad: 16/8  Cul$vos  a  gran  escala  de  Procentrum  belizeanum   Almería  –  2012  
  17. 17. Almería  –  2012  
  18. 18. RESIDUO MEDIO DE CULTIVO (1)  Decantación (2)  Centrifugación, 4 ºC 7000 rpm, 10 min EXTRACTO EN ACETONA 18,45 g CULTIVO Prorocentrum belizeanum 1000 L BIOMASA Diaion® HP-20 1,5 litros/hora Extracción con Acetona Extracción con Metanol EXTRACTO EN METANOL 14,95 g MATERIAL RETENIDO 1,52 g RESTOS CELULARES Tratamiento  del  cul$vo   Almería  –  2012  
  19. 19. Prorocentrum  belizeanum     Extracto  de  acetona   22.1  g   Okadaic  Acid   70  mg   Belizeanic  Acid   0.5  mg   FracTon  B2a   13  mg   FracTon  B2b   135  mg   FracTon  B2   209  mg   Sephadex  LH-­‐20   CH2Cl2:MeOH:n-­‐Hex  (1:1:2)   Lobar  Lichroprep  RP-­‐18   CH3CN:H2O  (1:1)   Lobar  Lichroprep  RP-­‐18   MeOH:H2O  (7:3)   Lobar  Lichroprep  RP-­‐18   MeOH:H2O  (17:3)   Lobar  Lichroprep  RP-­‐18   CH3CN:H2O  (1:1)   Corozalic  Acid   0.6  mg   Okadalactone   1.9  mg   FracTon  B3   5231  mg   FracTon  C   7.14  g   FracTon  A   4.65  g   FracTon  B4   138  mg   HPLC  XTerra   MeOH:CH3CN:H2O  (5:3:2)   HPLC  XTerra   CH3CN:H2O  (1:1)   19-­‐epi-­‐Okadaic  Acid   1.0  mg   FracTon  B   8.11  g   FracTon  B4d   14  mg   FracTon  B1   1742  mg   Esquema  cromatográfico  de    aislamiento   Almería  –  2012  
  20. 20. Ácido  19-­‐epi-­‐Okadaico   Ácido  Okadaico   O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O OH 3 11 18 24 Ácido  19-­‐epi-­‐Okadaico  :  estudio  estructural   Almería  –  2012  
  21. 21. Ácido  Okadaico   Ácido  19-­‐epi-­‐Okadaico   Ácido  19-­‐epi-­‐Okadaico  :  estudio  estructrual   Almería    –2012  
  22. 22. Ácido  19-­‐epi-­‐Okadaico  :  estudio  conformacional   Ácido OkadaicoÁcido 19-epi-Okadaico C1 C24 C1 C24 R*   Org.  Le..  2007,  9,  3045-­‐3048,  Mar.  Drugs  2008,  6,  489-­‐495   O O O OH HO O O OH O O O OH OH 1 7 14 19 25 30 38 39 40 41 42 43 44 Almería  –  2012  
  23. 23. O O OH O HO O O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 24 26 41 40 39 31 35 38 43 OH OH 16 19 Acido OkadaicoAcido Belizeánico S*   S*   Ácido  Belizeánico   Chem.  Eur.  J.  2008,  14,  6948-­‐6956  Almería  –  2012  
  24. 24. O O OH O O O OH O OH HO OH OH O 44 8 12 43 7 16 25 30 38 O O OH O O O OH 43 16 25 30 38 O O HO HO OH OH OH Ácido  Corozálico   Almería  –  2012   Chem.  Eur.  J.,  2010,  16,  11576-­‐11579  
  25. 25. O O OH O O O OH O OH HO OH OH O 44 8 12 43 7 16 25 30 38 O O OH O O O OH 43 16 25 30 38 O O HO HO OH OH OH O O OH O HO O O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 24 26 41 40 39 31 35 38 43 OH OH 16 19 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 17 20 24 26 41 40 39 31 35 38 43 O O OH O O OO O HO O OH OH OH 3 8 19 25 347 11 18 20 24 26 33 35 38 R* Ácido Belizeanico Ácido 19-epi-Okadaico Ácido Corozalico Nuevas  toxinas  de  $po  DSP   Almería  –  2012  
  26. 26. Tratamiento del medio de cultivo RESIDUO MEDIO DE CULTIVO (1)  Decantación (2)  Centrifugación, 4 ºC 7000 rpm, 10 min EXTRACTO EN ACETONA 18,45 g CULTIVO Prorocentrum belizeanum 1000 L BIOMASA Diaion® HP-20 1,5 litros/hora Extracción con Acetona Extracción con Metanol EXTRACTO EN METANOL 14,95 g MATERIAL RETENIDO 1,52 g RESTOS CELULARES Almería  –  2012  
  27. 27. Material Retenido 1,52 g Fracción H1 0,47 g Fracción H2 0,38 g Fracción H3 0,55 g Lobar® Lichroprep RP-8 CH3OH : H2O 50:50 Fracción H31 0,21 g Fracción H32 0,19 g Fracción H33 0,07 g Fracción H34 0,04 g Sephadex® LH-20 CH3OH : CHCl3 33:66 Fracción H32A 0,12 g Fracción H32B 0,04 g HPLC, XTerra® Prep MS C18 AcONH4 2 mM : CH3CN : CH3OH 56:6:38 Ácido belizeanólico 69,3 mg Ácido okadaico 1,7 mg HPLC, XTerra® Prep MS C18 CH3OH : AcONH4 2 mM 70:30 HPLC, Microsorb® 100-8 C18 CH3OH : AcONH4 2 mM 80:20 Belizeanolido 6,7 mg Actividad citotóxica moderada  Cromatogra@a  de  las  aguas  de  cul$vo   Almería  –  2012  
  28. 28.  Estudio  estructural  del  Ácido  Belizeanólico   Almería  –  2012  
  29. 29. ESI- ANÁLISIS LC/MS MODO TIC -Total Ion Current-  Análisis  mediante  HPLC-­‐MS    Análisis  mediante  HPLC-­‐MS   Almería  –  2012  
  30. 30. MALDI-TOF Ácido belizeanólico.MALDI-TOF Ácido belizeanólico. ESI [M–H]– m/z 1441,85 MALDI [M+Na]+ m/z 1465,89 MALDI [M+K]+ m/z 1481,87 C81 H134 O21  MLADI-­‐TOF   Almería  –  2012  
  31. 31.  Estudio  estructural  de  Ac.  Belizeanólico   Almería  –  2012  
  32. 32. 10 Metilos 21 Metilenos alifáticos 27 Metinos alifáticos 7 Metinos olefínicos 6 Metilenos tipo exo Heteronuclear Single-Quantum Correlation spectroscopy (HSQC)
  33. 33.  Estudio  estructural  de  Ac.  Belizeanólico:  fragmentos  de  espin   Almería  –  2012   Correlation Spectroscopy (COSY) Total Correlation Spectroscopy (TOCSY)
  34. 34.  Estudio  estructural  de  Ac.  Belizeanólico:  fragmentos  de  espin   Almería  –  2012   Correlation Spectroscopy (COSY) Total Correlation Spectroscopy (TOCSY)
  35. 35.  Ac.  Belizeanólico:  esqueleto  de  carbono   Heteronuclear Multiple-Bond Correlation spectroscopy (HMBC)
  36. 36. DESPLAZAMIENTO INDUCIDO POR EFECTO ISOTÓPICO SECUNDARIO Efecto β en grupos hidroxilo ΔδC 0,09 - 0,12 ppm  Ac.  Belizeanólico:  iden$ficando  sistemas  de  anillos   Almería  –  2012  
  37. 37. ÁCIDO BELIZEANÓLICO SINAQO  –  Córdoba  2011    Ac.  Belizeanólico:  iden$ficando  sistemas  de  anillos   Angew. Chem. Int. Ed. 2009, 48, 796.
  38. 38.  Belizeanolido   Almería  –  2012  
  39. 39. BELIZEANOLIDO Angew. Chem. Int. Ed. 2009, 48, 796.  Belizeanolido   Almería  –  2012  
  40. 40. Líneas  de  inves$gación   I.  Estudio de elucidación estructural de nuevas toxinas II.  Estudios biosintéticos III.  Aproximación al modo de acción y estudios SAR Almería  –  2012  
  41. 41. Cul;vos  de  Prorocentrum   Medio  Guillard  K   2,5  Litros  x  7   Adición  de  an;bió;cos   Penicilina  G  (40  U/mL)   Sulfato  de  estreptomicina  (200  U/mL)   Adición  de  precursores  enriquecidos     con  isótopos  estables  (0.67  mM)   Recolección     Preparación  del  extracto   Metabolitos  enriquecidos   7  días   1  día   14  días   CHCl3:MeOH   1:1   Cromatograca    Experimento  biosinté$co   Almería  –  2012  
  42. 42.  Experimento  biosinté$co   Almería  –  2012   39 4240 35 43 37 32 6 21 44 31 28 11 20 5 29 17 333613 3 18 13 3 18 36 28 11 20 5 33 29 17 31 21 6 32 44 37 43 35 40 42 39 A) B)
  43. 43. c m c m c O O m c m m c m c m O c mc m c m c O O m m m c m c m O m c m c c O m c m HO O m OH m m OH OH m m HO m m m:  meTlo  de  acetato;  c:  carboxilo  de  acetato;  c-­‐m:  unidad  de  acetato O O O O O O O HO O OH OH OH HO A B C D E POLICÉTIDO  CLÁSICOCICLO  DE  KREBS  ?   REAGRUP.  TIPO  FAVOSKI  ?          Incorporación  de  13C  en  Ácido  Okadaico   Almería  –  2012  
  44. 44.  Experimento  biosinté$co   Almería  –  2012   !
  45. 45.  Propuesta  biogené$ca  para  Ácido  Okadaico   Chem.  Rec.  2004,  4,  1-­‐9  Almería  –  2012  
  46. 46.  Propuesta  biogené$ca  para  Ácido  Okadaico   O O OH O HO O O HO O OH OH OH 1 44 7 9 11 42 14 24 26 41 40 39 31 35 38 43 OH OH 16 19 Chem.  Eur.  J.  2008,  14,  6948-­‐6956   Ac.  Belizeánico   Almería  –  2012  
  47. 47. c m m c m m cc m c m m c m m O OH OHm OH O HO * * * * * * OH * c c m m m m c O O c m c m m c m HO O m OH OH m ** * m c * c m m c m m cc m c m m c m m O OH OHm OH O HO * * * * * * OH * m c c c m m m m c O O c m c m m c m HO O m OH OH m ** * * O O HO HO 4 43 16 OH O * * * 12 8 Porpuesta biosintética para Ácido Okadaico Almería  –  2012  
  48. 48. Porpuesta biosintética para Ácido Okadaico
  49. 49.  Propuesta  biogené$ca  para  Ácido  Okadaico   O O OH O O O OH O OH HO OH OH O 44 8 12 43 7 16 25 30 38 O O OH O O O 43 16 25 30 38 O HO HO OH OH OH Chem.  Eur.  J.,  2010,  16,  11576-­‐11579  Almería  –  2012  
  50. 50. ÁCIDO COROZÁLICO ÁCIDO OKADAICO SN1 -H2O +H+  Propuesta  biogené$ca  para  Ácido  Okadaico   Chem.  Eur.  J.,  2010,  16,  11576-­‐11579  Almería  –  2012  
  51. 51.  Propuesta  biogené$ca  para  Ácido  Okadaico   Chem.  Eur.  J.,  2010,  16,  11576-­‐11579  Almería  –  2012  
  52. 52. Almería  –  2012   Nuevos retos 1.-­‐  Químicos   Aislamiento  y  caracterización  estructural  de  metabolitos     con  estructuras  y  esqueletos  químicos  singulares.  Estudio   de  nuevas  rutas  biosinté;cas     2.-­‐  Farmacológicos   Establecimiento  de  nuevos  modos  de  acción  e   iden;ficación  de  nuevas  dianas  moleculares     3.-­‐  Biotecnológicos   Desarrollo  de  procesos  biotecnológicos  que  permitan  la   explotación  industrial  de  las  nuevas  en;dades  químicas    
  53. 53. Proyectos de Investigación en Curso PROYECTO COORDINADO SAF2011-28883-CO3   BÚSQUEDA, CARACTERIZACIÓN Y DISEÑO DE NUEVOS COMPUESTOS BIOACTIVOS DE ORGANISMOS MARINOS BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL DE MICROALGAS MARINAS DINOFLAGELADAS Y SUSTACIAS BIOACTIVAS DERIVADAS EVALUACIÓN FISIOLÓGICA Y BIOQUÍMICA DE LOS EFECTOS EN EL SNC DE FICOTOXINAS MEDIANTE SISTEMAS EXPERIMENTALES IN VITRO BASADOS ENCULTIVOS PRIMARIOS Y ORGANOTÍPICOS. COMPUESTOS BIOACTIVOS DE ORGANISMOS MARINOS: ESTUDIOS ESTRUCTURALES, FARMACOLÓGICOS Y BIOTECNOLÓGICOS
  54. 54.  AGL,  PPQ,  SAF   Agradecimientos José Franco Santiago Fraga Pilar Riobo Emilio Molina Grima Francisco García Camacho Asterio Sánchez Juan José Gallardo Mª Carmen Ceron María Teresa Fernández Antonello Novelli José Gavín
  55. 55. Agradecimientos Grupo de Productos Marinos IUBO Dr. Manuel Norte Dr. Antonio H. Daranas Dra. María L. Souto Dra. Patricia Cruz Dr. José Napolitano Dr. Francisco Cen Lcda. Tamara Vilches Lcdo. Humberto Rodríguez Lcdo. Alexio Ronchial
  56. 56. Isla del Hierro (Canarias)! Volcán submarino! Noviembre 2011! Muchas gracias !

×