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Fiebre porcina clasica

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  • 1. FIEBRE PORCINA CLASICA
  • 2. FIEBRE PORCINA CLÁSICA Afecta Cerdos domésticos y Salvajes/ de vida silvestre Familia Flaviviridae Género Flavivirus Hepaticivirus Pestivirus Fiebre porcina clásica Diarrea viral bovina Enfermedad de la fronteraMVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 3. CA VR IA RC UT SERISTI • ARN de cadena simple, polaridad positiva,C • Forma esférica, • 50 nm diámetro,A • Coeficiente de sedimentación de 40-45SS • Longitud 12.284 nucleótidos aprox. • Un serotipo • Una proteína de cápsula adherente y tres proteínas de membana (Erns, E1 y E2) • El extremo 5 del genoma tiene un tope y el extremo 3 ‘ no es poliadenilado – en lugar hay un bucle 3‘ u horquilla MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 4. Resistencia viral • El virus puede permanecer meses en carne refrigerada o congelada. • Temperatura: < 60°C • Inactiva pH >11.0 o pH <3.0 • Químicos: cloroformo, ß-propiolactona 0.4% • Desinfectantes: Hipoclorito 2%, cresol 6%, fenol 5%, cresol, hidroxido de sodio 2%, formalina 1%, carbonato de sodio 4%, detergentes ionicos y no ionicos, ionoforos 1% MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 5. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 6. Erradicada: Canadá, EUA, Nueva Zelanda y gran parte de Europa central.Actualmente son pocos los paises libres de FPC. Es endémico en el jabalí de algunas regiones de Europa.En México, el 87% de las presentaciones corresponden a los cerdos de traspatio (34% de la producción). Se ha estimadoque por cada reporte de brote, hay tres más en granjas comerciales y diez en las explotaciones de traspatio aledañas. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 7. Impacto económico•Impacto en producción: Mortalidad, infertilidad, otros efectos en lasalud.•Pérdida de mercados de importación y exportación−Cerdos yproductos de carne de puerco•Pérdidas $ por control: Cuarentena, sacrificio.•1997-1998: Países Bajos−400 piaras afectadas−12 millones de cerdos sacrificados−$2.3 mil millones MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 8. Situación en México• 1972 Primer experiencia de vacunación en el Bajío con resultados poco satisfactorios.• 1980 campaña de erradicación obteniendo para 1983 Sonora como libre.• 1983- 1993 inmunización 93% cerdos y se redujo a cero la incidencia  prohibición de vacunación.• 1996 se declaran Sonora y Yucatán libres.• 1998 rebrote y se difundió. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 9. Situación en México Situación en México• 1999 operativo de vacunación intensiva contra FPC en cerdos de traspatio, incluyó 11 estados en control de FPC. El estado de Puebla fue el de mayor número de cerdos vacunado.• 2003 se divide al país en zona libre (Sonora y Yucatán) y en control el resto del país.• 2006 se prohíbe vacunación .• 2009 Aparición de dos focos en Cocula, Guerrero en una granja porcina con fines didácticos propiedad del Colegio agropecuario del Estado de Guerrero. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 10. TRANSMISIÓN• Virus en sangre y todos los tejidos, secreciones y excreciones de animales enfermos y muertos ,• Animales subclínicos eliminan virus silenciosamente,• Ingestión “escamocha”, contacto directo, inseminación,• Infección trasplacentaria,• Personal, comerciantes de porcinos ,• Contacto indirecto a través de los locales, herramientas, vehículos, ropa, instrumentos y agujas,• Alimentos a base de desechos insuficientemente cocidos (subproductos cerdo).• En la carne y productos cárnicos infectados, virus permanece hasta 4 años.NO SE TRANSMITE AL HUMANO MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 11. PATOGENIA FPCV Replicación viral Vasos linfáticos Linfonodos adyacentes Células epiteliales de criptas tonsila. TLAM bazo intestino Linfonodos médula mesentericosMVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 12. Los viriones se pegan a la superficie de la celula huesped  endocitosis mediada por receptores del huesped formación de vesiculas endosomales que al acidificarse provocan cambios en la estructura del virion  fusion demembranas de la celula huesped y el virion  desmontaje de particulas  Genoma viral liberado dentro delcitoplasma (el RNA positivo se traduce a una poliproteina que es procesada co y post trancicionalmente por lasproteasas del huesped y el virus)Ensamblaje del virus en superficie del retículo endoplasmático  partículas virales inmaduras y subvirales inmaduras+ acción furinas proteasas partículas virales maduras e infecciosas  liberadas por exocitosis MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 13. •Incubación: 2-14 dias•Los signos clínicos varían en cuanto a la edad ysusceptibilidad de los cerdos.•Presentación: subaguda, aguda, crónica, congénita,subclínica•Las cepas más virulentas = enfermedad grave,•Cepas menos virulentas = elevado porcentaje deinfecciones crónicas de grado moderado o asintomáticascon eliminación del virus prolongada e intermitente. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 14. PRESENTACION AGUDA • Fiebre (41°C), anorexia, letargia, amontonamiento, • Hiperemia multifocal, hemorragias en piel. • Cianosis de piel en extremidades, orejas, cola. • Constipación seguida de diarrea amarillenta, Vómito. • Secreción ocular mucosa a sanguinolenta, conjuntivitis, en ocasiones la secreción “pega” las conjuntivas. • Debilidad de miembros posteriores, paso tambaleante que progresa a paresia posterior y “movimientos de carrera” al no poder ponerse en pie. • Disnea, tos • Mortalidad en jóvenes 100% • Muerte de 5-15 días PI MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 15. CRÓNICA:(Cepas de menor virulencia)Signos similares a fase aguda:• Anorexia, depresión, fiebre,• constipación y diarrea,• hemorragias piel,• Recuperación,• Reincidencia y muerte MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 16. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZCONGENITA Y SUBCLINICA(Cepas de menor virulencia)En hembras gestantes infectadas por cepas demenor virulencia: deficiente rendimientoreproductivo.Abortos, momificaciones, lechones conmalformaciones y débiles.Los lechones nacen con temblor congénito,malformaciones de las vísceras y del sistemanervioso central.Pueden mostrarse asintomáticos al nacer yestar infectados persistentemente.
  • 17. LE Necrosis de tonsilas. Úlceras “botonosas” en mucosa intestinal, petequias epíglotis, laringe, y edema pulmonar.SION Hemorragias petequiales o equimóticas en la superficie del riñón, bazo, serosa deE vejiga, epicardio, laringe, tráquea, mucosa de intestinos y tejido subcutáneo.S MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 18. D I A G N Ó S T I C O MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 19. DIAGNÓSTICO Signos Pruebas Lesiones Serología biología Necropsia Aislamiento viral molecularAVISO AUTORIDADES ZOOSANITARIAS antes de tomar o enviar cualquier muestra deanimales sospechosos.Enviar muestras sólo en condiciones de seguridad a laboratorios autorizados paraevitar diseminación de enfermedad.Muestras: * Sangre completa o con EDTA; * Suero, * Órganos 4°C: tonsilas, linfonodos, bazo, riñón, íleon terminal. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 20. •PRRS •Circovirus porcino •Salmonelosis •Erysipela •LeptospirosisDIAGNOSTICO •Enfermedad AujeskyDIFERENCIAL (pseudorabia) •Peste procina africana •Pasteurellosis •Actinobacillosis •Haemophilus parasuis MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 21. PRUEBAS DE LABORATORIO:El Instituto de Virología de Hannover, Alemania es el laboratorio de referencia para FPC enEuropa. Archivos de AV y datos epidemiológicos de brotes de 30 años- presente.• DETECCIÓN DE ANTICUERPOS ESPECÍFICOS: ‐Neutralización de virus por anticuerpos fluorescentes ‐Ensayo de neutralización vinculado con peroxidasa ‐ELISA• DETECCIÓN DE VIRUS O ANTÍGENOS VIRALES: ‐Aislamiento viral ‐Inmunofluorescencia directa ‐Inmunoperoxidasa directa ‐ELISA de captura• DETECCIÓN DE ÁCIDO NUCLEICO VIRAL: ‐RT-PCR MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 22. ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)Las pruebas ELISA pueden detectar reacciones Ag-Ac en lamuestra.Los más utilizados son bloqueo, competición e indirectos;detectan anticuerpos contra todas las cepas del virus de FPC.Como antígeno emplean proteínas virales recombinantesmonoclonales. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 23. Según la NOM-037-ZOO-1995 los sueros procesados para detectar anticuerposcontra FPC por medio de ELISA deben reunir las siguientes características:- Cantidad mínima de suero: 5 ml- Amarillo claro-Traslúcido-Inodoro.Ausencia de partículas en suspensión. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 24. PRUEBA DE INMUNOFLUORESCENCIA (IF)• Prueba de diagnostico oficial en programas deerradicación.•Detecta antígeno viral FPC en cortes finos de tonsilas,bazo, riñón, nódulos linfáticos y porciones distales delíleon teñidos con anticuerpos monoclonales marcadoscon fluoresceína o peroxidasa.•Tonsilas, riñón, hígado, bazo de varios animales ytransportarse en frío 4°C, no congelados. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 25. Resultado POSITIVO:• En tonsilas: fluorescencia de células linfoides y es mas evidente en la línea epitelial de las criptas.• En cortes de riñón, fluorescencia +++ en túbulos proximales y distales del córtex renal y en los conductos colectores de la médula.• En íleon, fluorescencia en células epiteliales de las glándulas de Lieberkünhn,• En el bazo la reactividad es más difusa, con concentraciones de células linfoides en la lámina linfoide periarterial MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZEl resultado negativo por FAT no elimina la posibilidad de infección con FPC.
  • 26. AISLAMIENTO DE VIRUS•El aislamiento de virus en cultivos celulares es un método dediagnóstico de PPC• Es más sensible que IF, pero más lento.•Tonsilas órgano de elección para aislamiento en cerdos muertos osacrificados.•Bazo, el riñón o nódulos linfáticos. El aislamiento se realiza mejor encélulas PK-15, que se dividen rápidamente. Los cultivos se examinanpor IF 24-72 horas después. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 27. REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA transcriptasa reversa (RT-PCR)•Puede evidenciar la presencia del agente aunque el individuo se encuentre en ventanainmunológica•Limitaciones: Necesidad de iniciadores específicos para cada microorganismo lo cualda posibilidad de falsos positivos. Amplificación de diferentes serotipos de FPC y tres cepas vacunales atenuadas. Los productos de la reacción son analizados por electroforesis en agar gel. Líneas 1 y 13: marcadores. Línea 2: 83-114. Linea 3: 92-TN1. Linea 4: 90-YL1. Línea 5: 84-KS1. Línea 6: LPC/TS. Línea 7: LPC/PRK. Linea 8: LPC/AHRI. Línea 9: cepa ALD . Línea 10: Cepa A76. Linea 11: DVBV/NADL. Línea 12: control negativo. Los fragmentos de 367 pb detectadas de cepas silvestres de FPC estan marcados con una flecha . Los productos vacunales 6,7 son ligeramente mas grandes que las cepas silvestres de FPC. Imagen tomada de: Chu-Hsiang Pan, Yu-We Ku, Ming-Hwa Jong, Parn-Hwa Chao, Shiow-Suey Lai. A visual DNA chip for simultaneous detection, genotyping, and differentiation of wild-type and vaccine-type classical swine fever virus. Taiwan Veterinary Journal, 34 (2): 66-76, 2008 MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 28. SECUENCIACIÓN SuplementarObjetivo: Diferenciar los aislados virales de FPC hallazgos Clasificar en grupos los ailamientos epidemiológicos Tener las secuencias en bases de datos públicasEl genoma de FPC ha sido clonado y secuenciado en su totalidad. Contiene un marco abierto de lectura flanqueado por dos regiones no codificantes altamente conservadas (5’NCR y 3’NCR)  Poliproteína 4000 aa • 11 proteínas: • Cuatro estructurales (proteína C, Erns, E1 y E2) • Ocho no estructurales (NPRO, NS3,P7, NS2, NS4A-B, NS5A-B) MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 29. Se demostró la existencia de cuatro dominios antigénicos sobre dos unidadesestructurales de la mitad N-terminal (A, B, C y D) en la glicoproteína E2, de loscuales B y C son altamente conservados y A es completamente conservadoentre todas las cepas de PPC e inducen anticuerpos monoclonalesneutralizantes. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 30. …. Estandarización de un protocolo para secuenciacion de FPCV • 5’ NTR • E2 • NS5B 3’ MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 31. Tiene un serotipo y tres grupos, que a su vez tienen tres o cuatro subgrupos. 1.1 Grupo 1 1.2 1.3 2.1Pestivirus Grupo 2 2.2 2.3 3.1 3.2 Grupo 3 3.3 3.4 MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 32. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZhttp://viro08.tiho-hannover.de/eg/analysis/gt-image/Seiten/Folie06_PNG.htm
  • 33. MEDIDAS DE CONTROLDe acuerdo a la experiencia en la erradicación de otrasenfermedades, se elaboró el Plan Continental para laerradicación de la Fiebre Porcina Clásica de las Américas. Escoordinado por la FAO en colaboración con instituciones nacionalesy organismos internacionales de salud animal, como OIRSA , OIE,PANVET, PANAFTOSA , IAEA y USDA . MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 34. MEDIDAS DE CONTROL• Eliminación de todos los cerdos en las granjas afectadas y sudesinfección,• Prohibición del movimiento de animales en la zona afectada,• Evitar que personal que esta en contacto con cerdos infectadosentre en granjas libres,• Vigilancia epizootiológica y normas de repoblación.• Países con FPC  programas de vacunación• Países libres  monitereo. NO vacunar MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 35. VACUNACION•Disponible en países endémicos. Protege contra laenfermedad, NO elimina las infecciones•Cuatro vacunas de virus vivo modificado:  Cepa “C” lapinizada,  Cepa japonesa adaptada a cultivo celular de cobayo,  Cepa francesa Thiverval adaptada a la linea celular PK- 15  Cepa PAV-250 en PK-15 MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 36. Programa estricto de Medidas DESAPARECERvacunación por tiempo zoosanitarias BROTESprolongado oportunas País LIBRE de FPCUna vez que el país esté libre de la enfermedad, se debeprohibir las vacunaciones y hacer seguimiento serológico a los dosaños de la prohibición con el fin de ERRADICAR la enfermedad. MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ
  • 37. REFERENCIAS:•lii-Milorad, S.; König, M.; Saalmüller, A.; Reddehase M.J.;Thiel, H-J. Pathogenesis ofClassical Swine Fever: B-Lymphocyte deficiency caused by hog cholera virus.J Virol, 1992. vol. 66, pp.1171-1175•Pérez Rodríguez, Lester Josué y Díaz de Arce Landa, Heidy. Peste Porcina Clásica:diagnóstico y control. REDVET Rev. electrón. vet. Vol. IX, Nº 11 Noviembre/2008• Manual de la Pruebas de Diagnóstico y de las Vacunas para los AnimalesTerrestres, OIE 6a ed., 2008•http://www.rlc.fao.org/es/prioridades/transfron/ppc/peste/ppc2.htm• http://www.oie.int/eng/normes/mcode/code2008/en_chapitre_1.15.3.htm•http://www.cfsph.iastate.edu/?lang=en• http://www.vuz.uni-luebeck.de/tautz.htm?&sprache=gb• http://www.jiang.bio.purdue.edu/research.php• http://www.hc-sc.gc.ca/.../wnv-vno_2003_metzel-eng.php• http://www.nature.com/.../n1/box/nrmicro1067_BX1.html• http://www3.niaid.nih.gov/.../flavivirus.htm• http://www.veterinaria.org/.../003/images/image005.jpg• http://www.expasy.ch/viralzone/all_by_species/39.html MVZ FANY ATENEA MARRON LOPEZ

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