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Proteina c-reactiva
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  • 1. MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO - Cronómetro - Lámpara de luz intensa OBTENCIÓN DE LA MUESTRA No se requiere de una preparación especial del paciente antes de la toma de muestra. 1. Obtener 3.0 mL de sangre por punción venosa. 2. Centrifugar y separar el suero. PROTEÍNA C REACTIVA AGENTE DE DIAGNOSTICO Preparación del Diluyente Glicina Salina Concentrado: El frasco de Diluyente Glicina Salina Concentrado se afora con agua destilada al volumen suficiente según corresponda la presentación. Ejemplo:Equipo para investigar por aglutinación de partículas de látex. - 50 mL (para 50 pruebas) - 100 mL (para 100 pruebas) - 40 mL (para 40 pruebas), etcéteraINTRODUCCIÓNTillet y Francis concluyeron en 1930 que la reacción que seorigina en el suero de pacientes que sufren de enfermedades MÉTODO CUALITATIVOinflamatorias precipita con un extracto de pneumococo noproteico llamado polisacárido C. La proteína que causa este NOTA: El látex Anti-PCR debe estar a temperatura ambientetipo de reacción fue llamada Proteína “C” Reactiva. antes de ser utilizado. Como un fenómeno no específico, el incremento en la 1. Colocar en una gradilla un tubo de 13 x 100 mm.concentración de Proteína C Reactiva se puede presentar encualquier proceso inflamatorio agudo (ya sea infeccioso o no 2. Agregar 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salinainfeccioso). La concentración de Proteína C Reactiva concentrado pH 8.2) diluido.generalmente se encuentra por debajo de 6 mg/L en el suero 3. Añadir 0.05 mL del suero problema.de adultos sanos y en enfermedades inflamatorias estos 4. Después de haber agregado el suero problema, la diluciónvalores frecuentemente se incrementan en un lapso de 4 a 8 obtenida será 1:20 y estará lista para su uso.horas después de presentarse un evento agudo alcanzando 5. En un anillo de la placa depositar 0.05 mL del suero diluido.niveles aproximadamente de 20 a 500 mg/L. 6. En otro anillo depositar una gota del frasco No. 2 (suero Varios métodos de inmunoprecipitación se han desarrollado control positivo).para la detección de Proteína C Reactiva. El principio delprocedimiento presentado involucra una reacción 7. En un tercer anillo depositar una gota del frasco No. 3inmunológica entre la Proteína C Reactiva (como antígeno) y (suero control negativo).el anticuerpo correspondiente adsorbido a las partículas de 8. Añadir a cada uno de los 3 anillos una gota del frasco No.látex (látex sensibilizado con anti-Proteína “C” Reactiva). 1 (Látex anti-Proteína «C» Reactiva) previamente resuspendido.PRESENTACIÓN 9. Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos.Catálogo Núm. 102: Equipo para 50 pruebas 10. Realizar la lectura del resultado en este momento bajo una fuente de luz directa.REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO - Antisuero adsorbido a partículas de látex. (látex anti- Interpretación PCR) - Suero Control Positivo Resultado Positivo - Suero Control Negativo Presencia de agregados macroscópicos (aglutinación - Diluyente Glicina Salina, concentrado, pH 8.2 comparable al control positivo). - Placa de reacción - Pipetas desechables (únicamente para las Resultado Negativo presentaciones de 40 y 100 pruebas) Ausencia de agregados macroscópicos (sin aglutinación, comparable al control negativo). La no aglutinación o una ligeraESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO aparición de granulocidad que no exceda a la observada enEl látex anti-PCR así como los controles y el diluyente concen- el control negativo indican un resultado negativo.trado son estables hasta la fecha de caducidad indicada en laetiqueta cuando se almacenan a 2-8°C).
  • 2. MÉTODO SEMICUANTITATIVO BIBLIOGRAFÍA1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba 1. Harrison F. Wood, et. Al. , The Ocurrence During Accute cualitativa. Infections of a Protein not normal present in the blood. J.2. Colocar en una gradilla 5 tubos de 12 x 75 mm y Exp. Medical. numerarlos. 2. Van Lente Frederick, Ph D. The Diagnostic Utility of C3. Depositar al tubo No. 1, 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente Reactive Protein, Human Patology, 1982 ; 13(12) : 106-3. glicina-salina concentrado, pH 8.2) diluido. 3. Tillet, W.S. and Francis, T. Serological reactions in4. Depositar del tubo No. 2 al 5, 0.5 mL del frasco No. 4 pneumonia with a non-protein somatic fraction of (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.2) diluido. pneumococcus.J. Exp. Med. 52: 561-571, (1930).5. Añadir al tubo No. 1, 0.05 mL del suero problema dilución 4. Fischel, E.E., In Laboratory Diagnostic Procedures in 1:20. Mezcle. Rheumatic Diseases. Cohen AS, Ed. Little, Brown, Boston, (1967), pp 20.6. Pasar 0.5 mL del tubo No. 1 al tubo No. 2. Mezcle. 5. Ziegenhagen, G., Drahovsky, D.: klinische Bedeutung des7. Pasar 0.5 mL del tubo No. 2 al tubo No. 3. Mezcle. C-reaktiven Proteins. Med. Klin. 78:24-35 (1983).8. Continuar esta operación hasta el tubo No. 5.9. Depositar 0.05 mL de cada una de las diluciones en anillos Rev. 22/06/02 diferentes de la placa. IN-10310. Añadir una gota del frasco No.1 (látex Anti-Proteína «C» Reactiva) a cada una de las diluciones.11. Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 Proteína C Reactiva. minutos. Equipo para investigar por aglutinación de partículas de látex.12. Realizar la lectura del resultado en este momento. Estandarizada. Compuesto de: Suero control positivo y negativo. Placa de reacción. Antisuero adsorbido a partículas de látex. 2 mL.Interpretación Clave: 080.414.1505 - Propiedad del Sector Salud. NoEl título del suero problema será la última dilución que presente Negociable.agregados macroscópicos (aglutinación). Ejemplo :El título del suero problema será la última dilución que presenteagregados macroscópicos (aglutinación). Ejemplo : Fabricado en México por: Laboratorios Licon S.A.Tubo # 1 2 3 4 ResultadoDilución 1:20 1:40 1:80 1:160 Viveros del Rocío No. 33 + - - - Positivo 1:20 Col. Viveros de la Loma C.P. 54080 Tlalnepantla, Edo. de México + + - - Positivo 1:40 Tel.: (55) 5362-0299 Fax: (55) 5362-1792 + + + - Positivo 1:80SENSIBILIDADLa sensibilidad de látex de anti-PCR es de 0.05 mg/dLLIMITACIONES DEL MÉTODO1. No deben utilizarse sueros turbios, hemolizados o conta- minados para realizar la prueba.2. Para evitar falsos resultados NO es recomendable reali- zar la lectura después de los 2 minutos.

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