Guia aclaratoria de los test para detección de Covid-19

1. GUIA COVID-19: TEST

2. Guía Covid-19: test Eva Fraile Jorge
En la actualidad hay muchas dudas e incógnitas en el entorno a los
test de detección del coronavirus Covid-19. Es por ello por lo que
dentro de esta guía recogen los diferentes test que se están
realizando a día de hoy. Analizándolos uno a uno.
Salamanca 10 de mayo de 2020

3. Guía Covid-19: test Eva Fraile Jorge
ÍNDICE
pag
SITUACIÓN ACTUAL............................................................... 1
RESPUESTA INMUNOLÓGICA............................................... 2
DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR COVID-19.................... 3
TIPOS DE TEST....................................................................... 3
a) Reacción en cadena de la polimerasa....................... 3
b) Test rápido de detección de anticuerpos ................... 4
c) Test rápido inmunoglobulinas G y M.......................... 6
d) Serología................................................................... 8
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS................................... 9

4. Guía Covid-19: test Eva Fraile Jorge
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SITUACIÓN ACTUAL.
Al comienzo de la pandemia, se consideraron personas de riego a todos
aquellos mayores de 65 años, ya que todos ellos tienen su sistema inmunitario
o su capacidad de respuesta alterada, además de factores de riesgo que hacen
que el cuadro de la infección sea más grave, como por ejemplo personas con
patologías respiratorias tipo EPOC o asma. A medida que se han ido
incrementando los casos de personas infectadas se ha visto que la gravedad
no depende solo de presentar estos factores de riesgo, sino también de las
características del organismo de cada persona.
Se llegó a especular que las personas cuyo grupo sanguíneo es el A
(independientemente del Rh) la respuesta inflamatoria a nivel alveolar frente al
Covid-19, era mayor que en personas con otro grupo sanguíneo, y por lo tanto
la gravedad de la infección sería mayor.
Actualmente se sigue y se seguirá investigando para saber porque personas
que no eran consideradas personas de riesgo, han fallecido o el cuadro de la
infección en ellos ha sido tan grave.
Todo esto viene dado por el desconocimiento actual de la evolución del virus
así como las posibles mutaciones que se han especulado que se pueden estar
dando.
En lo referente a la repercusión del Covid-19 en nuestro sistema inmunitario
comenzaremos por la aparición de caso de personas reinfectadas por Covid-
19. Se llegó a pensar que, pese haber superado la infección, no se generaron
suficientes anticuerpos para hacer frente, y por ello volviendo a padecer la
infección. Dando lugar a la teoría de la reinfección para crear inmunidad.
Esta teoría se basa en que sería necesario infectarse en torno a 4-5 veces por
covid-19, para generar suficientes anticuerpos.
Por otro lado, en personas que han padecido la infección se ha valorado la
donación de su plasma, que debería ser rico en anticuerpos frente al Covid-19,
para ser transfundido a personas que están padeciendo la infección y de esta

5. Guía Covid-19: test Eva Fraile Jorge
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forma proporcionarles los anticuerpos de forma externa y superar la
enfermedad.
Puede parecer contradictorio, pero se cree que la respuesta inmunitaria frente
la infección depende de las características propias del sistema inmunitario de
cada individuo, así como su capacidad de generar inmunidad frente al Covid-
19.
RESPUESTA INMUNOLÓGICA.
Nuestro sistema inmunitario está formado por diferente tipo de células. En el
caso del Covid-19 nos centraremos en las inmunoglobulinas o también
denominados anticuerpos.
Todo patógeno tiene en su envoltura unas proteínas denominadas antígenos, a
estos antígenos se unirán los anticuerpos o inmunoglobulinas. De esta forma
nuestro cuerpo trata de destruir dicho patógeno y destruirlo. Una vez
identificado el patógeno se van a generar anticuerpos específicos contra ese
patógeno.
En el caso del Covid-19, las primeras inmunoglobulinas que se van a generar
son las IgM y a medida que progrese la infección se generarán IgG que estarán
especializadas en destruir el Covid-19. Estas últimas quedarán en el
organismo a modo de recuerdo inmunológico, para que , en caso de entrar de
nuevo en contacto con el patógeno, ya se combata directamente con los
anticuerpos específicos .
Cronología respuesta inmunitaria frente a Covid-19

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DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR COVID-19
Partiendo de la base de que la sintomatología del Covid-19 es de lo más
variada, se han concretado que los síntomas mayoritarios y que harían
sospechar de infección por Covid-19 serían los siguientes:
 Malestar general
 Cefalea
 Fiebre mayor de 38ºC conforme la OMS
 Tos
 Disnea
 Perdida de olfato y/o gusto
 Síntomas gastrointestinales, principalmente diarrea.
Una vez se tiene la sospecha de que una persona puede estar infectada por
Covid-19, habría que realizar diferentes pruebas diagnósticas entre ellas
radiografía de tórax para valorar la presencia o no de neumonía bilateral y test
para la detección del virus en el organismo
TIPOS DE TEST
A) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR): es el test que se debería
realizar de forma precoz una vez que la persona lleva varios días con los
síntomas de sospecha presentes.
- Fundamento: la reacción en cadena de la polimerasa, en el diagnóstico del
Covid-19 parte de una muestra de ARN del microorganismo. Luego se alinean
los cebadores que son fragmentos complementarios de genes del ARN del
microorganismo que se quiere estudiar. A
partir de ellos la enzima polimerasa ira
complementando las dos cadenas que se
habían desnaturalizado. Obteniendo así
una doble hélice de ADN, estos se vuelven
a desnaturalizar y volvemos a realizar el
mismo proceso de forma que se replica
tantas veces como se quiera. Una vez

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obtenidas las copias deseadas se estudia a qué microorganismo corresponden.
- Toma de la muestra: la muestra se toma mediante un hisopo que se introduce
en la nasofaringe, y se mueve realizando círculos. Después dicho hispo se
introduce en un medio de cultivo apropiado para su transporte al laboratorio de
microbiología. No es una técnica dolorosa, pero si puede resultar molesta.
- Tiempo para obtención de resultados: El tiempo estimado para la obtención
de los resultados suele estar entre 4 y 8 horas aunque dependiendo de la carga
de trabajo del laboratorio, como puede ser en la situación actual, puede tardar
días.
- Fiabilidad: ha de realizarse a los 5-7 días de haberse iniciado los síntomas, de
tal forma que el virus haya podido replicarse y a la hora de tomar la muestra
haya suficiente virus en la nasofaringe para ser recogido por el hisopo.
- Desventajas: en determinadas personas el virus se replica de forma masiva
generando un cuadro grave en pocos días, por lo que si se espera, de forma
protocolaria, a los 5-7 días de rigor para que la carga viral sea alta, puede ser
demasiado tarde.
B) Test rápido de detección de anticuerpos.
- Fundamento: Ante la presencia de cualquier microorganismo ajeno al
organismo de una persona, el sistema inmunitario comienza a generar
defensas (anticuerpos, inmunoglobulinas) frente a dicho microorganismo. En
función del tiempo que lleve el microorganismo en el cuerpo se van a generar
unas inmunoglobulinas u otras. Además una vez pasada la infección se espera
que hayan quedado inmunoglobulinas específicas frente al Covid-19. Por lo
que si se detecta un incremento de estas indicaría la presencia de un
microorganismo o que se ha pasado la infección. Estas inmunoglobulinas se
encuentran en la sangre de forma que pueden defender cualquier parte de
nuestro cuerpo del patógeno. Una vez tomada la muestra de la sangre, esta se
deposita en una placa.

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Dicha placa se compone de una tira
reactiva y dos depósitos. Uno para
la muestra sanguínea y otro para el
reactivo. Una vez se ha depositado
la sangre en su depósito se echan
dos gotas de reactivo en su
depósito. De esta forma a través de
la tira reactiva se mezclarán la
sangre y el reactivo dando lugar al
resultado mediante la aparición de
dos líneas en la tira reactiva.
En la tira reactiva habrá una zona indicada con una C. Aparecerá una franja en
esta zona para indicar que el test está bien realizado, es lo que se llama
control. También hay una zona indicada con una T que en caso de que haya
presencia de inmunoglobulinas en la muestra aparecerá otra franja en esta
zona T.
- Toma de la muestra: desinfección de la yema del dedo con alcohol, después
con una lanceta se puncionará para que salga sangre, se desechará esta
primera gota de sangre retirándola con una gasa estéril limpia. Después con
una pipeta se aspirará una nueva gota de sangre que se depositará con dicha
pipeta en el depósito correspondiente dentro de la placa del test.
- Tiempo obtención de resultados: 15 minutos, en caso de ser positivo y haber
gran cantidad de inmunoglobulinas la franja T aparece a los pocos minutos,
pero en caso de que haya pocas inmunoglobulinas tardará un poco más por lo
que hay que esperar rigurosamente los 15 minutos.
- Fiabilidad: al igual que ocurre con el resto de test no hay ninguno que
proporcione una fiabilidad del 100%. Estos tipos de test se comenta tener una
fiabilidad inferior al 30%. Esto se debe a que no discrimina qué tipo de
anticuerpos son los que tiene la persona, si los primarios, o los de haber
pasado la infección. En caso de ser positivo el test, habría que complementarlo
con una serología o PCR, para saber en qué fase de la infección se encuentra

9. Guía Covid-19: test Eva Fraile Jorge
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la persona o si es un falso positivo al ser inmunoglobulinas que se hayan
podido generar frente a otro patógeno.
- Desventajas: en caso de ser positivo, requiere de otro análisis
complementario para confirmación del diagnóstico.
C) Test rápido inmunoglobulinas G y M
- Fundamento: Ante la presencia de cualquier microorganismo ajeno al
organismo de una persona, el sistema inmunitario comienza a generar
defensas (anticuerpos, inmunoglobulinas) frente a dicho microorganismo. En
función del tiempo que lleve el microorganismo en el cuerpo se van a generar
unas inmunoglobulinas u otras. Además una vez pasada la infección se espera
que hayan quedado inmunoglobulinas específicas frente al Covid-19. Las
inmunoglobulinas que aparecen en la fase temprana de la infección son las IgM
y las IgG son las que aparecen como una respuesta secundaria y las que
deberían de quedar como recuerdo inmunológico. Por lo que si se detecta un
incremento de estas indicaría la presencia de un microorganismo o que se ha
pasado la infección. Estas inmunoglobulinas se encuentran en la sangre de
forma que pueden defender cualquier parte de nuestro cuerpo del patógeno.
Una vez tomada la muestra de la sangre, esta se deposita en dos placas
Dichas placas se compone de una tira reactiva y dos depósitos. Uno para la
muestra sanguínea y otro para el reactivo. Una vez se ha depositado la sangre
en su depósito se echan dos gotas de reactivo en su depósito. De esta forma a
través de la tira reactiva se mezclarán la sangre y el reactivo dando lugar al
resultado mediante la aparición de dos
líneas en la tira reactiva.
En la tira reactiva habrá una zona indicada
con una C. Aparecerá una franja en esta
zona para indicar que el test está bien
realizado, es lo que se llama control.
También hay una zona indicada con una T
que en caso de que haya presencia de
inmunoglobulinas en la muestra aparecerá

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otra franja en esta zona T. En este caso además cada placa vendrá
diferenciada con IgG o IgM.
Existe otra variante en la que en una misma placa vienen tres indicadores: C:
control, IgG e IgM.
- Toma de la muestra: desinfección de la yema del dedo con alcohol, después
con una lanceta se puncionará para que salga sangre, se desechará esta
primera gota de sangre retirándola con una gasa estéril limpia. Después con
una pipeta se aspirará una nueva gota de sangre que se depositará con dicha
pipeta en el depósito correspondiente dentro de la placa del test. Este proceso
de recogida de sangre con pipeta se realizará dos veces una para cada placa
- Tiempo obtención de resultados: 15 minutos, en caso de ser positivo y haber
gran cantidad de inmunoglobulinas la franja T aparece a los pocos minutos,
pero en caso de que haya pocas inmunoglobulinas tardará un poco más por lo
que hay que esperar rigurosamente los 15 minutos.
- Fiabilidad: En este caso la fiabilidad oscila en torno al 80%. Esto se debe a la
especificad identificando qué inmunoglobulina está presente. De esta forma se
podría saber en qué fase de la infección se encuentra la persona.
En caso de que sea positivo sólo la placa IgM habría que complementar con la
PCR ya que se supone que estamos en la fase temprana de la enfermedad y la
PCR debería de salir también positiva. En caso de PCR negativa, se trataría de
un falso positivo.
En caso de que sean positivos tanto las placas IgM como IgG, estaríamos en la
fase intermedia de la infección ya que se ha generado ya una respuesta
secundaria con la presencia de IgG.
En caso de ser positivo sólo la placa IgG, se consideraría que la persona ha
pasado la infección y ha generado recuerdo inmunológico.
Bien es cierto que en la actualidad se han visto casos de personas que tuvieron
PCR positiva, transcurrido el periodo de cuarentena se les realizó dos test
PCR con resultado negativo y tiempo después (unas 3 semanas
aproximadamente) se le ha realizado el test IgM e IgM y ambos han salido

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negativos, de ahí parte la teoría de que haya personas que no han generado
anticuerpos de memoria y podrían volverse a reinfectar.
- Desventajas: la necesidad de confirmar con PCR para asegurarnos al 100%
que la persona es portadora del virus.
d) Serología
- Fundamento: mediante una extracción de sangre venosa periférica, se analiza
los tipos de inmunoglobulinas y anticuerpos generados específicamente frente
a las diferentes enfermedades infecciosas. Esta prueba también se realiza en
muchos casos para corroborar si una vacuna ha sido capaz de dejar recuerdo
inmunológico en el organismo. En el caso del Covid-19 se buscarán
anticuerpos específicos frente al el mismo.
- Toma de muestra: es igual que cuando se realiza una analítica de sangre,
pero en este caso no es necesario estar en ayunas.
- Tiempo obtención de resultados: varios días.
- Fiabilidad: 100%.
- Desventajas: en la situación actual hay una sobresaturación de los
laboratorios de microbiología. Por lo que incluso muchos de ellos se han
quedado sin los reactivos necesarios para detectar los anticuerpos específico;
por lo que el tiempo de obtención de los resultados puede ser mayor al
esperado.

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INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
A continuación se muestran dos cuadros con la interpretación clínica de los
resultados obtenidos según cada tipo de test y la complementariedad con la
PCR
Test rápido anticuerpos totales
Test rápido IgG/ IgM