1. ESTUDIO MICROSCOPICO DE CÉLULAS Y TEJIDOS
Las células pueden ser observadas en estado vivo
En cultivos in Vitro
Preparación de cortes histologicos
Se realizan rebanadas finisimas (cortes)
Técnica a la parafina.-
1.- Obtención del tejido.- biopsia
2.- Fijación.- formaldehído al 4 %
3.- Deshidratación.- En alcohol
4.- Aclaración.- Con Xilol
5.- Inclusión.- Inclusión en parafina
6.- Corte.- con microtomo
7.- Tinción y montaje.- se sustituye la
parafina por agua
16. OCULAR
OBJETIVO:
SISTEMA ÓPTICO CONDENSADOR
DIAFRAGMA:
FOCO:
SOPORTE
PLATINA
SISTEMA MECANICO CABEZAL
REVÓLVER
TORNILLOS DE ENFOQUE
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24.
25. MICROSCOPIO ELECTRONICO.-
* Uso de haz de electrones
* Resolución de 1 nm.
MICROSCOPIO ELECTRONICO POR TRANSMISIÓN
PREPARACIÓN DE CORTES CON ME.
Fijación.- con glutaraldeido y post fijación con acido osmico (+A.Tánico)
Inclusión.-Usando resinas (Epson, Araldite o Spur) a 60 º C
Corte.- 60 a 80 nm de espesor
Tinción.- con acido osmico, sales de Uranio y Plomo
26.
27. Microfotográficas electrónicas.- Electrones
invisibles pasan por pantalla fluoroscópica
que proporciona macrofotografía electrónica.
MICROSCOPIA
ELECTRONICA DE
BARRIDO.- (tridimencional)
Rastrea la muestra
Generan imagen en
televisión llamada
microfotografia
electronica
28. PLANOS DE CORTES HISTOLOGICOS.-
– Longitudinal
– Transversal
– Oblicuo rasante o
tangencial
– Imágenes de
tubos (vasos
sanguíneos)
– Tabiques o
septos
(Hepatocitos)
29. TINCIÓN HISTOLÓGICA.-
Hematoxilina
Eosina
Coloración basófila y acidófila
Sustancia basofila afinidad por colorantes
basicos o alcalinos
Sustancia acidofila afinidad por colorantes
ácidos
Reacción de ácido periódico de Schiff (PAS).- para
teñir polisacaridos
Demostrar presencia de glúcogeno
Color violeta o magenda.
Colorantes de grasa.- se usa cortes por congelación.
Escarlata R. Sudan III o Sudan IV
30. ARTEFACTOS.-
Degeneración post morten
+ Contracción
+ Precipitado
+ Pliegues y arrugas
+ Muescas de la cuchilla
+ Manejo burdo de los tejidos
MICROSCOPIO ELECTRONICO.-
* Uso de haz de electrones
* Resolución de 1 nm.
MICROSCOPIO ELECTRONICO POR TRANSMISIÓN
PREPARACIÓN DE CORTES CON ME.
Fijación.- con glutaraldeido y post fijación con acido osmico (+A.Tánico)
Inclusión.-Usando resinas (Epson, Araldite o Spur) a 60 º C
Corte.- 60 a 80 nm de espesor
Tinción.- con acido osmico, sales de Uranio y Plomo
31. Microscopio comun (o de luz) y sus aplicaciones.
Amplifica la imagen
Permite identificar el objeto con mayor detalle (resolución)
Microscopio por contraste de fase.-permite observación de células vivas
Microscópio por fluorosencia.- Señala sitios de localización especifica
Tinción por inmunofluorescencia.- con colorantes fluorescentes
(fluoresceína)
Tinción inmunoaurica.- con oro coloidal
EMPLEO DEL MICROSCOPIO DE LUZ
Objetivo de poca potencia (objetivo de rastreo)
Objetivo de gran amplificación
Objetivo de inmersión en aceite.
Necesidad de conservar limpias las
lentes.-
Suciedad en el cubre objetos
Aceite en el objetivo
Suciedad en el ocular
Suciedad en el condensador.