Técnicas histologicas unidad I Anatomía Microsc. y Embr. Veterinarias
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Técnicas histologicas unidad I Anatomía Microsc. y Embr. Veterinarias

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  • 1. BIENVENIDOS…….. Anatomía Microscópica y Embriología Veterinaria
  • 2. HISTOLOGÍA Y TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Objetivos de un estudiante de Medicina Veterinaria Organismos Anatomía Ramas de la Anatomía: Macroscópica y Microscópica
  • 3. NIVELES DE ORGANIZACIÓN DE LOS ORGANISMOS ANIMALES
    • Átomos
    • Moléculas
    • Células
    • Tejidos
    • Órganos
    • Sistemas
  • 4.  
  • 5. HISTOLOGÍA
    • Definición
    • Importancia
    • Métodos o técnicas histológicas:
    • Definición
    • Tipos:
    • Cultivo de células
    • Injertos
    • Coloración
    • Excisión
    • Microdisección
    • Microincineración
    • Fotografía
    • Inyecciones
  • 6. CULTIVO DE CÉLULAS DEFINICIÓN CONDICIONES IDEALES PARA EL CULTIVO DE CÉLULAS: Medio nutritivo pH Medio estéril Temperatura
  • 7. INJERTOS DEFINICIÓN TIPOS: Autoinjerto Homólogo Heterólogo Isólogo
  • 8. MÉTODO DE COLORACIÓN DEFINICIÓN COLORANTE SALES SOLUBLES EN AGUA Colorantes con carga ( - )= Ácidos Colorantes con carga ( + )= Básicos
  • 9. CLASIFICACIÓN DE LOS COLORANTES SEGÚN SU ORIGEN 1. NATURALES: Animal ( Carmín ) Vegetal ( Hematoxilina ) 2. ARTIFICIALES: Pigmentos minerales ( Azul de Prusia ) Derivados anilínicos ( Eosina )
  • 10. CLASIFICACIÓN DE LOS COLORANTES Según su radical químico Ácidos ( Eosina ) Básicos ( Hematoxilina ) Neutros (Giemsa) Según su afinidad por los componentes celulares: Citoplasmáticos ( Eosina ) Nucleares ( Hematoxilina ) Núcleos Eucromáticos Núcleos Heterocromáticos
  • 11. TIPOS DE COLORACIONES ORTOCROMÁTICA METACROMÁTICA PROGRESIVA RETRÓGRADA POR IMPREGNACIÓN VITAL Intravital Supravital
  • 12. MÉTODOS DE COLORACIÓN
    • Coloración de rutina
    • Coloraciones especiales
    • Histoquímica
  • 13.
    • DEFINICIÓN
    • HEMATOXILINA y EOSINA (H-E)
    COLORACIÓN DE RUTINA
  • 14. COLORACIONES ESPECIALES
    • DEFINICIÓN
    • TIPOS
    • GIEMSA: Frotis sanguíneos
    • TRICRÓMICA MALLORY-AZAN: Fibras colágenas (azul)
    • TRICRÓMICA DE MASSON: Fibras colágenas (azul)
    • GRAM: Bacterias ( + ) violeta ( - ) rosado
    • GROCOTT: Hongos (Negro)
    • VON KOSSA: Calcio (Negro)
  • 15. HISTOQUÍMICA
    • DEFINICIÓN
    • CLASIFICACION
    • Histoquímica enzimática
    • Inmunohistoquímica
  • 16. HISTOQUÍMCA ENZIMÁTICA
    • DEFINICIÓN
    • PROCEDIMIENTO
    TEJIDO + ENZIMA SUSTRATO PRODUCTO INCOLORO PRECIPITADO INSOLUBLE COLOREADO
  • 17. INMUNOHISTOQUÍMICA
    • DEFINICIÓN
    • PROCEDIMIENTO
    ANTÍGENO ANTICUERPO ANTICUERPO + COLORANTES FLUORESCENTES REACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO
  • 18. HISTOLOGÍA
    • Definición
    • Importancia
    • Métodos o técnicas histológicas:
    • Definición
    • Tipos:
    • Cultivo de células
    • Injertos
    • Coloración
    • Excisión
    • Microdisección
    • Microincineración
    • Fotografía
    • Inyecciones
  • 19. Técnica para la preparación de tejidos
    • Técnica de la Parafina
    • Técnica de la Celoidina
    • Técnica de Congelación
  • 20. TÉCNICA DE LA PARAFINA DEFINICIÓN PROCEDIMIENTO TÉCNICO
    • Recolección de la muestra
    • Fijación
    • Lavado
    • Deshidratación
    • Aclaración
    • Inclusión en parafina
  • 21. 1) RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA BIOPSIA NECROPSIA: Muerte del animal (Natural o Eutanasia) Extracción de los órganos Reducción de las piezas: Tamaño Recolección rápida
  • 22. 2) FIJACIÓN DEFINICIÓN FIJADOR Tipos: Físicos Químicos
  • 23. FIJADORES FÍSICOS POR DESECACIÓN POR CALOR Seco Húmedo POR FRÍO POR CONGELACIÓN
  • 24. FIJADORES QUÍMICOS SIMPLES Formol bufferado al 10% Formol al 4% Alcohol etílico Alcohol metílico Ácido ósmico del 1 al 2 % Oxidantes: Bicloruro de mercurio y potasio Ácido acético Ácido pícrico Ácido crómico
  • 25. … FIJADORES QUÍMICOS COMPUESTOS Líquido de Bouin Líquido de Zenker Líquido de Helly Líquido de Fleming
  • 26. … FIJADORES QUÍMICOS VOLUMEN 1:10 CONDICIONES QUE DEBE TENER UN BUEN FIJADOR: Alto poder de penetración Evitar los procesos autolíticos Endurecimiento
  • 27. 3) LAVADO DURANTE 1 HORA AGUA CORRIENTE
  • 28. 4) DESHIDRATACIÓN PRINCIPIO TIPO DE ALCOHOL EN GRADOS CRECIENTES DE CONCENTRACIÓN 1 HORA CADA UNO AUTOTECNICÓN
  • 29. 5) ACLARACIÓN DEFINICIÓN TIPOS DE AGENTES ACLARANTES Xilol Cloroformo Benceno Tolueno 3 PASES 1 HORA CADA PASE
  • 30. 6) INCLUSIÓN EN PARAFINA INCLUSIÓN: 2 pasos Impregnación o preinclusión Inclusión definitiva (Formación del bloque)
  • 31. PREPARACIÓN DE LAS LÁMINAS CORTE DEL TEJIDO RECOLECCIÓN DEL CORTE O CINTA ESTUFA (37°C)
  • 32. CORTE DEL BLOQUE DE PARAFINA DEFINICIÓN MICRÓTOMO CORTES DE LAS CINTAS
  • 33. RECOLECCIÓN DEL CORTE O PESCA BAÑO DE FLOTACIÓN (37°C) FINALIDAD PESCA
  • 34. ESTUFA
  • 35. PROCESO DE COLORACIÓN DESPARAFINACIÓN HIDRATACIÓN TINCIÓN
  • 36. DESPARAFINACIÓN XILOL 3 PASES 5 MINUTOS c/u
  • 37. HIDRATACIÓN DEFINICIÓN 5 MINUTOS
  • 38. COLORACIÓN DE RUTINA DEFINICIÓN PROTOCOLO: Hematoxilina 10´ Lavado con agua 15´ Diferenciar los componentes con alcohol ácido. Virar al color azul sustancias Alcalinas Lavado con agua corriente Eosina acuosa 3 deeps Lavado con agua 15´ Deshidratación 5´ Aclaración 3 pases 5 minutos c/u
  • 39. MONTAJE Mar-tex Entellán Permount SECADO AL AIRE MICROSCOPIO
  • 40. HISTORIA DEFINICIÓN CLASIFICACIÓN Según el tipo de luz: Óptico o de Luz Electrónico MICROSCOPIO
  • 41. MICROSCOPIOS ÓPTICOS propiamente dicho MICROSCOPIOS ÓPTICOS especiales MICROSCOPIOS ÓPTICOS
  • 42. Microscopio óptico simple Microscopio óptico compuesto Partes: MICROSCOPIO ÓPTICO PROPIAMENTE DICHO
  • 43. MICROSCOPIOS ÓPTICOS ESPECIALES DE LUZ ULTRAVIOLETA DE FLUORESCENCIA DE CAMPO OSCURO CONTRASTE DE FASE DE LUZ POLARIZADA INTERFERENCIA
  • 44. MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS De transmisión De barrido De fuerza atómica
  • 45. … MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS Microscopio Electrónico de Transmisión
  • 46. … MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS Microscopio Electrónico de Barrido
  • 47. … MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS Microscopio de Fuerza Atómica
  • 48. Recomendación Dedícate, al menos, una hora del día para aprender otro idioma, música, arte o practicar algún deporte ……..