Técnicas histológicas

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Técnicas histológicas

  1. 1. 10-08-2012 Facultad de Medicina Escuela de Enfermería Sede Temuco Histoembriología ENFB2006 2012Introducción a la HistologíaTécnicas Histológicas Dra. Paola A. Araneda Reynolds paola.araneda@umayor.cl Histoembriología 08-08-2012 Temuco, Chile 1
  2. 2. 10-08-2012 ESTE POWERPOINT ES UNA GUÍA PARA EL ESTUDIO. EL ESTUDIANTE DEBE COMPLEMENTAR CON LECTURA DE BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA RESULTADOS DE APRENDIZAJES ESPERADOS A. CONCEPTUALESEstablecer concepto de tejido señalando suscaracterísticas y propiedades.Comprender e identificar las técnicas deprocesamiento de los tejidos.Examinar, identificar e interpretar unapreparación histológica a través delmicroscopio óptico común. 2
  3. 3. 10-08-2012 TEMARIO Definición de Histología Historia Técnicas histológicas Interpretación Microscopía HISTOLOGÍA DefiniciónEstudio en profundidad de la estructura yfunción de componentes celulares.Rama de la anatomía que estudia lostejidos de animales y plantas haciendo unadescripción de estructura celular, tejidos yórganos asociada a su función. 3
  4. 4. 10-08-2012 Historia Padre de la Histología: Marie F. X. Bichat SXVIII Publicación de libro 20 tejidos diferentes Histología acuñado S. XIX (1806) Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria. Importancia1. Conocimiento de la estructura y función normal a nivel microscópico de organización.2. Comprensión del proceso patológico por respuesta celular y tisular a las lesiones relacionadas con procesos patológicos.3. Entender a los seres vivos en estado de salud y enfermedad. 4
  5. 5. 10-08-2012 Unidades de MedidaAngström (Aº) 1Aº = 10.000.000 mmMicrómetro (µm) 1 µm = 0.001 mm 1x 10-6 mNanómetro (nm) 1 nm = 0.001 µm 1 x 10-9 m TEJIDO DEFINICIÓNGrupo de células similares, idénticas odiferentes y sus productos extracelulares querealizan una función específica o un conjuntode funciones relacionadas.HISTÓLOGOS : 4 tipos de tejidos básicos 5
  6. 6. 10-08-2012 Clasificación y características de los TejidosT. Básicos o simples : T. Epitelial T. Conectivo - T.Adiposo* T. Muscular T. Nervioso Origen de los Tejidos 6
  7. 7. 10-08-2012Organización de los Tejidos 7
  8. 8. 10-08-2012 Procesamiento de Tejidos en HistologíaTÉCNICAS HISTOLÓGICASOBJETIVOPreparar los tejidos para estudiarlosasemejando su estado natural y analizarlos pormedio de microscopio óptico. 8
  9. 9. 10-08-2012 1. Obtención de la Muestraubicación del tejido – identificación de muestrarápida y con destrezainstrumentación adecuadacolocar en fijador10 hrs 9
  10. 10. 10-08-2012 10
  11. 11. 10-08-2012 2. FijaciónOBJETIVO Detener la autólisis postmortem Conservación Endurecimiento de tejidos Intensificar la tinción Reducir la presencia de agua en tejidos Estabilizar componentes celulares Propiedades antisépticas Tipos de Fijadores1. FIJADORES COAGULANTES Generan cambios estructurales profundos ej : metanol, etanol2. FIJADORES ADITIVOS •Formalina 10% •Fijador de BouinTiempo necesario para fijación ápróx. 24 hrs 11
  12. 12. 10-08-2012 3. DeshidrataciónOBJETIVOEliminación total del agua desde el tejido. Baño gradual en alcohol Diferentes grados de manera ascendente Hasta llegar al 100%.ej: alcohol etílico, acetona Tiempo 8 hrs 12
  13. 13. 10-08-2012 4. AclaraciónOBJETIVOEliminar el alcohol de los tejidos porque noes compatible con parafina. Baño gradual en xilolej: xilol, benzol, cloroformo, tolueno 1:1, 1:2, 2:2 Tiempo 4 hrs 13
  14. 14. 10-08-2012 5. ImpregnaciónOBJETIVOImpregnar los tejidos con parafina sustituyendoal xilol para luego proceder a la inclusión. Parafina purificada a 51–53ºC en moldes 56–58ºC Tiempo 6 hrsAutotécnico : máquina automática de 12 envasesReloj - brazo Autotécnico 14
  15. 15. 10-08-2012 6. InclusiónOBJETIVOColocar el tejido en moldes de parafina. ej: Parafina purificada, paraplast 56–58ºC • corte en forma pirámide truncada 15
  16. 16. 10-08-2012 7. CorteOBJETIVOObtener fragmentos delgados de tejidosSe realiza con bloque en frío corte en forma pirámide truncada Micrótomo : cintas finas 5 – 7 µm Baño de agua 45º C 16
  17. 17. 10-08-2012 17
  18. 18. 10-08-2012Criostato 18
  19. 19. 10-08-2012 8. TinciónOBJETIVODiferenciar componentes celulares resaltandosus cualidades.OJO : Los colorantes son sales solubles en agua.Pasos: Agentes desparafinantes (xilol I y Xilol II) Hidratación (100% - 70%) Agua Tiempo 40 min 19
  20. 20. 10-08-2012 20
  21. 21. 10-08-2012 9. MontajeOBJETIVOAdhesión del tejido en el portaobjeto. ej: • bálsamo de Canadá • albúmina de Mayer + timol • Entellán® • Estufa secado 20 minutos 21
  22. 22. 10-08-2012http://www.youtube.com/watch?v=OavPZ6hx5oA&feature=related http://youtu.be/KyO3TT2NaKk http://youtu.be/EMXpQzwOc_Q TINCIONES 22
  23. 23. 10-08-2012 Tipos de Colorantes1. COLORANTES BÁSICOSComponente celular ácidos básicos BASOFILOS2. COLORANTES ÁCIDOSComponente celular básicos ácidos ACIDÓFILOS “ Neutralización” Ejemplo Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria. 23
  24. 24. 10-08-2012 Tinciones de uso frecuentea) TINCIÓN DE HEMATOXILINA-EOSINA USO : diferenciar elementos celulares H : color azul o púrpura a componentes ácidos de células ej: cromatina, secreciones E : color rosa pálido a rojo a componentes básicos de células ej : citoplasma. 24
  25. 25. 10-08-2012b) TINCIÓN DE WRIGHT-GIEMSA; MG; GUSO : diferenciar células sanguíneas rosa : eritrocitos, gránulos de eosinófilos púrpura : núcleos de leucocitos, gránulos basófilos. azul : citoplasma de monocitos y linfocitos.Wittwer, F. UACH. Wittwer, F. UACH. 25
  26. 26. 10-08-2012c) TINCIÓN DE ORCEÍNAUSO : diferenciar fibras elásticas marrón rojizo : fibras elásticas Sobotta, J. 1999. Histología. 26
  27. 27. 10-08-2012 Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.d) TINCIÓN TRICRÓMICA DE MALLORYUSO : diferenciar elementos del tejido conectivo azul oscuro : fibras de colágeno rojo : fibras musculares, glias naranja : fibras de elastina www.iqb.es 27
  28. 28. 10-08-2012e) TINCIÓN DE VAN GIESONUSO : diferenciar fibras de colágeno rojo : fibras de colágeno Sobotta, J. 1999. Histología. ArtefactosBacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria. 28
  29. 29. 10-08-2012Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria. 29
  30. 30. 10-08-2012 Técnicas Avanzadas1. HISTOQUÍMICA2. INMUNOCITOQUÍMICA3. AUTORRADIOGRAFÍA 30
  31. 31. 10-08-2012Importancia 31
  32. 32. 10-08-2012GRACIAS POR SU ATENCIÓN!! CONSULTAS? 32
  33. 33. 10-08-2012 Facultad de MedicinaEscuela de Enfermería Sede TemucoHistoembriología ENFB2006 2012 33

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