Citologia General Veterinaria

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Citologia General Veterinaria

  1. 1. CITOLOGIA GENERAL <ul><li>Adquisición de la muestra citológica </li></ul><ul><li>Maria Paulina Alvarez S. </li></ul><ul><li>MV ULS. </li></ul>
  2. 2. Sapere vedere- “Aprende a ver” <ul><li>Leonardo da Vinci. </li></ul>
  3. 3. El especimen citológico. <ul><li>Manejo. Es critico y crucial. Tan importante como la muestra misma. </li></ul><ul><li>El diagnostico depende tambien de cosas externas como el transporte, la elección de la coloración, la calidad del microscopio, aplicación correcta de la muestra en la lamina, representatividad de la muestra. </li></ul>
  4. 4. Guías generales <ul><li>Tener todo preparado. </li></ul><ul><li>Laminas </li></ul><ul><li>Jeringas de 5, aguja 22. </li></ul><ul><li>Cuchillas </li></ul><ul><li>Laminas impecables </li></ul><ul><li>Tubos nuevos con edta y secos </li></ul><ul><li>Superficie para extender </li></ul><ul><li>Macador permanente </li></ul><ul><li>Fijador </li></ul><ul><li>Anticoagulante. </li></ul>
  5. 5. Indicaciones <ul><li>Efusiones (torax y abdomen) </li></ul><ul><li>Sedimento urinario </li></ul><ul><li>Prostata </li></ul><ul><li>Linfadenopatia </li></ul><ul><li>Metastasis </li></ul><ul><li>Masas cutaneas y subcutaneas </li></ul><ul><li>Conjuntiva </li></ul><ul><li>Nariz, traquea </li></ul><ul><li>Masas abdominales </li></ul><ul><li>Masas intraoperatorias </li></ul>
  6. 7. Punción de aguja fina <ul><li>Se usan agujas desde 25 hasta 20, con jeringas de 5 básicamente y de 1 cc en ganglios y bazo felino. </li></ul>
  7. 8. toma de muestra <ul><li>Las masas pueden contener un contenido mixto por lo que redifigir la aguja durante la toma es crucial, manteniendo la presion con la aguna dentro de la masa. </li></ul><ul><li>una vez terminado, sin sacar la aguja, se libera la presion y alli si se retira la aguja </li></ul>
  8. 9. manejo de la muestra <ul><li>una vez tomada, se deposita sobre la lamina y la técnica de extendido se determina de acuerdo a la textura de la muestra obtenida </li></ul>
  9. 10. Hisopados <ul><li>Los hisopados están indicados en las lesiones ulceradas y en las fístulas; también para tomar muestras de epitelios como el epitelio vaginal o el oído. Los hisopados vaginales son el método de elección para la determinación del celo en las hembras . </li></ul>
  10. 11. Cont... <ul><li>Se toma una muestra con hisopo estéril reservándola en medio de transporte hasta obtener los resultados de la evaluación citológica. Otra muestra se toma con hisopo estéril y se la coloca sobre un portaobjetos haciendo girar suavemente el hisopo sobre el porta de manera tal de no dañar las células. </li></ul>
  11. 12. Cont... <ul><li>Si el resultado de la citología muestra inflamación séptica o micótica se puede realizar el aislamiento e identificación del agente en la muestra que quedó de reserva en el medio de transporte. </li></ul>
  12. 13. Compresion <ul><li>Es la técnica de elección en masas semisólidas, mucosas, o en pellet. </li></ul><ul><li>Debe ser movimiento continuo, y da dos especímenes </li></ul>
  13. 14. Muestras liquidas <ul><li>Se deben poner inmediatamente en edta, para evitar coágulos. </li></ul><ul><li>Los fluidos se manejan como la sangre, rápidamente sin romper las células. Se pueden concentrar en un microhematocrito pues pueden ser muestras de baja celularidad. </li></ul><ul><li>Se deben tomar otros parametros como densidad y pt. </li></ul>
  14. 15. toracocentesis <ul><li>Punción de Tórax: En el 7 mo , espacio intercostal a 1/3 hacia dorsal de la unión costocondral. </li></ul>
  15. 16. abdominocentesis <ul><li>Punción de abdomen: Es conveniente previo a la punción realizar el vaciado de la vejiga urinaria. Se realiza la punción en lateral a la altura del ombligo. No realizarla en ventral ya que los animales que alojan en la cavidad abdominal mucho contenido de líquido, sufren el riesgo de formar una serosa al punzar la cavidad en la parte central. </li></ul>
  16. 17. punciones <ul><li>Punción de la cavidad articular: </li></ul><ul><li>El líquido sinovial es abundante en las alteraciones de las articulaciones. La punción está indicada para evaluar reacciones inflamatorias sépticas y asépticas. </li></ul>
  17. 18. improntas <ul><li>Se utilizan para obtener una capa muy delgada a partir de un tejido Se pueden realizar improntas de órganos o de tumores. Luego de la extirpación quirúrgica es conveniente antes de realizar la impronta secar el exceso de líquido con un papel absorbente de la superficie de la muestra que luego se va a apoyar sobre el portaobjetos para realizar la impronta. </li></ul>
  18. 19. <ul><li>Las improntas son requisito para la evaluación de los ganglios linfáticos. Si se extrae un ganglio linfático antes de colocarlos en formol se debe realizar una impronta. </li></ul>
  19. 20. <ul><li>Se debe remitir al laboratorio el ganglio con su impronta. En el caso de otros órganos o masas también es conveniente remitir la muestra para histopatología junto con su impronta a los fines de que el patólogo pueda realizar un acercamiento diagnóstico rápido </li></ul>
  20. 21. <ul><li>1. La preparación a evaluar debe contener una adecuada cantidad de células, la mayoría de las células deben estar intactas y bien distribuidas formando una monocapa. </li></ul>
  21. 22. Evaluacion de la muestra <ul><li>Buena calidad de la preparación. </li></ul><ul><li>Buenos colorantes </li></ul>
  22. 23. <ul><li>Los colorantes utilizados para teñir la muestra deben ser de buena calidad. </li></ul><ul><li>Es recomendable gastar un poco más en colorantes de marcas reconocidas. </li></ul>colorantes
  23. 24. <ul><li>Si estas dos condiciones no se cumplen, la toma de la muestra y la coloración deben ser repetidas ya que intentar realizar un diagnóstico en un frotis de mala calidad, es frustrante y lleva a errores de interpretación o brinda información que no sirve. </li></ul>
  24. 25. Examen microscópico <ul><li>Examen en 10X </li></ul><ul><li>Si la preparación es buena entonces se puede comenzar a evaluar la muestra al microscopio. La evaluación inicial debe ser realizada con bajo aumento (objetivo de 10X). La observación con este aumento se realiza recorriendo TODO el frotis para : </li></ul><ul><li>Seleccionar áreas de monocapa que luego se observarán con mayor aumento. </li></ul><ul><li>Evaluar la distribución celular y el tipo de células presentes. </li></ul>
  25. 26. <ul><li>No se debe fallar en este punto, ya que si no se recorre toda la preparación se corre el riesgo de realizar una evaluación incompleta. </li></ul><ul><li>Es importante seleccionar las áreas en las cuales las células se dispongan en monocapa, es decir dónde se visualicen separadas y no estén superpuestas ya que esto ocasiona que las células se vean distorsionadas. </li></ul><ul><li>Con este aumento se puede identificar la presencia de estructuras micóticas y células neoplásicas. </li></ul>
  26. 27. Tipos de lesion <ul><li>En este punto se realiza la clasificación inicial de la muestra y aquí se debe responder la primera pregunta : </li></ul><ul><li>¿ Se trata de una lesión inflamatoria o tumoral? </li></ul>
  27. 28. <ul><li>Si en la muestra hay sólo células inflamatorias , la clasificación resulta fácil. Lo mismo ocurre cuando se encuentran sólo células tisulares. </li></ul><ul><li>Pero en algunos casos la población celular es mixta y está compuesta por infiltrado inflamatorio y “otras” células, esto ocurre porque las lesiones neoplásicas atraen gran cantidad de células inflamatorias especialmente cuando existe necrosis en la masa tumoral. </li></ul><ul><li>Del mismo modo, las reacciones inflamatorias provocan cambios hiperplásicos en las células epiteliales y estas simulan ser tumorales. </li></ul>
  28. 29. Inflamación o neoplasia <ul><li>Como regla general si se pudo identificar que más del 80% de las células son inflamatorias , entonces se clasifica a la lesión como inflamatoria. </li></ul><ul><li>No se debe realizar el diagnóstico de neoplasia cuando se encuentran menos del 20 % de células “anormales”, ya que la inflamación induce cambios en las células epiteliales y estas reaccionan en general, con una hiperplasia que no es más que un proceso de adaptación, simulando los cambios característicos de la anaplasia, en estos casos hasta a los patólogos más entrenados se les dificulta diferenciar entre esta respuesta hiperplásica y neoplasia. </li></ul><ul><li>Siempre ante la duda, repetir la toma de muestra o bien tomar una muestra para histopatología. </li></ul>
  29. 30. Coloraciones <ul><li>Papanicolau </li></ul><ul><li>Diff quick </li></ul><ul><li>Nuevo azul de metileno </li></ul><ul><li>Colorantes de la familia romanowski </li></ul>
  30. 31. Consideraciones especiales <ul><li>Nodulos cutaneos y ganglios linfaticos </li></ul><ul><li>Se debe evitar el centro de las masas de mas de 2 cm. de diametro. </li></ul><ul><li>Es recomendable seguirlos de biopsia excisional. </li></ul><ul><li>Bazo, higado y riñon: requieren ecografo. Deben ir a EDTA. Pueden no aspirarse. </li></ul>
  31. 32. cont <ul><li>Nariz y pulmon: deben practicarse despues de una radiografia pues hay muchos tejidos vitales cerca. </li></ul><ul><li>Son muestras contaminadas casi siempre, hay que saber que buscar </li></ul><ul><li>Lo ideal es por medio de lavados </li></ul>
  32. 33. Categorias generales de interpretacion <ul><li>Tejido normal o hiperplasico. </li></ul><ul><li>Quiste </li></ul><ul><li>Inflamacion </li></ul><ul><ul><li>Cronica </li></ul></ul><ul><ul><li>Septica </li></ul></ul><ul><ul><li>Piogranulomatosa </li></ul></ul><ul><ul><li>Aseptica </li></ul></ul><ul><ul><li>Eosinofilica </li></ul></ul>
  33. 34. Reconocimiento de la inflamacion <ul><li>Mas de 80% células infamatorias </li></ul><ul><li>Las células que la acompañan determinan el tipo de inflamación: </li></ul><ul><ul><li>neutrofilos </li></ul></ul><ul><ul><li>Eosinofilos </li></ul></ul><ul><ul><li>Neutrofilos toxicos </li></ul></ul><ul><ul><li>Macrofagos </li></ul></ul><ul><ul><li>Particulas extrañas </li></ul></ul>
  34. 35. Respuesta a injuria tisular <ul><li>Hemorragia </li></ul><ul><li>Eritrofagocitosis </li></ul><ul><li>Hemosiderina </li></ul><ul><li>Residuos proteinaceos </li></ul><ul><li>Cristales de colesterol </li></ul><ul><li>fibroplasia </li></ul>
  35. 36. Neoplasia <ul><li>Se diagnostica inicialmente al encontrar una poblacion monomorfica de celulas, sin celulas inflamatorias predominantes. </li></ul><ul><li>La neoplasia se debe clasificar como benigna o maligna </li></ul><ul><ul><li>Celulas normales </li></ul></ul><ul><ul><li>Celulas que cumplen criterios de malignidad. </li></ul></ul>
  36. 37. Criterios de malignidad <ul><li>Pleomorfismo </li></ul><ul><li>Cambios en la relacion nucleo citoplasma entre las mismas celulas y entre la celula normal teorica. </li></ul><ul><li>Anisocariosis </li></ul><ul><li>Cambios de cromatina </li></ul><ul><li>Moldeado nuclear o citoplasmatico </li></ul><ul><li>NUCLEOLOS </li></ul><ul><li>Multinucleacion </li></ul><ul><li>Figuras mitoticas </li></ul>
  37. 38. Ejemplos Cual es la mejor área para examinar? -todas -que célula predomina?
  38. 39. Ejemplo 2. Cual es la mejor area? -es inflamatoria O tisular…
  39. 40. Ejemplo 3 Cual es la mejor área para examinar? -todas -que célula predomina?
  40. 41. Toxicidad leucocitaria Las imágenes muestran neutrófilos segmentados en diferentes grados de toxicidad, que orientan a procesos sépticos.
  41. 42. Ejemplos celulas malignas en el mismo lugar. <ul><li>Celulas de la cavidad nasal de un canino, la superior muestra epitelio ti pico y la inferior muestra celulas de la misma zona, pero en un animal que presenta un adenocarcinoma nasal. </li></ul>
  42. 43. Citologia lesion nariz felino <ul><li>Celulas escamosas de un felino, la superior normal y la inferior, carcinoma de celulas escamosas. </li></ul>
  43. 44. Carcinoma prostatico <ul><li>Células prostáticas de un canino, normales con hipertrofia y células de carcinoma prostático, ver nucleolos. </li></ul>
  44. 45. Fibrocitos/fibrosarcoma <ul><li>Fibrocitos normales de una masa de tejido cicatrizal normal y fibrosarcoma. </li></ul><ul><li>Notese la diferencia de tamaño celular, nucleolos y la intensidad de la coloracion. </li></ul>

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