7 1 2 RevisãO Fundamentos De Engenharia GenéTica

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Recurso para a disciplina de Biologia - 12º ano

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7 1 2 RevisãO Fundamentos De Engenharia GenéTica

  1. 1. Fundamentos de Engenharia Genética REVISÕES
  2. 2. Fundamentos de Engenharia Genética Tecnologia do DNA recombinante
  3. 3. Tecnologia do DNA recombinante O que permite fazer? Em que “ferramentas” se baseia? Combinar na mesma molécula de DNA genes provenientes de fontes diferentes Enzimas de restrição Ligases de DNA vectores
  4. 4. Tecnologia do DNA recombinante O que fazem as enzimas de restrição A que correspondem as zonas de restrição? Reconhecem determinadas sequências de DNA e cortam a molécula nesses locais <ul><li>Correspondem a sequências de DNA curtas e simétricas </li></ul><ul><li>Que se lêem da mesma forma nas 2 cadeias na direcção 5´- 3´ </li></ul>
  5. 5. GAATTC CTTAAG ? Sequência de restrição As enzimas de restrição cortam o DNA da célula dadora e o DNA do vector na mesma sequência de restrição
  6. 6. GAATTC CTTAAG ? Extremidades coesivas – de cadeia simples G CTTAA AATTC G G CTTAA Fragmento de restrição
  7. 7. ? As Extremidades coesivas podem ligar-se pela actividade de ligases de DNA G CTTAA AATTC G G CTTAA Fragmento de restrição Como podem ligar-se as extremidades coesivas de 2 fragmentos de restrição? Há complementaridade entre as bases das extremidades coesivas dos fragmentos de restrição do DNA dador e vector
  8. 8. Como se transfere DNA de uma célula ou organismo dador para uma célula ou organismo receptor? vectores Que vectores são utilizados? bacteriófagos plasmídeos Pequenas moléculas circulares de DNA que ocorrem naturalmente em algumas bactérias, leveduras e células vegetais
  9. 9. Molécula de DNA dadora seleccionada Gene com interesse Vector adequado Tratamento com a mesma enzima de restrição AATTC G G CTTAA Fragmento de restrição
  10. 10. Vector adequado AATTC G G CTTAA Fragmento de restrição As ligases estabelecem a ligação entre os fragmentos de restrição e o vector As extremidades coesivas são complementares e estabelecem a ligação
  11. 11. Vector com DNA dador Transferido para célula ou organismo receptor O organismo receptor passa a ter DNA recombinante!
  12. 12. Fundamentos de Engenharia Genética C DNA – DNA complementar
  13. 13. Procarionte –utilizado em engenharia genética ? <ul><li>Fáceis de cultivar </li></ul><ul><li>Crescimento rápido </li></ul><ul><li>Processos bioquímicos bem conhecidos </li></ul><ul><li>Não processam o DNA </li></ul><ul><li>Os intrões que recebem não são retirados </li></ul><ul><li>A proteína produzida não é funcional </li></ul>Como ultrapassar este problema? cDNA Sem intrões 1- isolar 1molécula de RNA funcional das células 2-adicionar transcriptase reversa e nucleótidos 3- sintese de DNA a partir de mRNA 4- a DNA polimerase cataliza a formação da cadeia complementar de DNA

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