2 estructura y replicacion del dna 1 (1)

1,953 views
1,548 views

Published on

0 Comments
1 Like
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

No Downloads
Views
Total views
1,953
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
1
Actions
Shares
0
Downloads
44
Comments
0
Likes
1
Embeds 0
No embeds

No notes for slide
  • Table 12-2 Categories and Properties of Histone Proteins
  • Figure 13-9 The early stages of transcription in prokaryotes, showing (a) the components of the process; (b) template binding at the site involving the sigma subunit of RNA polymerase and subsequent initiation of RNA synthesis; and (c) chain elongation, after the sigma subunit has dissociated from the transcription complex and the enzyme moves along the DNA template.
  • Figure 13-9a The early stages of transcription in prokaryotes, showing (a) the components of the process; (b) template binding at the site involving the sigma subunit of RNA polymerase and subsequent initiation of RNA synthesis; and (c) chain elongation, after the sigma subunit has dissociated from the transcription complex and the enzyme moves along the DNA template.
  • Figure 13-9b The early stages of transcription in prokaryotes, showing (a) the components of the process; (b) template binding at the site involving the sigma subunit of RNA polymerase and subsequent initiation of RNA synthesis; and (c) chain elongation, after the sigma subunit has dissociated from the transcription complex and the enzyme moves along the DNA template.
  • Figure 13-9c The early stages of transcription in prokaryotes, showing (a) the components of the process; (b) template binding at the site involving the sigma subunit of RNA polymerase and subsequent initiation of RNA synthesis; and (c) chain elongation, after the sigma subunit has dissociated from the transcription complex and the enzyme moves along the DNA template.
  • Figure 13-10 Posttranscriptional RNA processing in eukaryotes. Heterogeneous nuclear RNA (hnRNA) is converted to messenger (mRNA), which contains a cap and a -poly-A tail, which then has introns spliced out.
  • Figure 14-11a Induction, isolation, and characterization of a nutritional auxotrophic mutation in Neurospora. In (a), most conidia are not affected, but one conidium (shown in red) contains such a mutation. In (b) and (c), the precise nature of the mutation is determined to involve the biosynthesis of tyrosine.
  • Figure 14-11b Induction, isolation, and characterization of a nutritional auxotrophic mutation in Neurospora. In (a), most conidia are not affected, but one conidium (shown in red) contains such a mutation. In (b) and (c), the precise nature of the mutation is determined to involve the biosynthesis of tyrosine.
  • Figure 14-11c Induction, isolation, and characterization of a nutritional auxotrophic mutation in Neurospora. In (a), most conidia are not affected, but one conidium (shown in red) contains such a mutation. In (b) and (c), the precise nature of the mutation is determined to involve the biosynthesis of tyrosine.
  • Figure 14-11 Induction, isolation, and characterization of a nutritional auxotrophic mutation in Neurospora. In (a), most conidia are not affected, but one conidium (shown in red) contains such a mutation. In (b) and (c), the precise nature of the mutation is determined to involve the biosynthesis of tyrosine.
  • Figure 14-10 Metabolic pathway involving phenylalanine and tyrosine. Various metabolic blocks resulting from mutations lead to the disorders phenylketonuria, alkaptonuria, albinism, and tyrosinemia.
  • 2 estructura y replicacion del dna 1 (1)

    1. 1. Estructura del DNA
    2. 2. Estructura del DNA
    3. 3. Estructura del DNAAdenina se aparea con TiminaGuanina se aparea con Citosina
    4. 4. Implicaciones del Diámetro constante
    5. 5. Uniones entre bases
    6. 6. Bases Físicas de la HerenciaProcariotesHU y H Eucariotes • Histonas • No histonas
    7. 7. Bases Físicas de la Herencia
    8. 8. Table 12-2 Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    9. 9. Bases Físicas de la Herencia
    10. 10. Bases Físicas de la Herencia
    11. 11. Bases Físicas de la Herencia
    12. 12. Bases Físicas de la Herencia
    13. 13. Bases Físicas de la Herencia
    14. 14. Bases Físicas de la Herencia
    15. 15. Bases Físicas de la Herencia
    16. 16. Bases Físicas de la Herencia EucromatinaCromatina Constitutiva Heterocromatina Facultativa
    17. 17. Bases Físicas de la HerenciaDNA Centrómeros Flia alfoideAltamente 170 pb-106 pbRepetitivo5% Telómeros TandemDNA Sec dispersas SINEModeradam. LINERepetitivo30% RNAr Sec repetidas VNTR STR
    18. 18. Replicación del DNA
    19. 19. Replicación del DNA
    20. 20. Cumple el DNA las condiciones del material hereditario? Condiciones Componente del DNATiene información biológica Código Genético: 3 basespara las proteínas codifican para 1 aminoácido (proteína)Replicarse fielmente y Las bases complementariastransmitirse a la son fieles; se encuentran endescendencia las células germinalesDebe ser estable en un Uniones covalentes; puentesorganismo vivo de hidrógenoCapaz de incorporar cambios Las bases pueden cambiarestables por mecanismos conocidos
    21. 21. Replicación del DNALa Replicación del DNA es simple, pero requiere ungran grupo de enzimas y proteínas:  La Helicasa desenrolla la molécula  Las proteínas de unión a cadena sencilla estabilizan el ssDNA  La Primasa inicia la replicación con RNA  La DNA polimerasa extiende el nuevo DNA  La segunda DNA polimerasa remueve el RNA  La DNA ligasa une todos los fragmentos
    22. 22. Replicación del DNA
    23. 23. Replicación del DNA
    24. 24. Replicación del DNA•Enzimas que sintetizan (replican) el DNA •E. coli •DNA polimerasa I (rellena huecos y repara) •DNA polimerasa II y III (función principal en la síntesis) •Añade bases en ambas cadenas en la dirección 5’ → 3’ •Requiere un 3’ OH final •Eucariotes •5 polimerasas ∀α y β principal en replicación ∀δ, ε y γ exonucleasas •Corrección de pruebas: actividad 3’ → 5’ exonucleotídica. Sustituye bases mal emparejadas por correctas
    25. 25. Acción Autocatalítica del DNA
    26. 26. Proteínas principales replicación• Topoisomerasas: rompen una hebra y la tensión del enrrollamiento de la hélice se relaja• Helicasas: completan el desenrrollamiento• ADN polimerasas: complejos agregados de diferentes proteínas.• Primasas: sintetizan los iniciadores de ARN que se necesitan para iniciar la replicación• Ligasas: sellan las lagunas dejadas por las ribonucleasas cuando remueven los primers, catalizan la unión fosfodiester entre nucleótidos adyacentes.• Proteinas de unión a la hebra sencilla del ADN: estabilizan la horquilla de replicación.
    27. 27. Replicación del DNA
    28. 28. Replicación del DNA •Replicación: continua (cadena adelantada) y discontinua (cadena retrasada)•Discontinua •Cebador (pequeño RNA 2-60 nucleótidos añadido por la primasa o RNA pol que provee 3’ OH) •Fragmento de Okazaki por DNA pol III (1500 bp en procariotas y 150 en eucariotas) •Pol I elimina cebador 3’ -> 5’ y llena huecos (gap) •Ligación (DNA ligasa, enlace fosfodiéster)
    29. 29. Replicación del DNA
    30. 30. Existen las dos formas de replicación:En general, es Bidireccional:• genomas bacterianos• cromosomas de células eucariotas En algunos casos es Unidireccional, ej: • en el ADN mitocondrial • en algunos virus
    31. 31. Replicación del DNA
    32. 32. Replicación del DNA
    33. 33. Replicación del DNA
    34. 34. Replicación del DNA
    35. 35. Replicación del DNA
    36. 36. Replicación del DNA•Enzimas que sintetizan (replican) el DNA •E. coli •DNA polimerasa I (rellena huecos y repara) •DNA polimerasa II y III (función principal en la síntesis) •Añade bases en ambas cadenas en la dirección 5’ → 3’ •Requiere un 3’ OH final •Eucariotes •5 polimerasas ∀α y β principal en replicación ∀δ, ε y γ exonucleasas •Corrección de pruebas: actividad 3’ → 5’ exonucleotídica. Sustituye bases mal emparejadas por correctas
    37. 37. Telomerasa• Ribonucleoproteína específica de los telómeros• Tiene actividad transcriptasa reversa• Añade unidades sencillas de la repetición a los extremos de los telómeros previniendo el acortamiento de los cromosomas• Contiene un molde de ARN que sirve para sintetizar el ADN y la subunidad catalítica que actúa como transcriptasa reversa.• Las mayoría de las células somáticas normales del ser humano son TELOMERASA-NEGATIVAS
    38. 38. • Se ha detectado actividad telomerasa en:1. Células hematopoyéticas: estimulación de los linfocitos T con algún mitógeno eleva los niveles de telomerasa 500-1000 veces.2. Queratinocitos basales3. Células epiteliales del endometrio, mamas, esófago, próstata y páncreas.• La actividad telomerasa es mayor en mujeres con ciclo menstrual activo y es casi nula en la menopausia• El epitelio lobular de las mamas tiene más actividad telomerasa durante el embarazo• La actividad telomerasa baja cuando las células se especializan y dejan de dividirse.
    39. 39. TRANSCRIPCION• El proceso mediante el cual la información almacenada en el DNA se recupera mediante la síntesis de RNA dependiente de un molde.
    40. 40. REPLICACION Y TRANSCRIPCIONSIMILITUDES• Se utilizan nucleótidos trifosfatados• El crecimiento de la cadena va en dirección 5’3’DIFERENCIAS• Solo se transcribe una hebra de DNA• Solo una pequeña fracción del genoma es transcito
    41. 41. RNA (Acido Ribonucleico)• Tipos mas importantes: – mRNA  Se sintetiza a partir de DNA y se utiliza como molde para la síntesis proteica en ribosomas – rRNA  Compone los ribosomas que se encargan de la síntesis de proteínas – tRNA  Se une a los aminoácidos y los transporta al ribosoma para la síntesis de proteínas
    42. 42. RNA POLIMERASA• Es la enzima que cataliza el proceso de trascripción: Mg2+ DNA n(ATP+CTP+GTP+UTP) ═ (AMP-CMP-GMP-UMP)n + nPPi• El producto de la rxn es una copia complementaria del DNA molde
    43. 43. RNA POLIMERASA• En procariotes una sola RNA pol cataliza la síntesis de las tres clases de RNA• La RNA pol cataliza la reacción de transcripción a una velocidad aprox. 50 nucleótidos/s• En E. coli hay aprox. 3000 moléculas de RNA pol• Una vez la RNA pol se une a un molde de DNA e inicia la transcripción rara vez se disocia hasta que llega a una señal de terminación
    44. 44. RNA POLIMERASA
    45. 45. MECANISMO DE LA TRANSCRIPCION• INICIACION  Interacción con los promotores• ELONGACION  Incorporación de los ribonucleótidos• TERMINACION  Finalización de la trascripción dependiente o independiente del factor
    46. 46. La Estructura del RNA
    47. 47. Transcripción• Se abre una pequeña sección de DNA• Solo se usa una de las hebras de DNA para la transcripción (3’ - 5’).• Esta sirve de molde para formar el mRNA• El mRNA se sintetiza de nucleótidos libres en la célula
    48. 48. Figure 13-9 Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    49. 49. Figure 13-9a Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    50. 50. Figure 13-9b Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    51. 51. Figure 13-9c Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    52. 52. Transcripción• E. coli: TTGACA (–35) y TATAAT (–10).•Terminación directa debida a la formacion debucle the RNA.•In some cases, termination depends on therho (ρ) termination factor
    53. 53. TERMINACION INDEPENDIENTE DEL FACTOR
    54. 54. TERMINACION DEPENDIENTE DEL FACTOR
    55. 55. DIFERENCIAS IMPORTANTES ENTRE PROCARIOTES Y EUCARIOTES PROCARIOTES EUCARIOTESTodo el DNA contenido en una Genoma dividido en varios oúnica molécula muchos cromosomas (1-190)El cromosoma bacteriano se Los cromosomas seencuentra libre en el citosol encuentran dentro del núcleo formando la cromatina (DNA- proteína)Haploides (una sola copia del Mayoría diploides (dos copiasmaterial genético) de un cromosoma)Transcripción y traducción Transcripción dentro del núcleoacopladas y traducción en el citoplasmaNo tienen intrones Intrones y exones
    56. 56. Que son los genes Los genes son secuencias de nucleótidos que codifican información para crear proteínas.Su tamaño varia desde menos de 100 pares de bases hasta varios millones de pares de bases.
    57. 57. • Todos los organismos eucariotes (organismo con células nucleadas, contrario a las bacterias que no poseen núcleo y se llaman procariotes) poseen genes que están divididos en exones e intrones. El significado biológico de esta segmentación no se conoce claramente.• La mayoría de los genes humanos están divididos en exones e intrones, excepto los genes mitocondriales y algunos genes del núcleo.• Durante la expresión génica tanto los exones como los intrones son transcritos para formar el pre- ARNm.
    58. 58. • El proceso de “splicing” del ARN elimina los intrones y produce una molécula de ARNm madura que codifica por un polipéptido.• Los exones se definen como secuencias que están representadas en el ARNm maduro.• Estos pueden o no codificar una proteína: algunos exones localizados en los extremos 3’ y 5’ del ARNm pueden no ser traducidos a proteínas.
    59. 59. Estructura del gen eucariotico• Exón: secuencia codificante• Intrón: secuencia no codificante entre dos exones
    60. 60. TRANSCRIPCION EN EUCARIOTAS• Es un proceso de mucha discriminación (según el tejido o etapa del desarrollo serán los genes que se van a transcribir)• La maquinaria de la transcripción debe tener en cuenta la compleja estructura de la cromatina eucariota• Requiere de varios tipos de RNA polimerasas• La RNA polimerasa requiere de factores adicionales llamados factores de transcripción para iniciar la transcripción• Tiene que haber un procesamiento complejo del mRNA que permita escindir los intrones del mensaje y transportar la molécula al citoplasma
    61. 61. Figure 13-10 Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    62. 62. RNA POLIMERASASPOLIMERASA LOCALIZACION RNA SINTETIZADOS I Núcleo pre – rRNA (excepto la subunidad 5S) II Núcleo pre – mRNA, RNA nucleares pequeños (snRNA) III Núcleo pre – tRNA, rRNA 5S, otros snRNAMitocondrial Mitocondria MitocondrialCloroplástica Cloroplasto Cloroplástico
    63. 63. RNA POLIMERA III• TRANSCRIBE LOS PRINCIPALES GENES DE RNA DE TRANSFERENCIA, RNA RIBOSOMAL 5S Y RNA PEQUEÑOS• Contiene 14 subunidades• Requiere varios tipos de factores de transcripción como TFIIIA, TFIIIB y TFIIIC
    64. 64. RNA POLIMERASA I• TRANSCRIBE LOS PRINCIPALES GENES DE RNA RIBOSOMICO• Contiene 13 subunidades• Necesita al menos 2 factores de transcripción para iniciar el proceso• El ribosoma eucariota contiene 4 moleculas de rRNA – Subunidad pequeña: 18S – Subunidad grande: 28S, 5.8S y 5S (no transcrito por esta RNApol)
    65. 65. RNA POLIMERASA II• TRANCRIBE LOS GENES ESTRUCTURALES, ES DECIR, LOS QUE SE TRADUCEN A PROTEINAS• Contiene múltiples subunidades• Intervienen al menos 7 factores de transcripción: TFIIA, TFIIB, TFIID, TFIIE, TFIIF, TFIIH y TFIIJ• El factor critico es TFIID que se une a la caja TATA que es el equivalente eucariota a la región -10
    66. 66. FACTOR DE FUNCIONTRANSCRIPCIONTFIID Reconoce la caja TATATFIIA Estabiliza el complejo entre TFIID y el DNATFIIB Recluta a la RNApol II y TFIIFTFIIF Ayuda a que la pol II reconozca el promotorRNA pol II Cataliza la síntesis de RNA, recluta a TFIIETFIIE Recluta a TFIIH y regula la actividad helicasa de TFIIHTFIIH Desenrolla la región promotora
    67. 67. Transcripción•
    68. 68. Procesamiento del RNA
    69. 69. Transcripción Procariotes
    70. 70. Procesamiento del RNA
    71. 71. Transcripción Eucariotes
    72. 72. FORMACION COMPLEJO TRANSCRIPCION RNA pol II•La caja TATA se une al factor de transcripciónTFIID, determina el sitio de inicio (aprox 10subunidades)•Incluye una prot de union a TATA (TBP) se uneespecificamente a TATA y a otros factoresasociados a TBP (TAFs)•El TBP se une a un segundo factor transcripcional(TFIIB) formando complejo TBP – TFIIB en elpromotor.
    73. 73. • EL TFIIB sirve de puente para que la RNA pol II se una al complejo TBP – TFIIB en asociacion con un tercer factor TFIIF.• Luego se requiere la union de dos factores adicionales para iniciar la transcripción: TFIIE, TFIIH.• TFIIH multisubunidad: 2 subunidades tienen funcion helicasa, otra subunudad tiene funcion quinasa•
    74. 74. • Potenciadores: rio arriba, dentro o rio abajo del gen y modulan la transcripción• Terminacion• hnRNA es procesado: 5 cap, poli-A y splicing
    75. 75. Transcripción
    76. 76. TranscripciónTipos de RNA• mRNA (mensajero)• tRNA (transferencia)• rRNA (ribosomal)• miRNA (micro RNA)
    77. 77. mRNA• Cadenas de largo tamaño con estructura primaria.• Se llama mensajero porque transporta la información para síntesis proteica.• La información de cada mRNA sintetiza una proteína determinada.• Su vida media es corta.
    78. 78. mRNA• Contiene codones (grupo de 3 nucleótidos que codifica para un a.a. en la cadena de polipéptidos). Señala el comienzo y el final de la cadena polipéptida.• En procariotas el extremo 5’ posee un grupo trifosfato• En eucariotas el extremo 5’ posee un grupo metil-guanosina (cap) unido al trifosfato, y el extremo 3´posee una cola de poli-A
    79. 79. tRNA• Tiene forma de hoja de trébol• Tiene una cola C-C-A 3’, donde se pega el A.A.• Contiene el anticodón (grupos de 3 nucleótidos complementarios al codón.)• Su misión es unirse a un aminoácidos y transportarlo hasta el ARNm  para sintetizar proteínas.
    80. 80. tRNA
    81. 81. rRNA• Es más estable.• Se divide en sub- unidades
    82. 82. Propiedades del código genético• Unidireccional – lee 5’ - 3’• No es superponible - codón independiente, (lee de tres en tres)• Colineal – la secuencia de a.a. corresponde a una ubicación de la secuencia de cada tres nucleótidos.• Redundante – la mayoría de los a.a. pueden ser codificados por varios codones.
    83. 83. Propiedades del código genético• Universal – el mismo código se cumple para todos los seres vivos.• Señal iniciadora – AUG corresponde a formil-metionina.• Señal de terminación – UAA, UAG, UGA, tripletes sin sentido.
    84. 84. Síntesis de proteínas• Transcripción• Traducción Iniciación Elongación Terminación
    85. 85. Traducción: (iniciación) • Envuelve la unión entre el tRNA con el primer codón del mRNA. • El primer codón es AUG (metionina) • El primer tRNA que llega se coloca en el lugar P (peptidil) del ribosoma.
    86. 86. INICIACION EN EUCARIOTES• El eIF1, y eIF3: Subunidad 40 s• eIF2 (GTP): RNAT met a la sub 40s• La cap 5’ reconocida eIF4F, eIF4A, eIF4B acoplan RNAm y ribosoma• La sub 40s + RNAT met y el eIF5 dirigen mensajero para identificar AUG de inicio• Al ser reconocido el eIF5 produce hidrólisis de GTP, los IF salen y sub 60s (eIF6) se une a 40s
    87. 87. Traducción: (elongación)• Formación de la cadena de a.a. para formar la proteína• Llega el segundo tRNA cargado y se coloca en el lugar A (aceptador) para formar el enlace péptidico, mediante la enzima peptidyltransferasa, esto se conoce como transpeptidación.
    88. 88. Traducción: (elongación) • La translocación se lleva a cabo cuando el primer tRNA (met) se mueve del lugar P al lugar E (“exit”). • El tRNA que estaba en el lugar A se mueve al P • El mRNA se mueve al siguiente codón para ser reconocido por el tRNA en el lugar A.
    89. 89. ELONGACION EUCARIOTES• eEF1α (GTP) = EF-Tu de bacterias• eEF2 (GTP) = EF- G de bacterias• eEF1β (GTP) recicla (GTP) eEF1α
    90. 90. Traducción: (terminación)• Luego de haberse formado la cadena de polipéptidos (elongación), se va colocar un codón de terminación (UAA, UAG, UGA)• Cuando el tRNA llega no reconoce el codón y detiene el proceso de elongación y se termina con la síntesis de proteína
    91. 91. TERMINACION EN EUCARIOTES• Solo un factor de liberación (RF)• 10 millones ribosomas /célula• 18 residuos de aa/ seg (20 aa diferentes)• DNA pol 10 N/seg.• RNA pol 55 N/seg• Síntesis proteínas 200M/ enlaces/ seg
    92. 92. 1865 Beadle & Tatum - 1941La hipótesis un gen – una enzima ¿Cómo funciona el genoma para manifestar sus características? Gen 1 Gen 2 Gen 3 Producto Precursor Enz 1 A Enz 2 B Enz 3 final
    93. 93. 1865 Beadle & Tatum - 1941La hipótesis un gen – una enzima Neurospora crassa
    94. 94. Figure 14-11a Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    95. 95. Figure 14-11b Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    96. 96. Figure 14-11c Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    97. 97. Figure 14-11 Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
    98. 98. 1865 Beadle & Tatum - 1941 La hipótesis un gen – una enzima Ascosporas en medio completo Neurospora crassaRayos X Mínimo + Todos amino ácidos crecen medio mínimo No crecen los mutantes Mutantes deficientes en la síntesis de arginina. Cys Glu Arg Lys His
    99. 99. 1865 Beadle & Tatum - 1941 + Ornithine + Citruline Minimal + Arginine Medium Gene A Gene B Gene CTipo Precursor Enz A Ornithine Enz B Citruline Enz C Argininenormal BLOQUEOMutantes Precursor Ornithine Enz B Citruline Enz C Arginineclase IMutantesclase II Precursor Enz A Ornithine Citruline Enz C ArginineMutantesclase III Precursor Enz A Ornithine Enz B Citruline Arginine
    100. 100. Figure 14-10 Copyright © 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.

    ×