Extracció ADN

Extracció d’ADN de plàtan

Objectiu
Extreure àcids nucleics de teixits de plàtan

Per extreure i visualitzar l’ADN del plàtan cal…
Trencar el teixit del plàtan per alliberar les cèl·lules.
Desfer les membranes lipídiques (plasmàtica i nuclear) per alliberar l’ADN.
Evitar que les nucleases lliures al citoplasma hidrolitzin l’ADN.
Precipitar l’ADN per poder visualitzar-lo

Abans de començar!!!
L’etanol, si es refreda en un frigorífic, s’ha de posar en un recipient tancat per evitar l’acumulació de vapors dins del frigorífic que es poden encendre amb una guspira

Procediment: Pas 1
Tritura gel a la batedora i posa’l ben triturat dins d’un got.
Posa aproximadament 15 mL (fins la marca feta al tub) d’etanol (alcohol 96º) al tub.
Tapa el tub amb film transparent i celo.
Enfonsa el tub tapat dins el gel. El glaç ha de cobrir al màxim l’etanol.
Deixa aquest muntatge al frigorífic fins al final de l’experiment.

Procediment: Pas 2
Tritura un plàtan amb 250 ml d’aigua destil·lada (és l’equivalent a un got d’aigua) fins que obtinguis una mescla homogènia.
Mescla 1

Procediment: Pas 3
En un got de plàstic mescla una cullerada petita de xampú i dos pessics de sal.
A continuació, afegeix 20 mL d’aigua destil·lada (5 cullerades petites)
No barregis encara
Mescla 2

Procediment: Pas 4
Afegeix al got que conté la mescla 2 3 cullerades petites del preparat de plàtan de la mescla 1 .

Procediment: Pas 5
Remena la solució durant 5 minuts amb una cullera de plàstic. Fes-ho lentament evitant així l’aparició de molta escuma.
Mescla 3

Procediment: Pas 6
Mentre un membre del grup remena la solució de plàtan, l’altre col·loca el filtre al got.
Posa’l de manera que el filtre no toqui el fons del got. Pots fer servir una pinça.

Procediment: Pas 7
Passa la mescla 3 pel filtre i deixa que la solució vagi filtrant durant uns minuts, fins que obtinguis uns 5ml de mostra (fins que es cobreixi el fons del got).

Procediment: Pas 8
Omple la pipeta de plàstic amb la mescla 3 filtrada.

Procediment: Pas 9
Treu el tub del frigorífic. Afegeix la mescla a l’alcohol fred.
Deixa que la solució reposi durant 2 ó 3 minuts sense moure-la . És molt important no agitar el tub.

Observació de resultats
El DNA precipita en contacte amb l’alcohol.
Té l’aparença d’un moc filamentós i blanc.

Extracció ADN

by ciencies.mon.contemporani

Accessibility

Upload Details

Usage Rights

2 Embeds 331

Statistics

Extracció ADN Presentation Transcript

http://biologiaelpalau.blogspot.com.es	322
http://biologiaelpalau.blogspot.com	9