Parásitos intestinales en las iguanas del parque zoo santa fe correcniones finales 6 de octubre de 2010

INFORME DE PROYECTOPARÁSITOS INTESTINALES EN LAS IGUANAS DEL PARQUE ZOOLÓGICO SANTA FE INVESTIGADORES Sebastián Ramírez Suarez María Claudia Puerta Vásquez Asesor Gustavo Valencia Quiroz. Licenciado en ciencias Naturales y Educación Ambiental 1

1. RESUMENSe está identificando las clases de parásitos intestinales que presentan lasiguanas del parque zoológico santa fe, a través de técnicas de separación eidentificación de parásitos a nivel de laboratorio. Se ésta utilizando el montajedirecto y la técnica de Flotación, la primera en solución salina al 0.9% y la segundaen solución salida al 33%; se hace su posterior montaje en placas porta y cubreobjetos y luego son llevadas al microscopio para observación y registro digital conun aumento de 10, 40 y 100X. La muestra representativa de iguanas para loscoprológico se obtiene de diferentes zonas del Zoológico denominadas zona 1:flamencos, zona 2 Lago del Totumo, Zona 3 Bisontes y zona 4 Herbívoros y sonalbergadas momentáneamente en los hábitats de cuarentena del Parque dondepermanecen con por un periodo de tres días siendo probable así obtener lamuestra de heces fecales naturalmente. Los resultados son analizados con laayuda de un experto en microbiología y por comparación con las imágenes guías ylos registros obtenidos en digital a través del microscopio. 2

2. TABLA DE CONTENIDOítem Título # Pág. 1 Resumen 2 2 Tabla de contenido 3 3 Agradecimientos 4 4 Introducción y justificación 5 5 Antecedentes y Planteamiento del problema 6 6 Pregunta de investigación 8 7 Objetivos 8 8 Hipótesis 8 9 Marco teórico 910 Metodología 1711 Cronograma de actividades 1912 Discusión, interpretación y aplicación de resultados 2013 Conclusiones parciales 2314 Bibliografía 2415 Anexos 25 3

3. AGRADECIMIENTOSPrimero que todo queremos agradecer a la Feria Explora y Cuidamundos EPM y alZoológico Santa Fe, por el apoyo incondicional que ha brindado a nuestroproyecto, igualmente a nuestra asesora de la UPB Lina María Martínez Sánchezpor los consejos metodológicos para de nuestra investigación.Para nuestros padres y madres de familia que han sido claves con la investigacióny el acompañamiento en los aspectos logísticos, de laboratorio y campo, aGustavo Valencia, nuestro tutor de herpetología y Nenfy Oyola microbióloga delParque Zoológico Santa Fe, muchas gracias por su apoyo y sabiduría. 4

4. INTRODUCCIÓN Y JUSTIFICACIÓNLas iguanas son reptiles muy hábiles capaces de desplazarse por todos losmedios posibles, por ejemplo, son veloces en tierra, excelentes nadadoras y muyagiles trepando arboles, de ésta manera se comportan en el Zoológico cadaindividuo, incluso delimitando su territorio.Sabemos entonces que las iguanas son libres en el Parque y que tienen unadinámica natural, que se desplazan por todos los rincones del Zoo y al igual queotros animales pueden contraer alguna enfermedad relacionada con parásitoscomo por ejemplo hongos, bacteriana, anélidos, etc.El trabajo con iguanas en cautiverio ha demostrado que estos reptiles pueden serreservorio y a la vez transmisores de muchas enfermedades, queremos confirmarel estado en que se encuentran a nivel de parásitos intestinales las iguanaspresentes en el zoo y esto como podría relacionarse con la salud de la mismaespecie y de otro tipo de animal.Este tipo de temas aun son desconocidos en muchos Zoológicos del mundo y portal motivo se ha vuelto de nuestro interés, sabemos que será una experienciainolvidable y que sobre todo aprenderemos mucho. 5

5. ANTECEDENTES O PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMAEn nuestro medio se tiene escaso conocimiento sobre las especies parasitariasque se encuentran habitualmente en la fauna silvestre. Pero existen algunosestudios realizados en este tipo de anímales: por ejemplo en el “…Perú en elParque Las Leyendas se realizó un estudio en un grupo de animales salvajes encautiverio en el zoológico Parque Las Leyendas en Lima, Perú, con el fin dedeterminar la presencia de parásitos gastrointestinales y establecer un plan detratamiento apropiado. Algunos de los parásitos que se encuentran en animales devida silvestre pueden permanecer en sus huéspedes cuando se encuentran encautiverio debido a la autoreinfección o la infección cuando las condicionessanitarias, el alimento o la presencia de huéspedes intermediarios o vectores lopermiten; por ejemplo, los primates no humanos se infectan con oxyuroideosporque estos parásitos tienen ciclo de vida directo, los pinnípedos lo hacen con laslarvas de ascáridos presentes en los peces marinos que ingieren como alimento(Soulsby, 1987). Los carnívoros son reservorios de protozoos, nemátodes,céstodes y trematodes, algunos de los cuales pueden infectar al hombre (porejemplo: Toxoplasma gondii, Lagochilascaris minor, Spirometra mansonoides,Paragonimus spp.) (Soulsby, 1987). Sin embargo, poco se conoce sobre loshuéspedes intermediarios o definitivos de estos parásitos en el Perú tanto en lafauna que proviene de su ambiente natural como en la que se encuentra encautiverio; por este motivo”…1 En el presente trabajo, se dan a conocer 4 especiesde nemátodes hasta ahora desconocidos para el Perú, mencionando sushuéspedes y su distribución. ESTOS. Dipetalonema graciliformis; Saguinuslabiatus; Evaginuris branickii, Dinomys branickii, Alaeuris caudatus; Iguana iguana;Serpinema amazonicus; Podocnemis expansa.1 Huéspedes definitivos de Spirometra mansonoides (Cestoda, Diphyllobothriidae) en el Perú 6

Otro tipo de Estudios realizados en Iguanas importadas han encontrado losiguiente:Lombrices intestinales: Los parásitos intestinales, y en particular los oxiuroideos,los acaris y los estrongiloideos, son muy comunes en las iguanas reciénimportadas y afortunadamente no demasiado peligrosos. Mediante el examen delas heces, que siempre debe efectuarse en los ejemplares recién adquiridos, elveterinario podrá descubrir si la iguana alberga lombrices intestinales y podráprescribir o administrar directamente el medicamento adecuado2.Estreñimiento y meteorismo: Se trata de patologías muy graves que puedenllevar a la iguana a la muerte en pocas horas y deben ser tratadas del mejor modopor personal experto. En la iguana el estreñimiento se presenta con uncaracterístico aumento de volumen del abdomen, respiración dificultosa e intentosde emisión de comida. Se debe a un estancamiento, en el colon saculado, dematerial seco que dificulta para avanzar hacia el último tramo del aparato digestivoy para ser eliminado en forma de heces. En el colon saculado el alimento seco esprivado de agua de nuevo y se vuelve aún más consistente, lo que agrava elproblema. Las causas de esta patología son diversas: dieta rica en alimentossecos (como piensos secos para iguana, heno y verduras deshidratadas porpermanecer en lugar caluroso); escasa ingestión de agua (porque falta del todo,no es renovada a diario o bien está la cubeta sucia); depósitos adiposos (en unaiguana obesa): huevos irregulares (demasiado largos o anchos, en forma de V) omuy numerosos (70 o más); deformaciones óseas de la pelvis (con frecuenciaresultado de una EMO), que comprimen el intestino; ingestión de cuerpos extraños(grava, piedras, arcilla, cortezas, etc.).Estudios como estos representan la importancia de continuar abordando estasproblemáticas en pro comprender como es la dinámica del parasito y suhospedero y sobre todo de su potencial zoonótico frente a otras especies.2 Fuente de informacion: La iguana. Massimo millefanti Editorial de vecchi 7

7. PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN¿Qué tipos de parásitos intestinales presentan las iguanas del Parque ZoológicoSanta Fe y que potencial zoonótico representan para las demás especies quehabitan estas instalaciones, incluyendo al ser humano? 8. OBJETIVOSObjetivo general:  Determinar los parásitos intestinales que están presentes en las iguanas del Parque Zoológico Santa Fe y su potencial zoonótico frente a las demás especies que habitan estas instalaciones, incluyendo al ser humano?Objetivos específicos:  Identificar los tipos de parásitos intestinales en las iguanas a través de la observación mediante el microscopio.  Relacionar el tipo de parasito con el estado de salud de los ejemplares y con su probable potencial zoonótico. 9. HIPOTESISEs probable que las iguanas del Zoológico posean parásitos intestinales quepueden transmitirse a otro tipo de animales que integran la colección del parqueZoológico a través de la dispersión natural de las heces fecales por varias zonasdel Zoo. 8

10. MARCO TEÓRICOEn nuestro marco teórico abordaremos los aspectos generales de la especie deiguana perteneciente a este estudio Iguana iguana luego, los aspectos generalesde la parasitología y el significado de parasito. También Especificando un pocomás reseñaremos varios tipos de parásitos algunos de interés para nuestrainvestigación que serán el referente de comparación con lo que encontremos enlas iguanas.Aspectos Biológicos de la especie Iguana Iguana3Iguana es un género de lagarto de la familia Iguanidae nativo de zonas tropicalesde centro y Sudamérica y el Caribe, que fue descrito por primera vez por elnaturista austríaco Josephus Nicolaus Laurenti en su libro Specimen Medicum,Exhibens Synopsin Reptilium Emendatam cum Experimentis circa Venena en1768. El género iguana incluye a dos especies, Iguana iguana e Iguanadelicatissima.La palabra "iguana" deriva del nombre taíno para este animal, "iwana".1 Iguanaiguana es la especie de este género más usada para la cría en cautiverio.Características físicasHay dos tipos de lagarto del género Iguana poseen una papada, con espinas quecorren por la espalda hasta la cola y un tercer ojo en su cabeza. Este último esconocido como ojo parietal, el cual parece una escama pálida en la cabeza. Detrásdel cuello hay unas escamas que asemejan picos, nombrados escamastuberculares.Las iguanas pueden medir de 7,5 centímetros hasta 2 metros, de los cuales 1,3metros pertenecen a la cola.2 Son animales herbívoros y se reproducen a travésde huevos que son colocados bajo tierra durante el mes de febrero. Alcanza la3 Aspectos biológicos y generales de Especie Iguana iguana son referenciados dehttp://es.wikipedia.org/wiki/Iguana_iguana 9

madurez sexual a los 16 meses de edad, pero son consideradas adultas a los 36 3meses, cuando miden 70 centímetros de largo.Visión: Las iguanas tienen una excelente visión y pueden ver cuerpos, sombras ymovimiento a grandes distancias. Las iguanas usan sus ojos para navegar através de selvas densas, así como también para encontrar comida. Tienentambién ciertas señales visuales para comunicarse con otras iguanas.Audición: La oreja de la iguana es conocida como tímpano, que es una estructuraexterna localizada cerca de los ojos, que en realidad no procesa el sonido,simplemente lo transmite a una oreja interna que está protegida del agua y objetosforáneos. Es una parte delgada y delicada de la iguana, y es crucial para suaudición.Distribución: Las iguanas son propias zonas húmedas selváticas de Sudamérica,Centroamérica y el Caribe viven normalmente en árboles alrededor de 1,2 m sobreel suelo, a pesar de su tamaño pueden moverse velozmente entre las plantas yson excelentes trepadoras.La parasitología: es una rama de la biología que se dedica a estudiarorganismos vivos, parásitos, eucariotas; como son los protozoos, helmintos(trematodos, cestodos, nematodos) y artrópodos. En su campo definencomo parasito como una relación simbiótica aniso específica (entre distintasespecies) en la que el parásito es dependiente metabólicamente de suhospedador y no es beneficiosa para éste”. A pesar de lo descrito anteriormente,el parasitismo también en algunos casos suele implicar una relación trófica, elparásito también puede lograr obtener otros beneficios de quien lo posea, ya queesto es lo que le sirve como protección frente a los depredadores o competidoresa quienes se debe enfrentar. Por otra parte es importante destacar que losparásitos suelen tener la facilidad de causar algún perjuicio sobre quién lo poseeen mayor o menor grado. 10

Los parásitos pueden vivir en diferentes partes del cuerpo, incluyendo los ojos y elcerebro, pero aquí vamos a discutir algunos de los parásitos más comunes dereptiles que habitan en el tracto digestivo que pueden ser identificados en examenfecal.Hay muchos tipos diferentes de pruebas fecales que se utilizan hoy en día,algunas pruebas son más apropiadas para identificar ciertos parásitos. Las dospruebas más comúnmente realizadas son la "materia fecal flotante" y "FecalCalumnia". La mayoría de los veterinarios lleva a cabo una o ambas de estaspruebas aunque algunos parásitos, especialmente protozoos más pequeños, queuna sola célula, no se visualizan bien con la flotación fecal o técnicas de tinción,pero se pueden identificar con otros métodos como el "ácido rápido".Cuando nos referimos a parásitos debemos tener en cuenta que pueden estaralojados dentro o fuera del organismo por ejemplo tenemos a nivel internoendoparásitos y a nivel externo ectoparásitos.Existe la parasitación interna por Protozoos como Amebas, Coccidios yCriptosporidios y por Vermes como Nematodos, Trematodos y Cestodos.Veamos algunos tipos de parásitos:Protozoos: La especie de protozoo parásito más patógena en saurios esEntamoeba invadens. Son parásitos de ciclo directo que colonizan el tractogastrointestinal, originando anorexia, diarrea, deshidratación y emaciación. Laslesiones más frecuentemente observadas son gastritis, enteritis, colitis, ulceracióny necrosis de la mucosa gastrointestinal. Cuando existe invasión hematógena sepueden ver afectados el hígado y los riñones, con lesiones de tipo necrótico. Lainfestación tiene su origen en la ingestión de quistes infestantes procedentes delas heces de otros reptiles. El diagnóstico in vivo se realiza mediante laobservación de quistes o trofozoitos en las heces. Como tratamiento de elecciónse utiliza metronidazol y dimetridazol (Lane & Mader, 1996).Los coccidios son parásitos de ciclo directo de las células epiteliales intestinales,aunque también se han descrito en las vías biliares. Los géneros más frecuentes 11

en reptiles son Eimeria, Isospora y Caryospora. Aunque son parásitos de ciclodirecto el ooquiste eliminado por heces requiere tres días antes de ser infestante.Ello tiene una importante implicación desde el punto de vista de la prevención; enun terrario en el que exista algún saurio infestado, si éste u otro ejemplar ingierematerial contaminado con ooquistes de dos días no se producirá infestación. Sinembargo, si el alimento contaminado permanece más tiempo será infestante. Porlo tanto es fundamental la limpieza y retirada de materia orgánica del terrario, tantoheces como restos de alimentos. Histológicamente se pueden observar losprotozoos parásitos junto con lesiones de tipos ulcerativos e inflamatorios dediverso grado. El diagnóstico in vivo se realiza mediante examen de heces eidentificación de ooquistes esporulados. La criptosporidiosis es una enfermedadparasitaria grave debida a coccidios del género Cryptosporidium. Aunque laenfermedad tiene una mayor incidencia en serpientes, también se ha descrito enaproximadamente 15 especies de saurios (O’Donoghue, 1995). La mayoría de loscasos de criptosporidiosis en saurios han estado asociados con infestacionesgástricas subclínicas (Upton, 1990), aunque también se han descrito cuadrosclínicos con anorexia, letargia y emaciación en camaleones (Dillehay et al., 1986)y lagartos ocelados (Frost et al., 1994). Mientras las lesiones asociadas acriptosporidiosis en serpientes son fundamentalmente hiperplásicas, con gastritisproliferativa caracterizada por hiperplasia de las células mucosas de las glándulasgástricas, algunos autores sugieren que los saurios responden a la infestación conuna gastritis atrófica (Frost et al., 1994), si bien también se han descrito lesionessimilares a las observadas en serpientes en un Chlamydosaurus kingi (Orós et al.,1998). La posibilidad que más de una especie de Cryptosporidium parasite areptiles podría explicar las diferentes lesiones (Upton et al., 1989). No existe untratamiento efectivo frente a esta enfermedad en reptiles.Trematodos: Los trematodos descritos en saurios pertenecen al orden Digenea.Son parásitos muy pequeños (1-2 mm) de ciclo indirecto, presentes en boca,faringe, esófago, tráquea y pulmones. Las lesiones que originan son de tipoulcerativo y salvo que el número de parásitos sea elevado, no se consideran de 12

excesiva importancia, salvo por la contaminación bacteriana secundaria de laslesiones.Cestodos: Dentro de este grupo de parásitos los tres órdenes de importanciaclínica en reptiles son Proteocephalidea, Pseudophyllidea, y Mesocestoididea.Dentro del primer orden los géneros Proteocephalus y Acanthotaenia parasitan elintestino anterior de varánidos (Frank, 1981). Dentro del segundo orden tan sólolos géneros Duthiersia y Scyphocephalus parasitan a saurios, concretamentevaránidos. Dentro del tercer orden se han descrito en lagartos parásitos adultos delas familias Nematotaenudae y Anoplocephalidae (Fig. 6), así como cisticercos dela familia Dilepididae y tetratiridios de la familia Mesocestoididae,desconociéndose en la mayoría de los casos el ciclo biológico del parásito.Nematodos: Dentro de este grupo de parásitos destacan en saurios dada lafrecuencia de presentación los nematodos oxyúridos. Son parásitos de ciclodirecto muy comunes especialmente en iguánidos. Sus fases larvarias sedesarrollan en el intestino anterior y después migran y se establecen en elintestino grueso particularmente en colon en el caso de infestaciones severaspueden causar impactación y anorexia, pero algunos autores piensan que en bajonúmero pueden servir al hospedador incluso para prevenir la constipaciónintestinal, ya que rompen y desmenuzan el material fecal. El diagnóstico se basaen la detección de huevos embrionados o no embrionados en las heces. Eltratamiento de elección es fenbendazol vía oral, a dosis de 50 mg/kg. 0tro grupode nematodos frecuentes en saurios son los filáridos. Las filariosis suelen sersubclínicas pero en infestaciones severas puede haber necrosis de territoriosorgánicos como consecuencia de trombosis parasitarias y consiguiente isquemia.Requieren mosquitos o garrapatas como hospedadores intermediarios. Las formasadultas suelen encontrarse en vena cava posterior y vena porta-renal, así como enel tejido subcutáneo en el caso de algunas especies. Existen numerosos génerosalgunos de los cuales son específicos, como el género foleyella en camaleones.El diagnóstico se basa en la detección de microfilarias en la sangre. 13

Dado que el tratamiento con ivermectina no ha sido probado en la mayoría de lasespecies de saurios, se recomienda como medida preventiva el control de losinsectos hematófagos que pueden actuar como hospedadores intermediarios.Recientemente se han detectado inmunohistológicamente microfilarias deFoleyella sp. En un camaleón de Oustaleti (Furciferoustaleti) (Orós et al., 2001).A continuación anexaremos la lista de imágenes de parásitos que se construyendoen nuestro marco teórico. Imágenes Tomadas del libro del capítulo deParasitología de ELLIS C. GREINER and DOUGLAS R. MADER. Giardia lamblia Orchidasma amphiorchis Pachypsolus irroratus Hymenolepis diminuta Aspicularis tetráptera Hymenolepis nana 14

Syphacia muris Cryptosporidium murisAmeva. Entomoeva invadens tropozoite Ciliate trophozoite Isospora amphiboluri Eimeria tacayea Hexamita Nycloterus 15

Giardia lambia Balantidium y NycloterusHuevo de cestodo Géneros de OxyridaLas recopilaciones de imágenes seguirán en construcción pues son el material didáctico para lacomparación con nuestras fotos que tomamos en el microscopio del Zoo.Respecto a los procesos parasitarios hay que indicar que en la naturaleza lamayoría de los reptiles están parasitados pero normalmente no sufren severasinfestaciones y por lo tanto no se compromete su supervivencia. Ello se debe aque los animales en libertad no están confinados en un espacio reducido y portanto la concentración ambiental de parásitos no es alta. Sin embargo, encondiciones de cautividad, especialmente si las condiciones higiénico-sanitarias noson adecuadas, la concentración de parásitos puede ser mucho más alta y portanto supone un mayor riesgo. Además en cautividad hay que considerar tambiénel estrés como factor adicional que disminuye las defensas del animalfavoreciendo la colonización parasitaria. Existen numerosísimas especiesparásitas afectando a reptiles. Lo más importante desde el punto de vista práctico 16

es conocer el ciclo del parásito y la forma de prevenir la infestación: si el ciclo esindirecto, y por tanto requiere un hospedador intermediario para completar suciclo, la medida más efectiva es evitar la existencia de ese hospedadorintermediario. Si el ciclo es directo se recomienda actuar sobre el animalparasitado. 10. METODOLOGÍAEl estudio se realiza a 1450 msnm en la Cuidad de Medellín en cuatro zonas delParque Zoológico Santa Fe correspondientes al hábitat de: 1 flamencos, 2 lago deltotumo, 3 hábitat de Bisontes y 4 Zona de herbívoros. Zonas en las cuales soncolectados los ejemplares de la especie Iguana iguana para ser llevados a la Zonade cuarentena donde son registradas y evaluadas cada una de sus característicascomo el tamaño, peso, condición corporal y particularidades. Allí se realiza elprocedimiento de marcado el cual se hace ubicando un número consecutivo en laescama salida con un marcador de tinta negra permitiendo esto no afectar enningún momento la integridad del animal. El número mínimo de iguanas a colectarestá estimado en 20.Además de registrar un historial del animal se procede a albergarlo en los hábitatsde cuarentena por un periodo de tres días con el ánimo de conseguir la mayorcantidad de muestras posibles (heces fecales) para llevar al laboratorio. Duranteeste periodo de tiempo las iguanas cuentan con los requerimientos necesariospara su bienestar como son el agua, alimentación, Calor (lámpara térmica) ytroncos para que puedan trepar.A continuación se describen los materiales utilizados y el procedimiento pararealizar la toma e identificación de las muestras como son el seriado, hisopadoCloacal, coprológico y montaje al microscopio.  Materiales: Guantes de látex, Guantes de carnaza para atrapar las iguanas, microscopio, gasa, Cajas de petri, computador con su respectivo software, 17

cámaras digitales, tarros de coprológico, tabletas de madera e hisopos estériles, tapabocas, bata de laboratorio, solución salina al 2.8% o tambien solución azúcarada4 al 20% Asesor experto en parasitología y asesor científico del proyecto.  Seriados: Consiste en muestreo repetitivo, que se hace por un periodo de 3 días para aumentar la probabilidad de encontrar los parásitos existentes en las iguanas o en cualquier otro animal.Técnicas utilizadas para examinar las muestras:  Flotación: es una técnica que permite diluir las heces fecales encontradas en los hábitats de cuarentena, en un tubo de ensayo y ser filtrada por una gasa para que a través de esta pasen solamente ciertos huevos de parásitos intestinales y se adhieren a un cubre objeto que se coloca encima del tubo de ensayo. Veamos lo pasos para esta técnica:Instrucciones: 1. Coloca agua destilada al frasco con la materia fecal. 2. tamiza (filtra) la materia fecal. 3. coloca líquido en un tubo de ensayo hasta las ¾ partes. 4. centrifuga a 1500rpm durante 3 min. 5. Tira el sobrenadante 6. Agrega agua hasta las ¾ partes y coloca un tapón y agita. 7. Centrifuga a 1500rpm por 3 min. 8. Tira el sobrenadante. 9. Repite los paso 6, 7,8. 10. Agrega ZnSO4 al 33% hasta ¾ partes. 11. Agita hasta homogenizar 12. Centrifuga a 1500rpm por 3 min 13. Destapa el tubo y colócalo en la gradilla y con el asa bacteriológica toma muestra de la superficie 14. Colócala en el porta objetos con una gota de iodo lugol y tápalo con el cubre objetos. 15. Enfoca con 10x revisa toda la muestra4 Solucion azucarada: 900 gramos de azúcar en 700 mililitros de agua. 18

16. Enfoca con 40x 17. Realiza datos de paciente examen físico y microscópico dibujos observaciones y conclusiones  Frotis directo: Con ayuda de un hisopo estéril o un estilete se introduce por la cloaca de la iguana y se toma la muestra de materia fecal, luego se frota sobre el porta objeto, se diluye con un poco de solución salina5 y en otras ocasiones con lugol6 y se hace observación directa en el microscopio.  Identificación: Con ayuda de un experto, imágenes y un libro guía aprenderemos a identificar las clases de familias y géneros de parásitos a través del microscopio. Variable de la investigación Químicas: PH de heces fecales. Físicas: humedad, temperatura, Densidad parasitaria. Biológicas: Se podrían expresar con ayuda de la categorización taxonómica de las familias y géneros de parásitos que logremos encontrar. 11. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADESCRONOGRAMA DE ACTIVIDADESACTIVIDADES JULIO AGO SEPT OCT NOV DIC ENE FEBRECOLECCION X X X XANALISIS X X XSEGUIMIENTO X XCONCLUSIONES X X X 5 Solución Salina: se diluye al 2.8% utilizando 331 gramos de sal en 1 litro de agua. 6 Lugol: Es un colorante utilizado para tinción de microorganismos, por ejemplo parásitos y bacterias. 19

12. DISCUSIÓN, INTERPRETACIÓN Y APLICACIÓN DE RESULTADOSDe las 20 Iguanas proyectadas como la muestra representativa de ejemplarespara el proyecto, se han capturado hasta la fecha en dos actividades de campo alinterior del Zoo 11 individuos, representados en 1 juvenil X hembras adultas ymachos adultos. Cada ejemplar ha sido evaluado y registrado (ver tablas deregistro) además se han marcado con un numero en la escama salida con laayuda de un marcador no borrable. Para reconocerlas por un corto periodo detiempo. También se registraron fotográficamente las particularidades de cadaejemplar para ser tenidas en cuenta en caso realizarse recaptura. La técnica de lafotografía resulta ser no invasiva y a la vez muy practica.Al primer grupo que constaba de 6 ejemplares se les realizaron en total 18Hisopados Cloacales, los cuales no develo ningún tipo de información casocontrario a las muestras a las muestras colectadas de las heces fecales quedejaban las Iguanas en el hábitat de cuarentena. Figura # 1 Hisopado cloacal Figura # 2 Coprológico obtenido naturalmentePor los datos arrojados y lo complicado de manipular estos ejemplares se decidecontinuar la investigación solo con la colecta de heces fecales que ellos depositenen el hábitat de cuarentena. Estas muestras son llevas al laboratorio en un tarropara coprológico totalmente estéril y marcado con los datos del ejemplar y la zonaa donde pertenece. 20

A continuación presentamos las tablas que relacionan el número de muestrasobtenidas, el número de pruebas realizadas y los resultados parciales (código defoto). N. Técnica de Identificación al N. Científico # serie Observaciones común separación microIguana iguana Iguana 001 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 002 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 003 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 004 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 005 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 006 Hisopado cloacal 0Iguana iguana Iguana 007 Hisopado cloacalIguana iguana Iguana 008 Hisopado cloacalIguana iguana Iguana 009 Hisopado cloacalIguana iguana Iguana 010 Hisopado cloacalIguana iguana Iguana 011 Hisopado cloacalEn la primera tabla se evidencia como después de los hisopados cloacales laidentificación en el microscopio no devela ningún tipo de resultado para los 6primeros ejemplares. En total por todo el seriado sumaron 18 muestras norevelaron muestras significativas.Por el contario el montaje al microscopio de las heces fecales recogidas encuarentena empezaron a revelar la presencia de algunos parásitos como sucedióen los ejemplares 1, 3, y 9. N. Técnica de Identificación Habitat N. Científico # serie Observaciones común separación al microIguana iguana Iguana 001 Flotación si Foto 001Iguana iguana Iguana 002 Flotación 0Iguana iguana Iguana 003 Flotación si Foto 003Iguana iguana Iguana 004 Flotación 0Iguana iguana Iguana 005 Flotación 0Iguana iguana Iguana 006 Flotación 0Iguana iguana Iguana 007 Flotación 0 21

Iguana iguana Iguana 008 Flotación 0Iguana iguana Iguana 009 Flotación Si (bacterias Foto 002 desconocidas)Iguana iguana Iguana 010 Flotación 0Iguana iguana Iguana 011 Flotación 0Zona 1: flamencosZona 2: totumoZona 3: bisontes y sabanasZona 4: herbívoros Hisopado ·# # de Cloacal/Frotis fecha ejemplar muestra Zona resultado Directo Flotación Observaciones21/09/2010 1 2 NOPI X21/09/2010 2 1 NOPI X21/09/2010 3 1 1 NOPI X X se observaron Trofozoitos de Balantidium sp21/09/2010 4 2 3 NOPI X X pool21/09/2010 5 2 3 NOPI X X pool21/09/2010 6 2 4 NOPI X X pool04/10/2010 7 4 NOPI X05/10/2010 8 4 NOPI X05/10/2010 9 3 NOPI X05/10/2010 10 3 NOPI X Hisopado ·# # de fecha Zona resultado Cloacal/Frotis Flotación Observaciones ejemplar muestra Directo22/09/2010 1 2 2 NOPI X X se encontraron Trofozoitos de Balantidium y huevos de tipo oxiuroideo ver foto #22/09/2010 2 1 NOPI X22/09/2010 3 1 NOPI X22/09/2010 4 2 3 NOPI X X se encontraron Trofozoitos de 22

Balantidium sp22/09/2010 5 2 3 NOPI X X22/09/2010 6 2 4 NOPI X X22/09/2010 7 4 NOPI X22/09/2010 8 4 NOPI X22/09/2010 9 3 NOPI X Bacterias desconocidas22/09/2010 10 3 NOPI X Hisopado ·# # de fecha Zona resultado Cloacal/Frotis Frotación Observaciones ejemplar muestra Directo05/10/2010 7 1 4 NOPI X X07/10/2010 7 2 4 X X huevo desconocido05/10/2010 8 1 1 X X trofozoitos de trichomonos y huevo desconocidoParásitos encontrados hasta el momento en las heces de las iguanas delParque Zoológico Santa Fe.Bautizar las fotos Imagen . Foto Valencia, G Imagen 007 . Foto Hoyola, N 23

Imagen Ramírez, SLa presencia de estos parásitos pueden significara lo siguiente: la presenciade Balantydium spGráfica # 1. Sistematización de datos: En la siguiente tabla se presenta larelación del numero de Iguanas vs el área en que se colectaron Número de iguanas Colectadas vs Zona Geográfica 8 7 6 5 # Iguanas 4 3 #REF! 2 # Iguanas Colectadas 1 0 Flamencos Totúmo bizontes Herviboros (Zona 1) (zona 2) (zona 3) (zona 4) Título del ejeDiscusión:Gráfica # 2. 24

Correlación del # de iguanas colectadas con el numero de isopados realizados y el numero número de Párasitos encontrados 10 9 8 número de eventos 7 6 Flamencos (Zona 1) 5 Totúmo (zona 2) 4 bizontes (zona 3) 3 2 Herviboros (zona 4) 1 0 # Iguanas Colectadas # Muestras Con # Parasitos Isopados Título del ejeGráfica Número Tres: Correlación entre el número de iguanas colectadas, el número de heces fecales realizados y el numero número de Párasitos encontrados 8 7 # eventos positivos 6 5 4 Flamencos (Zona 1) 3 Totúmo (zona 2) 2 bizontes (zona 3) 1 0 Herviboros (zona 4) # Iguanas Colectadas # Muestras # Parasitos Recolección de Heces Título del eje 25

Gráfica Numero Cuatro: # Parasitos 3,5 3 2,5 2 1,5 # Parasitos 1 0,5 0 Flamencos (Zona 1. Totúmo (zona 2. bizontes (zona 3. Herviboros (zona 4. Balantidium sp) Balantidium sp, y Balantidium Ninguno) Huevo sp, Trozofoitos de desconocidos) trichomonas y Huevo desconocidos) 13. CONCLUSIONES PARCIALESHasta el momento podemos interpretar que la mejor manera de detectar losparásitos intestinales de las iguanas del parque Zoológico Santa Fe se deberealizar a través de la colecta de muestras que surjan naturalmente pero coniguanas control, de ahí la importancia de marcar las iguanas y de aislarlasindividualmente durante tres días para recoger la mayor cantidad de pruebasposibles.La técnica de identificación de parásitos por comparación es una buena estrategiapero de igual manera se necesita un entrenamiento arduo para aprender adiferenciar y a encontrar los parásitos con la ayuda del microscopio. 26

Según los registros de tamaño y peso de los ejemplares de iguana iguana delZoo se encuentran en perfectas condiciones, no presentan desnutrición y por elcontrario poseen bastante vitalidad y fuerza. Aunque algunos individuos presentescicatrices y les falte alguna parte del cuerpo se comprende que los ejemplares quellegaron al zoológico fueron asignados por las autoridades ambientales para que elzoo sea una oportunidad más para vivir.El tiempo es una variable compleja para este tipo de investigaciones pues serequiere demasiado logística como permisos, personal, materiales y sobre todo lascondiciones del clima por que en muchas de las salidas de campo en el zoohemos perdido los días por la lluvia. Cuando llueve las iguanas se refugian en losarboles y se quedan allí para cuando sale el sol y es poco probable que bajen.ESPERAMOS OBTENER MAS MUESTRAS PARA PRESENTAR UN BUENAVANCE DE RESULTADOS EN LA FERIA EXPLORA Y CUIDAMUNDOS EMP. 27

14. BIBLIOGRAFÍAColes, William (2002), «Green Iguana», U.S.V.I. Animal Fact Sheet #08(Department of Planning and Natural Resources US Virgin Islands Division of Fishand Wildlife),http://www.vifishandwildlife.com/Education/FactSheet/PDF_Docs/08GreenIguana.pdfJoan Queralt Gil. «Iguanas» (en español). Consultado el 3 de junio de 2008.«Resptiles y Peces: Iguana». Consultado el 3 de junio de 2008.Tantaleán, M. Michaud, Carmen (2011). Definitive hosts of Spirometra mansonoides(Cestoda, Diphyllobothriidae) in Peru.http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-99332005000100015. Huéspedes definitivos de Spirometra mansonoides(Cestoda, Diphyllobothriidae) en el PerúIguanas.cl 1 42 pm sábado 17 abrilwww.dialway .com. 1 46 pm Sábado 17 de abrilhttp://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/biologia/v05_n2/nematodes.htm hora .156 fecha. 17 de Abril de 2010http://www.galapagospark.org/noph.php?page=institucion_laboratorio&set_lang=es hora 200 pm 17 abrilELLIS C. GREINER and DOUGLAS R. MADER. Capitulo de ParasitologíaContinúa en construcción 15. ANEXOS 28

Tabla de ingreso y examen Físico de fauna silvestreAllí registramos todos los datos del ejemplar y las particularidades en físico se tienen todas las tablas. 29

Actividades de campo Captura de iguanas y adecuación de cuarentena 31

Tablas de sistematizacion de datos de los ejemplares y sus particularidades Ejemplos fecha de marca o historia clínica Procedencia entregado cautiverio historia microchip por: Medellín, autoridad 21/09/2010 ejemplar: 001 001 si Antioquia ambiental clase orden familia genero especie nombre común Iguana reptilita Squamata Iguanidae iguana iguana iguana edad sexo: aproximada peso longitud anexos anexos Condición escamas macho adulto 8 kg 1.32 m corporal: normales normal Lugar de celda de problemas observaciones PROBLEMAS PROBLEMAS colecta cautiverio internos le falta parte de falta 4to dedolago del totumo celda B SOLO agresivo ninguno la gula inferior derecha Observacionesfecha de marca o historia Procedencia entregado por: cautiveriohistoria microchip clínica Medellín, autoridad 21/09/2010 ejemplar:002 h:002 si Antioquia ambiental clase orden familia genero especie nombre común reptilita Squamata Iguanidae iguana iguana iguana iguana edad sexo: peso longitud anexos anexos aproximada 32

condición escamas macho adulto 7.5 kg 1.42 m corporal: normal normales Lugar de celda de observacione problemas PROBLEMAS PROBLEMAS colecta cautiverio s internos faltas escamas flamencos celda D SOLO agresivo ninguno LASERACIONES laterales Bitacora parcial de nuestro proceso de investigaciónBitacora:Fecha: 20 de Febrero de 2010Actividad: Lluvia de ideas.Descripcion: Los integrantes del club científico del zoológico nos reunimos connuestros profesores para analizar diferentes temas de investigación quepudiéramos llevar a cabo dentro del zoo.Conclusion: Escogimos el tema de parasitos presentes en iguanas del parquezoológico santa fe.Fecha: 15 de marzo de 2010Actividad: Construcción del anteproyecto:Descripcion: En este dia el profesor nos explico como se elabora un anteproyectoy las partes que lo conforman. Se formulo la pregunta de investigación, seestablecieron los objetivos y comenzamos el marco teorico.Conclusion: No solo en el Club aprendemos sobre fauna sino también adquirimosconocimientos académicos y sembramos los primeros pinos para una formacióncomo investigadores. 33

Fecha:Actividad: Aprobacion del anteproyectoDescripcion: Fue presentado al profesor el anteproyecto para revisión yaprobación.Fecha:Actividad: Parque ExploraDescripcion: Reunion informativa sobre la feria explora 2010Actividad: Inscripcion Feria Explora 2010Explora para inscribir su proyecto a la FERIA EXPLORA 2010.Actividad: Aprobacion del proyectoDescripcion: El proyecto fue aprobado para pasar a semifinales, se exponen todasla condiciones para seguir en el proceso de selección y la metodología exigida porel PARQUE EXPLORA.Actividad: Reunion con la asesora designada por el parque explora.Descripcion: Se le presenta a la asesora el proyecto para que lo revise, se le haceun resumen sobre lo que hemos adelantado y le informamos la metodología aseguir con respecto al trabajo de campo.Fecha: 29 de Junio de 2010Actividad: Reunion con la microbióloga del PZSF.Descripcion: El PZSF nos puso a disposicion para la el estudio de las hecesfecales a la doctora Nenfy, ella nos va a colaborar con el análisis de la materiafecal recolectada en las diferentes zonas del Parque.Fecha: 2 de Julio de 2010Actividad: Recoleccion de materia fecal. 34

Descripcion: Teniendo en cuenta las normas de bioseguridad, nos dispusimos arecolectar las muestras de materia fecal en diferentes sitios del PZSF, lasdepositamos en frascos coprologicos, las marcamos con la fecha, el lugar de recolección y el numero de la muestra. Luego las llevamos al laboratorio y con lacolaboración de la doctora nenfy procedimos a realizar el respectivo análisisConclusion: aprendimos los diferentes métodos que se utilizan para examinar unamuestra de materia fecal, las condiciones en que hay que almacenarlas, y lasnormas de bioseguridad que hay que tener en cuenta para no contagiarlas conagentes externos.Fecha: 11 de Septiembre de 2010Actividad: Correccion del proyecto.Objetivo: Restaurar aspectos metodológicos y conceptuales del proyecto.Descripcion: Luego de una entrevista con nuestro asesor del parque explora y delZoologico se hizo necesario reestructurar algunos aspectos metodológicos de lainvestigación. En el método que se utilizara para recolectar las muestras de heces,se sugiere un cambio drástico, ya que antes nuestra metodología planteaba querecolectaríamos las heces al azar en diferentes zonas del zoológico, peroconcluimos que los resultados no eran los mas exactos ya que no sabíamos almomento de encontrar algún parasito a que animal pertenecía. En el métodorecomendado colectar los animales, colocarlos en zona de cuarentena y tomarmuestras de las heces como también isopados cloacales, por medio de estemétodo los resultados van a ser mas precisos y se sabra a que animal pertenece.Fecha: 21 de septiembre de 2010Actividad: Colecta de ejemplaresDescripcion: Al principio, cuando se planteo la forma de como se haría larespectiva colecta, dijimos que haríamos las tomas de muestra en diferenteszonas del zoo buscando la materia fecal del suelo al azar, inclusive se hizo un 35

ejercicio de tomar 3 muestras, las llevamos al laboratorio y la con la ayuda de lamicrobióloga, las analizamos y tomamos nota de lo encontrado en las diferentesmuestras, pero cuando hablamos con nuestra asesora del parque explora nosrecomendó otra forma de colecta que es la que utilizamos en el trabajo de campoy es la siguiente: 1. Gracias al apoyo de la Doctora Martha Ocampo pudimos acceder a cuatro cuartos para llevar a nuestros ejemplares y colocarlos en cuarentena, estos sitios los limpiamos y desinfectamos adecuadamente para protegerlos de cualquier bacteria que pudieran tener, también cubrimos la parte inferior de la reja con triplex para que ellos no se hagan daño con la malla. 2. Luego con la ayuda del equipo médico y algunos empleados, hicimos la colecta de 6 ejemplares de diferentes sitios del zoo, entre ellos dos machos, en el sitio de colecta se tomaron directamente de la cloaca de cada animal las muestras de heces y las etiquetamos y fotografiamos. 3. Procedimos a llevarlos al sitio de cuarentena, allí fueron medidos y pesados, se les observo las anomalías que algunos tenían y por último los colocamos en los cuartos, agrupados de acuerdo al sitio donde fueron capturados, los machos fueron puestos en sitios diferentes por seguridad de ellos ya que son muy territoriales y pueden atacarse. 4. Las muestras fueron llevadas al laboratorio para su posterior estudio que detallaremos mas adelante. 5. Estos 6 ejemplares se analizaran por tres días consecutivos conforme a lo planteado en el proyecto.La conclusión que sacamos de este método de muestreo es que es masespecifico con respecto a cada animal, ya que se sabe, al menos la primera toma,de que animal es. Mejor que lo que habíamos planteado inicialmente. Puede quepara el animal sea mas traumático, por ser capturado y puesto en cautiverio,puede ser también que desarrollen alguna anomalía que no tenían debido alestrés que esto les pueda causar, pero nos esforzamos para que su cautiverio y 36

posterior estudio sea lo menos dañino para ellos, lo último que nosotrosdesearíamos seria causarles algún mal.Fecha: 22 de Septiembre de 2010Actividad: Recolecta de materia fecal en cada hábitat y se les hizo isopado cloacal.Descripcion: Se procede a observar si hay heces en cada hábitat para surecolección. Se encontró materia fecal en el hábitat 1, que pertenece al ejemplarnumero 3, también el hábitat 4 ejemplar 2, luego se les hizo isopado al resto de losejemplares.Conclusion: Ya que, según nos informa la microbióloga, los hallazgos encontradossolo se han obtenidos de muestras de heces, ninguno por isopado cloacal, debidoa esto tomamos la decisión de no continuar haciendo este procedimiento, por lopobre de los resultados y por el alto estrés que se le causa a los animales.Fecha: 23 de Septiembre de 2010Actividad: Liberacion de los ejemplares.Descripcion: Nuevamente buscamos muestras de heces en cada hábitat sinresultados, como ya ajustamos el tercer dia, procedemos a la liberación de losejemplares, se tomaron fotos de los ejemplares para registrar las anomalidadesfísicas de cada uno.Se liberan en el mismo sitio de donde fueron capturados.Conclusion: La toma de muestras por medio de heces es mas lento que con elisopado cloacal pero nos arroja mejores resultados, ya que asi es como hemosobtenido los tipos de parasitos encontrados en los animales.Fecha: Entre el 24 de Septiembre y el · de Octubre no pudimos capturar animalesdebido al invierno, ya que estos animales se suben a los copos de los arboles paraaprovechar el sol.Fecha: 4 de Octubre de 2010 37

Actividad: Preparacion de Habitats y Captura de la segunda parte de losejemplares.Descripcion: Como hicimos para la colecta anterior se procede a desinfectar loshábitat con hipoclorito al 5%, luego vamos a las diferentes zonas del zoo parabuscar los ejemplares.Se colectaron 2 ejemplares un macho adulto y un juvenil que en el momento nosabemos si es macho o hembra, se llevaron al área de cuarentena. 38

Parásitos intestinales en las iguanas del parque zoo santa fe correcniones finales 6 de octubre de 2010

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