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Estudio de proteinas sericas
 

Estudio de proteinas sericas

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Estudio de las Proteinas séricas, diagnosticos mediante electroforesis de proteinas. Es un archivo grande, pero muy completo, enfocado a las electroforesis de proteinas.

Estudio de las Proteinas séricas, diagnosticos mediante electroforesis de proteinas. Es un archivo grande, pero muy completo, enfocado a las electroforesis de proteinas.

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    Estudio de proteinas sericas Estudio de proteinas sericas Presentation Transcript

    • ELECTROFORESIS DE PROTEINAS: ASPECTOS TECNICOS Y APLICACIONES CLINICAS Servi-Med Biol. Carlos Béjar Lozano Laboratorios Clínicos
    • PORQUE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS ?PORQUE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS ?  SU JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIASU JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA  Existen en el suero, cientos de proteínas producidas por diversos órganos.  A excepción de las proteínas del complemento hemolítico, las inmunoglobulinas y una gran variedad de hormonas, casi todas las proteínas son sintetizadas en el hígado y vertidas al sistema circulatorio.  Muchas de estas proteínas, o son filtradas por el riñón, absorbidas en el intestino o son metabolizadas en diversas células y órganos.   Mediante electroforesiselectroforesis pueden evidenciarse variaciones significativas en la concentración de estas proteínas, y por ende, evidenciar alteraciones orgánicasevidenciar alteraciones orgánicas como: hematológicas, inmunológicas, renales, hepáticas y gastrointestinales.  Hasta hace un par de décadas, el abordaje de estas alteraciones se basaba en el estudio de Proteínas Totales y Relación A/G  POCO SENSIBLE
    •  Este estudio se basa en la propiedad de las proteínas para moverse según su peso molecularpeso molecular y su carga eléctricacarga eléctrica, al colocar una muestra de suero del paciente en una matriz (Gel de Agarosa o Acetato de Celulosa) y aplicar un voltaje.  En el suero (pH 7.4) hay proteínas con carga + y – pero, a un pH alcalino de 8.9, todas las proteínas quedan con carga eléctrica negativa y migrarán del Cátodo (-) hacia el Anodo (+)  Son básicamente 10 a 12 proteínas las responsables de la formación de las bandas características de la electroforesis de proteínas. ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS  SU PRINCIPIO TÉCNICOSU PRINCIPIO TÉCNICO
    • ELECTROFORESIS DE PROTEINAS: Electroforograma de proteínas o Proteinograma Ánodo (+) Pre- Albúmina Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta B-1 B-2 Gamma Cátodo ( - ) Punto de aplicación
    • ELECTROFORESIS DE PROTEINAS: Principales interferencias: Hemoglobina y Fibrinógeno Ánodo (+) Pre- Albúmina Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta B-1 B-2 Gamma Cátodo ( - ) Punto de aplicación Fibrinógeno: 340 kD entre Beta y GammaHemoglobina: 68 kD entre Alfa-2 y Beta
    • ELECTROFORESIS DE PROTEINAS: Componentes de las distintas fracciones Componente Concentración Concentración Prot. Totales 6.0 a 8.0 g/dL 100.0 % Pre-Albúmina .016 a .040 g/dL 16.0 a 40.0 mg/dL Albúmina 3.2 – 5.2 g/dL 52 – 65 % Globulinas Alfa-1 0.1 – 0.3 g/dL 2 – 5 % Globulinas Alfa-2 0.4 – 1.0 g/dL 7 – 13 % Globulinas Beta 0.5 – 1.1 g/dL 8 – 14 % Globulinas Gamma 0.8 – 1.8 g/dL 12 – 23 %
    • Fracción: Albúmina - Forma la primer banda de la electroforesis. Constituye del 50 % al 60 % de las proteínas séricas. - Sirve como deposito móvil de aminoácidos y como molécula transportadora de diversas hormonas y medicamentos. - Variantes: - Bisalbuminemia: dos bandas en la fracción albúmina. Puede inducirla la penicilina y cefalotina. No tiene implicaciones clínicas. - Disalbuminemia: albúmina con diferente movilidad electroforética y diferente capacidad para transportar sustancias (medicam, hormonas…) - Medición útil en el diagnóstico de insuficiencia hepática, deshidrata- ción aguda, pérdida de proteínas. - Cuando la concentración sérica es menor de 2 g/dL, se desarrollará edema. - Buen marcador para detectar los déficit nutricionales crónicos. - Los aumentos de albúmina se relacionan casi siempre con deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido proteico del plasma. - Disminución importante por daño hepático (síntesis disminuida) o por pérdida renal (proteinuria).
    •  Bisalbuminemia típica  Fracciones Beta-1 y Beta-2 diferenciadas  No asociado a ninguna patología  Inducida por penicilinas y otros antibióticos Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  La Albúmina se encuentra dividida: bisalbuminemiabisalbuminemia  Las dos fracciones de albúmina no son simétricas, por lo que puede inferirse su inducción por fármacos como antibióticos  No tiene implicaciones clínicas. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • Fracción: Alfa - 1 - Esta formada básicamente por 3 componentes: - Antitripsina Alfa-1: Corresponde al 90 % de las proteínas de esta banda, y se tiñe de forma muy intensa. Es un inhibidor de proteasas como los activadores de los factores de la coagulación y del complemento hemolítico. - Alfa Feto-Proteína: normalmente es no detectable su presencia, pero en CA hepático incrementa esta banda. - Lipoproteína Alfa y Glicoproteína Ácida Alfa-1 (Orosomucoide): Se tiñen débilmente en este análisis, por lo que no son representativas. - Se presentan elevaciones en procesos inflamatorios en los que hay producción de reactantes de fase aguda. - Se observa disminución en pacientes con daño hepático (cirrosis). - Por deficiencia congénita de alfa 1 antitripsina. - Aproximadamente un 75% de los adultos con deficiencia grave de Alfa- 1 Anti-tripsina desarrollarán enfisema. - Se desconoce el mecanismo que asocia la enfermedad hepática con déficit de Alfa-1 Antitripsina y el enfisema.
    •  Albúmina baja  Alfa-1 elevada  Proceso inflamatorio agudo en curso.  Alfa-1 Anti-tripsina como reactante de fase aguda.  Albúmina ↓↓= aumento falso del resto de las fracciones. Observar valores absolutos y porcentuales. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Fracción Alfa-1 disminuida  Disminución crítica principalmente en pacientes con enfisema pulmonar  Sueros envejecidos pierden esta fracción. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • Fracción: Alfa - 2 Constituida por: 1.- Macroglobulina Alfa-2: - Peso Molecular = 725 KDa - Inhibidor de proteasas como la tripsina y la plasmina. - Reactante de fase aguda - Se eleva de 3 - 8 veces en procesos que aumentan la filtración glomerular con pérdida de proteínas. 2.- Ceruloplasmina - Proteína transportadora de hasta el 95 % de todas las reservas de cobre del organismo. - Hay formas heredadas y adquiridas de esta deficiencia. 3.- Haptoglobina: - Peso Molecular = 9 a 20 Kda - Proteína transportadora de la Hb liberada por hemólisis de los g.r. - Disminuye en todo proceso de hemólisis. El complejo Haptog-Hb migra diferente que la haptog sola. - Se une especialmente a las HbA, HbF, HbS y HbC. - Es reactante de fase aguda - Aumenta en infecciones, procesos inflamatorios, neoplasias, traumatismos y uso de andrógenos. 4.- Lipoproteína de alta densidad (HDL): - Poco teñida por colorantes de proteínas, por lo que tiene poca influencia en esta electroforesis.
    • Fracción: Alfa - 2 Aumento de esta fracción: - Procesos inflamatorios agudos o crónicos - Condiciones neoplásicas - Infarto al miocardio - Síntesis aumentada de haptoglobina por procesos hemolíticos. - SINDROME NEFROTICO (acumulación de HDL) Disminución de esta fracción: - Fase aguda de procesos hemolíticos - Anemia megaloblástica - Daño hepático severo (cirrosis, hepatitis, tumor hepático).
    •  Fracción Alfa-2 muy elevada (acumulación de HDL )  Albúmina disminuida.  Patrón observado en Síndrome NefróticoSíndrome Nefrótico  ColesterolColesterol ↑↑↑↑↑↑ Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Alfa-2 y Beta aumentados en cifra % pero normal en concentración g/dL: Imagen compatible con proceso maligno  Fenómeno inducido por disminución en Albúmina  Disminución real en gama globulinas. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • Fracción: Beta Esta fracción puede dividirse en dos bandas: Beta-1 y Beta-2 1) Fracción Beta-1 (más anódica, polo +) - Está constituida principalmente por Transferrina ( o Beta-1 glicoproteína). Tiene un papel fundamental en la dinámica del hierro; básicamente acarreo de sitios de depósito (hígado) hacia los sitios donde hay células que están sintetizando Hb (eritropoyesis en la médula ósea). - Existen distintos tipos de transferrina, P.M. 80 – 90 Kda que corren todos en Beta-1 posición. - Aumento: La Tf es abundante en la leche materna: aumento en suero de bebes lactantes y madres lactando. En pacientes con deficiencia en hierro aumenta para compensar el déficit de Fe de una forma precoz. - Disminuye: Enfermedad hepática, nefrosis, anemia crónica, neoplasias, y en procesos infecciosos.
    • Fracción: Beta 2) Fracción Beta-2 (más catódica, polo -) - Esta fracción incluye principalmente la fracción C3 del complemento y en menor grado, C4. - Esta fracción se degrada rápidamente aun en muestras refrigeradas, ya que C3 es degradado en componentes menores de movilidad electroforética Beta-1. - Ya que tanto la vía clásica como la alterna del complemento convergen en C3, variaciones significativas de los niveles séricos de C3 correlacionan estrechamente con variaciones en esta banda. - Varios procesos autoinmunes como Lupus, A.R. y otros, suelen cursar con disminución de esta banda por consumo de C3. - La proteína de Bence-Jones (en orina) presenta movilidad en esta zona, por lo que puede inducir su elevación (Cadenas ligeras de Ig´S). - La lipoproteína Betalipoproteína Beta (de baja densidad) se ubica en esta banda. Abarca Beta-1 y Beta-2 e inclusive hasta inicio de la región gamma. - Corren en esta fracción también, la Beta-2-microglobulina y la hemopexina, menos representativas en proporción del resto de los componentes citados.
    • Fracción: Beta Padecimientos que afectan los niveles de la Fracción Beta-2 1. Hipogamaglobulinemias y padecimientos con pérdida de inmunoglobulinas 2. En enfermedades malignas: Enf. Hodgkin, Leucemia granulocítica crónica, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, gamopatías monoclonales 3. Hipergamaglobulinemia policlonal 4. Hepatopatías crónicas, 5. Enfermedades autoinmunes: Lupus, AR, S. Sjögren, esclerodermia, etc 6. Varios tipos de infecciones crónicas como: - Bacterianas: TB, lepra, osteomielitis, endocarditis bacteriana. - Parasitarias: tripanosomiasis, paludismo, Kala-Azar. - Micóticas: Actinomicosis, nocardiosis - Virales: Mononucleosis infecciosa (VEB), bartonelosis, linfogranuloma venéreo 7. Frecuentemente una alteración de esta banda, va acompañada de alteraciones en otras bandas.
    • Fracción: Gamma-Globulinas - Esta fracción esta formada por las 5 inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM, IgD, IgE ESTA METODOLOGIA NONO DISCRIMINA LAS CONCENTRACIONES INDIVIDUALES DE CADA INMUNOGLOBULINA - SU FUNCION ES EVALUAR LA CONCENTRACION GLOBAL DE INMUNOGLOBULINAS. - Una banda monoclonal obliga a determinarse InmunoelectroforesisInmunoelectroforesis para definir la paraproteína anormal que se esta produciendo. - La Proteína C Reactiva corre dentro de esta banda, pero su concentración es tan baja en proporción a las Ig´S, que no altera el patrón de corrimiento aun en fase aguda.
    • Inmunoelectroforesis para definir paraproteína de un Mieloma Definición de Gammopatía BiclonalGammopatía Biclonal: aparecen dos bandas monoclonales definidas en la electroforesis de proteínas. La Inmunoelectroforesis define las Inmunoglobilinas producidas. Electroforesis en Gel de agarosa Inmunoelectroforesis para definir inmuno- globulina anormal: Biclonal IgG-IgM Kappa
    • Fracción: Gamma-Globulinas - Elevación de la Gamma Globulinas:Elevación de la Gamma Globulinas: - Infecciones crónicas (principalmente virales, como Epstein Barr) - Enfermedad hepática - Enfermedades autoinmunes (Lupus, A.R.) - Síndromes malignos como mielomas y linfomas - Disminución de Gamma Globulinas:Disminución de Gamma Globulinas: - Agamaglobulinemia - Envejecimiento (edad del paciente) - Algunos medicamentos principalmente mielotóxicos (QT, Antibióticos) - Algunos padecimientos malignos como LLC. - Su disminución explica estados de inmunodepresión, con causa aSu disminución explica estados de inmunodepresión, con causa a determinar por otros métodos (laboratorio y clínica).determinar por otros métodos (laboratorio y clínica).
    •  Disminución en fracción Gama:  Paciente con disminución en respuesta inmune Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • Fracción Gama ausente: AAgamaglobulinemia puragamaglobulinemia pura Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Fracción Gama con base angosta y altura mayor que la base: Banda MonoclonalBanda Monoclonal  Dx: MielomaDx: Mieloma Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0  Banda monoclonal: 65.3 %  Albúmina: 18.2 %  Inicia tratamiento Análisis de patrones electroforéticos
    • Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0  Banda monoclonal: 38.8 %  Buena respuesta a tratamiento con disminución de gama y aumento de albúmina Análisis de patrones electroforéticos
    • Electroforesis en Acetato de Celulosa Reproducibilidad 1 1 2 2 3 3 4 4 1. Banda policlonal 2. Banda monoclonal 3. Normal 4. S. Nefrótico (puente Beta-Gama)   Inmunofijación para definir inmunoglobulina anormal
    • Inmunofijación para definir paraproteina anormal Inmunoelectroforesis o Inmunofijación. 3. IgA kappa 4.- IgG Lambda 1. IgG Lambda 2.- Suero normal 1 1 2 2 3 3 4 4 1. Banda policlonal 2. Banda monoclonal 3. Normal 4. S. Nefrótico (puente Beta-Gama)
    • Reporte de Electroforesis de Proteínas Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0
    • REPORTE DE ELECTROFORESIS - ProteinogramaProteinograma del paciente con la ImagenImagen de su corrimiento electroforético. - Información auxiliar para interpretación (principales patrones encontrados. - Identificación del paciente - Resultados, con valores normales en % y g/dL.
    • Análisis de patrones electroforéticos  La disminución de la albúmina induce una pseudoelevación del resto de las fracciones.  Desnutrición severa?  Deshidratación ? Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0
    •  Proteínas normales  Alfa-2 muy elevada y Beta muy disminuida  ¿Síndrome Nefrótico?  ¿Banda Monoclonal?  No es común banda monoclonal en ese sitio… se sugiere practicar inmunoelectroforesis. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Albúmina esta muy disminuida  Alfa-2 y Beta en proporción muy aumentada  Paciente con proceso hepático maligno. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  En un mieloma, hay otros componentes que dan información además de la banda monoclonal:  Alfa-2 : S. Nefrótico + Neoplasias + Procesos inflamatorios  Beta : enfermedades malignas) Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Fracciones Beta y Gama unidas en una sola banda ancha:  Puente “Beta-Gama”  Cirrosis HepáticaCirrosis Hepática Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Puente “Beta-Gama”  Proteinas disminuidas  Cirrosis HepáticaCirrosis Hepática Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Banda policlonal invadiendo fracción Beta.  Discriminación entre cirrosis, policlonal o eventual monoclonal mediante inmunoelec- troforesis (verificar cambios hematológicos y PFH´s)  Puente Beta-Gama no suele dar un pico tan alto Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    •  Banda Monoclonal atípica.  Definir paraproteína producida mediante inmunoelectroforesis: define diagnóstico y pronóstico. Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta Gama Valor % 52.0 – 65.0 2.0 – 5.0 7.0 – 13.0 8.0 – 14.0 12.0 – 23.0 Valor g/dL 3.2 – 5.2 0.1 – 0.3 0.4 – 1.0 0.5 – 1.1 0.8 – 1.8 Prot. Totales 6.0 – 8.0 g/dL Relación A/G > 1.0 Análisis de patrones electroforéticos
    • 1. La electroforesis de proteínaselectroforesis de proteínas es un método de abordaje sensible para detectar innumerables alteraciones de estados patológicos y disfunción de varios órganos, que no pueden definirse por otros métodos. 2. Es importante realizar estudio de inmunoelectroforesisinmunoelectroforesis a toda muestra con banda monoclonal para definir la paraproteína producida y definir el diagnóstico, pronóstico y tratamiento. No es útil realizar la inmunoelectroforesis en el seguimiento de este padecimiento, ya que su principal utilidad es diagnóstico. 3. Debe usarse la electroforesis de proteínaselectroforesis de proteínas para evaluar respuesta a tratamiento (seguimientoseguimiento) en pacientes con banda monoclonal. 4. Puede realizarse electroforesis de proteínaselectroforesis de proteínas en el seguimiento de un padecimiento cuya anormalidad fue detectada por este método, observando la corrección de la anormalidad de imagen encontrada. 5. Sugerir la realización de electroforesis de proteínaselectroforesis de proteínas a pacientes con fenómeno de RouleauxRouleaux, mayores de 50 años de edad (sobre todo si hay datos clínicos de fiebre, dolor óseo y alteraciones hematológicas). 6. Se sugiere reducir el uso de la cuantificación de Proteínas yProteínas y Relación A/GRelación A/G por lo limitado de la información que provee. ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS
    •  En caso de sospecha clínica de gamopatía monoclonal, una región gama sérica normal no excluye diagnóstico.  Debe realizarse Electroforesis de Proteínas en OrinaElectroforesis de Proteínas en Orina: ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS  Proteína de Bence-Jones: Eliminación por orina, de cadenas ligeras de las inmunoglobulinas, las que se producen en exceso. Observada en pacientes con Mieloma, Macroglobulinemia de Waldenström y en algunos casos de Amiloidosis.  Enfermedad de cadenas pesadas: Pueden eliminarse por orina en estos padecimientos. Producen solo la fracción Fc de las inmunoglobulinas (principalmente IgG, IgA, IgM e IgD), de ahí el nombre de enfermedad de cadenas pesadas. Suero del paciente Orina del paciente concentrada 20 X
    •  Electroforesis de Proteínas de Líquido CefalorraquídeoElectroforesis de Proteínas de Líquido Cefalorraquídeo para investigar bandas oligoclonalesbandas oligoclonales.  Estas, son inmunoglobulinas (síntesis intratecal) que indican la presencia de una inflamación en el sistema nervioso central y puede ser un signo de esclerosis múltiple (apoyan diagnóstico, sin ser patognomónicas). ELECTROFORESIS DE LIQUIDOELECTROFORESIS DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO
    •  Más del 95% de los pacientes con esclerosis múltiple presentan bandas oligoclonales en el líquido cefalorraquídeo indicando una síntesis intratecal de inmunoglobulinas.  No hay correlación entre la presencia de bandas y el proceso desmielinizante.  Las Bandas pueden estar presentes aunque el nivel de inmunoglobulinas en LCR sea normal  Una vez que la respuesta oligoclonal está establecida se mantiene durante la vida del paciente (excepto en los procesos infecciosos).  Se sugiere correr la electroforesis del LCR simultáneamente con el suero del paciente para cálculo de índices proteicos (NO HEMOLISIS)  Las bandas oligoclonales se encuentran presentes en otros procesos como:  neurosífilis, meningitis aguda bacteriana o viral, leucoencefalopatías, panencefalitis esclerosante subaguda, panencefalitis progresiva por rubéola, neuritis óptica y otros procesos autoinmunes o infecciosos. ELECTROFORESIS DE LIQUIDOELECTROFORESIS DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO
    •  Diagnóstico y seguimiento de las distintas enfermedades neurológicas que cursan con alteraciones de la concentración y composición de las proteínas del LCR.  Aumento de la síntesis o liberación de proteínas (globulinas) in situ  Evaluación del grado de afectación de la integridad de la Barrera Hemato-Encefálica consecutivo a infecciones, inflamación o traumatismo.  Aumento del paso de proteínas por ruptura de la integridad de la BHE  Obstrucción a la libre circulación del LCR  Procesos degenerativos-destructivos del SNC  Proteinas del LCR:  Paso de proteínas Plasma  LCR = 80 % (difusión pasiva)  Síntesis intratecal de proteínas: < 20 % ESTUDIO DE LAS PROTEINAS DELESTUDIO DE LAS PROTEINAS DEL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOLIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
    • ELECTROFORESIS DE LIQUIDOELECTROFORESIS DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO  Para corrimiento en muestras sin diluir y tinción con oro coloidal, usar una muestra de suero normal como control, diluida 1:20 (suero / sol. salina)  Para corrimiento con muestras concentradas, ajustar concentración de proteínas según la siguiente tabla:  Proteínas de L.C.R. de 15 a 45 mg/dL (suero es de 6.0 a 8.0 g/dL) Proteínas totales iniciales en la muestra (L.C.R. / orina) Concentración a efectuar: (aproximar a 2 g/dLaproximar a 2 g/dL) < 30 mg/dL 80 X 40 – 100 mg/dL 40 X 100 – 300 mg/gL 20 X 300 – 600 mg/dL 10 X > 600 mg/dL 5 X
    • ELECTROFORESIS DE LIQUIDOELECTROFORESIS DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO  Método de Concentración mediante Columna de Minicon CS15 (Milipore)  Cuantificación de Proteínas en LCR y ajuste de concentración
    • INDICES DE PROTEINAS YINDICES DE PROTEINAS Y GLOBULINAS DEL SUERO / LCRGLOBULINAS DEL SUERO / LCR
    • CAUSAS DE AUMENTO DE PROTEINAS DELCAUSAS DE AUMENTO DE PROTEINAS DEL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEOLIQUIDO CEFALORRAQUIDEO Por aumento del paso de proteínas desde el plasma Hemorragia cerebral Meningitis bacteriana Meningitis viral 30 – 150 mg/dL 80 – 500 mg/dL 30 – 100 mg/dL Por aumento de síntesis intratecal Neurosífilis Esclerosis Múltiple Meningitis tuberculosa Síndrome de Guillain-Barre 50 – 150 mg/dL 25 – 50 mg/dL 50 – 300 mg/dL 100 – 400 mg/dL