Proyec Campos

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Presentacion de un Proyecto en el Concytec

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Proyec Campos

  1. 1. Responsables D. Campos. R. Chirinos. I. Betalleluz. G. Noratto. 462/2004/CONCYTEC/OAJ Colaboradores : Centro Internacional de la Papa (CIP) Proyecto CIUF – Belgica Proyecto AOL – Texas Evaluación de los compuestos bioactivos (fenólicos totales, antocianinas, carotenoides totales) y capacidad antioxidante de diferentes genotipos de mashua (Tropaelum tuberosum Ruiz & Pavón) IBT
  2. 2. <ul><li>El uso empírico de raíces y tubérculos andinos como alimentos con alto potencial benéfico para la salud se atribuye a la presencia de compuestos bioactivos entre ellos diversos antioxidantes, lo cual les confiere propiedades preventivas frente a procesos degenerativos como el cáncer, problemas cardiovasculares, la diabetes, entre otros. </li></ul>POTENCIALIDAD FUNCIONAL DE LAS RAÍCES Y TUBÉRCULOS ANDINOS
  3. 3. <ul><li>La determinación y cuantificación de los compuestos </li></ul><ul><li>bioactivos permitirá identificar variedades con mayor </li></ul><ul><li>potencial funcional. </li></ul><ul><li>Compuestos como los fenólicos, glucosinolatos, ...., antocianinas, carotenoides y otros pigmentos, presentes en grandes cantidades en raíces y tubérculos andinos, serian los responsables de gran parte de sus efectos protec tores . </li></ul>
  4. 4. VALORIZACION DE LOS RECURSOS GENETICOS <ul><li>cultivos andinos : papa, oca, olluco, mashua, yacón; por su contenido en compuestos bioactivos (antocianinas, fenólicos, carotenoides) y su Actividad a ntioxidante. </li></ul><ul><li>u otros como: chicuro, ar racacha, maíz morado, ayrampo, estevia, caig ua, etc. </li></ul>Rescatar y promocionar con base científica la importancia de:
  5. 5. <ul><li>Identificar los genotipos de la mashua que presenten mayor contenido de compuestos bioactivos y mayor capacidad antioxidante </li></ul><ul><li>Estudiar la influencia del estado de madurez (crecimiento) del tubérculo y de las condiciones de almacenaje en el contenido de compuestos bioactivos y capacidad antioxidante </li></ul><ul><li>Optimizar la extracción de los compuestos bioactivos y evaluar la estabilidad de estos compuestos y la capacidad antioxidante de la mashua. </li></ul>OBJETIVOS
  6. 6. MATERIALES Y METODOS
  7. 7. Materia prima Se trabajó con 10 genotipos de mashua proporcionados por el centro internacional de la papa (CIP), provenientes del departamento de Junín. Los códigos de los genotipos utilizados fueron: DP – 0203, AVM – 5562, DP – 0223, ARB – 5576, DP – 0215, M6 COL 2C, DP – 0223, ARB – 5241, AGM – 5109 y DP - 0224 Genotipos morados Genotipos amarillos DP - 0203 DP - 0207 DP - 0215 AGM - 5109 ARB - 5241 DP - 0224
  8. 8. Métodos de análisis <ul><li>Antocianinas totales: Fuleki y Francis (1968) </li></ul><ul><li>Compuestos fenólicos: Swain y Hills (1959) </li></ul><ul><li>Capacidad antioxidante: ABTS. Arnao (2001) </li></ul><ul><li> ORAC Ou et al (2001), Huang et al (2002), y Cao y Prior (1999) </li></ul><ul><li>Flavonoïdes (Flavan 3-ol): Mc Mourrough y Mc Dowell (1978) y Delcour y Varebeke (1985). </li></ul><ul><li>Carotenoides totales: Talcott y Howard (1999) </li></ul>
  9. 9. Metodología experimental Diagrama de flujo para la determinación de algunas características funcionales en 10 genotipos de mashua ( tropaelum tuberosum R & P) Lavado Selección Congelado Envasado Desinfección Mashua Antocianinas Compuestos fenólicos Carotenoides Capacidad antioxidante Agua potable Agua, tierra e impurezas Raíces defectuosas Agua clorada (50ppm CLR) -18 º C
  10. 10. C r e c i m i e n t o meses : 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 S o l e a d o días : 7 14 21 28 35 Evaluación de los compuestos bioactivos a diferentes estados de madurez y períodos de soleado Siembra Cosecha
  11. 11. Flujo de operaciones para el acondicionamiento de la materia prima para su almacenamiento antes de ser analizada Liofilizado Mashua Lavado Embolsado Molienda Almacenamiento* T= -45°C (condensador) P = 133x10 -3 mBar Agua + impurezas Agua °T = -18°C *Las muestras de mashua fueron almacenadas hasta el momento del análisis
  12. 12. Optimización de la extracción de los compuestos fenólicos de la mashua <ul><li>Se realizaron ensayos preliminares con la finalidad de evaluar el número de etapas de extracción y la relación materia prima/solvente. </li></ul><ul><ul><li>Se evaluaron 1, 2 y 3 etapas de extracción de 30 minutos cada una considerando una relación materia prima/solvente de 1/30 y 1/60 (p/v). </li></ul></ul><ul><ul><li>Las extracciones se realizaron a temperatura ambiente (  22 - 25ºC) y una agitación de 200 RPM todos los ensayos fueron protegidos de la luz. </li></ul></ul>
  13. 13. <ul><li>Tipo de solvente: acetona + 10 % H2O (v/v), </li></ul><ul><li>metanol + 10 % H2O (v/v), </li></ul><ul><li>etanol + 10 % H2O (v/v) y agua. </li></ul><ul><li>pH del solvente: 1.5; 2.1; 3.0 y 5.0. Se reguló el pH con HCL al 37%. </li></ul><ul><li>Proporción de agua en el solvente: Se evaluó la adición de 0, 50 y 90% de agua (v/v) en el mejor solvente de extracción seleccionado en las etapas previas. </li></ul><ul><li>Tiempo de extracción: 5, 15, 30, 60 y 120 minutos. </li></ul><ul><li>Mezcla de solventes: metanol/acetona/agua (45/45/10, v/v/v) O metanol/agua </li></ul>
  14. 14. Esquema experimental para evaluar el efecto de la temperatura y pH sobre los compuestos bioactivos Capacidad antioxidante Extractos de antocianinas Contenido de antocianinas Contenido de compuestos fenólicos Extractos de compuestos fenólicos Evaluación de características funcionales Muestras de trabajo Tratamiento térmico Temperatura (ºC) pH Tiempo (min.) 60 80 90 3 5 7 3 5 7 3 5 7 t 1 = 0 t 2 =15 t 3 =30 t 4 =45 t 5 =60 t 6 =75 t 7 =90
  15. 15. RESULTADOS
  16. 16. EVALUACION DE LOS DIFERENTES GENOTIPOS
  17. 17. CONTENIDO DE ANTOCIANINAS Antocianinas totales (mg cia-3-glu/100 g) 0 50 100 150 200 250 300 DP - 0224 ARB - 5241 AGM - 5109 Genotipos Antocianinas totales (mg cia - 3- glu/ 100 g, b.h.) 205.04 DP -0224 239.55 Maíz morado
  18. 18. COMPUESTOS FENÓLICOS Compuestos fenólicos (mg ac. Clorog./100 g) 0 50 100 150 200 250 300 350 400 ARB - 5241 DP - 0224 AGM - 5109 ARB - 5576 M6 COL 2C DP - 0223 DP - 0203 DP - 0215 DP - 0207 AVM - 5562 Genotipos Compuestos fenólicos (mg Ac. Clorog/ 100 g, b.h.) 337.40 ARB-5241 339.45 Fresa Genotipos amarillos Genotipos morados
  19. 19. CONTENIDO DE CAROTENOIDES Carotenoides totales (mg  -caroteno/100 g) 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 ARB - 5576 M6 COL 2C DP - 0227 DP - 0203 AGM - 5109 DP - 0215 AVM - 5562 DP - 0223 ARB - 5241 Genotipos Carotenoides totales (mg ß- caroteno/ 100 g , b.h.) Genotipos amarillos Genotipos morados 2.51 ARB - 5576 9.07 Zanahoria
  20. 20. CAPACIDAD ANTIOXIDANTE HIDROFILICA Genotipos amarillos Genotipos morados
  21. 21. CAPACIDAD ANTIOXIDANTE LIPOFILICA Genotipos amarillos Genotipos morados
  22. 22. COMPARACION ENTRE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE MASHUA Y OTROS PRODUCTOS 1784 ¨Blueberry¨ 1 3167 Camote morado 1 4720 Maíz morado 1 9309.27 Mashua (genotipo DP – 0224) 10002.36 Mashua (genotipo ARB –5241) C. Antioxidante (  g Trolox equiv/g) Producto 1 Cisneros – Zevallos (2001)
  23. 23. RELACION ENTRE ANTOCIANINAS Y CAPACIDAD ANTIOXIDANTE HIDROFILICA Ic = 0.74 R 2 = 54.9% p>0.05 0 200 400 600 800 1000 1200 ARB - 5241 DP - 0224 AGM - 5109 Genotipos Capacidad antioxidante hidrofilica (ug Trolox equiv./ g, b.h.) 0 50 100 150 200 250 Antocianinas (mg cia- 3-glu/ 100 g, b.h.) C. Aox Antocinaninas 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 0 100 200 300 Antocianinas totales (mg Cia -3 -glu/100 g , b.h.) Capacidad antioxidante hidrofílica (µg Trolox / g , b.h.)
  24. 24. RELACION ENTRE LOS COMPUESTOS FENOLICOS Y LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE HIDROFILICA Ic= 0.85 R 2 =70.6% p<0.01 0 200 400 600 800 1000 1200 ARB - 5241 DP - 0224 DP - 0215 M6 COL 2C AGM - 5109 AVM - 5562 ARB - 5576 DP - 0207 DP - 0223 DP - 0203 Genotipos Capacidad antioxidante hidrofílica (mg Trolox equiv./100 g,b.h.) 0 50 100 150 200 250 300 350 Fenólicos totales (mg Ac.Clorog./100 g, b.h.) Fenólicos totales
  25. 25. INFUENCIA DEL CRECIMIENTO DE LA RAÍZ Y DEL SOLEADO POST- COSECHA EN ALGUNOS COMPUESTOS BIOACTIVOS Y CAOx
  26. 26. EVOLUCION DE LA CAOx (ABTS, ORAC) DURANTE EL CRECIMIENTO DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MAS HUA Genotipos morados Genotipos morados
  27. 27. EVOLUCION DE FNosT y FLAVANOLES DURANTE EL CRECIMIENTO DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MAS HUA Genotipos morados Genotipos morados
  28. 28. EVOLUCION DE ACYs CAROTENIOIDES TOTALES DURANTE EL CRECIMIENTO DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MAS HUA
  29. 29. EVOLUCION DE LA CAOx (ABTS) Y FNsT DURANTE EL SOLEADO POST-COSECHA DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MAS HUA
  30. 30. EVOLUCION DE FAVANOLES y ACYs DURANTE EL SOLEADO POST-COSECHA DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MASHUA
  31. 31. EVOLUCION DE CAROTENOIDES TOTALES DURANTE EL SOLEADO POST-COSECHA DE DIFERENTES GENOTIPOS DE MAS HUA
  32. 32. ESTUDIO DEL LA EXTRACCION DE ALGUNOS DE LOS COMPUESTOS BIACTIVOS
  33. 33. Efecto de los diferentes solventes en la recuperación de los compuestos bioactivos y la capacidad antioxidante en extractos fenólicos procedentes de tres genotipos de mashua 2.0 1.0 1.5 2.0 1.2 0.4 1.2 0.9 6.1 4.4 5.9 4.9 236.5 110.9 237.3 193.9 AGM 5109 Metanol Etanol Acetona Agua 3.5 3.0 3.5 3.5 3.2 1.1 3.5 2.1 13.1 7.1 11.0 10.7 306.8 141.5 300.5 228.3 ARB 5241 Metanol Etanol Acetona Agua 6.4 5.5 6.0 6.3 1.8 1.1 1.8 1.0 12.8 6.4 8.4 11.9 206.0 131.3 185.2 146.1 DP 0224 Metanol Etanol Acetona Agua Antoc. (mg cianidina 3-glucósido/g, m.s) Flavan 3-ol (mg cateq./g, m.s) Comp. fenólicos (mg á. gálico/g, m.s) Capa. Antioxidante ORAC (μmol TE/g, m.s) Genotipo/ Solvente
  34. 34. Efecto del pH en la recuperación de los compuestos bioactivos y capacidad antioxidante (ORAC) de dos genotipos de mashua Fenólicos Antocianinas Flavan 3-ol ORAC 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 pH 1.5 pH 2.1 pH 3.0 pH 5.0 mg de comp. bioactivos/g ms 0 50 100 150 200 250 300 0 5 10 15 20 25 pH 1.5 pH 2.1 pH 3.0 pH 5.0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 u mol T.E. / g ms DP-0224 ARB-5241
  35. 35. Influencia de la proporción metanol/agua en la extracción de algunos compuestos bioactivos y capacidad antioxidante de dos genotipos de mashua DP-0224 ARB-5241 Fenólicos Antocianinas Flavan 3-ol ORAC 0 5 10 15 20 25 90% 50% 10% mg com. bioactivo/g, m.s 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 0 5 10 15 20 25 90% 50% 10% 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 u T.E./ gms
  36. 36. Evolución en la eficiencia de recuperación de los compuestos bioactivos y la capacidad antioxidante en extractos de mashua del genotipo DP 0224 en función al tiempo
  37. 37. Comparación de la eficiencia de recuperación de los compuestos bioactivos y la capacidad antioxidante en extractos de metanol al 90% y metanol:acetona:agua 45:45:10 262 402 271 9.6 6.1 4.2 2.5 5.0 3.0 16.2 20.4 13.1 DP 0224 ARB 5241 AGM 5109 Metanol:acetona:agua (45:45:10, v/v) 265 400 271 9.5 6.1 3.6 2.2 4.0 2.6 17.2 21.6 12.9 DP 0224 ARB 5241 AGM 5109 Metanol 90% (v/v) ORAC (umol TE/g, m.s) Antocianinas (mg cianidina 3-glucósido/g, m.s) Flavan 3-ol (mg catequina/g, m.s) Fenólicos (mg acido gálico/g, m.s) Genotipo Solvente
  38. 38. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA Y pH EN LA ESTABILIDAD DE LAS ANTOCIANINAS Y COMPUESTOS FENOLICOS (DP – 0224)
  39. 39. Influencia de la temperatura y pH en la estabilidad de las antocianinas 60 ºC 80 ºC Disminuciones 33.48% (pH 3) 39.89% (pH 5) 82.09% (pH 7) Disminuciones 71.38% (pH 3) 60.60% (pH 5) 87.77% (pH 7) … ///
  40. 40. 90 ºC Disminuciones 84.17% (pH 3) 84.78% (pH 5) 92.87% (pH 7) … ///
  41. 41. Constantes de velocidad térmica y tiempos de vida media de las antocianinas de mashua, a diferentes valores de pH 0.49 1.41 90 0.47 1.46 80 0.59 1.17 60 7 0.58 1.18 90 1.17 0.59 80 1.98 0.35 60 5 0.64 1.08 90 0.85 0.81 80 2.56 0.27 60 3 T½ (h) b K (h -1 ) a Temperatura (ºC) pH a Constante de velocidad de degradación (1/h) b Tiempo de vida media (h)
  42. 42. Influencia de la temperatura y pH en la estabilidad de los compuestos fenolicos Disminuciones 7.84% (pH 3) 6.50% (pH 5) 31.25% (pH 7) Disminuciones 20.54% (pH 3) 15.24% (pH 5) 16.31% (pH 7) … /// 60 º C 80 º C
  43. 43. … /// Disminuciones 30.91% (pH 3) 18.70% (pH 5) 46.65% (pH 7) 90 º C
  44. 44. Influencia de la temperatura y pH en la estabilidad de la capacidad antioxidante 60 º C 80 º C Variación -1.60% (pH 3) + 21.80% (pH 5) -1.00% (pH 7) Variación +10.62% (pH 3) -2.39% (pH 5) -10.57% (pH 7) … ///
  45. 45. … /// Variación +7.38% (pH 3) -10.82% (pH 5) -11.79% (pH 7) 90 º C
  46. 46. CONCLUSIONES
  47. 47. <ul><li>Los tres cultivares de coloración morada (ARB 5241, </li></ul><ul><li>DP 0224 y AGM 5109) presentaron altos contenidos </li></ul><ul><li>de metabolitos secundarios y capacidad antioxidante, comparables e incluso mayores que algunas frutas y vegetales. </li></ul><ul><li>Los valores del CFTs disminuyeron durante el período de desarrollo de los cultivares de Mashua observándose en el primer estado de madurez evaluado (5 meses después de la siembra) el mayor valor promedio de 13,49 mg de ácido clorogénico / g de materia seca. Luego CFTs aumentan sustancialmente durante la primera semana de soleado tiende a disminuir ligeramente hacia los últimos días de tratamiento. </li></ul>
  48. 48. <ul><li>Los contenidos de flavan 3-ol aumentan durante el </li></ul><ul><li>crecimiento de los tubérculos alcanzando su máximo </li></ul><ul><li>valor a los 7,5 meses. Los valores para los cultivares </li></ul><ul><li>morados son superiores (6,80 mg de catequina equi. </li></ul><ul><li>/ g de ms ARB 5241). Se aprecia un incremento durante la primera semana de soleado para el contenido de flavan 3-ol, luego se nota un descenso gradual que se hace más pronunciado al llegar a partir de la tercer semana de exposición solar. </li></ul><ul><li>El contenido Acys sólo se determinó para los 3 cultivares de coloración morada. Tienden a incrementarse conforme se desarrolla la raiz. El mayor valor de Acys es alcanzado por el cultivar de DP 0224 a los 7,5 meses (8,69 mg de cianidina–3 glucósido / g de ms). Las antocianinas son afectadas de forma considerable durante el soleado llegando a registrarse pérdidas hasta del 78,8% del contenido inicial para el cultivar ARB 5241. </li></ul>
  49. 49. <ul><li>La CAOx fluctúa durante el desarrollo vegetativo </li></ul><ul><li>de los tubérculos llegando a alcanzar sus más </li></ul><ul><li>alto valor promedio (173,79 μ-mol de Trolox equi./g de ms) al séptimo mes. Durante el soleado se observó un decrecimiento de la CAOx en los primeros 21 días y un aumento hacia los 35 días. </li></ul><ul><li>Los cultivares de mayor contenido de CT son los de coloración amarilla. Aumentan conforme se produce el desarrollo la raíz (13,3 mg de  - caroteno/g de ms, DP 0215 a 7.5 meses). Aumentan durante la primera semana de soleado y las tres semanas siguientes se mantienen casi constantes luego decrecen drásticamente. </li></ul>
  50. 50. <ul><li>Se encontraron altos coeficientes de correlación en la </li></ul><ul><li>mayoría de los cultivares para la relación entre </li></ul><ul><li>compuestos fenólicos y capacidad antioxidante. </li></ul><ul><li>El contenido de antocianinas del cultivar ARB 5241 </li></ul><ul><li>está fuertemente correlacionado con la capacidad antioxidante (Ic = 0,9698) y el contenido de compuestos fenólicos (Ic = 0,976) además de tener coeficientes regresión lineal altos (R 2 = 94,06% y R 2 = 95,3%, respectivamente). </li></ul><ul><li>las condiciones óptimas de extracción de los compuestos bioactivos y de la capacidad antioxidante para tres genotipos de mashua se obtuvieron en las siguientes condiciones: metanol al 90%, pH 1.5-2.1, relación mashua liofilizada/solvente de 1/60, una etapa de extracción, durante una hora y temperatura ambiente. Con la mezcla metanol:acetona:agua (45:45:10), bajo las mismas condiciones aumento la recuperación de compuestos del tipo flavan 3-ol (11-16%). </li></ul>
  51. 51. <ul><li>Las antocianinas (genotipo DP – 0224) siguen una </li></ul><ul><li>cinética de degradación térmica de primer orden </li></ul><ul><li>a los valores de pH de 3, 5 y 7 Siendo menos </li></ul><ul><li>estables, a pH 7 y 90 ° C. Los compuestos fenólicos de los extractos de mashua (genotipo DP – 0224) son estables a valores de pH de 3 y 5 a las temperaturas de 60 y 90 ° C. La capacidad antioxidante hidrofílica de los extractos de mashua (genotipo DP – 0224) es estable en el rango de pH de 3 a 7 y a temperaturas de 60 a 90 ° C y hasta 1.5 horas de tratamiento. </li></ul>
  52. 52. <ul><li>Antioxidant capacity and secondary metabolites in four species of Andean tuber crops: native potato ( Solanum sp.), mashua ( Tropaeolum tuberosum Ruiz & Pavon), Oca ( Oxalis tuberosa Molina) and ulluco ( Ullucus tuberosus Caldas). J Sci Food Agric 86:1481–1488 (2006) </li></ul><ul><li>Effect of genotype, maturity stage and post-harvest storage on phenolic compounds, carotenoid content and antioxidant capacity, of Andean mashua tubers ( Tropaeolum tuberosum Ruiz & Pavon). J Sci Food Agric 87:437–446 (2007) </li></ul><ul><li>Optimization of extraction conditions of antioxidant phenolic compounds from mashua ( Tropaeolum tuberosum Ruız & Pavon) tubers. Separation and Purification Technology 55 (2007) 217–225. </li></ul>PUBLICACIONES
  53. 53. ESTUDIOS RECIENTES
  54. 54. HPLC-DAD chromatograms for DP 0224 and AGM 5109 mashua genotypes obtained after basic (A1 and B1) and acid (A2 and B2) hydrolysis, respectively.
  55. 55. <ul><li>HPLC-electrospray ionization tandem mass </li></ul><ul><li>spectrometry (ESI/MS-MS): </li></ul><ul><li>profiles revealed the presence of 11 </li></ul><ul><li>different anthocyanins. </li></ul><ul><li>The two major pigments (56.4-73.0% total area range at 520 nm) were identified as delphinidin 3-glucoside-5-acetylrhamnoside and delphinidin 3-sophoroside-5-acetylrhamnoside . </li></ul><ul><li>Other pigments were delphinidin 3-glucoside-5-rhamnoside, delphinidin 3-sophoroside-5-rhamnoside, delphinidin 3-glucoside, cyanidin 3-sophoroside, and cyanidin 3-sophoroside-5-rhamnoside. Cyanidin 3-glucoside and cyanidin 3-rutinoside were only found in two genotypes, while pelargonidin </li></ul><ul><li>3-sophoroside and pelargonidin 3-sophoroside-5-rhamnoside were only found in the third one. </li></ul>
  56. 56. HPLC-DAD phenolic profiles for the three mashua genotypes recorded at 280 nm. (p/y) purple peel/yellow flesh, (p/p) purple peel/purple flesh, (y/y) yellow peel/yellow flesh. A: anthocyanin.
  57. 57. <ul><li>The compounds found in the different </li></ul><ul><li>genotypes investigated were: </li></ul><ul><li>gallic acid, </li></ul><ul><li>gallocatechin, </li></ul><ul><li>epigallocatechin, </li></ul><ul><li>procyanidin B2 </li></ul><ul><li>and epigallocatechin derivatives, </li></ul><ul><li>different hydroxycinnamic and hydroxybenzoic acid derivatives </li></ul><ul><li>and rutin and/or myricetin derivatives . </li></ul>Phenolic Profiles of Andean Mashua
  58. 58. Los compuestos fenólicos de la mashua protegen de manera eficiente el aceite frente a la oxidación: así durante la fritura se forman menos compuestos polares que con TBHQ Extra.puri. mashua y = 6.5247x + 4.7449 R 2 = 0.9948 y = 2.0397x + 4.9256 R 2 = 0.9871 y = 4.8643x + 3.7883 R 2 = 0.9687 0 5 10 15 20 25 30 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 HORAS %Compuestos polares BLANCO TBHQ E-mashua
  59. 59. Curva de oxidación de aceite de soya obtenida en un Calorimetro de Barrido Diferencial DSC para aceite de soya con A) Fracción etil acetato 269.4ppm y B) TBHQ 200ppm F ea 269.4 ppm TBHQ 200 ppm ppm
  60. 60. GRACIAS POR SU ATENCION

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