Este documento describe diferentes métodos para estudiar la acción de antimicrobianos, incluyendo desinfectantes, antisépticos y antimicrobianos. Explica conceptos clave como espectro de acción, resistencia y sinergismo. Describe métodos como el disco de difusión en agar, la dilución en agar, el E-test y la dilución en caldo, detallando sus ventajas e inconvenientes para evaluar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos.

1. MÉTODOS DE ESTUDIO DE
ANTIMICROBIANOS

2. Antimicrobianos. Conceptos
!!Desinfectante !!Superficies inertes
!!Antiséptico !!Superficies vivas
!!Antimicrobiano !!Organismos vivos
vía sistémica

3. Antimicrobianos. Conceptos
!!Acción antimicrobiana. Fundamento:
!!TOXICIDAD SELECTIVA .
!!Deriva de su acción específica sobre determinadas
estructuras
!!Pared bacteriana (penicilinas, cefalosporinas)
!!Ribosoma 70S (macrólidos, tetraciclinas,…)
!!Se requiere una elevada potencia biológica
!!Diferentes niveles de toxicidad.
!!Implican mayor o menor necesidad de control
de dosis y niveles

4. Antimicrobianos. Conceptos
!!Antibiótico/quimioterápico/antimicrobiano
!!Bacteriostático. Inhibe la multiplicación
!!Bactericida. Destruye al microorganismo
•! Sinergismo. La combinación es más activa
que cada antimicrobiano individualmente
•! Indiferente. La combinación tiene la
actividad del más activo individualmente.
•! Antagonismo. La combinación es menos
activa que el más activo individualmente.

5. Antimicrobianos. Conceptos
•!Espectro: Géneros y especies frente a los que un
antimicrobiano es típicamente activo.
•!Modificado por mecanismos de resistencia
adquiridos
•!Resistencia/sensibilidad/Sensibilidad intermedia

6. Concentración inhibitoria
Bacteria
resistente
Niveles séricos a dosis clínicamente
tolerables
Bacteria
sensible

7. Antimicrobianos. Modos de
acción
!!Sobre la pared bacteriana
!!Acción bactericida
!!Baja toxicidad
!!Requieren crecimiento activo
!!Sobre la membrana citoplasmática
!!Desestructuran la membrana
!!Alteran permeabilidad
!!Toxicidad relativamente alta
!!Bactericidas

8. Antimicrobianos. Modos de
acción
!!Inhibición síntesis de proteinas
!!Muy numerosos
!!Frecuentemente bacteriostáticos
!!Inhibición síntesis ácidos nucleicos
!!Inhiben transcripción o la replicación, o
lesionan directamente el ADN.
!!Habitualmente bactericidas
!!Interferencia de vías metabólicas.

9. Antimicrobianos. Métodos de
estudio
!!Disco placa

10. Antimicrobianos. Disco-placa
(difusión en agar, Kirby-Bauer)
!!Inconvenientes
!!Manual
!!No permite estudio de grandes
volúmenes de microorganismos
!!Resultados cualitativos

11. Antimicrobianos. Disco-placa
(difusión en agar, Kirby-Bauer)
!!Ventajas
!!Sencillo
!!Barato
!!Disponible para todos los antimicrobianos
!!Permite estudiar sinergismos,
antagonismos, mecanismos de resistencia
peculiares

14. Sinergismo

15. Subpoblaciones resistentes en S. aureus
resistente a meticilina

16. Sinergismo entre cefalosporinas de
3ª generación e inhibidores de beta
lactamasas en cepas productoras de
beta-lactamasas de espectro
extendido (BLEEs)

17. Antimicrobianos. Dilución en
agar
!!Inóculo común
!!Placas con concentraciones
progresivas de antimicrobiano
!!Inoculador especial (replicador de
Steers)
!!Inoculación de numerosas cepas
(hasta 40) en la misma placa

19. DILUCIÓN EN AGAR
•! CIM50: concentración que inhibe al 50% de
las cepas
•!CIM90: concentración que inhibe al 90% de
las cepas
•!Intervalo: la mayor y la menor CIM

20. Antimicrobianos. Dilución en
agar
!!Ventajas
!!Estudio de grupos grandes de cepas
!!Resultados cuantitativos

21. Antimicrobianos. Dilución en
agar
!!Inconvenientes
!!Moderadamente automatizable
!!Muy laborioso
!!Estudios epidemiológicos

22. Antimicrobianos. E-test
!!Técnicamente similar a disco-placa
!!Ofrece resultados cuantitativos
!!La CIM corresponde al punto de corte
entre el halo de inhibición y la tira de
E-test.
!!Permite estudiar sinergismos,
antagonismos y subpoblaciones.

25. Antimicrobianos. Dilución en
medio líquido (caldo)
!!Permite el mayor grado de automatización
!!Ofrece resultados cuantitativos
!!Uso habitual en clínica, en paneles que
incluyen identificación y sensibilidad
!!No utilizable en grandes estudios y estudios
epidemiológicos
!!No permite estudiar sinergismos,
antagonismos y subpoblaciones