Microbiología cultivo bacterias

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  • 1. Microbiología cultivo-bacterias  Tinción de GRAM  Gram positivo  Gram negativos ToMaV Gram
  • 2. Microbiología cultivo-bacterias La microscopia, la construcción y el manejo de los microscopios, comenzó en el siglo XVII con Antonie van Leeuwenhoek y su pequeño microscopio de mano. La experimentación con microorganismos casi siempre requiere su cultivo en el laboratorio. ToMaV Gram
  • 3. Microbiología cultivo-bacterias Anton Van Leeuwenhoek. ToMaV Gram
  • 4. Microbiología cultivo-bacterias Microscopio de Anton van Leeuwenhoek. ToMaV Gram
  • 5. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram
  • 6. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram
  • 7. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram
  • 8. Microbiología cultivo-bacterias El microscopio de campo claro es más útil para la observación de especimenes teñidos. Los colorantes son compuestos químicos utilizados para aumentar el contraste. Existen algunos,llamados colorantes vitales, que pueden añadirse directamente a una preparación en fresco; por tanto, colorean células vivas. No obstante, lamayoría de los colorantes son solamente efectivos después de que los microorganismos hayan sido fijados, es decir, se encuentren muertos y adheridos al portaobjetos. ToMaV Gram
  • 9. Microbiología cultivo-bacterias La tinción de Gram La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas (Figura 3.9). La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción de contraste:  1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta.  2. Se añade el mordiente, iodo.  3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas retienen el colorante.  4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un color violeta más intenso. ToMaV Gram
  • 10. Microbiología cultivo-bacterias El distinto comportamiento frente a los colorantes de las bacterias Gram positivas y Gram negativas se debe a las diferencias existentes en sus superficies externas. Las células Gram negativas poseen una capa de peptidoglicano delgada y una membrana externa. Las bacterias Gram positivas poseen una capa gruesa de peptidoglicano v carecen de membrana externa. ToMaV Gram
  • 11. Microbiología cultivo-bacterias La tinción de Gram es extraordinariamente útil en clínica. Esta técnica es, casi siempre, la primera prueba que se lleva a cabo en la identificación de un microorganismo causante de una enfermedad, aislado de un paciente. Con sólo un microscopio y unos cuantos botes de colorante podemos averiguar si un organismo es Gram positivo o Gram negativo, su morfología celular y su agrupación típica. Esto, a veces, es suficiente para determinar con qué tipo de bacteria estamos trabajando. Es más, el tratamiento de una infección depende de que el agente sea Gram positivo o Gram negativo, ya que algunos antibióticos actúan Sólo sobre los primeros, y otros sobre los segundos. La penicilina, por ejemplo, es más efectiva contra bacterias Gram positivas; mientras que la estreptomicina y la tetraciclina actúan sobre ambas. ToMaV Gram
  • 12. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram
  • 13. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram
  • 14. Microbiología cultivo-bacterias NOTAS CLINICAS En primer lugar haga una tinción de Gram Un muchacho de diecinueve años que estaba perfectamente por la mañana, comenzó a sentirse mal por la tarde. Sus padres lo encontraron paseándose por la casa en ropa interior, jurando murmurando entre dientes. Cada vez se encontraba más agitado y hostil. Finalmente, con la ayuda de un vecino, lo metieron a la fuerza en un coche y lo llevaron a urgencias. Aunque su extraño comportamiento podía ser debido a las drogas, tenía una fiebre de 40C, lo cual sugería una infección. Se le tomaron muestras de sangre, orina y líquido cerebroespinal (obtenido mediante punción lumbar). En unos minutos el médico de urgencias tuvo el diagnóstico. Una tinción de Gram del líquido cefalorraquídeo reveló la presencia de numerosos diplococos Gram negativos (bacterias esféricas en parejas). Se trataba de Neisseria meningitidis, causa común de la meningitis bacteriana en adultos jóvenes. El diagnóstico precoz mediante la tinción de Gram, permitió un tratamiento rápido y la completa recuperación de la infección que amenazaba su vida. ToMaV Gram
  • 15. Microbiología cultivo-bacterias ToMaV Gram