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Pruebas bioquimas para
enterobacterias.
Lic. Benjamín Castillo
Características de las enterobacterias
 Crecen en agar MacConkey
 Bacilos Gram negativas
 Desdoblan los nitratos a nitritos
 Aerobios facultativos
 Oxidasa (-) Catalasa (+)
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Bioquímica
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• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico,
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• Se siembra por picadura profunda con aguja y
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1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +
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2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +;
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• Color: lila
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• Indicador: púrpura de bromocresol
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1.- Lisina descarboxilasa +
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medio)
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Ej.: Escherichia coli
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3.- Lisina descarboxilasa -
Ej.: Shigella
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Lisina alfa cetácido
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Ej.: Proteus mirabilis
LIA (Lysine Iron Agar)
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una
enterobacteria
Citrato de Simmons
• Color: verde
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: azul de bromotimol
• Sustrato principal: citrato de sodio
• Sustratos secundarios: fosfato
dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de
magnesio y fosfato monoamónico.
• Se siembra por picadura profunda con
aguja y luego por estrías en el pico.
Citrato de Simmons
Citrato de Simmons
Este medio nos permite comprobar la capacidad de la
bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de
carbono.
La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del
medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a
azul prusia.
Citrato de Simmons
1.- Citrato positivo:
La bacteria consume el citrato
como fuente exclusiva de carbono
Cit- Na+
Cit+ Na+
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alcaliniza el
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Ej.: Klebsiella pneumoniae
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2.- Citrato negativo
La bacteria no consume el
citrato como fuente de carbono.
Ej.: Escherichia coli
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En este medio se observa la capacidad de la bacteria de
degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando
amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo
cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.
• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia
• Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y
Enterobacter.
• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
Urea
Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
• Color: lila
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: ornitina y glucosa.
• Sustratos secundarios: peptona, triptona
y extractos.
• Se siembra por picadura profunda
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
Este medio se usa para la identificación de enterobacterias
en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina
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MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
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MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: negativo
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Ej: Enterobacter aerogenes
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: positivo
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Pruebas bioquimicas en Enterobacterias

  • 2. Características de las enterobacterias  Crecen en agar MacConkey  Bacilos Gram negativas  Desdoblan los nitratos a nitritos  Aerobios facultativos  Oxidasa (-) Catalasa (+)  Fermentan glucosa
  • 4. TSI (Triple Sugar Iron) • Color: rojo ladrillo • Inhibidores: no tiene • Indicador: rojo de fenol • Sustratos principales: lactosa, sacarosa y glucosa (la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10: 1 con la glucosa) • Sustratos secundarios: tiosulfato sódico, peptona, citrato férrico amoniacal y extractos. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembra por estrías en el pico
  • 7. TSI (Triple Sugar Iron) 1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa + A/A +;- Ej.: Escherichia coli A/A -;-
  • 8. TSI (Triple Sugar Iron) A/A ++, ++ Ej.: Citrobacter freundii
  • 9. TSI (Triple Sugar Iron) 2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +; lactosa y sacarosa -) K/A -, ++++ Ej.: Proteus mirabilis K/A -;- Ej.: Shigella flexneri
  • 10. TSI (Triple Sugar Iron) N/N -;- Pseudomonas * Este resultado no es de una enterobacteria 3.- Bacilos no fermentadores
  • 11. LIA (Lysine Iron Agar) • Color: lila • Inhibidores: no tiene • Indicador: púrpura de bromocresol • Sustratos principales: lisina y glucosa • Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levaduras. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico
  • 14. LIA (Lysine Iron Agar) 1.- Lisina descarboxilasa + Lisina cadaverina (alcaliniza el medio) lisina descarboxilasa Ej.: Escherichia coli
  • 15. LIA (Lysine Iron Agar) 2.- Lisina descarboxilasa +, H2S + Ej.: Salmonella
  • 16. LIA (Lysine Iron Agar) 3.- Lisina descarboxilasa - Ej.: Shigella
  • 17. LIA (Lysine Iron Agar) 4.- Lisina deaminasa + Lisina alfa cetácido Lisina deaminasa Ej.: Proteus mirabilis
  • 18. LIA (Lysine Iron Agar) N/N -;- Pseudomonas * Este resultado no es de una enterobacteria
  • 19.
  • 20. Citrato de Simmons • Color: verde • Inhibidor: no tiene • Indicador: azul de bromotimol • Sustrato principal: citrato de sodio • Sustratos secundarios: fosfato dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamónico. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico.
  • 22. Citrato de Simmons Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono. La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.
  • 23. Citrato de Simmons 1.- Citrato positivo: La bacteria consume el citrato como fuente exclusiva de carbono Cit- Na+ Cit+ Na+ OH – alcaliniza el medio Ej.: Klebsiella pneumoniae citritasa
  • 24. Citrato de Simmons 2.- Citrato negativo La bacteria no consume el citrato como fuente de carbono. Ej.: Escherichia coli
  • 25. Úrea En este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza. • Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia • Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter. • Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
  • 26. Urea Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae
  • 27. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) • Color: lila • Inhibidor: no tiene • Indicador: púrpura de bromocresol • Sustratos principales: ornitina y glucosa. • Sustratos secundarios: peptona, triptona y extractos. • Se siembra por picadura profunda
  • 28. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) Este medio se usa para la identificación de enterobacterias en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina descarboxilasa.
  • 29. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: negativa I: positivo O: negativo Ej.: Klebsiella oxytoca
  • 30. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: positiva I: negativo O: positiva Ej: Enterobacter aerogenes
  • 31. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: positiva I: positivo O: positivo Ej.: Escherichia coli
  • 32.
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