Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques
Upcoming SlideShare
Loading in...5
×
 

Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques

on

  • 345 views

Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques - Présentation de la 5e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Mhadji ...

Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques - Présentation de la 5e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Mhadji NAOUIROU - Médecin - Direction Général de la Santé - Anjouan, Union des Comores - sedamir_2@yahoo.fr

Statistics

Views

Total Views
345
Views on SlideShare
345
Embed Views
0

Actions

Likes
0
Downloads
5
Comments
0

0 Embeds 0

No embeds

Accessibility

Categories

Upload Details

Uploaded via as Adobe PDF

Usage Rights

© All Rights Reserved

Report content

Flagged as inappropriate Flag as inappropriate
Flag as inappropriate

Select your reason for flagging this presentation as inappropriate.

Cancel
  • Full Name Full Name Comment goes here.
    Are you sure you want to
    Your message goes here
    Processing…
Post Comment
Edit your comment

Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques Test de chimiosensibilité in vitro pour évaluer la sensibilité des isolats de Plasmodium aux antipaludiques Presentation Transcript

  • TESTS DE CHIMIOSENSIBILITE IN VITROTESTS DE CHIMIOSENSIBILITE IN VITROPOUR EVALUER LA SENSIBILITE DESPOUR EVALUER LA SENSIBILITE DESISOLATS PLASMODIUM AUXISOLATS PLASMODIUM AUXANTIPALUDIQUESANTIPALUDIQUESNAOUIROU MHADJI, MEDECIN,COMORESNAOUIROU MHADJI, MEDECIN,COMORESEVALUATIONpar les FACILITATEURS
  • PLANPLANI- INTRODUCTIONINTRODUCTIONIIII-- POURQUOI SPOURQUOI S’’INTERESSER A LA CHIMIOSENSIBILITE ?INTERESSER A LA CHIMIOSENSIBILITE ?IIIIII-- LES TESTS UTILISES,IN VITRO, POUR EVALUER LALES TESTS UTILISES,IN VITRO, POUR EVALUER LARESISTANCE DES PLASMODIUM AUX ANTIPALUDIQUESRESISTANCE DES PLASMODIUM AUX ANTIPALUDIQUESIVIV--CONCLUSIONCONCLUSION
  • INTRODUCTION• La réponse parasitaire =résistance auxantipaludique =>obstacle pour la réussitedes stratégies de lutte• La réponse humaine =tests in vivo et destests in vitro =>définir et localiser leproblème=>évaluer la sensibilité d’unnouveau molécule
  • Définition de la chimiorésistancedes parasites du paludisme:• Selon OMS:aptitude d’une souche deparasite du paludisme àsurvivre ou à se reproduiremalgré l’administration etl’absorption d’un médicamentemployé à des doses égales ousupérieures aux dosesordinairement recommandéesmais comprises dans les limitesde tolérance du sujet• Selon Basco et Ringwald:conditions de définition de lachimiorésistance:-échec thérapeutique-CI50% élevée-identité des populationsparasitaires avant le traitementet lors d’une rechute-présence de mutation sur legène de résistance-taux plasmatique témoignantd’une bonne absorption auxmédicaments
  • CHIMIOSENSIBILITEPOURQUOI?
  • Tableau I : Sensibilité in vitro des isolats de P. falciparum aux antipaludiques en 2002Chloroquine:CI50>70nM,QU:CI50>800nM, amo:CI50>70nM, pyr:CI50>2000nM
  • Sensibilité à la chloroquine en 2003FCM29 CI50=253.6nM
  • TESTS DE PHENOTYPAGECulture du parasiteen présence de concentration croissantede divers antipaludiquesTESTS DE GENOTYPAGEidentification de mutations en cause dansla chimiorésistanceTESTS DE SENSIBILITE IN VITROTESTS DE SENSIBILITE IN VITROCONDITIONS DE LA CULTURE IN VITRO !!
  • TESTS DETESTS DEPHENOTYPAGEPHENOTYPAGEMicroscopieMicroscopie(Optique)(Optique)ColorimColoriméétrietrie--pLDHpLDH--HRPIIHRPIIisotopieisotopie(hypoxanthine(hypoxanthinetrititritiéée)e)--DesjardinsDesjardins--Le BrasLe BrasCytometrieCytometrieen fluxen fluxMicrofluorimetrieMicrofluorimetrie-Pico green-Sybr GreenEmpêcheEmpêchela maturationla maturationdes trophozoitesdes trophozoitesen schizontesen schizontesDDéétecter et quantifiertecter et quantifierLes LDH et HRPIILes LDH et HRPIIProduites parProduites parles parasites en pceles parasites en pceDes antipaludiquesDes antipaludiquesMesure de laradioactivité dans uncompteurcompteur àscintillationIncorporée dans leNoyau du parasitematureDDééceler et quantifierceler et quantifierLes hLes héématiesmatiesParasitParasitéé apraprèèssmarquage de lmarquage de l’’ADNADNParasitParasitéé parparle Thiazole orangele Thiazole orangeMesure laMesure laFluorescenceFluorescenceincorporincorporéée dans lee dans leNoyau du parasiteNoyau du parasite(ADN)(ADN)
  • Tests nTests n’’intintééressant pas lressant pas l’’ADNADN--microscopiemicroscopie--colorimcoloriméétrietrieAVANTAGES ET INCONVENIENTS DESAVANTAGES ET INCONVENIENTS DESTESTSTESTS•• Tests intTests intééressant ADNressant ADNCytometrieCytometrieIsotopieIsotopieMicrofluorimetrieMicrofluorimetrie
  • -temps++-milieu++-sensibilité bonne-coût++-personnel++-facile à manierPico Green,Pico Green,Sybr greenSybr green-coût++++-personnel+++-temps++-sensibilité bonne-risque nul-personnel++CytometrieCytometrieen fluxen flux--cocoûûtt éélevlevéé--personnel qualifipersonnel qualifiéé--milieu+++milieu+++--risque + + +risque + + +--temps +++temps +++Temps à être abandonnéIsotopie:Isotopie:--DesjardinsDesjardins--LebrasLebrasinconvénientsAvantagesTests(ADN)
  • --temps++temps++--personnel+++personnel+++--sensibilitsensibilitéé++++--facilefacile--cocoûût++t++colorimcoloriméétrietrie--temps +++temps +++--difficiledifficile--sensibilitsensibilitéé--cocoûût+t+--personnel++personnel++--facile sur le terrainfacile sur le terrainmicroscopiemicroscopieinconvinconvéénientsnientsavantagesavantagesTests non ADNTests non ADN
  • CONCLUSIONCONCLUSION•• TESTS IN VITRO=>SENSIBILITE DES ANTIPALUDIQUETESTS IN VITRO=>SENSIBILITE DES ANTIPALUDIQUEINTERVIENNENT DANS TROIS CAS:INTERVIENNENT DANS TROIS CAS:--éévaluer la rvaluer la réésistance croissistance croiséée dese desmméédicamentsdicaments--éévaluer la sensibilitvaluer la sensibilitéé initiale dinitiale d’’un mun méédicamentdicamentdestindestinéé àà être adoptêtre adoptéé--surveiller dans lsurveiller dans l’’espace et dans le temps laespace et dans le temps lasensibilitsensibilitéé du parasite aux mdu parasite aux méédicamentdicament
  • MERCI DEVOTREATTENTION!
  • Références bibliographiques•• Surveillance de laSurveillance de la resistanceresistance auxaux antipaludiquesantipaludiques--rapportrapport de lde l’’OMS surOMS surle site:le site: www.whqlibdoc.who.intwww.whqlibdoc.who.int//hqhq/2002//2002/who_CSD_CSR_Ewho_CSD_CSR_E•• RandrianarivelojosiaRandrianarivelojosia M. et AL,M. et AL,ResistanceResistance de plasmodiumde plasmodium falciparumfalciparum ààMadagascar,Madagascar, www.pasteur.mg/atlaswww.pasteur.mg/atlas--paludisme /resist .htmpaludisme /resist .htm•• ChimiorChimioréésistance du paludisme,sistance du paludisme,www.johnwww.john--libbeylibbey--eurotext.freurotext.fr//frfr/revues//revues/sante_pubsante_pub//sansan//ee--docsdocs•• Profil etProfil et éévolution de la chimiosensibilitvolution de la chimiosensibilitéé du paludisme ddu paludisme d ’’importationimportationàà plasmodiumplasmodium falciparumfalciparum en France 2000,en France 2000,www.eurosurveillance.org.www.eurosurveillance.org.•• RandrianarivelejosiaRandrianarivelejosia M etM et alal ,,reseaureseau dd’’etudeetude de lade la resistanceresistance pourpourpereniserpereniser la surveillance de la sensibilitla surveillance de la sensibilitéé dede pasmodiumpasmodium falciparumfalciparumaux antipaludiquesaux antipaludiques àà Madagascar,Madagascar,www.pasteur.mgwww.pasteur.mg//antipaludique.pdfantipaludique.pdf