Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme
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Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme

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Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme - Présentation de la 5e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Marie Clémence RAKOTOARIVONY - Médecin - Service de Lutte ...

Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme - Présentation de la 5e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Marie Clémence RAKOTOARIVONY - Médecin - Service de Lutte contre le Paludisme /MINSANPF - Antananarivo, Madagascar - kamansy2@yahoo,fr

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Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme Presentation Transcript

  • 1. Dr Rakotoarivony Marie ClDr Rakotoarivony Marie CléémencemenceAtelier sur le Paludisme 2007Atelier sur le Paludisme 2007LES METHODES DEDIAGNOSTIC BIOLOGIQUEDU PALUDISMEEVALUATIONpar les FACILITATEURS
  • 2. PLANPLANIntroductionIntroductionQuQu’’est ce quest ce qu’’un diagnostic biologique?un diagnostic biologique?Quelles sont les diffQuelles sont les difféérentes mrentes mééthodesthodesspspéécifiques?cifiques?La comparaison entre ces diffLa comparaison entre ces difféérentsrentsmmééthodesthodesConclusionConclusion
  • 3. INTRODUCTIONINTRODUCTIONEn dEn déépit des efforts dpit des efforts dééployployéés en faveurs en faveurde leur prde leur préévention et de leur traitement,vention et de leur traitement,les maladies infectieuses et leles maladies infectieuses et lepaludisme en particulier demeurent unpaludisme en particulier demeurent unproblproblèème important de santme important de santéé publiquepubliqueau niveau mondialau niveau mondialUn diagnostic rapide et prUn diagnostic rapide et préécis occurecis occureune bonne prise en charge du patient .une bonne prise en charge du patient .
  • 4. QUQU’’EST CE QUEST CE QU’’UNUNDIAGNOSTICDIAGNOSTICBIOLOGIQUE DUBIOLOGIQUE DUPALUDISME?PALUDISME?appui de lappui de l’é’évocation cliniquevocation cliniqueddéétecte les acctecte les accèès simples et les accs simples et les accèèssgraves du paludismegraves du paludismeéévalue lesvalue les ééchecs thchecs théérapeutiquesrapeutiques((ééventuellement)ventuellement)
  • 5. GoutteépaisseSérologie PCRTDRFrottissanguinDiagnosticbiologiqueLES DIFFLES DIFFÉÉRENTESRENTESMETHODES DE DIAGNOSTICMETHODES DE DIAGNOSTICBIOLOGIQUEBIOLOGIQUE
  • 6. L A MICROSCOPIEL A MICROSCOPIEmet enmet en éévidence les parasites plasmodialesvidence les parasites plasmodialesdans le sangdans le sangnnéécessite un microscope optique et descessite un microscope optique et descolorantscolorantsUn personnel qualifiUn personnel qualifiééLectureLecture àà 100 champs microscopiques100 champs microscopiques(oculaire 10X(oculaire 10X -- objectif 100X )objectif 100X )RRéésultats quantitatifssultats quantitatifs
  • 7. surface plus petite que le frottis.surface plus petite que le frottis.hhéémolyse des globules rougesmolyse des globules rougesDDéétecte destecte des parasitparasitéémiesmies 33--5 parasites/5 parasites/µµllLa sensibilitLa sensibilitéé 20 fois plus que FM20 fois plus que FMMet enMet en éévidence les formesvidence les formeséérythrocytaires derythrocytaires de PlasmodiumPlasmodiumLa GoutteLa Goutte éépaissepaisse
  • 8. Le frottis minceLe frottis mince (FM)(FM)quantitquantitéé de sang plusde sang plusfaible que sur une GEfaible que sur une GEPas dPas d’’hhéémolyse demolyse deGRGRLecture avecLecture avecimmersionimmersionPolyparasitPolyparasitéémiemiepossiblepossiblemise en dmise en dééfaut enfaut encas decas de parasitparasitéémiemiefaiblefaiblesensibilitsensibilitéé ththééoriqueoriqueest de 20est de 20 àà 30 fois30 foismoindre qumoindre qu’’avec GEavec GEDDéétecte 100tecte 100--200200parasites/parasites/µµll
  • 9. La sLa séérologierologieUtilise les techniques ( ELISA,Utilise les techniques ( ELISA,immunofluorescenceimmunofluorescence ……))mesure les anticorps smesure les anticorps séériques (contact antriques (contact antéérieurrieurdu sujet avec le parasite)du sujet avec le parasite)utilisutiliséé sur le plansur le plan éépidpidéémiologie, sur certainemiologie, sur certaineforme clinique de paludisme viscforme clinique de paludisme viscééralral éévolutif, ouvolutif, oudesdes éétudes rtudes réétrospectivestrospectives
  • 10. bandelettes rbandelettes rééactivesactivesDDéétection antigtection antigééniqueniqueRRééponse rapide (moins de 15 minutes),ponse rapide (moins de 15 minutes),rréésultats sous forme dsultats sous forme d’’un trait sur la bandeletteun trait sur la bandeletteNe nNe néécessite pas de compcessite pas de compéétence particulitence particulièèrereSensibilitSensibilitéé de dde déétectiontection àà >90% chez les patients>90% chez les patients>100 parasites/>100 parasites/µµllLe Test de diagnosticLe Test de diagnosticrapide(TDR)rapide(TDR)
  • 11. HRP2HRP2PlasmodiumPlasmodium falciparumfalciparum++++++pas de distinction 3 autrespas de distinction 3 autresespespèèces entre euxces entre eux(( P. ovaleP. ovale,, P.P. malariaemalariae,, P.P. vivaxvivax))ClairanceClairance àà > 2 semaines> 2 semainesSensibilitSensibilitéé 10HPM soit une10HPM soit uneparasitparasitéémiemie 0.02 %0.02 %pLDHpLDH4 esp4 espèècescesplasmodialsplasmodialsMoins sensibleMoins sensibleClairance en rapportClairance en rapportavec laavec la parasitemieparasitemieDDéétection antigtection antigéénique ( RDT )nique ( RDT )
  • 12. La technique de PCRLa technique de PCR(Polymerase Chain Reaction )(Polymerase Chain Reaction )amplifie les samplifie les sééquences reconnues et les rendquences reconnues et les rendfacilement repfacilement repéérables.rables.beaucoup plus sensible, dbeaucoup plus sensible, déétecte 1 plasmodium/10mltecte 1 plasmodium/10mlsang (5fois plus faible que GE)sang (5fois plus faible que GE)nest pas encorenest pas encore éévaluvaluéée dans le diagnostic due dans le diagnostic dupaludisme dpaludisme d’’urgenceurgenceOutil de rechercheOutil de rechercheMatMatéériels chers et compliquriels chers et compliquééss
  • 13. Comparaison des mComparaison des mééthodesthodesde diagnostic biologiquesde diagnostic biologiquesSource : Thierry Fandeur Atelier palu 2003
  • 14. conclusionconclusionVariétés diagnosticsPrise en chargePRECOCEUtilisation rationnelledes médicamentsDiagnosticRAPIDEMicroscopie/TDRde choixMorbiditémortalité
  • 15. Merci de votreMerci de votreAttentionAttention!!
  • 16. RRééfféérences bibliographiquesrences bibliographiques11-- F. Castelli, G. Carosi. (1997).F. Castelli, G. Carosi. (1997). DiagnosisDiagnosis ofofmalariamalaria infection.Healthinfection.Health CoCo--operationoperation paperspapers..15:10915:109--136.136.22-- M.M.--T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G.T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G.Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999).Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999).ÉÉvaluation dvaluation d’’une mune mééthode simple et rapidethode simple et rapidedd’’extraction de lextraction de l’’ADN de plasmodium falciparumADN de plasmodium falciparumàà partir de gouttespartir de gouttes éépaisses de patientspaisses de patientsgabonais. Ngabonais. N°°2031.2031. <Parasitologie>.<Parasitologie>.33--Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18septembre.septembre. Biologie.hialaveraBiologie.hialavera@wanadoo.fr@wanadoo.fr
  • 17. 44-- O.Gaye,G. MC Laughlin, M. Diouf, S.O.Gaye,G. MC Laughlin, M. Diouf, S. DialloDiallo. (1998)Etude. (1998)Etudecomparative decomparative de cinqcinq mmééthodesthodes de diagnosticde diagnostic biologiquebiologiquedudu paludismepaludisme: la: la gouttegoutte éépaisse,lapaisse,la mmééthodethode QBC, LaQBC, Lasondesonde ADN ,la PCR et leADN ,la PCR et le ParasightParasight FF test.Mtest.Méédecinedecinedd’’AfriqueAfrique Noire .45(4).Noire .45(4).55-- David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker,David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker,Lillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludismeLillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludismedans une rdans une réégion reculgion reculéée des Philippines:comparaison dee des Philippines:comparaison deplusieurs techniques et de leur acceptation par les agentsplusieurs techniques et de leur acceptation par les agentsde santde santéé et la communautet la communautéé. Bulletin of world Health. Bulletin of world HealthOrganisation 79(10):933Organisation 79(10):933-- 941.941.66-- Anon.Diagnostic du paludisme. citedAnon.Diagnostic du paludisme. citedhttp://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/http://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/wery1310.htmlwery1310.html 28/02/2007.28/02/2007.
  • 18. 77-- J.Mouchet,PierreJ.Mouchet,Pierre CarnevaleCarnevale, Marc, Marc CoosemansCoosemans,Jean,JeanJulvezJulvez, Sylvie, Sylvie ManguinManguin, Dominique Richard, Dominique Richard LenobleLenoble,,JacquesJacques CircoulonCircoulon.(2004)Biodiversit.(2004)Biodiversitéé du paludisme dansdu paludisme danslele monde.Edmonde.Ed JohnLibeyEurotexJohnLibeyEurotex, Paris., Paris.http://www.Johnhttp://www.John Libbey.eurotex.frLibbey.eurotex.fr88-- Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459-- 63.citted63.cittedhttp//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?http//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?dbdb==pubmedpubmed&&cmdcmd==RetrieveRetrieve&&doptdopt=A=A……26/02/200726/02/200799-- MendirattaDK,MendirattaDK,BhutadaBhutada k,k,NarangaPNarangaP.(2006).Evaluation de.(2006).Evaluation dediffdifféérentes mrentes mééthodes pour le diagnostic de la malaria.thodes pour le diagnostic de la malaria.Journal indien de la Microbiologie MJournal indien de la Microbiologie Méédicale.24:49dicale.24:49-- 51.51.http://http://babelfish.altavista.combabelfish.altavista.com//babaelfishbabaelfish//trurl_pagetrurl_pagecontcontentent??lplp==en_fren_fr&&trurltrurl=http%3a2=http%3a2……01/03/2007.01/03/2007.