2. Que vamos a Ver?
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Generalidades de los Venenos volátiles
Análisis cualitativos y cuantitativos
Tipos de muestras para el analisis
Toma correcta de muestra
Etanol
Metanol
Formaldehido
12. Identificación de Acetaldehído
Nitroprusiato de Na + piperidina + acetaldehído
AZUL
VERDE
INCOLORO
Nitroprusiato de Na + piperidina + acetona
ROJO
MAGENTA
INCOLORO
ETOH previa oxidación débil con MnO4K en ácido Fosforico
15. Se ensayaron las siguientes reacciones, en
muestras líquidas de frascos sin rótulo legible en
un laboratorio farmacéutico, obteniéndose los
siguientes resultados:
a)- Aspecto físico: líquido límpido, pH: neutro
b)- Carácter reductor: +
c)- Reacción con ión Diamino plata: d)- Ensayo de Lieben tradicional: +
e)- Ensayo de Lieben modificado: +
f )- Reacción con Nitroprusiato de sodio + Piperidina:rojo-magenta
g)- Ensayo de Scryver: -
¿De qué sustancia podría ud. sospechar? Justifique su
respuesta.
16. Respuesta
b) alcoholes aldehídos cetonas
c) alcoholes aldehídos cetonas
d) etanol acetona
e) Acetona
f) Halogenados
g)formaldehído/alcohol
ACETONA
17. Etanol
Sinonimia: alcohol, alcohol etílico, etanol
Características fisicoquímicas
* Líquido incoloro
* Punto de ebullición: 78,5 ºC
* Densidad : 0,8 g/ml (20ºC)
* Miscible con agua y algunos solventes orgánicos
Usos más comunes
* Disolvente
* Antiséptico
Fuentes del tóxico
* Bebidas alcohólicas
* Alcohol medicinal
* Perfumes
* Cosméticos
* Antisépticos
* Gotas óticas
18. Excreción
* Orina:
5-10% como ETOH
* Saliva
* Sudor
* Bilis
* Aire espirado : correlación con la
concentración en sangre
* Leche materna
* Atraviesa Barrera Placentaria
* Eliminación: 30 ml en 3 horas
19. ETANOL Y COMPORTAMIENTO
Concentración de
Etanol en sangre (g/l)
Efectos
0,22
Cambio de carácter
Empeoramiento de la
coordinación motora
0,50
Empeoramiento de la atención
Aumento del riesgo de
accidentes automovilísticos
1,00
Ataxia intoxicación
2,20
Pérdida de la conciencia
5,00
Muerte
20. Etanol- Muestras
CUANTIFICACIÓN DE ETANOL
* Muestra: sangre entera, plasma,
suero
- Jeringa sin cámara de aire
- Tubo sin cámara herméticamente
cerrado
* Anticoagulante:
citrato, fluoruro de sodio, (heparina,
EDTA)
21. Métodos para análisis
1- Métodos Químicos: Microdifusión y
Destilación
2- Métodos enzimáticos
3- Método Cromatografía gaseosa (CGFID)
22. Método Químico- Microdifución
Procesar un blanco en forma paralela
Muestra a investigar
Solución Cr2O7K2 0,4N (SO4H2 10N)
Sol. Sat. CO3K2
Tiempo
2 horas: 50ºC
6 horas: 37ºC
10 horas: 25ºC
Cr2O7= reducido (Cr3+)
Valoración por retorno
23. Método de Winnick:
Cr2O7= reducido (Cr3+)
ValoraciÛn : + IK 3N
TitulaciÛn: S2O3Na2 0.1N (+Almidón)
FUNDAMENTO de la TITULACIÓN
24. ESPECIFICIDAD de los
MÉTODOS QUÍMICOS
• NO SON ESPECÍFICOS
• INTERFIEREN: otros alcoholes,
aldehídos, cetonas y compuestos
reductores
• NO INTERFIEREN: cloroformo, benceno,
Tetracloruro de carbono, tricloroetileno
27. Método Cromatografía gaseosa
(CG-FID)
Método Head-space
[EtOH] gas ~ área del
pico
Muestra Biológica +
ClNa
Equilibrio a 37ºC durante 30 minutos
1- Metanol
5- t-butanol (St.I.)
2- Etanol
6- Metil etil cetona
3- Acetona
7- 2-butanol
4- Isopropanol
Método sensible
y especifico
28. Para no marearnos
Métodos
Ventajas
Desventajas
Microdifusión
Bajo costo
Limitado Nº de muestras
Baja sensibilidad
Tiempo
Interferentes
Métodos
Enzimáticos
Alta sensibilidad
Menos interferentes
Alto costo reactivo
Vencimiento del Kit
AxSym
(Inmunológicos)
Alto Nº de muestras
Menos interferentes
Alto costo reactivos
Consignación Equipo
CG-FID
Alta sensibilidad
Específico
Curva de calibración
Analista capacitado
Alto Costo Equipo
Tiempo
29. Toma de muestra para
Cuantificación Legal de Etanol en
sangre
•
•
•
•
Muestra de elección: Sangre
Tubo seco
Suero
Nunca usar Alcohol como antiséptico
Sin cámara de aire o cerrado
herméticamente
31. Clínica de la intoxicación por
Etanol
La intoxicación etílica aguda se puede presentar de tres formas:
-no complicada (75%): aliento alcohólico, incoordinación psicomotriz y de marcha,
imprecisión de gestos, vértigo, vómitos, logorrea, euforia, locuacidad, exaltación de
la imaginación, embotamiento, desinhibición, trastornos de la atención que van
desde la somnolencia a la torpeza. Al síndrome cerebeloso se asocian trastornos de
la visión (diplopia, alteración de la agudeza, disminución de la acomodación)
taquicardia, taquipnea, trastornos vasomotores de la cara y de las extremidades.
-intoxicación aguda con agitación psicomotriz (18%) alternando con fases de tristeza
y agresividad, familiaridad excesiva. Afectación de las funciones cognitivas (vigilia,
percepción, memoria)
-coma alcohólico (7%). Suele ser profundo sin signos de focalidad. Hipotermia,
midriasis bilateral poco reactiva, hipotonía, abolición de los reflejos osteotendinosos,
bradicardia, hipotensión y depresión respiratoria.
La evolución es habitualmente benigna y breve, acompañándose de amnesia
lacunar más o menos extensa en relación con la duración y profundidad del coma.
32. Otras manifestaciones
• Crisis convulsivas
• Otras afecciones Neurologicas: déficit
sensitivo y muscular
• Hepatitis aguda alcohólica
• Cirrosis alcohólica
33. Hepatitis alcohólica
Aparecen después de una intoxicación aguda importante. Se
caracteriza por una lesión inflamatoria con infiltración del hígado por
leucocitos, necrosis hepatocelular y balonización de células. La
clínica es muy variable, existen formas asintomáticas y formas muy
agudas que pueden abocar en una insuficiencia hepática letal. Los
signos clínicos simulan a los de las hepatitis virales o tóxicas:
anorexia nauseas, malestar general, dolores abdominales,
enflaquecimiento. Puede haber fiebre en la mitad de los casos. La
hepatoesplenomegalia se puede encontrar en un tercio de los
casos. También puede aparecer ictericia. En ocasiones ascitis y
síndrome hemorrágico cutaneo mucoso y encefalopatia con una
mortalidad del 60-80%. La citolisis se traduce por una elevación
de las transaminasas, colostasis ictérica o anictérica
manifestada con aumento de la bilirrubina, de las fosfatasas
alcalinas, de la gamma-GT, también alargamiento del tiempo de
Quick y del factor V, hipoalbuminemia, hiperleucocitosis.
35. Concluyendo…
Las transaminasas se elevan cuando existe daño
hepático, no soliéndose elevar en consumos bajos. En el
caso de la hepatopatía alcohólica se eleva más la
glutámico oxalacetica (GOT), y en consecuencia tiene
importancia el coeficiente GOT/GPT que suele alcanzar
valores superiores a 1,5, y cuando alcanza 2 es
altamente indicativo. Aunque la determinacion de los
tres parámetros (VCM, GGT Y GOT) asegura mejor el
diagnóstico, ninguno sería suficiente para utilizarlo como
screening de la población. Los marcadores se utilizan
para el seguimiento tras realizar la intervención oportuna
37. METANOL
Sinonimia: alcohol metilico, alcohol de la madera
Características fisicoquímicas
* Líquido incoloro
* Punto de ebullición: 64,7 ºC
* Densidad : 0,791 g/ml (20ºC)
* Miscible con agua y algunos solventes
orgánicos
Usos más comunes
* Disolvente Industrial
* Solvente para Lacas, Pinturas, Barnices
* Componente de Removedores
* Limpiadores de vidrio
* Adulterante de Bebidas Alcohólicas
38. CAMBIO DE ETANOL POR
METANOL
Intoxicación masiva por metanol:
Argentina (Febrero 1993) vinos Soy Cuyano
Adulteración de vinos con metanol 43 muertos, cientos
de afectado
INTOXICACIÓN POR METANOL
* ES GRAVE
* RIESGO DE MUERTE
* SECUELAS IRREVERSIBLES
Dosis tóxica: 10 a 30 ml (0,4 ml /Kg en
niños)
Dosis letal: > 60 ml (0,8 ml/Kg en niños)
39. Manifestaciones Clínicas
La intoxicación por metanol se caracteriza por el desarrollo de tres
estadios progresivos.
El primer estadio se presenta con una mínima disminución de la
actividad del sistema nervioso central, debilidad, sensación
vertiginosa y náuseas. Tras un periodo de latencia que es
asintomático
Aparece una segunda fase, que coincide con el desarrollo de una
acidosis metabólica que se caracteriza por vómitos, dolor
abdominal, desorientación y alteraciones visuales con fotofobia,
visión borrosa, midriasis bilateral arreactiva a a la luz y ceguera
ocasional.
En la tercera fase, en relación directa con el grado de acidosis
metabólica alcanzada, se produce lesión neuronal, con necrosis
retiniana y de los ganglios basales del encéfalo. En esta fase hay
hipotensión, coma profundo y respiración de Kussmaul. El
desarrollo de apnea y convulsiones aparece en la etapa final
40. Tratamiento intoxicación por Metanol:
ETILTERAPIA
Etanol
Metanol
Etilenglicol
ADH
Formaldehído
Glicolaldehído
Acetaldehído
Ác.Fórmico
CO2 + H2O
Ác.Glicólico
41. Toxicodinamia del Metanol
ELIMINACIÓN
* Orina: 5-10% inalterado
* Aire espirado
INTOXICACIÓN AGUDA:
* Depresión del SNC: cefalea, vértigo, confusión
* Trastornos digestivos: nauseas , vómitos
* Acidosis metabólica severa
* Dificultad respiratoria: respiración en boca de pescado
* Alteraciones visuales, daño en la retina y atrofia del
nervio óptico Secuelas permanentes: ceguera, encefalopatía,
parkinsonismo, polineuropatía
Concentración en sangre
0-0,20 g/l Usualmente
0,20-0,50 g/l Requiere tratamiento
> 0,8 g/l Potencialmente fatal
Niveles >0,20 g/l son
tóxicos requiere
tratamiento
42. Cuantificación de Metanol
Muestra: sangre entera, plasma, suero
- Jeringa sin cámara de aire
- Tubo sin cámara, herméticamente cerrado
* Anticoagulante: Citrato, fluoruro de sodio
Metodologías:
* 1- Métodos Químicos: Desproteinización y Microdifusión
* 2- Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
43. 1- METODO QUÍMICO: Oxidación con KMnO4
Aislamiento: Desproteinización
MÉTODO DE WILLIAMS
Fundamento:
El metanol es oxidado por el KMnO4 a formaldehido, el
cual forma complejo coloreado con el ácido cromotrópico
Interferentes: EDTA, heparina
Desproteinización con ácido Tricloroacético en solución sulfúrica al 10%
p/v
44. Método de Williams
1- Muestra
2- Desproteinizante TCA en H2SO4 10% v/v
Transferir a otro tubo sobrenadante
3- KMnO4 5% p/v
4-Eliminar exceso de KMnO4 (Na2SO3)
5-Ácido cromotrópico 0.5% + H2SO4 cc
6-BM hirviente 5 minutos
7-Espectrofotómetro a 570 nm
8-Comparar con curva de calibración
Sensibilidad: 0,03 g/l
Interferencias: Heparina, EDTA, Formalina
45. Reacción de Williams
* Blanco de Reactivos
* Blanco de Muestra: NO KMnO4
* Muestra
Fundamento de la Cuantificación
47. METODO QUÍMICO: Oxidación
con KMnO4
Aislamiento: Microdifusión
Método de Feldstein-Klendshoj: + reacción con ácido cromotrópico
Rvo Fijador: H2SO4 10%
Rvo Liberador: CO3K2 sol sat
48. Cuantificación de etanol y metanol
cuando están presentes en
la misma muestra de sangre
Deben realizarse las pericias por los vinos adulterados Soy Cuyano,
donde en forma intencional se le adicionó alcohol de quemar,
provocando la intoxicación de varias personas con los siguientes
síntomas: visión borrosa, confusión mental y debilidad, muchos de
ellos presentaron marcada acidosis metabólica y se les efectuó etilterapia
* Microdifusión
etanol
+
metanol
* Técnica de Williams
metanol
49. Como se hace?
Mediante la técnica de etanol por
microdifusión calculamos los Eq. totales
(etanol + metanol)
Mediante la técnica de Williams para
metanol se obtiene la concentración en g/l
Una vez obtenidos los equivalentes de
metanol, por diferencia se sacan la
concentración de Etanol (g/l)
50. Mediante la técnica de etanol por microdifusión calculamos los Eq.
totales (etanol + metanol)
N S2O32- = 0,1199
VB = 1,52 ml
VM = 0,3 ml
Vsangre = 0,5 ml
Cálculo de los equivalentes
Eq. Totales = 0,29 eq/l
51. Mediante la técnica de Williams
para metanol se
obtiene la concentración en g/l
deben ser transformados a eq./l de la siguiente manera
Cc= 0.74
g/l
52. Una vez obtenidos los equivalentes
de metanol
Eq. Totales = Eq. Etanol + Eq. Metanol
Eq. Etanol = Eq. Totales Eq. Metanol
Eq. Etanol = 0,29
-
0,09 = 0,20 eq/l etanol
pasar los eq./l de etanol a g/l de la siguiente manera
RESULTADO FINAL:
2,30 g/l de etanol
0,74 g/l de metanol