IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS LABORATORIO NO 2
Alejandro Ángel Berján
Código 20122010039
Grupo 423
Docente William Ariza
...
INTRODUCCIÓN
Las biomoleculas están presentes desde el más grande organismo hasta el más
pequeño. Al interior se encuentra...
Biuret- Caseína Lugol-Almidón
Biuret- Caseína
Benedict-Sacarosa Sudán III-Aceite
Se toman cuatro tubos de ensayo y son rot...
Tabla 1. Clasificación de las biomoleculas.
Par nuestra investigación nos enfocaremos en aquellas biomoleculas que
son org...
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de
yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particul...
Cuestionario
1. ¿Qué es una prueba de control? Y diga cuál es su importancia en el
procedimiento realizado.
De acuerdo con...
Maní
Maíz
Quinua
Proteína
Soya
Maní
Quinua
Maíz
Tabla 11. Síntesis de presencias en los alimentos analizados.
3. ¿Qué otro...
Reacción con la ninhidrina: El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma
complejos coloreados con la ninhidrina: violeta a...
¿En aminoácidos libres es posible encontrar enlaces peptídicos?
Los aminoácidos libres presentan un grupo amino y un grupo...
BIBLIOGRAFÍA:
Ch. Carraher, R. Seymour, (1995).Introducción a la química de los polímeros.
Madrid: Reverté S.A. 191p.
E. O...
J. Patiño, (2006). Metabolismo, Nutrición y Shock. Bogotá, Colombia: Editorial
Médica Panamericana. 100 p.
A. Gil, (2010)....
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Biomoléculas

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Identificación, análisis, función y carcaterísticas de biomoléculas correspondientes al metabolismo primario.
Proteínas. Carbohidratos. Lípidos. Almidón.

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Biomoléculas

  1. 1. IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS LABORATORIO NO 2 Alejandro Ángel Berján Código 20122010039 Grupo 423 Docente William Ariza Universidad Distrital Francisco José de Caldas Proyecto curricular de Ingeniería Forestal Biología Bogotá DC 27 de septiembre de 2012
  2. 2. INTRODUCCIÓN Las biomoleculas están presentes desde el más grande organismo hasta el más pequeño. Al interior se encuentran desempeñando papeles fundamentales en pro del funcionamiento del individuo. De allí deriva la gran importancia que tienen estos para los seres vivos. Debido a su gran importancia, se ha propuesto identificar los principales tipos de moléculas orgánicasa partir de sus propiedades físico-químicas.Tras reaccionar con pruebas bioquímicas se tendrá en cuenta características como el color, para determinar que clases de moléculas, además en que cantidad están concentradas en un determinado alimento. OBJETIVOS Identificar los tipos de moléculas orgánicas que están presentes en un determinado alimento. Reconocer las propiedades físicas que adquiere una sustancia posteriormente a una prueba bioquímica específica. Comparar algunas características de las sustancias a analizar en función de las biomoleculas presentes en ellas. MATERIALES Y MÉTODOS  Tubos de ensayo  Cinta de enmascarar  Estufa  Mortero y pistilo  Reactivo Benedict  Reactivo Lugol  Reactivo Sudán III  Solución de sacarosa  Solución de almidón  Solución de aceite  Solución de caseína  Soya  Maíz  Maní  Quinua
  3. 3. Biuret- Caseína Lugol-Almidón Biuret- Caseína Benedict-Sacarosa Sudán III-Aceite Se toman cuatro tubos de ensayo y son rotulados de la siguiente manera: Posterior a ello, se disponen para agregar las determinadas sustancias con el respectivo reactivo. Para el tubo que contiene Benedict y sacarosa es puesto en baño de María durante un lapso de 20 minutos. Luego son tenidos en cuenta como testigos. Inmediatamente después se toma 1 gr de maíz previamente machacado para obtener una mezcla homogénea y se introduce en cuatro tubos de ensayo para luego agregar los cuatro reactivos asignados para nuestras pruebas. De igual manera siguiendo el procedimiento anteriormente mencionado, se manipulan los alimentos restantes, teniendo presente que aquellos comestibles que son puestos a reaccionar con el Biuret, deben ser expuestos a baño de maría Finalmente se registran datos respecto al color inicial y final que obtiene la sustancia puesta a prueba, para así determinar que tipo de biomolecula está presente en el alimento y paralelamente definir su concentración. MARCO TEÓRICO Según J. Macarulla, A. Marino y A. Macarulla (1988), el término biomolecula se entiende como las moléculas que integran a los seres vivos y este además puede clasificarse tanto inorgánicas como orgánicas, de esta manera tenemos: Orgánicas Inorgánicas Azucares: Glucosa, almidón, celulosa Gases como O2, N2 y CO2. Lípidos como grasas, esteroides y cerebrósidos. Aniones como (HCO3 - ), Cl- y So= 4. Proteínas, como insulina, hemoglobina, fibrinógeno Cationes como Na+ , K+ , amonio (NH+ 4). Ácidos nucleicos, como DNA, RNA y sus componentes. Metabolitos intermediarios, como ác. Acético, etanol, urea y ác. Cítrico.
  4. 4. Tabla 1. Clasificación de las biomoleculas. Par nuestra investigación nos enfocaremos en aquellas biomoleculas que son orgánicas, ya que son las que se presentan en mayor concentración en los alimentos a analizar. Carbohidratos o sacáridos Son los compuestos orgánicos más abundante de las células biológicas. Contienen carbono, hidrógeno y oxígeno; se encargan de almacenar: energía, combustibles e intermediarios metabólicos para el organismo. También cumplen un esencial papel al formar parte de la trama estructural del ARN y ADN, ya que los anillos que conforman, almacenan y expresan informaciones genéticas. De igual manera a se encuentran formando paredes celulares y exoesqueletos en los artrópodos. Por último se desempeñan como lubricantes en las articulaciones, adhesivos en las células. Se clasifican en monosacáridos, disacáridos y polisacáridos. Su unidad básica son los monosacáridos o azucares simples.(V. Melo y O. Cuamatzi, 2006). Como menciona la Universidad Jorge Tadeo Lozano, con el fin de reconocer la presencia de carbohidratos en una determinada sustancia. Se han utilizado numerosas pruebas para su identificación en las cuales resaltamos: Prueba de Benedict: se usa para detectar la presencia de azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre y éste se reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción (“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede simultáneamente con la reacción de reducción del cobre. Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor, el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia de azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores. Las azúcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en color y la solución se mantiene azul.
  5. 5. Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración azul-violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja. Proteínas Las proteínas cumplen una numerosa funcionalidad en los organismos. Esto debido a las diferentes formas que logran adoptar. Entre las principales funciones que satisfacen las proteínas tenemos que conforman las unidades estructurales a partir de las cuales se ensamblan las células. Aunque además de proporcionar forma y estructura a la célula, las enzimas promueven reaccione químicas intercelulares. Las proteínas se encargan igualmente controlan el pasaje de nutrientes, otras llevan mensajes de una célula a otra desde la membrana hacia el núcleo de una célula. Incluso algunas proteínas especializadas pueden actuar como: anticuerpos, toxinas, hormonas, moléculas anticongelantes, fibras elásticas o generadores de luminiscencia. (Alberts, Bray, Hopkin, Johnson, Lewis, Raff, Roberts y Walter2004). Las pruebas realizadas para su identificación son: Reacción Xantoproteica: Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira a un color anaranjado oscuro. Reacción de Biuret: La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret, que en contacto con una solución de sulfato cúprico diluida, da una coloración violeta característica.
  6. 6. Cuestionario 1. ¿Qué es una prueba de control? Y diga cuál es su importancia en el procedimiento realizado. De acuerdo con la revista 5, en “Aplicación de muestreo estadístico a las pruebas control”, las pruebas de controles constituyen un componente importante del trabajo de campo del auditor. Las mismas son comprobaciones que este realiza para asegurarse de que determinados controles están funcionando correctamente. El objetivo de una prueba de controles será obtener un grado de certeza razonable de la eficacia de los controles, y de que la proporción de errores en su funcionamiento no excede determinado nivel máximo aceptable. De esta forma se puede lograr una evaluación de la eficacia de las actividades de control vigentes. Permite calificar el nivel de confianza de la prueba, es decir la probabilidad de que las conclusiones obtenidas del muestreo sean correctas. La selección aleatoria impide que las preferencias del auditor favorezcan la selección de algunos elementos de la población en deterioro de otros. Permite limitar el tamaño de la muestra al mínimo necesario, evitando realizar pruebas de auditoría sobre una cantidad mayor de elementos. Los resultados de la prueba permite elaborar recomendaciones sobre una base más objetiva. Permite hacer más defendibles las conclusiones de la prueba. 2. A partir de los resultados obtenidos, complete la siguiente tabla donde se citará ejemplos determinados de la presencia o no de las moléculas orgánicas evaluadas en las diferentes sustancias. Molécula orgánica Sustancia Positiva Negativa Azúcar reductor Soya Maíz Quinua Maní Almidón Maíz tierno Maní Quinua Soya Lípido Soya
  7. 7. Maní Maíz Quinua Proteína Soya Maní Quinua Maíz Tabla 11. Síntesis de presencias en los alimentos analizados. 3. ¿Qué otros reactivos nos permiten identificar azúcares, almidones, proteínas y grasas? Azúcares y almidones De acuerdo con la Universidad Jorge Tadeo lozano se tiene como ensayos para detectar carbohidratos a: Ensayo de Molisch: Es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hastamonosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α- naftol formando un color púrpura violeta. Ensayo de Barfoed: Permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos reductores, igualmente contiene ion cúprico que se reduce a un óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los disacáridos. Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así complejos coloreados. Ensayo de Bial: Este contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración solo con las pentosas. Proteínas Reacción Xantoproteíca Determina la cantidad de proteína soluble en una solución empleando ácido nítrico concentrado, de esta manera, forma compuestos nitrados amarillos. (S. Ramos, 2007) Según la Universidad Jorge Tadeo Lozano, se consideran además:
  8. 8. Reacción con la ninhidrina: El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y proteínas. Reacción de Millón: El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas que la contienen Reacción de Sakaguchi: El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones de alfanaftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados o rojos. Reacción de Ehrlich: La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de Sodio por formación de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando péptidos y proteínas. Reacción de Hopkins Cole: El anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-aminoácidos libres o haciendo parte de péptidos y proteínas se puede reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico a pH ácido, puesto que forma complejos de coloración violeta o amarillo violeta, permitiendo así identificar al triptófano. Reacción con acetato de Plomo alcalino: Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteína y Cistina se reconocen por la formación de precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino. Grasas Sudán IV:Sirvenpara determinar principalmente lípidos homofásicos. este se basa en que el colorante es más soluble en lípidos que en el propio disolvente en el que va contenido. La prueba da positivo si la sustancia a analizar toma el color rojo. (G. Méndez, 2004)
  9. 9. ¿En aminoácidos libres es posible encontrar enlaces peptídicos? Los aminoácidos libres presentan un grupo amino y un grupo carboxilo, los cuales se encuentran unidos a un carbono central, mas no entre ellos, por lo cual no hay presencia de enlaces peptídicos, porque para ello se requiere la unión del aminol de un aminoácido con un carboxilo de otro aminoácido. (Peña, Arroyo, Gómez, Tapia, Gómez, 2004). CONCLUSIONES El reactivo biuret sólo funciona para detectar la presencia de proteínas, mas no incluye aminoácidos, puesto que el biuret reacciona con enlaces peptídicos formados por la unión de aminoácidos propios de las proteínas. En los alimentos analizados, haymás de una presencia de biomoleculas propuestas a identificar, lo que quiere decir que en un alimento no hay una sola presencia de una determinada molécula orgánica, sino que cada tipo está presente bien sea en menor o mayor proporción. La soya es rica en proteínas al estar en mayor proporción que las demás. Y por el otro lado pobre tanto en grasas como almidones. El maíz es rica en almidón einsuficiente en lípidos. El maní es generoso en proteínas y escasa en lípidos. La quinua es abundante en almidón einsuficiente en grasa. Los lípidos están presente en las cuatro sustancias. Los diferentes métodos utilizados son cualitativos, esto quiere decir que los reactivos indican la presencia de ciertas biomoleculas, mas no la cantidad en las que se encuentran concentradas.
  10. 10. BIBLIOGRAFÍA: Ch. Carraher, R. Seymour, (1995).Introducción a la química de los polímeros. Madrid: Reverté S.A. 191p. E. Olivas y L. Alarcón, (2004). Manual de prácticas de Microbiología básica y Microbiología de alimentos. Ciudad Juárez: Universidad Autónoma de Ciudad Juárez. 36 p. J. Fornaguera y G. Gómez, (2002).Bioquímica. Panamá: Editorial Universidad Estatal a distancia UNED .169 p. V. Melo y O. Cuamatzi, (2006). Bioquímica de los Procesos Metabólicos. México, D.F, México: Editorial Reverté .43 p. J. Macarulla, A. Marino y A. Macarulla, (1988). Bioquímica Cuantitativa. Barcelona, España: Editorial Reverté S.A. 20 p. Universidad Jorge Tadeo Lozano, (2002). Laboratorio de química orgánica 502502. Bogotá: Departamento de ciencias básicas. 2 p. Alberts, Bray, Hopking, Jhonson, Lewis, Raff, Roberts y Walter, (1998) Introducción a la Biología Celular. Madrid, España: Editorial Médica Panamericana. 119 p. Koolman y Röhm, (2004). Bioquímica Texto y Atlas. Madrid, España: Editorial Médica Panamericana. 46 p. E. Primo, (1995). Química Orgánica Básica y Aplicada. Barcelona, España: Editorial Reverté. 979 p. E. Sandoval, (2005). Técnicas aplicadas al estudio de la anatomía vegetal. México D.F, México: Universidad Nacional Autónoma de México. 122 p. J. Macarulla y F. Goñi, (1994). Bioquímica Humana. Barcelona, España: Editorial Médica Reverté S.A. 80 p. A. Salama, (2005). Manual de farmacognosia. Bogotá, Colombia: Universidad Nacional de Colombia. 41 p. M. Tapia, H. Gandarillas, S. Alandia, A. Cardozo y A. Mujica, (1979). La Quinua y Kañiwua cultivos andinos. Bogotá, Colombia: CIID. 154 p.
  11. 11. J. Patiño, (2006). Metabolismo, Nutrición y Shock. Bogotá, Colombia: Editorial Médica Panamericana. 100 p. A. Gil, (2010). Tratado de Nutrición. Madrid, España: Editorial Médica Panamericana. 128 R. Valencia y A. Garzón, (2004). Potencialidades de la soya y usos en la alimentación humana y animal. Villavicencio, Colombia: CARPOICA. 15 p. A. Guarnizo y P. Martínez, (2004). Experimentos de Química Orgánica. Armenia, Colombia: Editorial Elizcom. 183 p. E. Deloiza, N. Cuevas, C. Blanco, G. García, B. Sánchez y A. Vásquez. (2011). Primera práctica de biología VA: Universidad Nacional Autónoma de México,5 p. Peña, Arroyo, Gómez, Tapia y Gómez(2004). Bioquímica. México D.F, México: Editorial Limusa Noriega. 66 p.

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