Extracción de ADN vegetal de semillas con detergente
1.
2. Semillas (garbanzos, porotos,
lentejas)
Sal
Detergente liquido
Ablandador de carne o jugo de
piña
Alcohol etílico o isopropil
3. Tomar media tasa de garbanzos o
lentejas una pizca de sal y una
taza de agua. Todo se coloca en
una licuadora y se procesa durante
15 segundos. La mezcla resultante
se filtra para eliminar cualquier
partícula de gran tamaño
4. A la mezcla que obtuviste
agrégale dos cucharadas de
detergente liquido y revuelve
sin formar espuma. Luego deje
reposar 5 o 10 minutos. Seria
conveniente probar con
distintos detergentes ya que
algunos no funcionaran tan bien
como otros. Coloca la mezcla en
tres tubos de ensayo
5. Agrega a cada tubo una pizca de
ablandador de carne y revuelve
muy despacio si lo haces
rápidamente tal vez no logres ver
nada al final del experimento. Si
no tienes ablandador de carne
puedes utilizar jugo de piña o
solución para lentes de contacto
Inclina el tubo de la mezcla y
vierte muy lentamente alcohol
etílico de modo que se forme una
capa sobre la mezcla anterior de
garbanzos o lentejas vierte tanto
alcohol como mezcla hay en el tubo
6. El ADN comenzara a coagular como
una masa blancuzca y subirá hasta
la parte donde esta el alcohol.
Después de que este la mezcla
puedes retirarlo con la ayuda de
un palillo.
En este caso las proteínas y la
grasa se quedan en la parte acuosa
de la mezcla y el ADN asciende
hasta llegar al alcohol. El ADN es
una molécula que tiende agruparse
de ahí la facilidad para retirarla
7. Puedeser necesario que
intentes varias veces el
experimento, con distintas
fuentes de ADN distintos
detergentes y ablandadores; ya
que muchas veces no sale como lo
esperado y solo se puede tener
paciencia para volver a
intentarlo
8. El agua con una pizca de sal es una mezcla
isotónica. Es para lo que se va a sacar de
la semilla. En la licuadoras se rompe la
cubierta de las semillas. Pero las células
vegetales están enteras para eso se usa el
detergente
Zumo de piña de papaya ablandador de carne
todo esto son enzimas que cortan las
proteínas se trata de romper lo que hay
dentro de la célula dejando intacto el ADN
al añadir el alcohol se consigue separar el
ADN, que tiene mas afinidad con el alcohol
que con el agua